動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)專題2 2

1、2.2動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)1歸納動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用。2歸納通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程及應(yīng)用前景。核心素養(yǎng)1科學(xué)思維：能用文字和圖示表述克隆動(dòng)物的培育過(guò)程。2社會(huì)責(zé)任：了解克隆動(dòng)物的新進(jìn)展和尚未解決的問(wèn)題，理性地看待克隆技術(shù)的社會(huì)影響。一、動(dòng)物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)梳運(yùn)*夯實(shí)敦材基礎(chǔ)J1動(dòng)物細(xì)胞工程基礎(chǔ)技術(shù)手段應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核深入探索并改造生物的遺傳特性；大量培養(yǎng)細(xì)胞；單克隆抗體的制備等移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念：從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后，放在適宜的

2、培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。過(guò)程數(shù)一變少癌#-III代鄒胞鵬確長(zhǎng)動(dòng)物胚舲動(dòng)物觸蛋L相關(guān)概念細(xì)胞貼壁：懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上。接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：貼壁的細(xì)胞，出現(xiàn)接觸抑制后，需要重新用胰蛋白酶來(lái)處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖的培養(yǎng)過(guò)程。培養(yǎng)條件無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，并定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)細(xì)胞自身造成危害。無(wú)機(jī)物：無(wú)機(jī)鹽、微量元素等營(yíng)養(yǎng)有機(jī)物：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、天然成分：血清、血漿等、溫度：哺乳動(dòng)物多以3

3、6.50.5C為宜溫度和pH、pH:多數(shù)細(xì)胞適官卩日為7.27.4氣體環(huán)境.02：細(xì)胞代謝所必需的CO.:維持培養(yǎng)液的pH應(yīng)用生產(chǎn)生物制品：如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。應(yīng)用于基因工程：動(dòng)物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞。應(yīng)用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。用于生理、病理、藥理等方面的研究，如用于篩選抗癌藥物等。I歸納總結(jié)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的幾個(gè)要點(diǎn)選取幼齡動(dòng)物的組織、器官作為材料的原因動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，一般選取幼齡動(dòng)物的組織、器官，其細(xì)胞的分化程度較低，增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，容易培養(yǎng)。將動(dòng)物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的原因分散成單個(gè)細(xì)胞后容易培養(yǎng)，細(xì)

4、胞所需的營(yíng)養(yǎng)容易供應(yīng)，其代謝廢物容易排出。同時(shí)，分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)，可使得在細(xì)胞水平操作的其他技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)。細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞能傳到10-50代，這樣的傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株。細(xì)胞系:傳代培養(yǎng)的細(xì)胞在傳到50代后，有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,獲得不死性，這種具有癌變特點(diǎn)的細(xì)胞稱為細(xì)胞系。學(xué)以致用鏈接典例拓展1如圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線，圖中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。下列判斷錯(cuò)誤的是()A.B點(diǎn)之前的培養(yǎng)接觸抑制現(xiàn)象主要發(fā)生在AB段和DE段分瓶后的每個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞群稱為一個(gè)克隆E點(diǎn)后的細(xì)胞大多數(shù)具有異倍體核型，可連續(xù)傳代答案C解析人們通常

5、將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，貼滿瓶壁的細(xì)胞用胰蛋白酶處理，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖的培養(yǎng)過(guò)程稱為傳代培養(yǎng)，B點(diǎn)之后細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)，可見B點(diǎn)之后進(jìn)行了傳代培養(yǎng)，A正確；當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，即會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，在AB段和DE段細(xì)胞幾乎生長(zhǎng)停滯，可能發(fā)生了接觸抑制，B正確；細(xì)胞克隆的最基本要求是必須保證分離出來(lái)的是一個(gè)細(xì)胞而不是多個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；已獲無(wú)限增殖能力能持續(xù)生存的細(xì)胞系，稱為連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系，無(wú)限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，D正確。2下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是（）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分有所不

6、同動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，而植物組織培養(yǎng)不能植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性答案A解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分不同，如培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基需加入血清，而植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基則不需要加入血清；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)都需要在無(wú)菌、人工控制的條件下進(jìn)行；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)過(guò)程中都可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變；植物組織培養(yǎng)最終能夠形成完整的植物體，能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞最終不能被培養(yǎng)成新的個(gè)體，不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性。I前掛后連植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生物

7、學(xué)原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體液體培養(yǎng)基成分蔗糖、氨基酸、水、礦物質(zhì)、生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量兀素、水、血清、血漿等培養(yǎng)結(jié)果新的植株或組織大量新細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物應(yīng)用快速繁殖；培育無(wú)病毒植株；細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)；制作人工種子生產(chǎn)病毒疫田、干擾素、單克隆抗體等；檢測(cè)有毒物質(zhì)；生理、病理、藥理研究培養(yǎng)條件無(wú)菌、適宜的溫度和pH取材植物器官、組織或細(xì)胞動(dòng)物早期胚胎、幼齡動(dòng)物的器官或組織培養(yǎng)對(duì)象植物器官、組織或細(xì)胞分散的單個(gè)細(xì)胞過(guò)程脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)、分化的特點(diǎn)分裂：形成愈傷組織；分化：形成根、芽只分裂不分化；貼壁生長(zhǎng)；

8、接觸抑制二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物基礎(chǔ)梳理夯實(shí)敦材基甜J1.概念將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。2分類包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，其中胚胎細(xì)胞核移植較易成功。3.過(guò)程:徉入I細(xì)斶打L垃細(xì)細(xì)胞康供休體銅胞處竺采畢卵;機(jī)分恕屮期一母細(xì)胞去樓得到遷或翅代孕動(dòng)物豎盼浙-輕也船4體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。增加瀕危動(dòng)物的存活數(shù)量。生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白。用于組織器官的移植。用于科學(xué)研究。5體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題成功率非常低?？寺?dòng)物存在健康問(wèn)題。克隆動(dòng)物食品的安全性存在爭(zhēng)議

9、等。I歸納總結(jié)】1細(xì)胞核移植的原理動(dòng)物體細(xì)胞核移植的原理是細(xì)胞核的全能性，而不是動(dòng)物細(xì)胞的全能性。因?yàn)閯?dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，不能經(jīng)培養(yǎng)直接發(fā)育成完整個(gè)體，所以用體細(xì)胞核移植技術(shù)能夠得到克隆動(dòng)物，說(shuō)明動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。2供體和受體的選擇供體：一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。受體：選擇MII期的卵母細(xì)胞，其原因是：卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。卵母細(xì)胞體積大，便于操作。卵母細(xì)胞內(nèi)卵黃多，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富。3克隆動(dòng)物的遺傳特點(diǎn)克隆動(dòng)物的親本有三個(gè)，即體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體和代孕母體

10、?？寺?dòng)物細(xì)胞核基因來(lái)自體細(xì)胞核供體，因此，克隆動(dòng)物的性狀與體細(xì)胞核供體基本相同?？寺?dòng)物的細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞，因此，克隆動(dòng)物的性狀與卵母細(xì)胞供體部分相同。代孕母體沒(méi)有為克隆動(dòng)物提供遺傳物質(zhì)，因此，克隆動(dòng)物的性狀與代孕母體沒(méi)有直接關(guān)系。學(xué)以致用鏈接典例拓展3如圖為某哺乳動(dòng)物的生殖過(guò)程圖，下列敘述正確的是()動(dòng)物個(gè)體2為克隆動(dòng)物，c為高度分化的體細(xì)胞動(dòng)物個(gè)體2的遺傳性狀與提供b細(xì)胞的母體完全不同產(chǎn)生動(dòng)物個(gè)體2的生殖方式為有性生殖e細(xì)胞為完成減數(shù)分裂的卵細(xì)胞答案A解析通過(guò)克隆技術(shù)培育的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物，提供細(xì)胞核的是高度分化的體細(xì)胞，A項(xiàng)正確；克隆動(dòng)物絕大部分性狀與供體動(dòng)物相同，少數(shù)性狀(由線

11、粒體DNA控制的性狀)與提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物相同，B項(xiàng)錯(cuò)誤；動(dòng)物的克隆實(shí)際上是無(wú)性生殖過(guò)程，C項(xiàng)錯(cuò)誤；e細(xì)胞是處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞，并沒(méi)有完全完成減數(shù)分裂，D項(xiàng)錯(cuò)誤?！就卣固嵘袛嘤行陨撑c無(wú)性生殖的兩種方法從概念上判斷：有性生殖是指經(jīng)兩性生殖細(xì)胞結(jié)合而成的合子或有性配子直接發(fā)育成個(gè)體的生殖方式；無(wú)性生殖是指不經(jīng)過(guò)生殖細(xì)胞的結(jié)合而由親本直接產(chǎn)生子代的生殖方式。從培養(yǎng)細(xì)胞的種類上判斷：組織培養(yǎng)中培養(yǎng)的不是體細(xì)胞而是有性配子或合子時(shí)，才屬于有性生殖；植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞核移植都屬于無(wú)性生殖。4.(2018全國(guó)III，38)2018年細(xì)胞期刊報(bào)道，中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用

12、體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴一一“中中”和“華華”。回答下列問(wèn)題：“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過(guò)程，核移植是指。通過(guò)核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目(填“減半”“加倍”或“不變”)。（2）哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度（填“大于”或“小于”）體細(xì)胞核移植，其原因是。（3）在哺乳動(dòng)物核移植的過(guò)程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目（填“相同”或“不同”），性染色體組合傾“相同”或“不同”）。答案（1）將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移

13、入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變（2）小于胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易（3）相同不同解析（1）核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，形成重組細(xì)胞。重組細(xì)胞形成的早期胚胎可移植到受體子宮內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育，最終分娩得到克隆動(dòng)物。因?yàn)槿旧w在細(xì)胞核中，所以克隆動(dòng)物體細(xì)胞的染色體數(shù)目與提供細(xì)胞核的個(gè)體的體細(xì)胞相同。（2）由于動(dòng)物的胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物的體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性十分困難，因此，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。（3）哺乳動(dòng)物雌雄個(gè)體的體細(xì)胞中，細(xì)胞核內(nèi)常染色體的數(shù)目是相同的，性染色體組合是不同的。若分別

14、以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，則得到的克隆動(dòng)物的體細(xì)胞中常染色體的數(shù)目相同，性染色體組合不同。丄番問(wèn)題丄應(yīng)用前呆隨堂演鎮(zhèn)知識(shí)落實(shí)1判斷正誤：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性（）（2）從動(dòng)物機(jī)體取出相關(guān)組織，可以用胃蛋白酶將它分散成單個(gè)細(xì)胞（）（3）動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中一些細(xì)胞會(huì)發(fā)生遺傳物質(zhì)的變化（）TOC o 1-5 h z在動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中，使用的合成培養(yǎng)基中可以不加入血清和血漿等物質(zhì)()體細(xì)胞核移植技術(shù)產(chǎn)生的個(gè)體組織與供體的性狀完全相同()答案(1)XX(3)VXX下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，不正確的是()傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞細(xì)胞的癌變發(fā)生于

15、原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過(guò)渡過(guò)程中癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般需要使用CO2培養(yǎng)箱答案B解析由原代培養(yǎng)分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，A項(xiàng)正確；細(xì)胞的癌變一般發(fā)生于50代后的細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，B項(xiàng)錯(cuò)誤；癌細(xì)胞膜上糖蛋白減少，細(xì)胞間的黏著性降低，失去了接觸抑制，容易分散和轉(zhuǎn)移，C項(xiàng)正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的場(chǎng)所是CO?培養(yǎng)箱，培養(yǎng)箱內(nèi)含有95%的空氣加5%的CO2的混合氣體，為動(dòng)物細(xì)胞提供適宜的氣體環(huán)境，D項(xiàng)正確。生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一頭野驢剛死亡，以下提供的“復(fù)生”野驢個(gè)體的方法中能夠成功的是()

16、將野驢的體細(xì)胞取出，利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，可培育成新個(gè)體將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體將野驢的一個(gè)基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體答案C解析由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，目前動(dòng)物細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)或通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)還不能培養(yǎng)成動(dòng)物個(gè)體；將野驢的一個(gè)基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成的是帶有野驢基因的家驢；野驢的體細(xì)胞核中具有發(fā)育成野驢的全部基因，因此通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)，可使野驢“復(fù)生”。下列對(duì)動(dòng)物核移植技術(shù)的描述不正確的是()體細(xì)胞核移植過(guò)程中通常采用MII期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞體細(xì)胞核移植的過(guò)程中可通過(guò)顯

17、微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核哺乳動(dòng)物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯低于胚胎細(xì)胞核移植通過(guò)體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物不是對(duì)體細(xì)胞動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制答案C解析體細(xì)胞核移植過(guò)程中通常采用MII期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，A正確；體細(xì)胞核移植的過(guò)程中可通過(guò)顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，B正確；哺乳動(dòng)物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，C錯(cuò)誤；通過(guò)體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物不是對(duì)體細(xì)胞動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制，因?yàn)檫€有細(xì)胞質(zhì)基因，D正確。5科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基

18、因奶牛的繁育,可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如圖所示)。請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列相關(guān)問(wèn)題：采集卵母細(xì)胞在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分離，形成單個(gè)細(xì)胞，這個(gè)過(guò)程中需要利用酶處理。用于核移植的供體細(xì)胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是。在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞增殖的方式，此外，細(xì)胞增殖還表現(xiàn)和接觸抑制等特點(diǎn)。將進(jìn)行培養(yǎng)的供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的目的是。將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后，該母牛就會(huì)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的犢牛，但也不是100%的復(fù)制，原因最可能是答案(1)胰蛋白(或膠原蛋白)(2)該種細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng)，且遺傳

19、物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變(3)有絲分裂貼壁生長(zhǎng)(4)使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制；生物的性狀還受環(huán)境因素的影響解析(1)在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織細(xì)胞使其分散開來(lái)。(2)傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng)，遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變，適于作動(dòng)物體細(xì)胞核移植的供體細(xì)胞。(3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞以有絲分裂的方式進(jìn)行增殖，同時(shí)表現(xiàn)出貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的現(xiàn)象。(4)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的目的是使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞。(5)生物的性狀是細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果，同時(shí)，生物的性狀還

20、受環(huán)境的影響，因此，克隆動(dòng)物不可能是供體奶牛100%的復(fù)制品。課時(shí)対點(diǎn)練丁對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練題組一動(dòng)物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)1.CCTV4“國(guó)際頻道”曾報(bào)道，廣東出入境檢疫部門連續(xù)兩次從美國(guó)進(jìn)口凍豬腎和加拿大進(jìn)口凍豬肉中檢測(cè)出獸藥殘留物一一萊克多巴胺。這種獸藥對(duì)人體細(xì)胞的毒性大小可以采用的檢測(cè)技術(shù)是（）組織培養(yǎng)技術(shù)B.細(xì)胞融合技術(shù)C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)D.基因拼接技術(shù)答案C解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以應(yīng)用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。2般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件有（）無(wú)毒的環(huán)境無(wú)菌的環(huán)境培養(yǎng)液中需加血漿溫度與動(dòng)物體溫相近需要02加CO2維持培養(yǎng)液的pHB.C.D.答案A解析動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)要求環(huán)境

21、無(wú)菌、無(wú)毒，在細(xì)胞培養(yǎng)液中需添加血清、血漿等一些天然成分，培養(yǎng)溫度一般與動(dòng)物體溫相近。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還需要02和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2可維持培養(yǎng)液的pH。3實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)（非克隆培養(yǎng)）的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型丁過(guò)程得到的細(xì)胞可能具有異質(zhì)性答案C解析進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)前需要對(duì)提供實(shí)驗(yàn)材料的動(dòng)物進(jìn)行消毒，A正確；進(jìn)行培養(yǎng)的組織需先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其消化分散成單個(gè)細(xì)胞，B正確；丙過(guò)程屬于原代培養(yǎng)，細(xì)胞的核型穩(wěn)定，C錯(cuò)誤；丁過(guò)程屬于傳代培養(yǎng)，期間部分細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)異質(zhì)性

22、，D正確。4.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是()可用于檢測(cè)某種物質(zhì)的毒性可通過(guò)培養(yǎng)各種病變細(xì)胞，用于藥理等方面的研究可通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素等經(jīng)過(guò)脫分化、再分化，可構(gòu)建人造皮膚答案D解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)沒(méi)有脫分化與再分化過(guò)程。在將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí)，可以使用胰蛋白酶。由此判斷以下推測(cè)不合理的(是)動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系處理時(shí)一定要注意處理時(shí)間、加酶量胰蛋白酶一定不會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致答案C解析胰蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解，由胰蛋白酶可破壞動(dòng)物細(xì)胞之間的聯(lián)系，可推測(cè)動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互

23、聯(lián)系；細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì)成分，所以一定要注意處理的時(shí)間和酶的用量，以防止對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷；酶促反應(yīng)需要適宜的pH,所以培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致。對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分答案B解析在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，得到單個(gè)細(xì)胞；細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)

24、箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH；為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，要求對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行消毒、滅菌，也可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素；合成培養(yǎng)基通常需加入血清、血漿等天然成分。動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，不能從該圖獲得的結(jié)論是()疋芾細(xì)胞（有血渝一|匸常細(xì)胞無(wú)血即培養(yǎng)吋間正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響較大培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大答案A解析分析圖中曲線可知，對(duì)癌細(xì)胞來(lái)說(shuō)，相同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，培養(yǎng)基中有無(wú)血清，其細(xì)胞數(shù)目相差不大，說(shuō)明培養(yǎng)基

25、中有無(wú)血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大；對(duì)正常細(xì)胞來(lái)說(shuō)，在相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于沒(méi)有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目，說(shuō)明有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞的培養(yǎng)影響較大；在相同條件和相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的數(shù)目差距較大，正常細(xì)胞達(dá)到一定的數(shù)目后不再增加，而癌細(xì)胞卻能不斷增加。題組二動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物8下列關(guān)于哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物的敘述，正確的是（）體細(xì)胞核移植過(guò)程中可以用任何細(xì)胞作為受體細(xì)胞目前科學(xué)家可以用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動(dòng)物個(gè)體利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)可有選擇地繁殖某一性別的家畜用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代50代以內(nèi)的細(xì)胞

26、答案C解析體細(xì)胞核移植過(guò)程中常用減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，不能通過(guò)類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得動(dòng)物個(gè)體；用于核移植的供體細(xì)胞一般是10代以內(nèi)的細(xì)胞；克隆動(dòng)物細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞，其性別與提供細(xì)胞核的動(dòng)物一致，因此可有選擇地克隆某一性別的家畜。9科學(xué)家培育克隆羊時(shí)，使用了三種細(xì)胞核的供體細(xì)胞，分別將這些細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，形成重組細(xì)胞，發(fā)育成重組胚胎，這些重組胚胎的發(fā)育情況如下表所示。據(jù)此分析不正確的是（）細(xì)胞核供體細(xì)胞的類型妊娠數(shù)/受體母羊數(shù)乳腺上皮細(xì)胞1/13胚胎成纖維細(xì)胞4/10早期胚胎細(xì)胞14/27早期胚胎細(xì)胞作為細(xì)胞核的

27、供體細(xì)胞妊娠成功率最高克隆羊的遺傳信息與細(xì)胞核的供體細(xì)胞完全相同體細(xì)胞核移植難度高于胚胎細(xì)胞核移植重組細(xì)胞的發(fā)育與去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)有關(guān)答案B解析分析表格數(shù)據(jù)可知，早期胚胎細(xì)胞作為細(xì)胞核的供體細(xì)胞妊娠成功率最高，A正確；克隆羊的培育用到了核移植、胚胎移植技術(shù)，克隆羊細(xì)胞核的遺傳信息來(lái)自細(xì)胞核的供體，細(xì)胞質(zhì)的遺傳信息來(lái)自去核卵母細(xì)胞，B錯(cuò)誤；對(duì)比表格中的數(shù)據(jù)可知，體細(xì)胞核移植難度高于胚胎細(xì)胞核移植，C正確；核移植中作受體細(xì)胞的都是卵母細(xì)胞，可見重組細(xì)胞發(fā)育與去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)有關(guān)，D正確。核移植的受體細(xì)胞是MII期卵母細(xì)胞，下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()MII期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能

28、性表達(dá)的物質(zhì)MII期卵母細(xì)胞體積比較大，操作起來(lái)相對(duì)容易可以把供體細(xì)胞直接注入去核的卵母細(xì)胞中MII期卵母細(xì)胞對(duì)克隆動(dòng)物的遺傳特性沒(méi)有任何影響答案D解析直接把供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中也是可以的，并且這樣可以減少對(duì)細(xì)胞核的損傷，更有利于重組細(xì)胞的分裂；MI期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有少量的遺傳物質(zhì)，也會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的遺傳特性產(chǎn)生影響。下列有關(guān)體細(xì)胞核移植技術(shù)的說(shuō)法，不正確的是()體細(xì)胞核移植技術(shù)在多種動(dòng)物中獲得了成功，成功率非常高克隆技術(shù)的各個(gè)環(huán)節(jié)有待于進(jìn)一步改進(jìn)大多數(shù)克隆動(dòng)物還存在一些遺傳和生理缺陷類的健康問(wèn)題克隆動(dòng)物食品的安全性問(wèn)題仍然存在爭(zhēng)議答案A解析盡管體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)在許多種動(dòng)物中獲

29、得成功，但其成功率仍然非常低，產(chǎn)下的活克隆動(dòng)物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%。12下圖是某克隆羊的培育過(guò)程模式圖，與獲得該克隆羊接近的生殖方式和其發(fā)育成熟時(shí)所分泌的主要性激素分別是()辛小一豐胞核(歴因唱AA)卵球細(xì)胞O儉人眈羊陌S丿住因型也L隆如丫一淪胞按羊(基因型丸擷聶缶A.無(wú)性生殖；C.有性生殖；答案A雄性激素B.無(wú)性生殖；雌性激素雄性激素D.有性生殖；雌性激素解析克隆羊的產(chǎn)生屬于無(wú)性生殖；由于此過(guò)程是雄性羊供核，故得到的克隆羊?yàn)樾坌?，其分泌的性激素主要是雄性激素。N綜合強(qiáng)化13.某生物興趣小組對(duì)一種抗癌新藥進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝癌細(xì)胞為材料，測(cè)定抗癌藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響。請(qǐng)回

30、答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為培養(yǎng)基。通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量等一些天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是。另外，還應(yīng)該保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于、的環(huán)境。在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中，當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)到一定程度時(shí)，其生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，這種現(xiàn)象稱為為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的。請(qǐng)你幫助興趣小組的同學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)的自變量，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組除了自變量不同外，其他處理均應(yīng)該相同，這是為了遵循實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)白原則。答案(1)合成血清、血漿維持培養(yǎng)液的pH無(wú)菌無(wú)毒(2)接觸抑制(3)抗生素

31、(4)是否加入抗癌藥物單一變量解析將動(dòng)物細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基淋為合成培養(yǎng)基。由于對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全搞清楚，因此，在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，還要加入一些動(dòng)物血清、血漿等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體中有co2，作用是維持培養(yǎng)液的pH。被培養(yǎng)的細(xì)胞必須處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境中，才能保證細(xì)胞正常地生長(zhǎng)增殖。(2)動(dòng)物細(xì)胞在分裂過(guò)程中有接觸抑制的現(xiàn)象。(3)抗生素能殺死培養(yǎng)基中的微生物，保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境。(4)實(shí)驗(yàn)的目的是要測(cè)定抗癌藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響，故實(shí)驗(yàn)的自變量為抗癌藥物的有無(wú)，其他無(wú)關(guān)變量應(yīng)該相同，否則會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這種設(shè)計(jì)遵循的是實(shí)驗(yàn)的單一變量原則。14下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。細(xì)胞卡則比環(huán)脈船回答下列問(wèn)題:圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n,則其性染色體