Optimizer質(zhì)譜方法自動(dòng)優(yōu)化軟件的使用

1、MassHunterVersionB.D301:總：AgilentTechnologiesMasshunterOptimizer(B.03.01)質(zhì)譜方法自動(dòng)優(yōu)化軟件的使用-軟件介紹如何進(jìn)行自動(dòng)優(yōu)化如何導(dǎo)入優(yōu)化結(jié)果SAjilentTwhnolie$.klC.2010vwr可ifentaxnW*m3.IgileniTtchiwbgics：?；*AgilentTechnologies一、軟件介紹MassHunterOptimizer是為三重四極質(zhì)譜開(kāi)發(fā)，可以按照設(shè)定條件門(mén)動(dòng)優(yōu)化MRM模式所需參數(shù)的軟件。按照順序，其門(mén)動(dòng)優(yōu)化的參數(shù)包括：繪優(yōu)precursorion的選擇,如M+H,M-H,M+Na,

2、M+K和M+NH4;故優(yōu)fragmentor電壓的選擇，在一種極性下根據(jù)加和離子的不同和所帶電荷數(shù)的不同域多叮以對(duì)4個(gè)precursorion的fragmentor進(jìn)行優(yōu)化；故優(yōu)production的選擇；故優(yōu)collisionenergy的選擇；為獲得故大靈敏度，可選擇地進(jìn)行finefragmentor的優(yōu)化。二、如何進(jìn)行自動(dòng)優(yōu)化1.運(yùn)行MassHunterOptimizer雙擊桌而圖標(biāo)Omizer；或者在WindowsStartmenu點(diǎn)擊ProgramsAgilentMassHunterWorkstationOptimizer2.點(diǎn)擊新建NewProjectB圖標(biāo)或點(diǎn)擊打開(kāi)已有OpenP

3、roject凰圖標(biāo);3.點(diǎn)擊標(biāo)簽CompoundSetup如圖1；- - -總:AgilentTechnologies圖i4在標(biāo)簽處點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，選擇AddCompound；在空白處填入相應(yīng)信息:CompoundName：化合物名稱(chēng)；Formula：分子式；Mass：準(zhǔn)確分子量。如果在Formula欄填入分子式，Optimizer將口動(dòng)計(jì)算出分子量；如果不知道分子式，在此處填入準(zhǔn)確分子量即可，至少精確到小數(shù)點(diǎn)后一位；SamplePosition:樣品瓶位置。5.點(diǎn)擊標(biāo)簽PrecursorIonSelection，如圖2；選擇化合物可能的加合離子,系統(tǒng)默認(rèn)正模式為+H,負(fù)模式為H。Positiv

4、eions：正模武下化合物可能的加合離子。除系統(tǒng)默認(rèn)的+H,還可以添加其它離子，如圖2所示，在空白處填入K,即鉀離子，并點(diǎn)擊口，就可將鉀離子加入列表；Negativeions：正模式下化合物可能的加合離子；系統(tǒng)默認(rèn)負(fù)模式為H；Chargestate：所帶電荷數(shù)；總:AgilentTechnologiesUsemostabundantprecursorion：女I果選中此選項(xiàng)，Optimizer將使用具有域大豐度的precursorion；Excludemasses：如果需要排除某些質(zhì)荷比，請(qǐng)選中此選項(xiàng)，并在m/zValues任務(wù)欄填入相應(yīng)質(zhì)荷比，或者在Minimumabundance中填入放小

5、豐度值，該域小豐度值以下的precursorion將被排除。玄OpiimUcr回IB雖園囲編嗡他費(fèi)區(qū)四呂、.它幻1幻ISO呼.JFVadudIcSk=bn5-bupRxfcin:(Wcxbr怯刃OEwduifcna*3rsNg/veE丿也EtorbwlecuwicnmArVduel|3JMrtnunefcurdance|carts圖26.點(diǎn)擊標(biāo)簽ProductIonSelection?如圖3；Lowmasscut-off：在Mass(m/z)中填入質(zhì)荷比或者在Precursormass(m/z)中填入方分?jǐn)?shù)，小于所填入數(shù)值的質(zhì)量范圍將不被掃描；Excludemasses：如果需要排除某些質(zhì)荷比

6、，請(qǐng)選中此選項(xiàng)，并在m/zValues任務(wù)欄填入相應(yīng)質(zhì)荷比，或者在Minimumabundance中填入需要排除的最小豐度值?；蛘咴贛inimumabundance中填入披小豐度值,該最小豐度值以下的ProductIon將被排除。NeutralLosses：如果需要排除水(H20)等中性丟失，將分子式填入相應(yīng)文本框，并點(diǎn)擊匚I圖標(biāo)。:資AgilentTechnologies圖37.點(diǎn)擊標(biāo)簽OptimizerSetup,如圖4：在此標(biāo)簽內(nèi)設(shè)定進(jìn)樣類(lèi)型(Sampleintroduction)Fragmentor優(yōu)化范圍、CollisionEnergy優(yōu)化范圍、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)路徑(Pathfordataf

7、iles)、數(shù)據(jù)采集所用儀器方法(AcqMethod).離子源類(lèi)型和極性(IonSource.Polarity)oSampleintroductionInjection(withorwithoutcolumn)：使用自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)彳亍多次進(jìn)樣，要求色譜峰寬大于10秒，推薦使用；AutomaticinfusionusingLoopinjection：定量環(huán)進(jìn)樣，需要連續(xù)進(jìn)樣30秒以上;丁Manualinfusionusingsyringe：使用蠕動(dòng)泵連續(xù)進(jìn)樣30秒以上，直接進(jìn)入質(zhì)譜，每次只能優(yōu)化一種化合物。Fragmentor丁Coarserange：在設(shè)定起止范圍內(nèi)對(duì)Fragmentor進(jìn)行粗略

8、優(yōu)化：丁Fine：以指定步長(zhǎng)在Coarse基礎(chǔ)上對(duì)Fragmentor進(jìn)行細(xì)致優(yōu)化；Fixed：以固定Fragmentor進(jìn)行優(yōu)化。CollisionEnergy:在CErange填入起止范圍；- #- -?AgilentTechnologies3.”*1”圖4AcqMethod：選擇數(shù)據(jù)采集所用儀器方法。在AcqMethod標(biāo)簽點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，選擇Addmethod,在彈出對(duì)話(huà)框中選中方法并Open,如圖5。該方法應(yīng)該在MassHunterAcquisition中設(shè)定并保存，Optimizer僅調(diào)用該方法中LC參數(shù)和質(zhì)譜離子源參數(shù)，不涉及該方法中質(zhì)譜采集方式。- #- #- -AgilentT

9、echnologiesLJOr心匸5.gvWM.皿“乙isVO彳cE)aawoxucQtG43*kM_M.S口2*；XLUm/M4f,Qfn4H_ar.4WecsaCEMWkMOwtmnrvSteieS/Wo庖tl急i圖5- #- #- #- #- - #-vilonBreakdownProfile開(kāi)始進(jìn)StartOptimization：開(kāi)始門(mén)動(dòng)優(yōu)化，優(yōu)化結(jié)果門(mén)動(dòng)存入database,8.點(diǎn)擊圖標(biāo)iMfStartOptimization或行門(mén)動(dòng)優(yōu)化。點(diǎn)擊任一圖標(biāo)Z前，確認(rèn)MasshunterAcquisition軟件已調(diào)用OptimizerSetup中選擇的AcqMethod,且液相和質(zhì)譜已

10、顯示ready（全部顯示為綠色）。如果需要停止門(mén)動(dòng)優(yōu)化，點(diǎn)擊空町以宜接導(dǎo)入MasshunterAcquisition；（lllonBreakdownProfile：在保存優(yōu)化結(jié)果Z前手動(dòng)選擇ProductIon的CollisionEnergy,然后點(diǎn)擊Save&Exit；如果放棄手動(dòng)修改結(jié)果，點(diǎn)擊LoadOptimizerDefaults,恢復(fù)自動(dòng)優(yōu)化結(jié)果,并點(diǎn)擊Save&Exit,如圖6o：?；*AgilentTechnologies圖69.門(mén)動(dòng)優(yōu)化完成后，優(yōu)化數(shù)據(jù)和記錄結(jié)果的Excel文件會(huì)門(mén)動(dòng)保存在Pathfordatafiles設(shè)定目錄下，如圖4,Excel文件在Reports子目錄下

11、。三、如何導(dǎo)入優(yōu)化結(jié)果1.在MasshunterAcquisition軟件中點(diǎn)擊方法編輯界而中的MSQQQ標(biāo)簽;然后點(diǎn)擊右側(cè)的Acquisition標(biāo)簽；再將左側(cè)Timesegments中的ScanType設(shè)置為MRM；在Acquisition標(biāo)簽中點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，選擇ImportfromOptimizer,如圖7；- - - #-AgilentTechnologies圖72.在彈岀的DatabaseBrowser界而，選中需要導(dǎo)入的化合物，然后點(diǎn)擊Import,女LI圖8：DatabaseBrowser界而將門(mén)動(dòng)關(guān)閉并返回到MasshunterAcquisition,如圖9。圖8嗔和AgilentTechnologies|EMM|oalS-SL|Cc*.E5BKMR夠鷲FNS2舷PMOIFecrrwCOBMnErwCcnccMdl3CDM|20D|Ur