急檢驗(yàn)的最大耐受量

1、論文發(fā)表專家由國導(dǎo)氟友志網(wǎng)gwww.qikanwang,net急檢驗(yàn)的最大耐受量關(guān)鍵詞應(yīng)急檢驗(yàn)；最大耐受量；半數(shù)致死量key words emergency test; maximum tolerance dosage;median lethal dosage在對(duì)“齊二藥事件”的處理過程中，首先是進(jìn)行不同廠家同產(chǎn)品 之間的急性毒性測(cè)定，得出所懷疑的樣品其毒性遠(yuǎn)大于其他廠家同 產(chǎn)品的結(jié)論，從而啟動(dòng)進(jìn)一步的應(yīng)急處理程序，并取得了較好成效。 本文著重介紹了在藥害事件應(yīng)急檢驗(yàn)中如何進(jìn)行藥品的急性毒性 試驗(yàn)（最大耐受量以及半數(shù)致死量測(cè)定），開展對(duì)比試驗(yàn)，為尋找 可能產(chǎn)生整體毒性的質(zhì)量根源，不斷縮小排查范

2、圍直至找到毒性物 質(zhì)以及藥害事件的快速應(yīng)對(duì)方案提供有益的經(jīng)驗(yàn)。1最大耐受量的測(cè)定主要考察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在藥物單次給藥或24 h內(nèi)多次給藥后的急性 毒性情況（不引起動(dòng)物死亡的最大劑量或濃度）。該方法適合于大 多數(shù)中藥制劑以及部分毒性極小的化學(xué)藥物，難于測(cè)出半數(shù)致死量 （ld50）的情況。應(yīng)急檢驗(yàn)就是要比較不同廠家同產(chǎn)品之間的最大 耐受量情況，從而得出二者毒性不同的結(jié)論。1.1測(cè)定方法1.1. 1總的原則從給藥濃度（灌胃給藥的供試品采用最大溶解度下濃度，注射液 采用原液）、給藥體積（一般采用0.4 ml/10 g小鼠，必要時(shí)可調(diào)論文發(fā)表專家 ED國學(xué)JK友志廁 www.qikanwang,net整至0.

3、5 ml/10 g小鼠）、給藥次數(shù)（參考樣品說明書，一般可接 受24 h內(nèi)給藥3次）三方面進(jìn)行綜合考慮，一般應(yīng)取最大值。1.1.2預(yù)試驗(yàn)取健康無孕小白鼠10只，體重1822 g,雌雄各半，分為兩組， 試驗(yàn)前禁食12 h，不禁水，試驗(yàn)當(dāng)天（24 h內(nèi)）供試品組小鼠灌 胃或按規(guī)定給藥途徑給予藥液23次，給藥后連續(xù)觀察3d，記錄 精神狀態(tài)等一般情況以及小鼠毒性反應(yīng)情況，試驗(yàn)結(jié)束后解剖觀察 內(nèi)臟器官有無異常病變。若出現(xiàn)死亡，則可將此劑量作為半數(shù)致死 量（ld50）的參考劑量之一。1.1.3正式試驗(yàn)根據(jù)上述結(jié)果，取健康無孕小白鼠60只，體重1822 g，雌雄 各半。試驗(yàn)前禁食12 h，不禁水，實(shí)驗(yàn)時(shí)按性

4、別、體重將小鼠隨機(jī) 分為3組，分為樣品組（包括受試樣品及其他廠家同產(chǎn)品各1批） 和溶劑對(duì)照組。試驗(yàn)當(dāng)天（24 h內(nèi)）參照上述給藥濃度、給藥體積、 給藥次數(shù)的要求進(jìn)行給藥，并計(jì)算總給藥量，對(duì)照組給予等體積溶 劑，給藥后記錄小鼠精神狀態(tài)等一般情況以及毒性反應(yīng)情況，由于 小鼠若出現(xiàn)死亡一般在給藥后第13天，同時(shí)考慮到應(yīng)急檢驗(yàn)的 時(shí)效性，觀察并計(jì)算3 d后小鼠最大耐受量。1.2計(jì)算公式小鼠最大耐受量（相當(dāng)于成人日均用量的倍數(shù)）=該結(jié)果表明，小鼠最大耐受量至少在成人日均用量的計(jì)算倍數(shù)以論文發(fā)表專家 ED國學(xué)JK友志廁 www.qikanwang,net上，該數(shù)值越大，表明供試藥品的毒性越小2。2半數(shù)致死

5、量的測(cè)定該方法適合于大多數(shù)化學(xué)藥物以及部分毒性較大的中藥制劑，特 別是預(yù)試驗(yàn)出現(xiàn)小鼠死亡的情況。應(yīng)急檢驗(yàn)的目的是要比較不同廠 家同產(chǎn)品之間的半數(shù)致死量大小，從而得出二者毒性不同的結(jié)論。2.1測(cè)定方法2.1.1預(yù)試驗(yàn)取健康無孕小白鼠若干只，體重1822 g，試驗(yàn)前禁食12 h， 不禁水，實(shí)驗(yàn)時(shí)按性別、體重將小鼠隨機(jī)分為若干組（供試品各濃 度組及純化水對(duì)照組），每組24只，雌雄各半。預(yù)試驗(yàn)當(dāng)天供試 品各劑量組（210倍稀釋）按規(guī)定途徑給予小鼠藥液1次，給藥 體積為0.4 ml/10 g，對(duì)照組小鼠給予等體積溶劑，給藥后連續(xù)觀 察3 d，記錄精神狀態(tài)等一般情況以及小鼠毒性反應(yīng)和死亡情況， 試驗(yàn)結(jié)束后

6、解剖觀察內(nèi)臟器官有無異常病變。2.1.2正式試驗(yàn)劑量的確定 根據(jù)上述預(yù)試驗(yàn)可得出本品小鼠0100% 死亡劑量，考慮到一定的安全系數(shù)，正式試驗(yàn)時(shí)可用100%小鼠死亡 劑量的1.414倍作為最大劑量，而以0小鼠死亡劑量除以1.414作 為最低劑量，在高低劑量之間設(shè)置46個(gè)劑量組，各劑量組的比 值一般應(yīng)相等（一般在0.600.85之間）。試驗(yàn)方法 每一個(gè)品種測(cè)定時(shí)取健康無孕小白鼠60只，論文發(fā)表專家 ED國學(xué)JK友志廁 www.qikanwang,net體重1822 g,試驗(yàn)前禁食12 h,不禁水，按性別、體重將小鼠 隨機(jī)分為6組（供試品各濃度組及純化水對(duì)照組），每組10只，雌 雄各半。試驗(yàn)當(dāng)天供試

7、品各劑量組按規(guī)定途徑給予小鼠藥液1次， 給藥體積為0.4 ml/10 g，對(duì)照組小鼠灌胃給予等體積溶劑，應(yīng)急 檢驗(yàn)給藥后連續(xù)觀察3 d，記錄精神狀態(tài)等一般情況以及小鼠毒性 反應(yīng)和死亡情況。樣品的最高與最低劑量組應(yīng)分別保證有70% 100%和030%的死亡率，這樣可由bliss法求得新藥小白鼠灌胃給 藥的半數(shù)致死量ld50及其95%的可信區(qū)間，該數(shù)值越大，表明供試 藥品的毒性越小3。急性毒性試驗(yàn)的結(jié)果可以描述為：采用最大耐受量測(cè)定法，測(cè)得 藥品小白鼠灌胃給藥或注射給藥的最大耐受量為多少；或采用半數(shù) 致死量測(cè)定法（例如bliss法），測(cè)得藥品小白鼠灌胃給藥的半數(shù) 致死量ld50及其95%的可信區(qū)間

8、為多少。3討論近年來藥害事件的頻繁發(fā)生，亟需建立相應(yīng)的應(yīng)急檢驗(yàn)研究方 法。與常規(guī)檢驗(yàn)不同的是，應(yīng)急檢驗(yàn)需要探尋藥品事件發(fā)生的質(zhì)量 原因，所需檢驗(yàn)項(xiàng)目和參考標(biāo)準(zhǔn)也與常規(guī)檢驗(yàn)存在較大差異（可允 許應(yīng)用經(jīng)過驗(yàn)證的非標(biāo)準(zhǔn)方法或補(bǔ)充檢驗(yàn)方法）。由于導(dǎo)致藥害事 件的原因復(fù)雜多樣，因而應(yīng)急檢驗(yàn)除應(yīng)包括常規(guī)檢驗(yàn)的全部項(xiàng)目 外，還應(yīng)有輔料、微生物指標(biāo)以及是否添加其他物質(zhì)、有毒有害物 質(zhì)等探索性檢測(cè)的內(nèi)容。但由于抽樣的可疑藥品數(shù)量相對(duì)較少，甚論文發(fā)表專家 ED國學(xué)JK友志廁 www.qikanwang,net至難于符合常規(guī)檢驗(yàn)的最低量，如何對(duì)盡量少的可疑樣品進(jìn)行探索 性研究，快速甄別藥品的急性毒性情況，已成為藥品

9、應(yīng)急檢驗(yàn)工作 者面臨的新課題。藥害事件除了伴隨患者產(chǎn)生各種不良反應(yīng)外，出現(xiàn)死亡的個(gè)案也 不在少數(shù)，因而迅速查明樣品的急性毒性情況是十分必要的，在我 們所經(jīng)歷的“清開靈事件”、“香丹事件”、“肝素鈉事件”的應(yīng)急處 理中，急性毒性試驗(yàn)均發(fā)揮了重要的作用。具體來說是堅(jiān)持循證科 學(xué)思維，以臨床出現(xiàn)的各臟器急性毒性癥狀為中心，從排查動(dòng)物整 體毒性開始，開展對(duì)比試驗(yàn)，尋找可能產(chǎn)生整體毒性的質(zhì)量根源， 進(jìn)而還原分析，不斷縮小排查范圍，直至找到最終的毒性物質(zhì)。在急性毒性試驗(yàn)中，根據(jù)受試樣品的性質(zhì)以及預(yù)試驗(yàn)結(jié)果確定采 用最大耐受量測(cè)定還是半數(shù)致死量測(cè)定。由于該方法具有直觀、靶 向性強(qiáng)的特點(diǎn)，在藥害事件的應(yīng)急處理

10、中往往充當(dāng)先鋒作用，與一 般情況下進(jìn)行的急性毒性試驗(yàn)有所不同。由于藥害事件的迅速發(fā) 生，需要進(jìn)行快速應(yīng)對(duì)，結(jié)合“動(dòng)物死亡時(shí)間多在3 d內(nèi)”的一般 規(guī)律，應(yīng)在給藥后采用觀察動(dòng)物3 d，且進(jìn)行不同廠家同產(chǎn)品之間 的急性毒性試驗(yàn)對(duì)比，得出所懷疑的樣品其毒性遠(yuǎn)大于其他廠家樣 品的結(jié)論，從而啟動(dòng)進(jìn)一步應(yīng)急處理的程序，為藥害事件的快速處 理奠定良好的基礎(chǔ)，實(shí)踐證明可取得良好成效4。參考文獻(xiàn)1李瑾翡，梁祈，黎旸.“齊二藥”亮菌甲素注射液毒性物質(zhì)篩論文發(fā)表專家ED國學(xué)JK友志廁www.qikanwang,net查研究j.中國藥房,2011,22(5):437-439.張亞珍，孟文芳,邱麗萍，等.金茵顆粒劑的抗炎作用及最大耐受量