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1、實驗十一水中細菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)的檢測1一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)并掌握水體細菌學(xué)的檢驗2、學(xué)習(xí)測定水中大腸菌群數(shù)量的多管發(fā)酵法2二、實驗原理1、細菌總數(shù)的測定:采用稀釋平板法(混合平板法)32、大腸菌群數(shù)的測定:采用多管發(fā)酵法(MPN法) 大腸菌群以大腸桿菌為主,能在3748h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣。大腸菌群數(shù)可作為判斷水源或食品污染的指標(biāo)。最大概率數(shù)法:對未知樣品進行十倍稀釋,然后根據(jù)估算取三個連續(xù)的稀釋度平行接種多支試管,對這些平行試管的微生物生長情況進行統(tǒng)計,長菌的為陽性,未長菌的為陰性,然后根據(jù)數(shù)學(xué)統(tǒng)計計算出樣品中的微生物數(shù)目。4三、實驗材料1、水樣2、培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、3倍濃縮乳
2、糖蛋白胨培養(yǎng) 基(帶指形管)、伊紅美蘭固體培養(yǎng)基5四、實驗方法(一)水中細菌總數(shù)的測定(混合平板法)1、樣品采集和稀釋 自來水、純凈水、飲料作原樣、 10-1 、10-2三個稀釋度 污水作10-1 、10-2 、10-3三個稀釋度2、取3個稀釋度樣品各1ml于平皿中,再倒入50左右牛肉 膏蛋白胨培養(yǎng)基約15ml,輕輕轉(zhuǎn)動混合均勻。凝固后37 倒置培養(yǎng)。每個稀釋度作3個重復(fù)。 細菌總數(shù)同一稀釋度平板上菌落平均數(shù)稀釋倍數(shù) (最好在30300個之間)6(二)水中大腸菌群數(shù)的測定1、初發(fā)酵實驗 在3倍濃縮乳糖培養(yǎng)基中加入3個梯度樣品各10ml(5個重復(fù)),混勻37 培養(yǎng)24h。2、平板分離不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣和不變渾濁 陰性產(chǎn)酸產(chǎn)氣或僅產(chǎn)酸 陽性 菌落為深紫黑色,具 金屬光澤或紫黑色不 帶金屬光澤或淡紫紅 色中心較深3、結(jié)果計算 根據(jù)陽性管數(shù)查表得大腸菌群數(shù)。劃線接種于伊紅美蘭平板,37 培養(yǎng)24h7五、思考題1、記錄每組
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