衰老動(dòng)物模型的建立及評(píng)價(jià)

1、衰老動(dòng)物模型的建立及評(píng)估1衰老學(xué)說(shuō)與衰老動(dòng)物模型的造模機(jī)制自由基氧化應(yīng)激學(xué)說(shuō)該學(xué)說(shuō)于上世紀(jì)50年代由Harman首次提出。該學(xué)說(shuō)提出，在人體代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生不穩(wěn)定的自由基，當(dāng)機(jī)體年齡增加時(shí)，自由基產(chǎn)生增多，清除能力下降，造成自由基在機(jī)體過(guò)量堆積。過(guò)量的自由基對(duì)細(xì)胞和結(jié)締組織產(chǎn)生有害攻擊，導(dǎo)致細(xì)胞損傷、組織器官功能紊亂，從而引起衰老1。線粒體DNA損傷學(xué)說(shuō)Miquel于1980年提出該學(xué)說(shuō)，認(rèn)為 DNA損傷是細(xì)胞衰老與 損傷的 基礎(chǔ)2。DNA由于本身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，易被自由基等多種有 害物質(zhì)的襲擊，致 使其產(chǎn)生突變，從而引起衰老和相關(guān)的機(jī)體功 能減退。內(nèi)分泌功能減退學(xué)說(shuō) 神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)在維持機(jī)體正常功

2、能中有著重要的作用。該學(xué)說(shuō)認(rèn)為，隨著機(jī)體年齡增長(zhǎng)，內(nèi)分泌系統(tǒng)地分泌、調(diào)節(jié)功能出 現(xiàn)紊亂，機(jī) 體靶器官對(duì)于內(nèi)分泌物質(zhì)的反應(yīng)性發(fā)生改變， 從而產(chǎn)生生理機(jī)能的紊亂3免疫功能退化學(xué)說(shuō)正常機(jī)體的免疫功能，能夠識(shí)別異體抗原，而對(duì)自身的細(xì)胞、組織和器官不產(chǎn)生反應(yīng)。當(dāng)機(jī)體的年齡逐漸增加，機(jī)體免疫功能逐漸下降， 無(wú)法有效的清楚外源性抗原或內(nèi)源性異?？乖缤蛔兊哪[瘤細(xì)胞。糖基化衰老學(xué)說(shuō)該學(xué)說(shuō)認(rèn)為， 糖基化造成的蛋白質(zhì)交聯(lián)損傷能夠造成結(jié)構(gòu)蛋 白的硬 化和多種功能酶的功能下降，引起機(jī)體代謝水平降低、DNA損傷加劇、內(nèi) 環(huán)境穩(wěn)態(tài)破壞等老化過(guò)程， 是衰老發(fā)生中的重要原 因。2自發(fā)性衰老動(dòng)物模型自然衰老動(dòng)物模型自然衰老動(dòng)物

3、模型在生理變化上與人類的自然衰老過(guò)程最為相近。目前該模型以哺乳動(dòng)物為主，最常使用的是大鼠與小鼠，因其價(jià)格低廉、 壽命短且飼養(yǎng)成本低。常用的衰老模型動(dòng)物年齡 為：大鼠衰老早期21-26月齡，衰老晚期30-32月齡；小鼠12-24月齡3。該模型在應(yīng)用中面臨的 主要問(wèn)題是飼養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)和價(jià)格 昂貴，且難以保證動(dòng)物批次相同，影響實(shí)驗(yàn) 可靠性?？焖倮匣∈?sensecence accelerated mouse , SAM )模型該小鼠衰老模型由日本東京大學(xué)研究人員經(jīng)過(guò)20多年培育成功的近交系小鼠群，該種小鼠壽命較短，約為 1年左右。該模 型目前有12個(gè)亞 系，每個(gè)亞系有特定的病理表現(xiàn)型，其中許多與人類衰

4、老具有相似的病理特征。如隨著年齡的增長(zhǎng)，快速衰老 小鼠P系1代(SAMP1特征表現(xiàn)為免疫功能低下，SAMP2A肺部病理改變?yōu)橹?，SAMP特征病理改變?yōu)樽冃怨顷P(guān)節(jié)疾病，SAMP6表現(xiàn)為骨質(zhì)疏松和主動(dòng)脈形態(tài)結(jié)構(gòu)異常，SAMP8在衰老過(guò)程中伴有學(xué)習(xí)記憶能力下降，是研究老年性癡呆等疾病的理想模型，SAMP特征表現(xiàn)為白內(nèi)障，SAMP10在衰老的同時(shí)伴有腦萎縮相關(guān) 的學(xué)習(xí)記憶和情感障礙，SAMP1的老化過(guò)程更為迅速，伴有 B -淀粉樣蛋白沉積和腎萎縮。小型魚(yú)類衰老模型 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究人員通過(guò)研究一些小型魚(yú) 類的老年學(xué)特征，構(gòu)建了小型魚(yú)類衰老模型。目前已經(jīng)建立的品種包括孔雀魚(yú)、斑馬魚(yú)和？魚(yú)。該模型最大的

5、缺點(diǎn)在于魚(yú)類與人類的身體構(gòu)造和遺傳學(xué)有一定差距，無(wú)法很好地模擬人類衰老相關(guān)疾病，也因此 主要用于探索衰老機(jī)制。果蠅衰老模型果蠅由于飼養(yǎng)成本低、繁殖快， 現(xiàn)在作為衰老模型被廣泛用 于衰老遺傳學(xué)和衰老機(jī)制的研究。其他自發(fā)性衰老模型 除了上述動(dòng)物，犬類、靈長(zhǎng)類、線蟲(chóng)等多種動(dòng)物也被用于制造自發(fā)性衰老模型。其中靈長(zhǎng)類動(dòng)物由于在遺傳學(xué)上與人類最為相近，用其建造的模型最能全面反映人類衰老的機(jī)制和病理變化。但其應(yīng)用也因成本過(guò)高、倫理問(wèn)題等受到限制。3誘發(fā)性衰老動(dòng)物模型D-半乳糖誘發(fā)亞急性衰老模型在一定時(shí)間內(nèi)，連續(xù)給動(dòng)物注射大劑量的D-半乳糖，使動(dòng) 物體內(nèi)的D-半乳糖濃度增高。但目前對(duì)于造模使用的D-半乳糖劑量

6、、注射時(shí)間及衰老發(fā)生的判斷尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，一定程度上影 響了其應(yīng)臭氧損傷衰老模型臭氧是一種強(qiáng)氧化劑，進(jìn)入體內(nèi)后產(chǎn)生自由基，使細(xì)胞膜上 的不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化作用，通過(guò)自由基損傷機(jī)制誘發(fā) 衰老。臭氧致衰老的動(dòng)物在行為學(xué)、形態(tài)學(xué)以及DNA損傷表現(xiàn)方 面與自然衰老模型動(dòng)物相似。丫射線輻射誘發(fā)衰老模型該模型使用大鼠，輻射的吸收劑量為3Gy較為合適，輻射面 積為25X 25cm2輻射源距動(dòng)物高度為 80cm,每次輻照時(shí)間為4分鐘53秒，連續(xù)輻 照5天能夠快速有效地建立衰老動(dòng)物模型。但由于需要放射性射線，對(duì)設(shè)備及環(huán)境要求高。B -淀粉樣蛋白誘發(fā)衰老模型B -淀粉樣蛋白是老年性癡呆患者大腦中出現(xiàn)的特征性

7、蛋白，并且與AD的病理形成過(guò)程模切相關(guān)。 B -淀粉樣蛋白注射動(dòng) 物，能夠 引起在動(dòng)物腦部的聚集與沉淀， 引起小膠質(zhì)細(xì)胞的炎性反應(yīng)，并產(chǎn)生神經(jīng) 毒性作用。氯化鋁誘發(fā)急性衰老模型鋁是公認(rèn)的損傷大腦、能引起老年性癡呆的重要因素之一。將氯化鋁注射入大腦后，能夠使神經(jīng)元纖維形成異常的T形結(jié)構(gòu)，相互糾纏；并促進(jìn)腦細(xì)胞產(chǎn)生淀粉樣前體蛋白而形成老年斑。因此，該模型是目前公認(rèn)的老年性癡呆的病理模型。4轉(zhuǎn)基因衰老動(dòng)物模型隨著人類基因工程技術(shù)的不斷進(jìn)步，對(duì)基因在衰老與疾病中 作用的了解不斷深入， 轉(zhuǎn)基因技術(shù)也被用到了衰老動(dòng)物模型制造中。APP專基因小鼠因攜帶了不同編碼淀粉前體蛋白的突變基因，并在小鼠大腦中表達(dá)，可用于研究老年性癡呆和淀粉樣蛋白沉積 的病理變化。CRH基因敲除小鼠 的前皮質(zhì)留酮基因序列被全部刪 除，在飲食限制下，血漿皮質(zhì)備酮的水平 無(wú)法增加，可用于研究 衰老過(guò)程中糖皮質(zhì)激素的作用。隨著越來(lái)越多的基因被發(fā)現(xiàn)在衰老或衰老相關(guān)疾病中產(chǎn)生重要作用，多種?；騽?dòng)物均可作為衰老動(dòng)物模型。綜上所述， 衰老動(dòng)物模型種類雖然眾多，但各自有自己的特 點(diǎn)和不足，并且尚沒(méi)有一種衰老動(dòng)物模型