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文檔簡介
1、 貴州大學(xué)課程論文學(xué)院:貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院班級:植物生產(chǎn)類 113姓名:蒲云海學(xué)號:1109010171課程名稱:分子生物學(xué)課程論文題目:基因工程評閱成績:評閱意見:成績評定教師簽名: 日期: 年 月基因工程學(xué) 生:蒲云海( 貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物生產(chǎn)類 113 班,學(xué)號蒲云海摘 要:基因作為機體內(nèi)的遺傳單位,不僅可以決定我們的相貌、高矮,而且它的異常會 不可避免地導(dǎo)致各種疾病的出現(xiàn)。 某些缺陷基因可能會遺傳給后代, 有些則不能。 基因治療 的提出最初是針對單基因缺陷的遺傳疾病, 目的在于有一個正常的基因來代替缺陷基因或者 來補救缺陷基因的致病因素。生物工程主要有基因工程、細胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程
2、和微生物工程等 5個部分。其中基因工程就是人們對生物基因進行改造,利用生物生產(chǎn)人們想要 的特殊產(chǎn)品。隨著DNA勺內(nèi)部結(jié)構(gòu)和遺傳機制的秘密一點一點呈現(xiàn)在人們眼前, 生物學(xué)家不再僅僅滿足于探索、 提示生物遺傳的秘密, 而是開始躍躍欲試, 設(shè)想 在分子的水平上去干預(yù)生物的遺傳特性。一. 分子生物學(xué)技術(shù)概述分子生物學(xué)是一門在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學(xué)。 通過研究生物大分子 ( 核酸、蛋白質(zhì) )的結(jié)構(gòu)、功能和生物合成等方面來闡明各種生命現(xiàn)象的本質(zhì)。 研 究內(nèi)容包括各種生命過程。比如光合作用、發(fā)育的分子機制、神經(jīng)活動的機理、 癌的發(fā)生等。分子生物學(xué)從分子水平研究生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能從而闡明生命現(xiàn)象本
3、質(zhì)的科學(xué)。 自20世紀(jì) 50年代以來, 分子生物學(xué)是生物學(xué)的前沿與生長點, 其主 要研究領(lǐng)域包括蛋白質(zhì)體系、蛋白質(zhì) -核酸體系 ( 中心是分子遺傳學(xué) )和蛋白質(zhì) - 脂質(zhì)體系(即生物膜)。生物大分子,特別是蛋白質(zhì)和核酸結(jié)構(gòu)功能的研究,是分子生物學(xué)的基礎(chǔ)。 現(xiàn)代化學(xué)和物理學(xué)理論、技術(shù)和方法的應(yīng)用推動了生物大分子結(jié)構(gòu)功能的研究, 從而出現(xiàn)了近 30 年來分子生物學(xué)的蓬勃發(fā)展。二基因工程基礎(chǔ)基因工程(genetic engineering )又稱基因拼接技術(shù)和 DNA重組技術(shù),是以 分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ), 以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段, 將不同來 源的基因按預(yù)先設(shè)計的藍圖,在體外構(gòu)建雜種D
4、NA分子,然后導(dǎo)入活細胞,以改 變生物原有的遺傳特性、 獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。 基因工程技術(shù)為基因的結(jié)構(gòu) 和功能的研究提供了有力的手段?;蚬こ淌巧锕こ痰囊粋€重要分支,它和細胞工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程 和微生物工程共同組成了生物工程。 所謂基因工程( genetic engineering) 是 在分子水平上對基因進行操作的復(fù)雜技術(shù), 是將外源基因通過體外重組后導(dǎo)入受 體細胞內(nèi),使這個基因能在受體細胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯表達的操作。它是用人 為的方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì)一一DNA大分子提取出來,在離體 條件下用適當(dāng)?shù)墓ぞ呙高M行切割后, 把它與作為載體的DNA分子連接起來,然后 與
5、載體一起導(dǎo)入某一更易生長、 繁殖的受體細胞中, 以讓外源物質(zhì)在其中 “安家 落戶”,進行正常的復(fù)制和表達,從而獲得新物種的一種嶄新技術(shù)?;蚬こ淌窃诜肿由飳W(xué)和分子遺傳學(xué)綜合發(fā)展基礎(chǔ)上于本世紀(jì) 70 年代誕 生的一門嶄新的生物技術(shù)科學(xué)。 一般來說, 基因工程是指在基因水平上的遺傳工 程,它是用人為方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì)-DNA 大分子提取出來,在離體條件下用適當(dāng)?shù)墓ぞ呙高M行切割后, 把它與作為載體的DNA分子連接 起來,然后與載體一起導(dǎo)入某一更易生長、 繁殖的受體細胞中, 以讓外源遺傳物 質(zhì)在其中 安家落戶 ,進行正常復(fù)制和表達, 從而獲得新物種的一種嶄新的育種 技術(shù)。 這個定義
6、表明,基因工程具有以下幾個重要特征:首先,外源核酸分子 在不同的寄主生物中進行繁殖, 能夠跨越天然物種屏障, 把來自任何一種生物的 基因放置到新的生物中, 而這種生物可以與原來生物毫無親緣關(guān)系, 這種能力是 基因工程的第一個重要特征。第二個特征是,一種確定的DNA小片段在新的寄主 細胞中進行擴增,這樣實現(xiàn)很少量 DNA羊品拷貝出大量的DNA而且是大量沒 有污染任何其它DNA序列的、絕對純凈的DNA分子群體。科學(xué)家將改變?nèi)祟惿?細胞DNA的技術(shù)稱為“基因系治療” (germlinetherapy ),通常所說的“基 因工程” 則是針對改變動植物生殖細胞的。 無論稱謂如何, 改變個體生殖細胞的
7、DNA都將可能使其后代發(fā)生同樣的改變。迄今為止,基因工程還沒有用于人體, 但已在從細菌到家畜的幾乎所有非人 生命物體上做了實驗, 并取得了成功。 事實上, 所有用于治療糖尿病的胰島素都 來自一種細菌,其DNA中被插入人類可產(chǎn)生胰島素的基因, 細菌便可自行復(fù)制 胰島素。基因工程技術(shù)使得許多植物具有了抗病蟲害和抗除草劑的能力; 在美國, 大約有一半的大豆和四分之一的玉米都是轉(zhuǎn)基因的。 目前,是否該在農(nóng)業(yè)中采用 轉(zhuǎn)基因動植物已成為人們爭論的焦點: 支持者認(rèn)為,轉(zhuǎn)基因的農(nóng)產(chǎn)品更容易生長, 也含有更多的營養(yǎng)(甚至藥物),有助于減緩世界范圍內(nèi)的饑荒和疾?。欢磳?者則認(rèn)為,在農(nóng)產(chǎn)品中引入新的基因會產(chǎn)生副作
8、用,尤其是會破壞環(huán)境。誠然,仍有許多基因的功能及其協(xié)同工作的方式不為人類所知, 但想到利用 基因工程可使番茄具有抗癌作用、 使鮭魚長得比自然界中的大幾倍、 使寵物不再 會引起過敏, 許多人便希望也可以對人類基因做類似的修改。 畢竟, 胚胎遺傳病 篩查、基因修復(fù)和基因工程等技術(shù)不僅可用于治療疾病, 也為改變諸如眼睛的顏 色、智力等其他人類特性提供了可能。目前我們還遠不能設(shè)計定做我們的后代, 但已有借助胚胎遺傳病篩查技術(shù)培育人們需求的身體特性的例子。 比如,運用此 技術(shù),可使患兒的父母生一個和患兒骨髓匹配的孩子, 然后再通過骨髓移植來治 愈患兒。隨著DNA勺內(nèi)部結(jié)構(gòu)和遺傳機制的秘密一點一點呈現(xiàn)在人
9、們眼前,特別 是當(dāng)人們了解到遺傳密碼是由 RNA轉(zhuǎn)錄表達的以后,生物學(xué)家不再僅僅滿足于 探索、提示生物遺傳的秘密, 而是開始躍躍欲試, 設(shè)想在分子的水平上去干預(yù)生 物的遺傳特性。如果將一種生物的DNA中的某個遺傳密碼片斷連接到另外一種 生物的DNA鏈上去,將DNAt新組織一下,就可以按照人類的愿望,設(shè)計出新的 遺傳物質(zhì)并創(chuàng)造出新的生物類型, 這與過去培育生物繁殖后代的傳統(tǒng)做法完全不 同。 這種做法就像技術(shù)科學(xué)的工程設(shè)計, 按照人類的需要把這種生物的這個 “基 因”與那種生物的那個“基因”重新“施工”,“組裝”成新的基因組合,創(chuàng)造 出新的生物。 這種完全按照人的意愿, 由重新組裝基因到新生物產(chǎn)生
10、的生物科學(xué) 技術(shù),就稱為“基因工程”,或者說是“遺傳工程”?;静僮鞑襟E 這個過程 即為體外重組DNA的過程。首先選擇目的基因所適合的運載工具, 如質(zhì)粒、病毒 等,然后用同一種限制酶分別切割運載體和目的基因, 使其產(chǎn)生相同的黏性末端, 再加入適量的DNA連接酶,在生物體外將目的基因的DNA與運載體的DNA結(jié)合起 來,形成重組DNA(或重組質(zhì)粒)將重組的DNA雜合分子,借鑒細菌或病毒侵染細菌的途徑,轉(zhuǎn)移到選定的生物體細胞中,使重組的 DNA在受體細胞中復(fù)制、 轉(zhuǎn)錄、翻譯得以表達。 把目的基因裝在運載體上并通過運載體將目的基因運到受 體細胞的這一過程, 在一般情況下, 轉(zhuǎn)化成功率僅為百分之一。 為
11、此遺傳工程師 們創(chuàng)造了低溫條件下用氯化鈣處理受體細胞和增加重組 DNAt度的辦法來提高 轉(zhuǎn)化率。采用氯化鈣化處理后,能增大受體細胞的細胞壁透性,從而使雜種 DNA 分子更容易進入。 另外也可用基因槍法、 激光微束穿孔法、 顯微注射法等方法直 接將目的基因轉(zhuǎn)入受體細胞(如受精卵細胞)。用基因治病是把功能基因?qū)氩∪梭w內(nèi)使之表達, 并因表達產(chǎn)物蛋 白質(zhì)發(fā)揮了功能使疾病得以治療。 基因治療的結(jié)果就像給基因做了一次手術(shù), 治 病治根,所以有人又把它形容為“分子外科”。我們可以將基因治療分為性細胞基因和體細胞基因治療兩種類型。 性細胞基 因治療是在患者的性細胞中進行操作, 使其后代從此再不會得這種遺傳疾
12、病。 體 細胞基因治療是當(dāng)前基因治療研究的主流。 但其不足之處也很明顯, 它并沒前改 變病人已有單個或多個基因缺陷的遺傳背景, 以致在其后代的子孫中必然還會有 人要患這一疾病。無論哪一種基因治療, 目前都處于初期的臨床試驗階段, 均沒有穩(wěn)定的療效 和完全的安全性,這是當(dāng)前基因治療的研究現(xiàn)狀。可以說,在沒有完全解釋人類基因組的運轉(zhuǎn)機制、充分了解基因調(diào)控機 制和疾病的分子機理之前進行基因治療是相當(dāng)危險的。增強基因治療的安全性, 提高臨床試驗的嚴(yán)密性及合理性尤為重要。盡管基因治療仍有許多障礙有待克 服,但總的趨勢是令人鼓舞的。據(jù)統(tǒng)計,截止 1998年底,世界范圍內(nèi)已有 373 個臨床法案被實施,累計
13、 3134人接受了基因轉(zhuǎn)移試驗,充分顯示了其巨大的開 發(fā)潛力及應(yīng)用前景。 正如基因治療的奠基者們當(dāng)初所預(yù)言的那樣, 基因治療的出 現(xiàn)將推動新世紀(jì)醫(yī)學(xué)的革命性變化。三基因控制性狀(一)基因控制性狀的過程 從基因到性狀的表現(xiàn)有著許多生物合成和代謝過程,它們往往是有步驟按順 序地進行。 在生物的個體發(fā)育過程中, 基因一旦處于活化狀態(tài), 就將它攜帶的遺 傳密碼,通過mRNA勺轉(zhuǎn)錄和翻譯,形成特異的蛋白質(zhì),通過蛋白質(zhì)控制細胞直 到個體?;蚩刂菩誀畹倪^程DNA專錄mRN翻譯 肽鏈加工 蛋白質(zhì)一細胞結(jié)構(gòu)、 調(diào)控:(1)(2)(3) +環(huán)境功能 組織器官的生理、病理狀態(tài) 性狀的 正常、異常 正常、疾病。(二
14、)基因控制性狀的機理基因內(nèi)含有的控制生物性狀的遺傳信息,存在于染色體的 DNA分子上。基因 控制生物性狀的過程稱為基因表達。 在基因表達中,生物遺傳信息的傳遞途徑是: DNA RNA蛋白質(zhì)(表現(xiàn)性狀).轉(zhuǎn)錄:從 DNARNA遺傳信息從DNA專遞給RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄(transcription )。轉(zhuǎn)錄時, 在RNA聚合酶作用下,以DNA為模板,按堿基配對原則,合成 RNA分子。轉(zhuǎn)錄形 成的RNA其類型有:tRNA rRNA mRNAtRNA即轉(zhuǎn)運RNA作用是在蛋白質(zhì)合 成中運送氨基酸;rRNA即核糖體RNA參與組裝核糖體;而mRNA卩信使RNA它 攜帶有編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列的遺傳信息。.翻譯
15、:從RNA蛋白質(zhì)將mRN分子上的遺傳信息翻譯成由特定氨基酸排列順序的多肽鏈,這一過 程稱為翻譯(translation )。將mRN上的堿基排列順序(其中每三個堿基為一 個遺傳密碼,決定一種氨基酸)依次轉(zhuǎn)換為氨基酸的排列順序。已知所有生物都 使用相同的遺傳密碼,這也表明了生物界的統(tǒng)一性。肽鏈的氨基酸序列,由mRN鏈上的U、C、A、G四種堿基順序,按三聯(lián)體密 碼確定。如: AUG UUC AGC CCU UGACAA UGU GCA,UGA mRNA起始 MetpheSerproCysLysCysAla, 終止多肽鏈翻譯過程在細胞質(zhì)內(nèi)進行。 合成的多肽鏈形成蛋白質(zhì)亞基, 最后形成蛋白質(zhì)。遺傳的中
16、心法則1958年克里克提出了中心法則,他認(rèn)為遺傳信息的自我復(fù)制是從 DNA到DNA 遺傳信息的傳遞是DNA到RNA最終決定蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和功能。后來人們發(fā) 現(xiàn),有些病毒的RNA能自我復(fù)制。另外還發(fā)現(xiàn),有些 RNA病毒侵染細胞后能產(chǎn)生 逆轉(zhuǎn)錄酶,逆轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成雙鏈DNA分子。這個雙鏈DNA分子能整合 到寄主細胞的DNA中,可隨寄主細胞的DNA復(fù)制而復(fù)制,同時也可以轉(zhuǎn)錄出更多 的病毒 RNA。四基因突變基因突變的類型及原因基因突變的原因很復(fù)雜, 根據(jù)現(xiàn)代遺傳學(xué)的研究, 基因突變的產(chǎn)生, 是在 一定的外界環(huán)境條件或生物內(nèi)部因素作用下,DNA在復(fù)制過程中發(fā)生偶然差錯,使個別堿基發(fā)生缺失、
17、增添、代換,因而改變遺傳信息,形成基因突變。 生物個體發(fā)育的任何時期,不論體細胞或性細胞都可能發(fā)生基因突變?;?突變發(fā)生在體細胞部分的如家蠶曾發(fā)生有半邊透明、半邊不透明皮膚的嵌合 體,這是早期卵裂時產(chǎn)生的體細胞突變。 人的癌腫瘤也是致癌物質(zhì)、 紫外線、 電離輻射、病毒等影響下所發(fā)生的體細胞突變。體細胞的突變不能直接傳給 后代,并且突變后的體細胞在生長上往往競爭不過周圍正常的體細胞,因而 受到抑制、排斥。但對于能進行營養(yǎng)繁殖的植物,只要把突變的芽或枝條采 取營養(yǎng)繁殖的方法,便可保留下來。由這種芽或枝條產(chǎn)生的植株,還可以把 突變遺傳給有性后代。許多果樹和花卉植物的著名品種,就是通過“芽變” 傳流
18、下來的。 基因突變發(fā)生在生殖細胞時, 就會通過受精而直接遺傳給后代, 導(dǎo)致后代產(chǎn)生突變型。實驗表明,突變發(fā)生的時期一般都在形成生殖細胞的 減數(shù)分裂的末期?;蛲蛔儼ㄗ匀煌蛔兒腿斯ふT變兩大類?;蛲蛔兊囊饬x基因突變的效應(yīng)是多種多樣的。 人們一般容易誤認(rèn)為突變對生命都具有危 害性,其實就其后果而言,突變在生物界存在是有積極意義的。從生物進化 史看,進化過程是突變不斷發(fā)生鎖造成的,突變?yōu)檫M化提供了最根本最原始 的材料,沒有突變就沒有現(xiàn)今五彩繽紛的生物世界。遺傳學(xué)家甚至認(rèn)為沒有 突變就沒有遺傳學(xué)。在進化過程中,DNA序列一定要歷經(jīng)改變,新序列必須 加入到生物的基因組中,才可能使生物進化發(fā)展。綜上所述
19、可知,突變是進 化的分子基礎(chǔ)。另外,突變可產(chǎn)生遺傳多態(tài)性。一些致死突變也可以用于消 滅病原體。突變還可以創(chuàng)造新類型物種,但正如人們懷疑的那樣,突變也不 能盡善盡美,它同時也是一些疾病的發(fā)病愿意。五 . DNA 重組DNAt組是指DNA分子內(nèi)或分子間發(fā)生的遺傳信息的重先共價組合過程,包括同源重組、位點專一性重組、轉(zhuǎn)座重組、異常重組和人工重組等類型。其中異 常重組之所以冠以“異常”,是目前人們小狐貍發(fā)現(xiàn)它是一種非同源 DNA序列之 間的交換外, 對這種重組過程知道極少之故; 人工重組是指在體外人為地將不同 源的DNA組合在一起,是模擬體內(nèi)重組和突變的自然過程, 是人們有目的的改造 生物體的一項技術(shù)
20、和手段。DNAt組為生物的進化和變異提供了最豐富的原材 料。六 . 基因工程的應(yīng)用(一)親子鑒定近幾年來,人類基因組研究的進展日新月異, 而分子生物學(xué)技術(shù)也不斷完善, 隨著基因組研究向各學(xué)科的不斷滲透,這些學(xué)科的進展達到了前所未有的高度。 在法醫(yī)學(xué)上,STR位點和單核苷酸(SNP位點檢測分別是第二代、第三代 DNA 分析技術(shù)的核心,是繼RFLPs(限制性片段長度多態(tài)性)VNTRs(可變數(shù)量串聯(lián) 重復(fù)序列多態(tài)性)研究而發(fā)展起來的檢測技術(shù)。作為最前沿的刑事生物技術(shù), D NA分析為法醫(yī)物證檢驗提供了科學(xué)、可靠和快捷的手段,使物證鑒定從個體排 除過渡到了可以作同一認(rèn)定的水平,DNA僉驗?zāi)苤苯诱J(rèn)定犯罪
21、、為兇殺案、強奸 殺人案、碎尸案、 強奸致孕案等重大疑難案件的偵破提供準(zhǔn)確可靠的依據(jù)。 隨著 DNA技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,DNA標(biāo)志系統(tǒng)的檢測將成為破案的重要手段和途徑。此 方法作為親子鑒定已經(jīng)是非常成熟的,也是國際上公認(rèn)的最好的一種方法。( 二)分子生物學(xué)與人類自身發(fā)展息息相關(guān)分子生物學(xué)作為現(xiàn)代科學(xué)的一種綜合科學(xué), 其意義不止提現(xiàn)在純粹的科學(xué)價 值上;更為重要的是它的發(fā)展關(guān)系到人類自身的方方面面。 分子生物學(xué)有可以細 致的劃分為大分子生物與電子生物學(xué)兩種。 上面提到的關(guān)于在刑偵方面的應(yīng)用以 及包括但不限于親自鑒定、 及嬰兒男女鑒定方面的內(nèi)容, 大體為大分子分子內(nèi)容 的實際用途。而電子生物生物學(xué)則是從比大分子更細致的小分子及原子角度來解 釋生命的基本要素和構(gòu)成, 有著更多未解的謎題
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