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文檔簡介
1、課題1 大腸桿菌的培養(yǎng)與分離第一部分 微生物的利用課題背景如何保持培養(yǎng)物純凈呢?資料: 19世紀中期,關(guān)系到法國經(jīng)濟命脈的釀造業(yè)曾一度遭受毀滅性的打擊。在生產(chǎn)過程中,出現(xiàn)了葡萄酒變酸、變味的怪事。經(jīng)過一番研究,法國科學家巴斯德發(fā)現(xiàn),導致生產(chǎn)失敗的根源在于發(fā)酵物中混入了雜菌。由此人們認識到保持培養(yǎng)物純凈的重要性。殺菌:殺死內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子高壓蒸汽滅菌:121 100KPa 15-30min(培養(yǎng)基)合成培養(yǎng)基:分離、鑒定微生物經(jīng)過一番研究,法國科學家巴斯德發(fā)現(xiàn),導致生產(chǎn)失敗的根源在于發(fā)酵物中混入了雜菌。固體培養(yǎng)基:微生物的分離、鑒定、計數(shù)結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂固體培養(yǎng)基:微生物的分離
2、、鑒定、計數(shù)課題1 大腸桿菌的培養(yǎng)與分離月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯固體培養(yǎng)基:微生物的分離、鑒定、計數(shù)接種針灼燒滅菌 平板劃線倒平板時應在酒精燈附近操作將培養(yǎng)皿倒置放在培養(yǎng)箱內(nèi),于36培養(yǎng)24h。結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂為什么培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱內(nèi)要倒置呢?H2O 定溶1000 mL資料卡無菌技術(shù):1.消毒與殺菌 消毒:消除表面或內(nèi)部的部分微生物 殺菌:殺死內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子2.常用方法巴氏消毒法:牛奶化學藥劑:雙手、水源灼燒滅菌:接種環(huán)等(金屬)干熱滅菌:160-170 1-2h (玻璃器皿、金屬)高壓蒸汽滅菌:121 100KPa 15-30min(培養(yǎng)基)紫外線消毒法:30min(空氣中
3、的微生物)酒精燈火焰附近操作;超凈工作臺上操作。接種針灼燒滅菌 平板劃線回憶有關(guān)細胞的元素組成、分子組成的知識,想一想微生物應該生活在什么環(huán)境中呢?(1)你能歸納培養(yǎng)基的配制流程嗎?如何保持培養(yǎng)物純凈呢?H2O 定溶1000 mL第一部分 微生物的利用經(jīng)過一番研究,法國科學家巴斯德發(fā)現(xiàn),導致生產(chǎn)失敗的根源在于發(fā)酵物中混入了雜菌。半固體培養(yǎng)基:觀察微生物運動經(jīng)過一番研究,法國科學家巴斯德發(fā)現(xiàn),導致生產(chǎn)失敗的根源在于發(fā)酵物中混入了雜菌。液體培養(yǎng)基:菌種培養(yǎng)或工業(yè)生產(chǎn)(1)每四人一組,每組均需完成兩種方法;紫外線消毒法:30min(空氣中的微生物)半固體培養(yǎng)基:觀察微生物運動1ml 與生長有關(guān)平板劃
4、線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌(2)組內(nèi)成員可任選一種分離方法。溫故知新 回憶有關(guān)細胞的元素組成、分子組成的知識,想一想微生物應該生活在什么環(huán)境中呢?培養(yǎng)基組成葡萄糖 10g蛋白質(zhì) 5gNaCl 15gH2O 定溶1000 mL主要營養(yǎng)物質(zhì) 碳源 氮源 無機鹽氫元素、氧元素 維生素 0.1ml 與生長有關(guān)大腸桿菌的分離純化新課探討閱讀教材P16-17,回答問題:(1)你能歸納培養(yǎng)基的配制流程嗎?(2)配置培養(yǎng)基是應該注意什么?結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂配制培養(yǎng)基的過程:計算 稱量 溶化(溶解)滅菌倒平板注意:1.培養(yǎng)基冷卻至50左右倒平板2.倒平板時應在酒精燈附近操作資料卡培養(yǎng)基的分類:1.物理性
5、質(zhì) 液體培養(yǎng)基:菌種培養(yǎng)或工業(yè)生產(chǎn) 半固體培養(yǎng)基:觀察微生物運動 固體培養(yǎng)基:微生物的分離、鑒定、計數(shù) 2.組成成分 合成培養(yǎng)基:分離、鑒定微生物 天然培養(yǎng)基:生產(chǎn)3.用途: 選擇培養(yǎng)基:缺某種物質(zhì)或多加某種物質(zhì) 鑒別培養(yǎng)基:加指示劑或化學藥品資料卡月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST)資料卡配置培養(yǎng)基:溶化(溶解) 分裝資料卡倒平板:資料卡倒平板:資料卡接種:接種針灼燒滅菌 平板劃線資料卡大腸桿菌的純化方法:稀釋涂布平板法 平板劃線法大腸桿菌的分離純化學生活動1.平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌要求: (1)每四人一組,每組均需完成兩種方法; (2)組內(nèi)成員可任選一種分離方法。2.培養(yǎng) 將培養(yǎng)皿倒置放在培養(yǎng)箱內(nèi),于36培養(yǎng)24h。結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂課題1 大腸桿菌的培養(yǎng)與分離作業(yè)布置思考: 1.為什么
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