雜環(huán)類藥物分析

1、關(guān)于雜環(huán)類藥物的分析第一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月基本要求 一、掌握二氫吡啶類、喹啉類、托烷類、吩噻嗪類、苯并二氮雜卓類藥物的鑒別和含量測(cè)定的基本原理與方法。 二、熟悉本類藥物中典型藥物國(guó)外藥典收載的鑒別和含量測(cè)定方法。 三、了解本類藥物的體內(nèi)分析方法。返 回第二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月雜環(huán)：環(huán)狀有機(jī)化合物的碳環(huán)中夾雜有其它非碳原子的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。非碳原子（雜原子）： N、S、O等雜環(huán)類藥物共性：（1）是合成藥物中所占比例最大的一類藥物； （2）多為五元環(huán)或六元環(huán)，單環(huán)或合并環(huán)；（3）雜環(huán)結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定，不易開環(huán)，其它性質(zhì)受雜原子種類、數(shù)目、位置影響；（4）雜環(huán)上取代

2、基性質(zhì)較活潑，常用于分析；（5）含N雜環(huán)，其堿性的強(qiáng)弱往往用于分析 。第三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 二氫吡啶類藥物（鈣通道阻滯劑）苯基-1,4-二氫吡啶母核吡啶（一）結(jié)構(gòu)第四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月硝苯地平（nifedipine)第五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）主要理化性質(zhì)1）二氫吡啶環(huán)的還原性2）硝基的氧化性：硝基芳伯胺基重氮化-偶合3）二氫吡啶的解離：與堿作用，二氫吡啶環(huán)上1,4-氫均可發(fā)生解離，形成p-共軛而發(fā)生顏色變化4）遇光不穩(wěn)定5）旋光性：C4手性碳6）UV、IR：苯環(huán)、取代基第六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6

3、月（三）鑒別試驗(yàn)化學(xué)鑒別法1）與亞鐵鹽反應(yīng)：-NO2Fe(OH)2 Fe(OH)3灰綠色 紅棕色2）與NaOH試液反應(yīng)：二氫吡啶類藥物的丙酮溶液+NaOH 橙紅色3）沉淀反應(yīng)：與重金屬鹽尼莫地平+HgCl2 白色沉淀4）重氮化-偶合反應(yīng)苯環(huán)硝基 芳伯胺基Zn，H+第七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二、分光光度法1）UV尼群地平膠囊的鑒別（ChP 2010）2）IR原料藥與部分制劑； 尼群地平片的鑒別（ChP 2010）二、色譜法1）TLC硝苯地平（BP 2010）2）HPLC尼莫地平片的鑒別（ChP 2010）第八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 (四) 硝苯地平中有關(guān)物

4、質(zhì)檢查 硝苯地平遇光分子內(nèi)部發(fā)生光化學(xué)歧化作用，降解為4-（2-硝基苯基）-2, 6-二甲基吡啶-3, 5-二羧酸二甲酯（I）和4-（2-亞硝基苯基）-2, 6-二甲基吡啶-3, 5-二羧酸二甲酯（II）。III第九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月溶液配制供試品液: 硝苯地平1 mg/mL對(duì)照品貯備液: 雜質(zhì)I、II各10 ug/mL 供試品液 對(duì)照品貯備液方法對(duì)照溶液1硝苯地平2 ug/mL雜質(zhì)A、B各1 ug/mL硝苯地平對(duì)照品雜質(zhì)I雜質(zhì)II硝苯地平1 mg/mL雜質(zhì)A、B各10 ug/mL對(duì)照溶液2第十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測(cè)對(duì)照溶液2進(jìn)樣測(cè)定分離度、靈敏

5、度供試品液對(duì)照溶液1判斷供試品液中若有與雜質(zhì)I、II保留時(shí)間一致的色譜峰，其峰面積均0.1%（峰面積外標(biāo)法）供試液中其他雜質(zhì)峰面積對(duì)照溶液液1中硝苯地平峰面積的0.2%；雜質(zhì)總量0.5%。分別進(jìn)樣，記錄至主峰tR的2倍第十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 吡啶類藥物一、典型藥物的結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì) （一）典型藥物的結(jié)構(gòu)吡啶（pyridine）異煙肼（isoniazid）尼可剎米（nikethamide）第十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）主要化學(xué)性質(zhì) 1. 弱堿性 吡啶環(huán)上的氮為堿性氮原子，吡啶環(huán)的pKb 值為8.8（水中）。尼可剎米除了吡啶環(huán)氮外，位上被

6、酰氨基取代。酰氨基化學(xué)性質(zhì)不甚活潑，但遇堿水解后釋放出具有堿性的二乙胺，故可以進(jìn)行鑒別。 第十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 3吡啶環(huán)的特性 異煙肼和尼可剎米的吡啶環(huán)、位未取代，而或位被羧基衍生物所取代；硝苯地平的吡啶環(huán)、位被甲酸甲酯所取代，其吡啶環(huán)可發(fā)生開環(huán)反應(yīng)。 2還原性 異煙肼的吡啶環(huán)位上被具有還原性酰肼取代，可被氧化劑氧化，可與含羰基的化合物發(fā)生縮合反應(yīng)。 第十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗(yàn)（一）吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng) 適用于吡啶環(huán)的、位無取代基的異 煙肼和尼可剎米。1. 戊烯二醛反應(yīng)（kning 反應(yīng)）尼可剎米 + 溴化氰H2O戊烯二醛衍生物苯胺黃色

7、第十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月CNBr第十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（黃色黃棕色）衍生物的顏色隨芳伯胺胺的不同而不同第十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2二硝基氯苯反應(yīng)（Vongerichten反應(yīng)）吡啶及其衍生物+2,4-二硝基氯苯至熔融或混合醇制KOH紫紅色無水條件第十八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 采用本法鑒別異煙肼、尼可剎米時(shí)，需適當(dāng)處理，即將酰肼氧化成羧基或?qū)Ⅴ０匪鉃轸然筮M(jìn)行鑒別。如異煙肼鑒別：第十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月異煙肼不經(jīng)處理的反應(yīng)：異煙肼 + 2，4-二硝基氯苯乙醇OH-紫紅色第二十張，

8、PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）酰肼基團(tuán)的反應(yīng) 1還原反應(yīng)異煙肼+AgNO3N2+Ag銀鏡異煙肼+亞硒酸硒（紅色）第二十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2縮合反應(yīng) 異煙肼的酰肼基與芳醛縮合形成腙，其有固定的熔點(diǎn)，可用以鑒別。ChP和BP均采用本法鑒別. 黃色結(jié)晶 mp為228231 第二十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 -NH2活性-CH2-+1，2-萘醌-4-磺酸OH-紅色第二十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）形成沉淀的反應(yīng) 具有吡啶環(huán)的結(jié)構(gòu)，可與重金屬鹽類及苦味酸等試劑形成沉淀。 尼可剎米+CuSO4+硫氰酸銨草綠色尼可剎米異煙肼+

9、HgCl2白色第二十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 （四）分解產(chǎn)物的反應(yīng)使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)尼可剎米異煙肼+無水Na2CO3Ca(OH)2吡啶臭尼可剎米+NaOH二乙胺第二十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 （五）紫外吸收光譜特征 本類藥物的分子結(jié)構(gòu)中均含有芳雜環(huán)，在紫外光區(qū)有特征吸收，其最大、最小吸收波長(zhǎng)及百分吸收系數(shù)可供鑒別。 本類藥物的紫外特征吸收鑒別方法 藥 物 溶 劑 max（nm） min（nm） E1cm1% 異煙肼 HCl（0.01mol/L） 265 約420 水 266 234 378 尼可剎米 HCl（0.01mol/L） 263 285 N

10、aOH（0.1mol/L） 255 840 260 860 硝苯地平 無水乙醇 333 140第二十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 （一）異煙肼中游離肼的檢查 三、有關(guān)物質(zhì)檢查TLC（ChP、BP）比濁法（JP）差示分光光度法（文獻(xiàn)）第二十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月1. TLC法 異煙肼及其注射液,采用TLC法中雜質(zhì)對(duì)照法。對(duì)照品：硫酸肼薄層板：硅膠（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）展開劑：異丙醇-丙酮（3 ：2）顯色劑：乙醇制對(duì)-二甲氨基苯甲醛試液規(guī)定：供試品主斑點(diǎn)前方，不得顯黃色斑點(diǎn)樣品液：50 mg異煙肼/mL，點(diǎn)樣10 uL雜質(zhì)對(duì)照液：50 ug游離肼/mL，

11、點(diǎn)樣2 uL 雜質(zhì)限量： Ch.P5025010310100% = 0.02%第二十八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 BP的檢查方法： 供試品溶液制備: 取異煙肼1.0g，加丙酮-水(1:1)制成10ml. 對(duì)照溶液制備: 取硫酸肼50mg，加水50ml使溶解后，加丙酮稀釋至100ml；量取10ml，加供試品溶液0.2ml， 加丙酮-水(1:1)稀釋至100ml。 薄層板：硅膠GF254薄層板 展開劑：醋酸乙酯-丙酮甲醇水(50:20:20:10) 顯色劑：乙醇制對(duì)-二甲氨基苯甲醛試液第二十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 檢測(cè)結(jié)果： 于254nm紫外光下檢測(cè)，供試品中

12、的雜質(zhì)斑點(diǎn)強(qiáng)度應(yīng)小于對(duì)照溶液中異煙肼色譜斑點(diǎn)；再噴以對(duì)-二甲氨基苯甲醛溶液，并在日光下檢視，對(duì)照溶液中硫酸肼斑點(diǎn)的強(qiáng)度大于供試液中的雜質(zhì)斑點(diǎn)。第三十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 2比濁法 (JP) 原理：游離肼+水楊醛 水楊醛腙（渾濁） 規(guī)定：異煙肼樣品+水楊醛 5 min內(nèi)不得渾濁 此法專屬性差，因異煙肼(慢)和硫酸肼均生成腙而析出沉淀。第三十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 差示分光光度法 肼異煙肼+ 對(duì)-二甲氨基苯甲醛黃色縮合物對(duì)-二甲氨基苯甲醛連氮 (max = 456nm 有最大吸收)形成的縮合產(chǎn)物對(duì)-二甲氨基芐叉 (于max =456nm波長(zhǎng)處無吸收)

13、 可在456nm波長(zhǎng)處測(cè)定并計(jì)算二者的差示吸收度A456，同時(shí)以 對(duì)照品比較法計(jì)算游離肼含量。第三十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 具體測(cè)定法： 對(duì)照品溶液：硫酸肼CR1g/ml 5 ml + 丙酮 max=456nm 測(cè)A1 + 對(duì)-二甲氨基苯甲醛 (A456A2A1)AR 5 ml max=456nm 測(cè)A2 供試品溶液：異煙肼C2mg/ml 游離肼 CX=As/ARCR 1份+ 丙酮 max=456nm 測(cè)A1 + 對(duì)-二甲氨基苯甲醛 (A456A2A1) As 2份 max=456nm 測(cè)A2第三十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月(二) 尼可剎米中有關(guān)雜質(zhì)檢查

14、 因有關(guān)雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)不明，故Ch.p采用TLC法中的高低濃度對(duì)比法進(jìn)行檢查。 第三十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 吩噻嗪類藥物一、基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與典型藥物第三十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月奮乃靜第三十八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月癸氟奮乃靜第三十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月鹽酸氟奮乃靜第四十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月鹽酸三氟拉嗪第四十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）主要化學(xué)性

15、質(zhì) 1.UV和IR：硫氮雜蒽母核為共軛三環(huán)體系 三個(gè)最大吸收峰別：205nm、254nm、300nm 由于2位、10位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。 硫氮雜蒽母核的硫?yàn)槎r(jià)，易氧化為砜和亞砜，其UV光譜有明顯不同，有四個(gè)峰值。 另外，取代基R和R不同，IR不同。第四十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2.易氧化呈色：二價(jià)硫易氧化，遇H2SO4、HNO3、FeCl3、H2O2等氧化劑易被氧化，隨著取代基的不同，而呈不同的顏色。 3.與金屬離子絡(luò)合呈色：本類藥物中未被氧化的硫，可與鈀離 子形成有色配合物，其氧化產(chǎn)物則無此反應(yīng)?？捎糜阼b別和含量測(cè)定，并具有專屬性，可消除氧化產(chǎn)物的

16、干擾。4.弱堿性：硫氮雜蒽母核中的N原子堿性極弱；10位取代的脂烴氨基、哌嗪及哌啶的衍生物的N原子堿性較強(qiáng)，可用于鑒別與含量測(cè)定第四十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）紫外特征吸收和紅外吸收光譜 可用UV和IR鑒別，Ch.P中UV鑒別實(shí)例如下： 藥物名稱 溶 劑 濃度（g/ml） max（nm） A E1%1cm鹽酸氯丙嗪 鹽酸（9 1000） 5 254 0.46 915 306 鹽酸異丙嗪 鹽酸（0.01mol/L） 6 249 883937奮乃靜 無水乙醇 7 258 0.65 癸氟奮乃靜 乙醇 10 260 鹽酸氟奮乃靜 鹽酸（9 1000） 10 255 553593

17、 鹽酸三氟拉嗪 鹽酸（1 20） 10 256 630鹽酸硫利達(dá)嗪 乙醇 8 264與315 二、鑒別試驗(yàn)第四十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）顯色反應(yīng) 1. 與氧化劑的顯色反應(yīng) 藥物名稱 硫 酸 硝 酸 過氧化氫 鹽酸氯丙嗪 顯紅色, 漸變淡黃色 鹽酸異丙嗪 顯櫻桃紅色,放置 生成紅色沉淀,加熱即溶解, 后顏色漸變深 溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色 奮乃靜 顯深紅色;放置后 紅色漸褪去 鹽酸氟奮乃靜 顯淡紅色, 溫?zé)?后變成紅褐色 鹽酸三氟拉嗪 生成微帶紅色的白色沉淀; 放 置后, 紅色變深, 加熱后變黃色 鹽酸硫利達(dá)嗪 顯藍(lán)色 第四十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月

18、 2. 與鈀離子絡(luò)合顯色反應(yīng)（ChP 2010） 利用分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò) 合物，如與癸氟奮乃靜形成紅色絡(luò)合物。第四十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第四十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng) 癸氟奮乃靜 碳酸鈉及碳酸鉀 F- + 酸性茜素鋯試液 ZrF62-配位離子，茜素游離使溶液由紅色變?yōu)辄S色。600熾灼第四十八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月三、特殊雜質(zhì)檢查HPLC、TLCP300-305返 回藥物與有關(guān)物質(zhì)在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上具有相似性第四十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 苯并二氮雜卓類藥物一、

19、結(jié)構(gòu)特征與典型藥物NNClH3CO地西泮第五十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月阿普唑侖第五十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月奧沙西泮第五十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月氯氮卓NNNCH3OClH第五十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月主要理化性質(zhì)：弱堿性：二氮雜卓環(huán)為七元環(huán)，環(huán)上N原子具堿性，苯基的取代使堿性下降，可用非水滴定法測(cè)定。UV吸收共軛體系；含量測(cè)定水解性：環(huán)比較穩(wěn)定，在強(qiáng)酸下水解，生成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物，可用于鑒別和比色測(cè)定溶解性：多為游離堿，不溶于水，溶于甲醇、乙醇和氯仿中。第五十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 (一)

20、 化學(xué)鑒別試驗(yàn) 1.沉淀反應(yīng) 氯氮卓 橙紅色沉淀 阿普唑侖 鹽酸氟西泮 KBiI4 橙紅色沉淀 氯硝西泮 放置后，沉淀顏色變深， 二、鑒別試驗(yàn)阿普唑侖 + 硅鎢酸 白色沉淀第五十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2.水解后呈芳伯胺反應(yīng) 氯氮卓和奧沙西泮第五十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 硫酸-熒光反應(yīng) 本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光。 地西泮 黃綠色 黃色 氯氮卓 黃色 紫色 艾司唑侖 + H2SO4 亮綠色 + 稀硫酸 天藍(lán)色 硝西泮 淡藍(lán)色 藍(lán)綠色 奧沙西泮 淡黃綠色第五十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月4.分解產(chǎn)物

21、的反應(yīng) 本類藥物多為有機(jī)氯化合物，氧瓶燃燒法破壞，顯氯化物反應(yīng)。Ch.P用于地西泮鑒別。第五十八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜 藥物名稱 溶 劑 濃度（g/ml） max（nm） 地西泮 0.5%硫酸甲醇溶液 10 284 440-468 氯氮卓 鹽酸溶液(0.1 M) 7 245,308 309-329(308nm) 氯硝西泮 0.5%硫酸乙醇溶液 10 252,307 奧沙西泮 乙醇 10 229, 315(較弱) 紅外吸收光譜:已用于地西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、鹽酸氟西 泮、氯硝西泮和奧沙西泮的鑒別。 第五十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于20

22、22年6月（三）TLC法 1.硝西泮片的TLC鑒別法對(duì)照法 第六十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2.酸水解產(chǎn)物的TLC法 利用苯并二氮雜卓類藥物經(jīng)酸水解產(chǎn)生的二苯甲酮衍生物進(jìn)行鑒別。由于不同的苯并二氮雜卓類藥物水解后可能會(huì)獲得相同的二苯甲酮衍生物，因此本法的專屬性較差。 第六十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 （一）有關(guān)物質(zhì)檢查 多采用TLC、HPLC法。三唑侖USP采用GC法三、特殊雜質(zhì)檢查第六十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 1.地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查 地西泮在合成過程中因其副反應(yīng)，可能引入N-去甲基苯甲二氮卓及化學(xué)結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì)，可采用TLC法中

23、的高低濃度對(duì)比法進(jìn)行檢查。 2.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查 USP(24)用TLC法檢查氯氮卓中的有關(guān)物質(zhì)，并規(guī)定其分解產(chǎn)物2-氨基-5-氯-2-苯甲酮含量不得過0.01%；中間體7-氯-1，3-二氫-5-苯基-2H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮-4-氧化物含量不得過0.1%。 第六十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 3.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的反相高效液相色譜法 色譜條件：色譜柱為250mm2.6mm（i.d.）Nucleosil10C18柱；n=3000；流動(dòng)相為甲醇-磷酸液(0.05mol/L)(60:40),40%氫氧化鈉溶液調(diào)pH為6.0；流速為1ml/min;紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)為25

24、4nm。 檢測(cè)結(jié)果：氨基物（）的tR為12.0min、氧化物（）的tR為4.3min，痕量雜質(zhì)（、）的tR為13.8、3.6、4.7min。 第六十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 (二) 降解產(chǎn)物的檢查 地西泮注射液列入此項(xiàng)檢查，因本品在貯藏過程中有可能分解成2-甲氨基-5-氯-二苯甲酮等雜質(zhì)。采用HPLC法進(jìn)行檢查。返 回第六十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月一、非水溶液滴定法(一) 基本原理第四節(jié) 含量測(cè)定當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不

25、同情況采用相應(yīng)測(cè)定條件。第六十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月(二) 一般方法供試品+冰醋酸10ml30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml結(jié)果高氯酸滴定液滴定以空白試驗(yàn)校正第六十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 1.適用范圍 主要用于Kb10-8的有機(jī)堿鹽的含量測(cè)定。對(duì)堿性較弱 的雜環(huán)類藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點(diǎn)指示的方法， 可使pKb為813的弱堿性藥物采用本法滴定。 一般來說： Kb為10-810-10時(shí)，宜選冰醋酸作為溶劑；藥物的 Kb為10-1010-12時(shí)，宜選冰醋酸與醋酐的混合溶液； Kb10-12時(shí)，應(yīng)用醋酐作為溶劑。

26、另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增 大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測(cè)定結(jié)果。 (三) 問題討論第六十八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.酸根的影響： 無機(jī)酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞減： HClO4HBrH2SO4HClHNO3過量(13倍)不影響測(cè)定結(jié)果 消除HX干擾的方法：加Hg(Ac)2 量不足終點(diǎn)不明顯，結(jié)果偏低。 2BHX + Hg(Ac)2 2BHAc + HgX2 第六十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3.滴定劑的穩(wěn)定性 非水溶液滴定法所用的溶劑為醋酸，具有揮發(fā)性，膨脹系數(shù)較大，溫度和貯存條件都影響滴定劑的濃度。若滴定

27、樣品與標(biāo)定HClO4溶液時(shí)的溫度不一致，溫差未超過10時(shí)，應(yīng)將高氯酸滴定液的濃度用下列公式加以校正： N1 = N0/1+0.0011 (t1-t0)4.終點(diǎn)指示方法 常用電位法和指示劑法。Ch.P收載的本類藥物大多采用結(jié)晶紫指示劑指示終點(diǎn)，少數(shù)采用電位法指示終點(diǎn)。第七十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月(四) 應(yīng)用實(shí)例 1.游離弱堿性藥物測(cè)定 異煙肼、尼可剎米、地西泮及氯氮卓等。基于這些藥物分子結(jié)構(gòu)中氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法直接測(cè)定其含量。由于這些藥物的堿性強(qiáng)弱不同，測(cè)定時(shí)所采用溶劑、指示劑及其指示終點(diǎn)的方法也不盡相同。 藥物名稱 取樣量(g) 溶 劑 指示劑 終點(diǎn)顏色 尼

28、可剎米 0.15 冰醋酸10ml 結(jié)晶紫 藍(lán)綠色 地西泮 0.2 冰醋酸、酸酐10ml 結(jié)晶紫 綠色 氯氮卓 0.3 冰醋酸10ml 結(jié)晶紫 藍(lán)色第七十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.氫鹵酸鹽類藥物測(cè)定 2BHX + Hg(Ac)2 2BHAc + HgX2 藥物名稱 取樣量(g) 溶 劑 加入醋酸汞試液(ml) 指示劑 終點(diǎn)顏色 鹽酸氯丙嗪 0.2 醋酐10ml 5 橙黃 玫瑰紅色 鹽酸異丙嗪 0.3 冰醋酸10ml 4 結(jié)晶紫 藍(lán)色 鹽酸氟奮乃靜 0.3 冰醋酸20ml 5 結(jié)晶紫 藍(lán)綠色 鹽酸環(huán)丙沙星 0.2 冰醋酸25ml 5 橙黃 粉紅色 氫溴酸東莨菪堿 0.3 冰

29、醋酸20ml 5 結(jié)晶紫 純藍(lán)色 鹽酸硫利達(dá)嗪 0.3 丙酮100ml 5 電位滴定法 第七十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3.硫酸鹽類藥物測(cè)定 硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二級(jí)解離，生成SO42-，但在非水介質(zhì)中，只顯示一元酸解離為HSO4-，即只供給一個(gè)H+，所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。第七十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）硫酸阿托品測(cè)定：阿托品為堿性較強(qiáng)的 一元堿藥物，因而硫酸阿托品的化學(xué)結(jié)構(gòu)式可以 簡(jiǎn)寫為(BH+)2SO42 -，用HClO4直接滴定時(shí)的反 應(yīng)式為：(BH+)2SO42- + HClO

30、4 (BH+)ClO4- + (BH+)HSO4- n硫酸阿托品:n高氯酸 =1:1第七十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）硫酸奎寧測(cè)定：奎寧為二元堿，其中喹核堿的堿性較強(qiáng)，可與硫酸生成鹽；而喹啉環(huán)的堿性極弱，不能與硫酸成鹽，而保持游離狀態(tài)。當(dāng)用高氯酸直接滴定硫酸奎寧時(shí)，1mol的硫酸奎寧消耗3mol的高氯酸。其反應(yīng)式如下： (C20H24N2 H+)2SO4 + 3HClO4 (C20H24N2 2H+)2ClO4- +(C20H24N2 2H+)HSO4-ClO4- Ch.P和USP(24)都采用此法測(cè)定硫酸奎寧和硫酸奎尼丁的含量。第七十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于202

31、2年6月(3) 硫酸奎寧片的測(cè)定： 硫酸奎寧片劑堿化處理，生成奎寧游離堿，然后再用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定。此時(shí)1摩爾的硫酸奎寧可消耗4摩爾的高氯酸，因此片劑分析的滴定度與原料藥分析的滴定度不同。 第七十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月4.硝酸鹽的測(cè)定 硝酸在冰醋酸介質(zhì)中酸性不強(qiáng)，滴定反應(yīng)可以進(jìn)行完全。硝酸具氧化性可破壞指示劑使其變色，無法指示終點(diǎn)。因此采用非水溶液滴定法測(cè)定硝酸鹽時(shí)，一般用電位法指示終點(diǎn)。第七十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月5.磷酸鹽與有機(jī)酸鹽 磷酸與有機(jī)酸在冰醋酸介質(zhì)中酸性極弱，不影響滴定反應(yīng)的定量完成，可以按常規(guī)方法直接滴定。第七十八張，PPT共九

32、十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）硝苯地平的測(cè)定 基本原理 硝苯地平的測(cè)定原理，可用下列反應(yīng)式表示： 終點(diǎn)時(shí):微過量的Ce4+將指示劑中的Fe2+氧化成Fe3+，使 橙紅色配合物離子呈淡藍(lán)色或無色，以指示終 點(diǎn)的到達(dá)。二、鈰量法第七十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）吩噻嗪類藥物的測(cè)定藥物Ce(SO4)2, -e紅色Ce(SO4)2, -2e紅色消退自身指示終點(diǎn)或電位法、永停法指示終點(diǎn)第八十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月(一）酸性染料比色法 1.基本原理 三、比色法第八十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 2. 影響因素 (1) 水相最佳pH值的選擇：水相

33、的pH應(yīng)使有機(jī)堿性藥物均成陽離子(BH+)，而酸性染料應(yīng)電離足夠的陰離子(In -),陰陽離子才能定量生成離子對(duì)，并完全溶于有機(jī)溶劑中，而過量的染料完全保留在水相中，才能保證定量的測(cè)定。 (2) 酸性染料及其濃度：常用酸性染料有溴麝香草酚藍(lán)、甲基橙、溴甲酚綠等。酸性染料濃度，對(duì)測(cè)定影響不大，有足夠量即可。 第八十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月(3) 有機(jī)溶劑的選擇 應(yīng)對(duì)離子對(duì)提取率高，不與水混溶，或能與離子對(duì)形成氫鍵的有機(jī)溶劑。常用的有機(jī)溶劑有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、苯、甲苯、四氯化碳等。(4)水分的影響：嚴(yán)防水分混入有機(jī)溶劑中，水相中過量有色 酸性染料，而影響測(cè)定結(jié)果；水分的

34、混入使氯仿混濁，而影 響比色測(cè)定。一般加入脫水劑，或?yàn)V紙過濾的方法，除去混 入的水分。 第八十三張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 應(yīng)用示例 Ch.P中硫酸阿托品片、氫溴酸東莨菪堿片和氫溴酸山莨菪堿片等，采用本法測(cè)定含量測(cè)定。第八十四張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）鈀離子比色法優(yōu)點(diǎn)： 鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測(cè)定。 max500nm吩噻嗪類藥物 + Pd2+pH20.1紅色絡(luò)合物在max處測(cè)定A，以對(duì)照法定量第八十五張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）直接分光光度法 供試品不需提取分離，溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲屑纯蛇M(jìn)行含量測(cè)定。 1.奧

35、沙西泮原料的測(cè)定 在229nm，采用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法測(cè)定。 2.鹽酸異丙嗪片的測(cè)定 在249nm，采用E1cm1%910測(cè)定。 3.鹽酸異丙嗪注射液的測(cè)定 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇：注射液處方加VC作抗氧劑，可還原異丙嗪紅 色氧化產(chǎn)物，從而防止異丙嗪氧化變色。VC在鹽酸異丙嗪最大 吸收波長(zhǎng)249nm處有吸收，干擾注測(cè)定。因此選用299nm波長(zhǎng)測(cè) 定鹽酸異丙嗪注射液的含量時(shí)，維生素C在此波長(zhǎng)處則不產(chǎn)生干 擾,但E1cm1% 108 。四、紫外分光光度法第八十六張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)萃取后分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液鹽酸氯丙嗪氨水堿化氯丙嗪乙醚提取乙醚層鹽酸提取鹽酸氯丙嗪max2541nm

36、處測(cè)定A， E1cm1% 915第八十七張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）萃取-雙波長(zhǎng)分光光度法 本法是USP（24）收載的方法，用于鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定，主要用來校正樣品中氧化物對(duì)測(cè)定的干擾。測(cè)定原理 利用氯丙嗪的最max為254nm，其氧化物在此波長(zhǎng)也有吸收，同時(shí)在277nm氧化物也有吸收，且其A254=A277.而氯丙嗪在此波長(zhǎng)無吸收。因此，可由兩波長(zhǎng)處測(cè)得A計(jì)算氯丙嗪含量。第八十八張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第八十九張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法 鹽酸氯丙嗪注射液 抗氧劑維生素C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線

37、，不干擾鹽酸氯丙嗪的測(cè)定。因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰266nm谷254nm距離，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量 其測(cè)定方法如下： 第九十張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月1.光譜繪制 測(cè)繪條件： 波長(zhǎng)范圍為200nm320nm；狹縫為12nm；紙速為120mm/min。2.線性關(guān)系 精取鹽酸氯丙嗪對(duì)照液(50g/ml)制得標(biāo)準(zhǔn)系列，以 HCI(0.1mol/L)為空白，按光譜繪制項(xiàng)下分別測(cè)定。用尺量取不 同濃度系列溶液光譜266nm-谷254nm距離（DL），并以峰谷距離為縱 坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.供試品測(cè)定 精密量取鹽酸氯丙嗪注射液2.0ml，按光譜繪制項(xiàng) 下的方法，測(cè)得

38、二階導(dǎo)數(shù)光譜，量取光譜峰-谷(266nm254nm) 距離，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出濃度，計(jì)算百分含量。第九十一張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月五、氣相色譜法（一）硫酸阿托品片的含量測(cè)定 USP(24)采用的方法。以后馬托品作為內(nèi)標(biāo), 采用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法。 測(cè)定方法 (1)內(nèi)標(biāo)溶液的制備： (2)供試品溶液與對(duì)照品溶液的制備： (3)色譜系統(tǒng)：色譜柱為1.8m2mm的玻璃柱；擔(dān)體為與碳酸 鈉混合于900熔融后，經(jīng)酸和堿處理的硅烷化藻土；固定 相為3%的OV-17（即50%甲基，50%苯基的聚硅氧烷）；載氣 為氮?dú)?，流速?5ml/min；檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器。第九十二張，PPT共九十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 (4)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：取對(duì)照品溶液1l，進(jìn)樣6次，所得的對(duì) 照品和內(nèi)標(biāo)峰面積之比的RSD不大于2.0%；對(duì)照品峰和內(nèi)標(biāo)峰的 分辨率Rs4.0；T2.0。 (5)測(cè)