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1、1.2.2目的基因的導(dǎo)入、檢測與鑒定(二、目的基因的檢測與鑒定)(3月9日)答案二、課后作業(yè)1.【解析】 選?;蚬こ痰幕竟ぞ呤窍拗泼?、連接酶和載體,前兩者統(tǒng)稱為工具酶; 在實際操作中 , 載體上插入目的基因形成重組載體,然后導(dǎo)入受體細胞。符合題意的只有B項2.2+【解析】選將目的基因?qū)爰毦毎谐S玫姆椒ㄊ荂a 處理法,基因必須保持結(jié)構(gòu)的完整性才能得以表達,而抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)完整, 能夠表達而使細菌具有對氨芐青霉素的抗性,在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能存活的是導(dǎo)入了質(zhì)粒A 或?qū)肓酥亟M質(zhì)粒的細菌; 于將人的生長激素基因?qū)胭|(zhì)粒的四環(huán)素抗性基因上, 破壞了四環(huán)素抗性基因的完整性, 入了重

2、組質(zhì)粒的細菌也沒有對四環(huán)素的抗性, 在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活, 能存活的是質(zhì)粒 A,故C正確;目的基因成功表達的標(biāo)志是產(chǎn)生人的生長激素。3.【解析】 選?;虻暮塑账嵝蛄?、基因的功能、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物均可作為從基因庫中獲取目的基因的依據(jù)。4.【解析】選是一種體外迅速擴增片段的技術(shù) ;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胛锛毎畛S玫姆椒? 用同一種限制酶分別切割載體和目的基因的目的是能夠產(chǎn)生相同的黏性末端,便于兩者連接; 利用載體上標(biāo)記基因的相關(guān)特性就可檢測出目的基因已導(dǎo)入受體細胞, 但不能確定目的基因是否得以表達。5.【解析選反應(yīng)的實質(zhì)是模擬體內(nèi)復(fù)制, 因此需要穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境, 正確反應(yīng)需要模

3、板,正確;PCR反應(yīng)需要一對引物, 正確 ;PCR 反應(yīng)需要以四種脫氧核苷酸為原料,正確;PCR反應(yīng)需要聚合酶催化延伸過程,正確;PCR反應(yīng)過程中通過高溫使變性解鏈 ,不需要 解旋酶, 錯誤;PCR反應(yīng)不需要限制性核酸內(nèi)切酶, 錯誤;PCR反應(yīng)過程中需要控制的關(guān)鍵因素是溫度,因此需要溫控設(shè)備,正確。6.【解析】 選 。從圖示看 ,a中含有胸腺嘧啶, 故其基本骨架是磷酸和脫氧核糖交替連接而成;DNA 連接酶縫合目的基因和載體質(zhì)粒之間的縫隙,使兩者之間形成磷酸二酯鍵;若要獲已知序列的目的基因,可從基因文庫中尋找;若要獲得相同的黏性末端,可以用不同種的限制性核酸內(nèi)切酶處理,如識別 的限制性核酸內(nèi)切酶

4、和識別的限制性核酸內(nèi)切酶分別處理目的基因和載體質(zhì)粒就可以形成相同的黏性末端。7.【解析選題圖中過程A為構(gòu)建基因表達載體, 需要用到限制酶和連接酶,不需要 聚合酶,選項 A錯誤;CaCl 2 處理只是提高農(nóng)桿菌細胞的細胞壁的通透性, 選項 B錯誤;抗植物病毒基因整合到番茄細胞的染色體上, 不一定能表達 , 選項 C錯誤; 轉(zhuǎn)基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通過接種特定病毒, 觀察番茄是否被感染的實驗進行鑒定, 選項D正確。8.【解析】 選 。標(biāo)記基因是用于鑒別受體細胞中是否導(dǎo)入了目的基因,本題中將某目的基因和發(fā)光蛋白基因共同接入基因表達載體, 在將該載體轉(zhuǎn)入某生物受體細胞后, 若受體細胞檢測到發(fā)

5、出可見光,則說明該目的基因?qū)崿F(xiàn)成功轉(zhuǎn)入,C 項正確。9.【解析】 選。檢測受體細胞中是否有目的基因, 可以利用分子雜交技術(shù) ,正確;基因工程中不需要檢測受體細胞中是否有致病基因, 錯誤; 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了可以利用分子雜交技術(shù), 正確; 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),可以利用抗原-抗體雜交技術(shù),正確。10【解析】選圖甲中的質(zhì)粒用Bam切割后 ,獲得一個片段,其只含有2 個游離的磷酸基團,選項 A錯誤; 在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,不能使用Bam切割外源因為用 Bam切割會破壞目的基因的結(jié)構(gòu),但可以用 Pst 和Hind切割質(zhì)粒和外源選項B錯誤;用Pst和Hind切割會得到2 個片段, 再加入 連接

6、酶, 切開的質(zhì)粒由于黏性末端不同,不會自身連接,從而保證重組質(zhì)粒只能得到一種, 即含有目的基因和標(biāo)記基因neo 的重組質(zhì)粒 ,保證了重組 序列的唯一性, 選項 C正確; 由于用 Pst 切割質(zhì)粒后, 其中的氨芐青霉素抗性基因已被破壞 ,所以導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長, 選 項 D誤。11解析選B ?;蛱结樖蔷哂刑囟ㄐ蛄械膯捂溩饔檬悄軝z測是否含有目的基因,運了分子雜交技術(shù);基因探針含有目的基因的片段放射性同位素標(biāo)記。12.解析選 D ?;虮磉_的產(chǎn)物是蛋白質(zhì),因此,只有在受體細胞中檢測或提取到了相應(yīng)蛋白質(zhì)才能證明目的基因在受體細胞中完成了表達,、C項只能說明完成了目

7、的基因的導(dǎo)入B項只能說明完成了目的基因的導(dǎo)入和目的基因的轉(zhuǎn)錄過程。13解析 :選 A。A 正確,圖中表示基因工程操作的流程圖,過程為逆轉(zhuǎn)錄過程,需逆轉(zhuǎn)錄酶。B錯誤,過程為從文庫中獲取目的基因,不需要解旋酶。C錯誤,過程(導(dǎo)入目基因)使用的感受態(tài)細胞通過CaCl2 溶液處理獲得。D錯誤,過程為目的基因的檢測,可以利用 分子雜交技術(shù)進行鑒定。14.【解析】 本題主要考查了基因工程的相關(guān)知識。人體基因A 有內(nèi)含子,將獲得的基因A 導(dǎo)入大腸桿菌中,經(jīng)過轉(zhuǎn)錄得到含有內(nèi)含子的mRA因為大腸桿菌沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的序列的機制。 內(nèi)含子部對應(yīng)的 mRN序列阻斷了蛋白A的合成。若用家蠶作為表達基

8、因A的受體,選用昆蟲病毒作為載體,不選用噬菌體作載體的原是噬菌體的宿主細胞是細菌,噬菌體不能侵染家蠶。容易培養(yǎng)等。要檢測基因A是否翻譯出蛋白最準確的方法是利用蛋白A的抗體,因抗體具有特性,一種抗體只能與特定的蛋白質(zhì)結(jié)合,可根據(jù)蛋白A抗體的雜交情況來判斷是否合成了蛋白。艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗中將一種生物個體的 DNA中,并表達合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(1) 基因 A 有內(nèi)含子,在大腸桿菌中,其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應(yīng)的 序列不能被切除,無法表達出蛋白 A (2) 噬菌體 噬菌體的宿主是細菌,而不是家蠶 (3) 快,容易培養(yǎng) (4) 蛋白 A 的抗體 (5)DNA 可以從一種生物個體轉(zhuǎn)移到另一種生物個體15.【解析】本題主要考查目的基因的獲取方法、基因表達載體的構(gòu)建方法、目的基因?qū)胫参锛毎姆椒āT诨蚬こ讨? 獲取目的基因主要有兩大途徑, 既可在核苷酸序列已知的情況下人工合成,也可用限制酶對生物材料的切割,再選取。cDNA 文庫是由反轉(zhuǎn)錄獲得的 , 其中只含有葉細胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達 )的基因,而基組文庫中含有該植物的全部基因。在基因表達載體中, 啟動子是聚合酶識別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因達載體的受體細

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