實驗2蛙骨骼肌及心肌收縮-lliu

1、刺激強度、頻率與骨骼肌收縮的關系,心肌收縮記錄與心肌特性郵箱： 密碼：123456實驗二實驗目的實驗原理實驗材料實驗內容注意事項基本內容實驗目的1.坐骨神經腓腸肌標本的制備2.觀察刺激強度與肌肉收縮反應的關系。掌握閾刺激，閾下刺激，閾上刺激，最大刺激的概念。3.觀察用不同頻率的最大刺激刺激坐骨神經對腓腸肌收縮形式的影響，了解和掌握單收縮、復合收縮、強直收縮特征和形成的基本原理。4.觀察心肌收縮的特點并與骨骼肌比較。實驗原理1. 閾下刺激 閾強度 閾上刺激 最大刺激2. 單收縮 不完全強直收縮-描記曲線為鋸齒形 完全強直收縮。3.心肌-具有較長的不應期 期前收縮 代償間歇蟾蜍、蛙板、手術剪、敷料

2、鑷、刺針、絲線、玻璃分針、燒杯、鋅銅弓、任氏液、滴管、RM6240信號采集系統(tǒng)、刺激電極。實驗材料一坐骨神經腓腸肌標本制備（第21頁）破壞中樞神經系統(tǒng)：將探針自枕骨大孔(枕骨大孔定位：以脊柱正中線為縱線，兩側眼后毒腺的連線為橫線，兩線交匯的凹陷處即為枕骨大孔)插入，先左右橫斷脊髓，再向前攪毀腦，然后再將探針撤回，反向插入脊椎管破壞脊髓。檢查蟾蜍四肢全身肌肉完全松馳。 實驗內容剪斷脊柱：用粗剪刀自胸部剪斷脊柱。 剪除前肢及內臟去皮膚 一坐骨神經腓腸肌標本制備分離左右下肢：用粗剪刀沿脊柱中線把標本分為左右兩半。注意勿損傷神經。 分離坐骨神經：大腿背面股二頭肌和半膜肌的夾縫中分離出坐骨神經。 分離肌

3、肉：分離腓腸肌的跟腱，用線結緊，自跟腱的附著點剪斷。提起跟腱將腓腸肌剝離出來，并將小腿其余部分剪掉，保留一小段(約1.5cm)股骨， 一坐骨神經腓腸肌標本制備一坐骨神經腓腸肌標本制備二.刺激強度對肌肉收縮的影響 1.標本與儀器的連接股骨斷端固定于肌槽的插孔中，神經干搭在刺激電極上，腓腸肌肌腱上的線與換能器相連，換能器與RM6240相連。 點擊“實驗”菜單，選擇“刺激強度對骨骼肌收縮的影響”，儀器參數：通道模式為張力，采樣頻率400Hz-1kHz，掃描速度1s/div，靈敏度10-30g，時間常數：直流，濾波頻率100Hz。1.標本與儀器的連接2.觀察項目：刺激方式單刺激，刺激幅度0.1-3V可

4、調，刺激波寬0.1ms。記錄閾刺激和最大刺激值。測量每一刺激強度所對應的肌肉收縮張力；測量最大刺激時肌肉的收縮期和舒張期時間。三.刺激頻率對肌肉收縮的影響 1.點擊“實驗”菜單，選擇“刺激頻率對骨骼肌收縮的影響”，儀器參數：通道模式為張力，采樣頻率400Hz-1kHz，掃描速度1s/div，靈敏度10-30g，時間常數：直流，濾波頻率100Hz。2.系統(tǒng)采用頻率遞增，刺激幅度：最大刺激強度，波寬0.1ms，采用自動頻率方式，起始頻率1Hz，結束頻率30Hz，步長1Hz，串間隔大于5s。刺激頻率按1Hz，2Hz，3Hz，4Hz，5Hz30Hz逐漸增加，連續(xù)記錄不同頻率時的肌肉收縮曲線。3.觀察測

5、量各刺激頻率所對應的肌肉收縮最大張力。 四.蛙心收縮記錄及心肌特性（39頁）1.破壞蟾蜍腦和脊髓，暴露心臟，打開心包膜。 用帶有絲線的蛙心夾夾住心尖，將絲線連在張力換能器上，再將換能器固定于鐵架臺上，調整絲線高度，并將絲線拉緊。將刺激電極安放在心室外壁，使之既不影響心搏又能同心室接觸良好。2.張力換能器接RM6240系統(tǒng)第一通道（也可選擇其它通道），刺激電極與RM6240刺激輸出相連，作刺激標記。 3. 點擊“實驗”菜單，選擇“期前收縮-代償間歇”，系統(tǒng)進入實驗信號記錄狀態(tài)。儀器參數：第一通道，時間常數：直流。濾波頻率：10Hz，靈敏度3g，采樣頻率400Hz，掃描速度1s/div，單刺激模式

6、，閾上刺激強度2-5V，刺激波寬5ms。四.蛙心收縮記錄及心肌特性儀器連接在制備標本時，避免過度牽拉神經，避免用手或金屬器械觸碰神經干。避免動物皮膚分泌物（蟾酥、血液等）污染神經和肌肉；不要用水沖洗，以免影響組織機能。制備標本時，要隨時用任氏液潤濕神經和肌肉，防止干燥。分離神經時，要把周圍結締組織剝離干凈。實驗要迅速，以免時間過長影響標本活性 注意事項 注意事項肌肉與換能器的連接松緊適當。給予刺激時，在按刺激器手動開關的同時，按下記錄儀的“標記”，記錄刺激標記，用于計算肌肉收縮的潛伏期。每改變一次刺激頻率后，應休息0.5-1 min, 每次刺激不要超過3-4 秒，以免標本疲勞。實驗過程中應常用任氏液潤濕標本，以免影響神經和肌肉活性。 NaCl 6.5 g KCl 0.14 g Ca