生物安全和實(shí)驗(yàn)室感染控制教學(xué)課件

1、生物安全與實(shí)驗(yàn)室感染控制 v05011最主要的職業(yè)是護(hù)士和實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員；除三名實(shí)驗(yàn)室人員是暴露于艾滋病病毒培養(yǎng)以外，其余全部是由于污染血液或體液；外科醫(yī)生和被縫合針刺傷的暴露者中沒有發(fā)生肯定的艾滋病病毒感染。 到1997年7月為止，美國共發(fā)生52名職業(yè)暴露后艾滋病病毒感染者，發(fā)現(xiàn)其中：23起嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)室SARS病毒感染事件2003年9月新加坡國立大學(xué)研究生在環(huán)境衛(wèi)生研究院實(shí)驗(yàn)室中感染SARS病毒2003年12月一名臺(tái)灣的SARS研究人員在實(shí)驗(yàn)室感染SARS病毒2004年4月安徽、北京先后發(fā)現(xiàn)新的SARS 病例，經(jīng)證實(shí)分別來自于在中國疾病預(yù)防控制所實(shí)驗(yàn)室受到SARS感染的兩名工作人員3應(yīng)對(duì)措施1

2、、嚴(yán)格執(zhí)行國家和有關(guān)部門的實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范與標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的安全操作規(guī)則和程序。凡從事高危險(xiǎn)級(jí)別微生物研究的單位必須按程序申報(bào)，并經(jīng)有關(guān)部門考察批準(zhǔn)后方可進(jìn)行有關(guān)研究。2、只有在具有相應(yīng)級(jí)別的生物安全防護(hù)設(shè)施內(nèi)才能從事高危險(xiǎn)級(jí)別微生物的研究，生物安全防護(hù)設(shè)施要有標(biāo)準(zhǔn)的硬件條件（包括設(shè)施、設(shè)備、防護(hù)器具），也要有規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室管理和操作程序。3、進(jìn)一步加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的管理，要切實(shí)做到使實(shí)驗(yàn)人員嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室管理和操作規(guī)范，按照實(shí)驗(yàn)室的要求嚴(yán)格控制用于實(shí)驗(yàn)的微生物種類。另外，嚴(yán)格對(duì)菌/毒種的管理。4、一旦發(fā)生意外感染事件，當(dāng)事人應(yīng)盡快就醫(yī)，通報(bào)疫情，關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，消毒場(chǎng)所，隔離相關(guān)人員，相關(guān)部門應(yīng)

3、立即啟動(dòng)緊急預(yù)案。5、在從事微生物研究中必須牢固樹立安全第一的觀念。6、各級(jí)衛(wèi)生行政部門，各疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、醫(yī)療、衛(wèi)生、教學(xué)科研單位要明確領(lǐng)導(dǎo)和專人負(fù)責(zé)管理，嚴(yán)格實(shí)行責(zé)任制和責(zé)任追究制。4實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染傳播途徑易感宿主感染源皮膚接觸氣溶膠吸入粘膜的接觸 攝取培養(yǎng)基和培養(yǎng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)本被上述污染的物品免疫系統(tǒng)疫苗接種年齡5僅有 20% 能夠找出發(fā)病原因其中80%是源自人為因素 另外20%源自儀器故障4種最常見的感染原因泄漏針頭和注射器利器和破碎的玻璃動(dòng)物或寄生蟲的咬傷和抓痕http:/www.weizmann.ac.il/safety/bio2.html實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染6實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染人物疾病地

4、點(diǎn)時(shí)間原因研究者SARS臺(tái)灣2003年12月微生物學(xué)家西尼羅河病毒美國2002年8月割破實(shí)驗(yàn)室人員流感美國2000氣溶膠?實(shí)驗(yàn)室人員牛痘病歐洲2002接觸7生物安全通過管理工作人員在接觸生物物質(zhì)的過程來避免感染自己，他人或者環(huán)境通過如下措施工程控制行政控制規(guī)章制度個(gè)人防護(hù)措施8生物危害例如：病毒、細(xì)菌、真菌、寄生蟲和他們的毒素和他們所產(chǎn)毒素 血、體液及人和動(dòng)物的組織改變了的細(xì)胞排序和核酸特定序列生物或其他相關(guān)材料所導(dǎo)致的對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境的潛在危害910感染性微生物的危險(xiǎn)度等級(jí)分類11微生物分類目錄的制訂1、微生物的致病性2、微生物的傳播方式和宿主范圍。它們可能會(huì)受到當(dāng)?shù)厝巳阂延械拿庖咚?、宿?/p>

5、群體的密度和流動(dòng)、適宜媒介的存在以及環(huán)境衛(wèi)生水平等因素的影響3、當(dāng)?shù)厮邆涞挠行ьA(yù)防措施。這些措施包括：通過接種疫苗或給予抗血清的預(yù)防（被動(dòng)免疫）；衛(wèi)生措施，例如食品和飲水的衛(wèi)生；動(dòng)物宿主或節(jié)肢動(dòng)物媒介的控制4、當(dāng)?shù)厮邆涞挠行е委煷胧＿@些措施包括：被動(dòng)免疫、暴露后接種疫苗以及使用抗生素、抗病毒藥物和化學(xué)治療藥物，還應(yīng)考慮出現(xiàn)耐藥菌株的可能性。12血液感染病原體 (BBP)來源血液精液生殖道分泌物體液腦脊液羊水關(guān)節(jié)液組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)感染的試驗(yàn)動(dòng)物13血液感染Hepatitis BHepatitis CHIV14暴露的危險(xiǎn)因素病原體類型體液類型暴露途徑暴露時(shí)間暴露中相關(guān)血液的量暴露時(shí)病毒的濃度

6、個(gè)人防護(hù)措施15實(shí)驗(yàn)室分級(jí)BSC：生物安全柜；GMT：微生物學(xué)操作技術(shù)規(guī)范16危險(xiǎn)級(jí)別個(gè)體危險(xiǎn)度群體危險(xiǎn)度實(shí)驗(yàn)室分級(jí)例如1低低Level 1大腸桿菌2中等限制性Level 2 大腸O157, 鏈球菌 & 沙門菌屬, 腺病毒, A, B & C型肝炎, 流感, 麻疹3高低Level 3 結(jié)核分枝桿菌, 漢塔病毒, HIV, 黃熱病病毒4高高Level 4 由拉沙病毒, Ebola virus, 馬爾堡病毒不可能導(dǎo)致健康的人和動(dòng)物感染很少導(dǎo)致病人和動(dòng)物感染可能導(dǎo)致嚴(yán)重疾病很可能導(dǎo)致非常嚴(yán)重的疾病常規(guī)病原體17Level 1 基本的實(shí)驗(yàn)室不需要特殊設(shè)置不需要生物安全柜18Level 2 具有2級(jí)實(shí)驗(yàn)

7、室相應(yīng)的臨床的、診斷的、研究的和教學(xué)的設(shè)備容易產(chǎn)生氣溶膠或者飛濺時(shí)需要 I級(jí)或II級(jí)的生物安全柜 需要有對(duì)突發(fā)事件的應(yīng)急處理預(yù)案需要進(jìn)入規(guī)定19專門的設(shè)計(jì)和建筑最主要是個(gè)體防護(hù)其次是保護(hù)環(huán)境所有的工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作前均需經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)包括PPE,設(shè)備, 垃圾處理Level 3 20Level 4在加拿大僅有一個(gè)4級(jí)實(shí)驗(yàn)室(Canadian Centre for Human and Animal Health in Winnipeg, Man.)設(shè)計(jì)要求非常苛刻，要把工作人員完全與感染物質(zhì)隔離開21不同生物安全水平對(duì)設(shè)施的要求222324原則在不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)室，建立統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程和

8、生物安全要求標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)不同的生物安全級(jí)別，實(shí)驗(yàn)室裝備必要的實(shí)驗(yàn)與防護(hù)設(shè)備有可靠的防護(hù)效果和安全的菌種資源庫實(shí)驗(yàn)室實(shí)行嚴(yán)格的科學(xué)化管理 25操作規(guī)范實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施實(shí)驗(yàn)室設(shè)備健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)培訓(xùn)廢棄物處理化學(xué)品、火、電、輻射以及儀器設(shè)備安全26操作規(guī)范進(jìn)入規(guī)定人員防護(hù)操作規(guī)范實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)生物安全管理2728人員防護(hù)1、連體衣、隔離服或工作服2、應(yīng)戴上合適手套3、洗手4、安全眼鏡、面罩或其他防護(hù)設(shè)備295、嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開實(shí)驗(yàn)室6、不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋子7、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡8、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料9、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過的防護(hù)服不得和日常服裝放

9、在同一柜子內(nèi)30每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)該采用“安全手冊(cè)”或“操作手冊(cè)”，其中定義了已知的和潛在的危害，并規(guī)定了特殊的操作程序來避免或盡量減小這種危害。規(guī)范的微生物學(xué)操作技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室安全的基礎(chǔ)，而專門的實(shí)驗(yàn)設(shè)備僅僅是一種補(bǔ)充，絕不能替代正確的操作規(guī)范。31操作規(guī)范1、嚴(yán)禁用口吸移液管。2、嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進(jìn)行。4、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須向?qū)嶒?yàn)室主管報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存這些事件或事故的書面報(bào)告。326、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。7、污染

10、的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險(xiǎn)度評(píng)估結(jié)果，可能需要準(zhǔn)備污水處理系統(tǒng)。8、需要帶出實(shí)驗(yàn)室的手寫文件必須保證在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)沒有受到污染。33實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施可能造成安全問題的情況氣溶膠的形成處理大容量和或高濃度微生物儀器設(shè)備過度擁擠和過多嚙齒動(dòng)物和節(jié)肢動(dòng)物的侵?jǐn)_未經(jīng)允許人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作流程：一些特殊標(biāo)本和試劑的使用34圖2 典型的一級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（圖片由CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA 提供）35圖3 典型的二級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（圖片由CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA 提供）。在生物安全柜

11、中進(jìn)行可能發(fā)生氣溶膠的操作程序。門保持關(guān)閉并貼上適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)標(biāo)志。潛在被污染的廢棄物同普通廢棄物隔開。36圖4 典型的三級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室（圖片由CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA 提供）。實(shí)驗(yàn)室與公共通道分開并通過緩沖間（雙門入口或二級(jí)生物安全水平的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室）或氣鎖室進(jìn)入。處理廢棄物前，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先進(jìn)行高壓滅菌以清除污染。應(yīng)有非手控的水槽。形成向內(nèi)氣流而且涉及感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。37實(shí)驗(yàn)室設(shè)備1、在設(shè)計(jì)上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸2、建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求3、設(shè)備裝配后應(yīng)無毛刺、銳角以及易松動(dòng)的部件4、設(shè)備的設(shè)計(jì)、建造與安

12、裝應(yīng)便于操作、易于維護(hù)、清潔、清除污染和進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品38基本生物安全設(shè)備1、移液輔助器2、生物安全柜，在以下情況使用：處理感染性物質(zhì)；空氣傳播感染的危險(xiǎn)增大時(shí)進(jìn)行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(shí)3、一次性塑料接種環(huán)，也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán)，以減少生成氣溶膠4、螺口蓋試管及瓶子5、高壓滅菌器6、一次性巴斯德塑料移液管，避免使用玻璃制品7、高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備用前須進(jìn)行驗(yàn)收39404142生物安全柜Laminar flow hoods NOT biological safety cabinets Vertical or horizontal lam

13、inar flow HEPA filtered air (intake) product protection onlyBiological Safety Cabinet HEPA filtered laminar air flow and exhaust personnel, environment & often product protectionVS43444546474849實(shí)驗(yàn)室中生物安全柜的使用位置操作者物品放置操作和維護(hù)紫外燈明火溢出認(rèn)證清潔和消毒清除污染個(gè)體防護(hù)裝備警報(bào)器50用生物安全柜之前:確認(rèn)生物安全柜經(jīng)過認(rèn)證關(guān)閉紫外燈，打開熒光燈用適當(dāng)?shù)南緞┫竟ぷ髋_(tái)面把需要使用的儀

14、器放入柜內(nèi)工作前吹風(fēng)機(jī)需開510分鐘生物安全柜內(nèi)的工作安全51所有的材料和設(shè)備需要放置在靠近生物安全柜的后緣，特別是能夠產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備，但是不能阻塞任何通氣孔盡量減少飛濺和產(chǎn)生氣溶膠所有的工作流程應(yīng)從干凈到臟的區(qū)域盡量較少動(dòng)作避免引起氣流產(chǎn)生生物安全柜內(nèi)盡量不要使用明火生物安全柜內(nèi)的工作安全52每天工作結(jié)束時(shí):吹風(fēng)機(jī)需要開5分鐘來凈化把所有設(shè)備和材料均移出并進(jìn)行消毒消毒操作臺(tái)面關(guān)閉吹風(fēng)機(jī)和熒光燈，打開紫外燈生物安全柜內(nèi)的工作安全53維護(hù):每天兩次擦拭工作表面每周對(duì)紫外燈表面進(jìn)行擦拭*每月對(duì)生物安全柜表面進(jìn)行擦拭每年二次紫外燈強(qiáng)度監(jiān)測(cè) 每年一次甲醛熏蒸 每年一次進(jìn)行認(rèn)證生物安全柜內(nèi)的工作安全5

15、4洗手控制感染最有效、最方便、最經(jīng)濟(jì)的方法但要能夠經(jīng)常和適時(shí)的洗手什么時(shí)間洗手?開始所有的操作之前離開實(shí)驗(yàn)室前當(dāng)手被明顯污染時(shí)在生物安全柜操作前后摘除手套后接觸面部或者嘴巴時(shí)每天下班時(shí)55Youve got the wholePLEASE WASH THEM NOW !56Contamination of Hands and EnvironmentFirst cleaning, then disinfection (if appropriate)57 控制醫(yī)院感染最簡單, 最有效, 最方便, 最經(jīng)濟(jì)方法 洗 手58安全使用離心機(jī)使用前放置平穩(wěn)? 過滿? 平衡?塞子要正確放置?運(yùn)行條件?使用密封

16、的轉(zhuǎn)子 使用后完全停止? 溢出和泄漏?放置30分鐘沉淀氣溶膠或者在生物安全柜內(nèi)開啟59接種環(huán)用明火滅菌可能會(huì)產(chǎn)生含有污染物的氣溶膠短柄來避免晃動(dòng)過度推薦使用一次性塑料接種環(huán)60個(gè)人防護(hù)措施(PPE)個(gè)人防護(hù)措施是最基本的防護(hù)措施 (防護(hù)的最后防線).使用者和管理者均要確保防護(hù)措施是有效的 61PPE考慮的標(biāo)準(zhǔn)所有暴露的途徑均需要進(jìn)行封閉防護(hù)的程度方便使用需要進(jìn)行正確的選擇并且使用者需要進(jìn)行嚴(yán)格培訓(xùn)離開實(shí)驗(yàn)室前需要正確的移除個(gè)人防護(hù)設(shè)備62PPE鞋套所穿鞋子不能露出腳趾. 在高等級(jí)生物實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物房需要穿膠鞋實(shí)驗(yàn)服裝長袖、需要到膝蓋長度 袖口需要收緊后扣式需要定期清洗63PPE手套乳膠, 腈類

17、& 乙烯類等材料手套不能重復(fù)使用,更換要及時(shí). 如果手套的防護(hù)效果沒有改變可以消毒后重復(fù)使用需要有一定彈性，必須蓋住袖口雙層手套不要在公共場(chǎng)所戴手套摘除手套后必須要洗手手套不能代替洗手64戴手套的優(yōu)點(diǎn)減少病原體遷移到手上或從手上遷移出來的最好方法如果規(guī)范地戴手套及更換，成本效果好手套的類型，用途和材料比較多樣降低病原體雙向傳播的危險(xiǎn)明顯減少被針頭刺破皮膚的幾率，保護(hù)不受血液性傳染病的感染65戴手套的缺點(diǎn)花費(fèi)高使用很不規(guī)范; 沒有對(duì)手套進(jìn)行及時(shí)更換等醫(yī)護(hù)人員認(rèn)為戴手套只是為了保護(hù)他們自己手套材料質(zhì)量差的情況并非少見增加了固體廢物手套材料與一些洗手/擦手材料起反應(yīng)66手套重復(fù)使用的問題清洗手套會(huì)增

18、加滲漏的機(jī)會(huì)Adams . J Hosp Infect 1992對(duì)手套進(jìn)行滅菌或者高水平消毒比較困難一些手套的材料不能進(jìn)行再處理67PPE眼罩、面罩護(hù)目鏡, 安全的玻璃來防護(hù)眼睛面罩需要保護(hù)整個(gè)面部皮膚68健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)1、根據(jù)需要提供主動(dòng)或被動(dòng)免疫2、促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室感染的早期檢測(cè)3、應(yīng)禁止高度易感人群（如孕婦或免疫損傷人員）在高危險(xiǎn)實(shí)驗(yàn)室中工作4、提供有效的個(gè)體防護(hù)裝備和方法。69醫(yī)療聯(lián)系卡70培訓(xùn)1、吸入危險(xiǎn)（氣溶膠產(chǎn)物），如使用接種環(huán)、劃線接種瓊脂平板、移液、制作涂片、打開培養(yǎng)物、采集血液血清標(biāo)本、離心等2、食入危險(xiǎn)，如處理標(biāo)本、涂片以及培養(yǎng)物3、在使用注射器和針頭時(shí)刺傷皮膚的危險(xiǎn)4、處理動(dòng)

19、物時(shí)被咬傷、抓傷5、處理血液以及其他有潛在病理學(xué)危害的材料6、感染性材料的清除污染和處理71醫(yī)療廢物管理清除污染高壓蒸汽滅菌污染性材料和廢棄物的處理和丟棄程序可重復(fù)或再使用，或按普通“家庭”廢棄物丟棄的非污染（非感染性）廢棄物污染（感染性）銳器皮下注射用針頭、手術(shù)刀、刀子及破碎玻璃；這些廢棄物應(yīng)收集在帶蓋的不易刺破的容器內(nèi)，并按感染性物質(zhì)處理通過高壓滅菌和清洗來清除污染后重復(fù)或再使用的污染材料高壓滅菌后丟棄的污染材料直接焚燒的污染材料72醫(yī)療廢物管理是指從教學(xué)、臨床和研究實(shí)驗(yàn)室和手術(shù)室丟棄的生物垃圾包括(但不是僅有)如下幾種：動(dòng)物尸體實(shí)驗(yàn)室生物垃圾人體解剖學(xué)標(biāo)本人血和體液銳器73廢物處理Biomedical