選修知識(shí)點(diǎn)及習(xí)題匯總

1、1、基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。變異類型基因重組2、基因工程的基本工具限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體（常見的是質(zhì)粒 條件？）3、限制酶的功能：能夠識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。切割時(shí)不能破壞目的基因、標(biāo)記基因。4、酶DNA連接酶：連接兩個(gè)雙鏈DNA片段形成磷酸二酯鍵 ；限制酶：催化磷酸二酯鍵水解，形成DNA片段；DNA聚合酶：?jiǎn)蝹€(gè)脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵，解旋酶：斷開氫鍵RNA聚合酶：?jiǎn)蝹€(gè)核糖核苷酸之間形成磷酸二酯鍵DNA酶：催化磷酸二酯鍵水解，形成脫氧核苷酸5、基因工程的基本操作程序是：目的基

2、因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定7、獲取目的基因的方法有：從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，人工合成，逆轉(zhuǎn)錄法9、基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建（限制酶+DNA連接酶處理質(zhì)粒和目的基因）?；虮磉_(dá)載體的組成是：?jiǎn)?dòng)子目的基因終止子標(biāo)記基因+復(fù)制原點(diǎn)。啟動(dòng)子:位于DNA上，其上有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄起始密碼：位于mRNA上，開始翻譯標(biāo)記基因的作用：鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因（培養(yǎng)基中加入抗生素進(jìn)行篩選）。目的基因與標(biāo)記基因一般不是同一種基因。11、（1）將目

3、的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是（雙子葉）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體），其次還有（單子葉）基因槍法和 花粉管通道法等。受體細(xì)胞若是體細(xì)胞，還要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。2）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是 顯微注射技術(shù)。受體細(xì)胞一般是 受精卵（具有全能性），若為體細(xì)胞，則需采用細(xì)胞核移植技術(shù)。（3）將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：鈣離子處理，使細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞。12、目的基因的檢測(cè)與鑒定：首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。其次還要檢測(cè) 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用分子雜交技術(shù)。（都用基因探針：用

4、放射性同位素標(biāo)記的目的基因的單鏈，原理都是堿基互補(bǔ)配對(duì)）最后檢測(cè) 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是抗原抗體雜交。都是觀察有沒有雜交帶。有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，即接種實(shí)驗(yàn)（即用病原體感染或讓蟲子吃）?；蚬こ痰膬?yōu)點(diǎn)：定向改造生物的遺傳性狀14、蛋白質(zhì)工程通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?；蚬こ淘谠瓌t上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)的蛋白質(zhì)是自然界不存在的。程序：15、植物組織培養(yǎng)技術(shù)原理：植物細(xì)胞的全能性；植物體細(xì)胞雜交技術(shù)原理是：細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性，意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和的障礙。植物

5、細(xì)胞全能性實(shí)現(xiàn)的條件：離體、一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、植物激素（生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素）、適宜的外界條件。脫分化16、植物組織培養(yǎng)技術(shù)(無(wú)菌操作)再分化過程：離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織胚狀體、叢芽等植物體。20、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中原代培養(yǎng)）出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)到50代左右絕大多數(shù)細(xì)胞死亡，少數(shù)成為無(wú)限增殖的細(xì)胞（癌變特征）。原理：細(xì)胞增殖21、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添

6、加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。溫度：適宜溫度：哺乳動(dòng)物多是36.50.5；pH：7.27.4。氣體環(huán)境：95%空氣5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。22、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)中選用去核卵(母)細(xì)胞做受體細(xì)胞的原因：含有使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)原理：細(xì)胞核的全能性。25、動(dòng)物細(xì)胞融合最大的應(yīng)用制備單克隆抗體。單克隆抗體的制備中必須事先對(duì)小鼠注射特定抗原，使其產(chǎn)生漿細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞），然后與骨髓

7、瘤細(xì)胞融合，得到3種融合的細(xì)胞；因此需要經(jīng)過兩次篩選，第一次用選擇性培養(yǎng)基，選出雜交瘤細(xì)胞，第二次需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，選出能分泌所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。26、（1）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。（2）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。27、精卵結(jié)合首先發(fā)生的是頂體反應(yīng)防止多精入卵的的兩道屏障：透明帶反應(yīng)，卵黃膜封閉作用判斷受精的依據(jù)：透明帶和卵黃膜間隙有兩個(gè)極體28、動(dòng)物早期胚胎發(fā)育的基本過程是：受精卵桑椹胚囊胚原腸胚（1）卵裂期的特點(diǎn)是：細(xì)胞有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，或略有減??；（2）桑椹胚前細(xì)胞具有全能性；（3）

8、囊胚的特點(diǎn)是：開始出現(xiàn)分化（內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞仍有全能性），聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，外圍的細(xì)胞為滋養(yǎng)層細(xì)胞，中間的空腔稱為囊胚腔；29、胚胎干細(xì)胞來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)，主要特性是：在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。30、試管動(dòng)物的培養(yǎng)過程：體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植。（1）體外受精過程是：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng) 精子的采集和獲能 受精。（2）采集的卵母細(xì)胞必需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，采集的精子必需進(jìn)行獲能處理。獲得更多卵母細(xì)胞的方法：超數(shù)排卵處理,（注射促性腺

9、激素）31、胚胎移植時(shí)要移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，其中胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”。胚胎移植的意義：充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖能力。32、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入提供相同的生理環(huán)境。早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎收集提供了可能。受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。這為胚胎的存活提供了可能。供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。33、胚胎移植的基本程序主要包括：對(duì)供、受體的選擇和處理。【選擇：供體要求遺傳性能和生產(chǎn)性

10、能優(yōu)秀的個(gè)體，受體要求有健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力；處理：首先用激素對(duì)供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理。然后用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）】。配種或人工授精（屬于體內(nèi)受精）。對(duì)胚胎的收集（沖卵早期胚胎）、檢查、培養(yǎng)或保存。胚胎移植。移植后檢查受體是否妊娠。產(chǎn)下胚胎移植的新個(gè)體。胚胎移植時(shí)間：囊胚或桑椹胚如何對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定？取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析34、胚胎分割一般選擇發(fā)育良好，形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。 對(duì)囊胚階段的胚胎分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。意義：提高胚胎的利用率。屬于無(wú)性繁殖。35、利用的技術(shù)：（1）轉(zhuǎn)基因植物：基因工程、植物組織培養(yǎng)。

11、（2）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植。（3）克隆動(dòng)物：細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。（4）轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物：基因工程、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。（5）試管動(dòng)物：體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植。（6）制備單克隆抗體：動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。36、生物工程獲得的生物遺傳物質(zhì)的來(lái)源及生殖方式：轉(zhuǎn)基因生物2個(gè)親本；克隆動(dòng)物：2個(gè)親本，無(wú)性生殖；試管苗1個(gè)親本，無(wú)性生殖；體細(xì)胞雜交2個(gè)親本，無(wú)性生殖；試管動(dòng)物：2個(gè)親本，有性生殖；胚胎移植（狹義）2個(gè)親本，有性生殖；胚胎分割1個(gè)親本，無(wú)性生殖36、你對(duì)轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度？支持理由不支持理由23.

12、現(xiàn)代生物技術(shù)并不是各自獨(dú)立的，而是相互聯(lián)系、相互滲透的，下圖表示利用乳腺反應(yīng)器生產(chǎn)某種動(dòng)物蛋白的流程示意圖，請(qǐng)分析回答：（1）該生產(chǎn)流程中應(yīng)用到的現(xiàn)代生物技術(shù)有（至少兩種）（2）蛋白質(zhì)工程中，要對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，必須通過基因修飾或基因合成來(lái)完成，而不直接改造蛋白質(zhì)的原因是。（3）進(jìn)行過程的目的是。（4）若要完成體外受精，則、過程分別代表和。（5）為獲得較多的遺傳同質(zhì)早期胚胎，可采用的方法是進(jìn)行。（6）過程技術(shù)的優(yōu)是。5、預(yù)期的蛋白質(zhì)功能預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)應(yīng)有的氨基酸序列目的基因載體基因表達(dá)載體受精卵早期胚胎受體轉(zhuǎn)基因山羊藥用蛋白質(zhì)雌性動(dòng)物雄性動(dòng)物卵母細(xì)胞精子體外受精20XX年2月6日，美

13、國(guó)首次批準(zhǔn)了一種從轉(zhuǎn)基因山羊的乳汁中提取的抗血栓藥物上市。 具體過程如下：請(qǐng)回答：（1）基因工程是蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)。從本質(zhì)上看蛋白質(zhì)工程是通過改造，進(jìn)而達(dá)到改造蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的目的。（2）為了使乳汁中含有抗血栓藥物，用_技術(shù)將藥用蛋白基因表達(dá)載體導(dǎo)入山羊的受精卵中。轉(zhuǎn)基因山羊的每個(gè)體細(xì)胞中都含有藥用蛋白基因，但只有在山羊的乳腺細(xì)胞才會(huì)表達(dá)，這與藥用蛋白基因表達(dá)載體的_結(jié)構(gòu)有關(guān)。成功后，在胚胎發(fā)育的初期，通過_技術(shù)分析DNA進(jìn)行性別鑒定，選取能夠發(fā)育成母羊的胚胎繼續(xù)培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因山羊。（3）操作中使用激素對(duì)供體動(dòng)物和受體動(dòng)物進(jìn)行同期發(fā)情處理的意義是，從而確保供體的胚胎與受體子宮建立正常的聯(lián)系。（4）獲

14、得轉(zhuǎn)基因山羊也可采用克隆，對(duì)卵母細(xì)胞的去核處理一般選擇在時(shí)期進(jìn)行。（5）胚胎工程的最后一道工序是胚胎移植，其實(shí)質(zhì)是5、（1）基因結(jié)構(gòu) （2）顯微注射 啟動(dòng)子 DNA分子雜交 (3)使供體和受體生理狀態(tài)相同 生理和組織 （4）減數(shù)第二次分裂中期（5）早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。2（8分）生物現(xiàn)代生物科技題被認(rèn)為是生命基石的胚胎干細(xì)胞可以復(fù)制成人體內(nèi)200多種細(xì)胞中的任意一種，因而它可以被用來(lái)取代出現(xiàn)缺陷的組織。20XX年11 月20日美國(guó)和日本的研究人員分別發(fā)表論文，宣布已成功地把人體皮膚細(xì)胞改造成類似胚胎干細(xì)胞的“萬(wàn)能細(xì)胞”。下圖是“萬(wàn)能細(xì)胞”的誕生過程，圖中OCT4、SOX2

15、、NANOG和LIN28是在胚胎干細(xì)胞中能高度表達(dá)并決定其“全能性”的四個(gè)基因，將改造后的萬(wàn)能細(xì)胞植入小鼠身體上，植入的細(xì)胞長(zhǎng)成了“腫瘤”，“腫瘤”中出現(xiàn)了神經(jīng)、骨骼、肌肉等多種類型的細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：嬰兒陰莖包皮的皮膚細(xì)胞從胚胎干細(xì)胞中獲取OCT4、SOX2、NANOG和LIN28基因逆轉(zhuǎn)錄病毒攜帶“目的基因”的逆轉(zhuǎn)錄病毒萬(wàn)能細(xì)胞（1）胚胎干細(xì)胞又稱ES細(xì)胞，是由_中分離出來(lái)的一類細(xì)胞，如果胚胎發(fā)育到了囊胚期，這時(shí)的_細(xì)胞就是ES細(xì)胞。（2）圖中過程常用的方法有_。過程是構(gòu)建的過程。（3）圖中逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是作為基因工程中的_，過程利用了逆轉(zhuǎn)錄病毒的_特性。（4）萬(wàn)能干細(xì)胞經(jīng)體外誘

16、導(dǎo)分化，可以培育出人造組織器官，這樣培育的特殊細(xì)胞或器官移回病人體內(nèi)與異體器官移植相比，最大的優(yōu)點(diǎn)是_。（5）植入小鼠體內(nèi)的“萬(wàn)能細(xì)胞”長(zhǎng)成了“腫瘤”，“腫瘤”中出現(xiàn)了神經(jīng)、骨骼、肌肉等多種類型的細(xì)胞是 的結(jié)果。2（8分，每空1分）（1）早期胚胎（或原始性腺） 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) （2）直接分離法 基因表達(dá)載體（重組DNA）（3）載體 感染（宿主細(xì)胞） （4）不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng) （5）細(xì)胞分化31（8分）生物選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題 請(qǐng)仔細(xì)閱讀下列材料后回答有關(guān)問題：材料一、科學(xué)家經(jīng)過數(shù)年的研究，從成年小鼠內(nèi)耳感受器上成功的分離出能夠分化毛細(xì)胞、支持細(xì)胞和神經(jīng)元的多潛能干細(xì)胞；此外成功的定向誘導(dǎo)干

17、細(xì)胞分化為內(nèi)耳毛細(xì)胞，這兩項(xiàng)研究干細(xì)胞治療感音神經(jīng)性耳聾開辟了一條新的途徑。材料二、德國(guó)科學(xué)家利用對(duì)老鼠胚胎干細(xì)胞進(jìn)行特定基因操作再植入老鼠體內(nèi)的方法，使患糖尿病老鼠的健康狀況取得明顯好轉(zhuǎn)。科學(xué)家希望這一成果將有助于治療人類的糖尿病?？茖W(xué)家在動(dòng)物試驗(yàn)中首先對(duì)老鼠胚胎干細(xì)胞中一種名為“”的“開關(guān)基因”進(jìn)行特定處理，使之可以持續(xù)穩(wěn)定地發(fā)揮“開關(guān)”作用，承擔(dān)起調(diào)節(jié)胰島素分泌的任務(wù)。隨后，科學(xué)家們?cè)賹⑦@一處理后的胚胎干細(xì)胞植入糖尿病鼠體內(nèi)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其病情有明顯好轉(zhuǎn)。（1）胚胎干細(xì)胞可以從（填早期或晚期）胚胎（如囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）分離培養(yǎng)，也可以從中分離培養(yǎng)。（2）胚胎干細(xì)胞和植物組織培養(yǎng)一樣，要利用培

18、養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基的成分中等是植物細(xì)胞培養(yǎng)基所沒有的。（3）胚胎干細(xì)胞之所以能分化成內(nèi)耳毛細(xì)胞，是因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞生長(zhǎng)旺盛，分裂、分化能力（填強(qiáng)或弱）。（4）德國(guó)科學(xué)家利用對(duì)老鼠胚胎干細(xì)胞進(jìn)行特定基因操作再植入老鼠體內(nèi)的工程技術(shù)是_。（5）胚胎干細(xì)胞治療糖尿病的機(jī)理是：能夠在體內(nèi)分化再生成，恢復(fù)其數(shù)量，能夠按照機(jī)體需求分泌，從而達(dá)到降解的目的，使體內(nèi)的血糖達(dá)到平衡。31生物選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題每空1分，共8分。（1）早期 原始性腺（2）動(dòng)物血清（血漿）（3）強(qiáng) （4）轉(zhuǎn)基因工程（5）胰島B細(xì)胞 胰島素 血糖35（8分）【生物現(xiàn)代生物科技專題】圖示為獲得轉(zhuǎn)基因鼠和單克隆抗體

19、的制備過程，據(jù)圖回答。（1）過程【】的方法是_。在分子水平上檢測(cè)該過程是否成功的程序是。 （2）過程表示受精卵經(jīng)過體外培養(yǎng)，形成早期胚胎，再移植到受體母鼠體內(nèi)。培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液添加一定量的，以防止雜菌污染；在含有5CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的主要作用是。（3）過程可以形成種融合細(xì)胞，為了獲得所需要的抗體，我們還需要的操作。（4）若操作過程中有一種限制酶識(shí)別和作用的片段是GGATCC（箭頭處表示酶切位點(diǎn)）請(qǐng)畫出被切割形成的黏性末端示意圖。35. （8分）【生物現(xiàn)代生物技術(shù)專題】（1）目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 顯微注射法 帶有放射性同位素等標(biāo)記的含有目的基因的DNA片段與提取的DNA或RNA混

20、合，如果出現(xiàn)雜交帶則說(shuō)明導(dǎo)入成功（2）抗生素 維持培養(yǎng)液的pH（3）3 篩選(4）G GATCCCCTAG G35.（8分）【生物現(xiàn)代生物科技】據(jù)報(bào)道，科學(xué)家把帶有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因片段，整合到羊的乳腺上皮細(xì)胞DNA中，再將帶有轉(zhuǎn)基因的乳腺上皮細(xì)胞移植到去核卵細(xì)胞中，培育出了一只克隆羊，其乳汁中可以提煉出含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的物質(zhì)。請(qǐng)據(jù)此回答下列問題： （1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因片段應(yīng)插入到和之間。（2）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入乳腺上皮細(xì)胞常用的方法是。（3）若要檢測(cè)乳腺上皮細(xì)胞染色體上是否含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的基因，可采用技術(shù)。（4）已知Bam H 與B

21、gl 的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如下圖所示，用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)一段含有數(shù)個(gè)Bam H 和Bgl 識(shí)別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，若干循環(huán)后 和序列明顯增多，該過程中DNA連接酶能催化鍵的形成。（5）為了更多地生產(chǎn)出含有人肝細(xì)胞再生增強(qiáng)因子的物質(zhì)，可采用胚胎分割技術(shù)。進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的胚或囊胚。在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將均等分割。只有第（4）問較難，但只要寫出切開后的末端，再重新組合就可以了，但是為什么后兩種序列明顯增多，是因?yàn)楹蠓N序列不能被限制酶識(shí)別并切割。35.（8分）【生物現(xiàn)代生物科技專題】下圖表示利用生物技術(shù)繁殖高產(chǎn)奶牛的過程，請(qǐng)分析并

22、回答問題。（1）A、B高產(chǎn)奶牛繁殖過程的本質(zhì)區(qū)別是。（2）過程技術(shù)為，過程涉及的技術(shù)有、。（3）過程常用激素處理。過程的培養(yǎng)液中，除無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、氨基酸、激素、維生素、核苷酸外，還需添加等物質(zhì)。（4）為快速繁殖大量相同的高產(chǎn)奶牛B，過程應(yīng)采用技術(shù)，此操作應(yīng)在胚胎發(fā)育至?xí)r期進(jìn)行。35、（8分）日本的下修村、美國(guó)的沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得了20XX年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。GFP會(huì)發(fā)出綠色熒光，該蛋白質(zhì)在生物工程中有廣闊的應(yīng)用前景。請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問題：（1）過程適用于獲取分子量大而又不知其序列的基因的方法是。（2）重組質(zhì)粒上除了有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)

23、序列外，還應(yīng)有。（3）甲兔一般選用個(gè)體發(fā)育過程中時(shí)期的健康兔，原因是該時(shí)期兔的細(xì)胞。（4）在核移植過程中，供體細(xì)胞一般選用培養(yǎng)到代以內(nèi)的轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞。（5）在過程培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，必須模擬細(xì)胞在體內(nèi)生存的良好環(huán)境和物質(zhì)代謝過程，為其提供必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、適宜的酸堿度、滲透壓、溫度、二氧化碳以及嚴(yán)格條件。（6）圖示各種現(xiàn)代生物科技中，能有效發(fā)揮優(yōu)良母畜繁殖潛能的技術(shù)是。（7）圖示各項(xiàng)技術(shù)中，使克隆兔能發(fā)熒光的最關(guān)鍵技術(shù)是。35、（1）反轉(zhuǎn)錄法 （2）目的基因和標(biāo)記基因 （3）幼齡或胚胎 分裂能力強(qiáng)、分化程度低 （4）10 （5）無(wú)菌、無(wú)毒（缺一不可） （6）胚胎移植 （7）轉(zhuǎn)基因技術(shù)35（8分）【生

24、物-現(xiàn)代生物科技專題】下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答：過程和必需用到的酶是。重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體。為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞，可通過對(duì)母豬注射的方法，做超數(shù)排卵處理，并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到_期即可通過顯微操作將其細(xì)胞核去除。早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及等物質(zhì)。如果想同時(shí)得到多頭綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬，可通過胚胎分割技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)。但應(yīng)選擇的早期胚胎進(jìn)行操作，且要注意，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。與一般的

25、繁育良種動(dòng)物方式相比較，胎移植的優(yōu)勢(shì)是。35、限制酶和DNA連接酶（缺一不可）啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因（缺一不可）促性腺激素 減數(shù)第二次分裂中期血清發(fā)育良好形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚 將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力33(7分)科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstI、SmaI、Hind、AluI等四種限制酶切割位點(diǎn)。下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，其中是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟，I、表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：(1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或多種限制酶進(jìn)行切割。

26、為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶 ，分別對(duì) 進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為 種。(2)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)人含魚的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體I中含有 ，作為標(biāo)記基因。(3)研究人員通常采用 法將魚抗凍蛋白基因?qū)朔鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用 技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(4)利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)人含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細(xì)胞培育成植株。圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的 。33PstI、SmaI 含魚的抗凍蛋白基因的DNA、質(zhì)粒 4、2 (2

27、)抗氨芐青霉素基因(ampr) (3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍法等，答案合理即給分) 抗原-抗體雜交 (4)脫分化、再分化9、【生物現(xiàn)代生物科技專題】克隆羊“多利”的問世引起了許多人對(duì)“治療性克隆”的興趣。下圖所示為人類“治療性克隆”的大概過程，請(qǐng)據(jù)圖作答：（1）圖示過程是利用ES細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)分化，培育人造器官的過程。ES細(xì)胞在功能上的特性是。（2）過程A表示，由此產(chǎn)生的重組細(xì)胞的主要遺傳物質(zhì)來(lái)自圖中的。（3）圖中C表示定向誘導(dǎo)技術(shù)，其誘導(dǎo)的對(duì)象是 細(xì)胞。（4）如果進(jìn)行生殖性克隆，則不需要進(jìn)行定向誘導(dǎo)，但必須進(jìn)行，使得胚胎能正常發(fā)育成完整個(gè)體，該操作一般在時(shí)期進(jìn)行。（5）人體器官移植面臨的主要

28、問題有_和免疫排斥，目前臨床通過注射免疫抑制劑抑制T細(xì)胞的增殖來(lái)提高器官移植的成活率。）ES細(xì)胞不進(jìn)行定向誘導(dǎo)體外培養(yǎng)不能獲得動(dòng)物器官是因?yàn)椤＃?）具有發(fā)育的全能性（即可以分化為動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞）（2） 細(xì)胞核移植 乙 M期 （3）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(或胚胎干細(xì)胞或ES細(xì)胞 （4）胚胎移植桑椹胚或囊胚（5） 供體器官短缺 （6）胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下可以增殖而不發(fā)生分化35（8分）【生物現(xiàn)代生物科技專題】如圖所示是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿?。ɑ蛉毕輰?dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素）的過程設(shè)計(jì)圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：（1）圖中、所示的結(jié)構(gòu)分別是_、_。（2）圖中所示的生物工程技術(shù)

29、是_。此外圖示過程還應(yīng)用的工程技術(shù)有_。（至少寫一種）（3）過程通常用去核卵細(xì)胞做受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作外，還因?yàn)開。（4）過程通常用做受體細(xì)胞的原因是_。（5）過程的完成需要用到的基因操作工具有_。（6）圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是_。答案：（1）細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或ES細(xì)胞或胚胎干細(xì)胞（2）轉(zhuǎn)基因技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)、顯微操作技術(shù)、核移植技術(shù)等（3）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)（4）這些細(xì)胞還未分化，具有全能性，可以定向誘導(dǎo)分化成各類細(xì)胞、組織、器官（5）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體（6）沒有排斥反應(yīng)20XX年，美國(guó)及

30、日本兩個(gè)研究團(tuán)隊(duì)證實(shí)皮膚細(xì)胞經(jīng)過“基因直接重組”后可以轉(zhuǎn)化成為具有胚胎干細(xì)胞特性的細(xì)胞。這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)一方面解決了利用胚胎進(jìn)行干細(xì)胞研究的道德爭(zhēng)議，另一方面也使得干細(xì)胞研究的來(lái)源更不受限。請(qǐng)回答下面有關(guān)胚胎工程的若干問題。（1）胚胎工程的理論基礎(chǔ)是_；體外受精的基本原理是人工模擬體內(nèi)環(huán)境，包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等，使_成熟，同時(shí)使精子獲能，最終完成受精。（2）在胚胎發(fā)育過程中，通常把在內(nèi)進(jìn)行的早期發(fā)育稱為卵裂。（3）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，是由分離出來(lái)的一類細(xì)胞。在體外培養(yǎng)時(shí)，在培養(yǎng)液中添加ES細(xì)胞可以只增殖不分化；而在培養(yǎng)液中添加牛黃酸或丁酰環(huán)腺苷酸時(shí)ES細(xì)胞可以_。（4）從患者身上

31、取出體細(xì)胞核，將其植入去核的卵母細(xì)胞，從而獲得早期人類胚胎，然后再?gòu)闹信嘤盎颊咦陨淼摹迸咛ジ杉?xì)胞供醫(yī)學(xué)臨床使用的技術(shù)叫做。（1）體外受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律初級(jí)卵母細(xì)胞（2）透明帶（3）囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞或原始性腺抑制因子分化為不同類型的細(xì)胞（4）設(shè)計(jì)試管嬰兒供體器官的短缺和排斥反應(yīng)是制約器官移植的兩個(gè)重要問題，而治療性克隆能夠最終解決這些問題。如圖，是治療性克隆的過程圖解：（1）正常情況下，去核的卵子取自于女性卵巢排卵后在輸卵管中處于_期的卵子。（2）重組細(xì)胞發(fā)育的過程中，細(xì)胞開始分化發(fā)生在_期。（3）胚胎干細(xì)胞是由_中分離出來(lái)的一類全能性細(xì)胞，這種細(xì)胞經(jīng)過一定的誘導(dǎo)能分化出成年人任何一種組織

32、，是由于細(xì)胞內(nèi)含有_，圖中哪部分細(xì)胞是胚胎干細(xì)胞_。（4）治療性克隆解決了供體器官移植后的排斥反應(yīng)，根本原因是_。（5）治療性克隆所用到的生物工程技術(shù)名稱是_，要想獲得基因型完全相同的兩個(gè)胚胎，可采用_技術(shù)。（6）已知患者是紅綠色盲的女性，圖中提供卵子的為完全正常的年輕女性。移植器官后，該患者所生育子代紅綠色盲的情況是_。答案（1）減數(shù)第二次分裂中期 （2）囊胚（3）早期胚胎或原始性腺 個(gè)體發(fā)育需要的全部遺傳物質(zhì) 內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（4）供體的遺傳物質(zhì)和受體相同（5）核移植技術(shù) 胚胎分割（6）男孩紅綠色盲，女孩不一定隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們可以根據(jù)需求來(lái)改造生物的性狀。如圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)人類血清白蛋

33、白的圖解，據(jù)圖回答：（1)在此過程中涉及細(xì)胞水平的現(xiàn)代生物技術(shù)手段主要有 _。(2)在基因工程中，我們稱為_，在進(jìn)入之前要用_等工具來(lái)構(gòu)建基因表達(dá)載體，能實(shí)現(xiàn)進(jìn)入的常用方法是_。(3)圖中一般經(jīng)_處理可以得到，從到的過程中一般利用去核后未受精的卵細(xì)胞作為受體，而不用普通的體細(xì)胞，原因是_。(4)下列AD中表示到過程中正確的操作方法的是 _。(5)是的后代，那么的遺傳性狀和_(填或)最相似，原因是_。如果的數(shù)量太少，常用_來(lái)擴(kuò)增。要實(shí)現(xiàn)批量生產(chǎn)血清白蛋白，則要求的性染色體是_，利用該方法得到的動(dòng)物叫做_。(6)用這種方法生產(chǎn)藥物與工廠化生產(chǎn)藥物相比，前者的優(yōu)越性在于_。(7)和某些轉(zhuǎn)基因羊可通過分泌乳汁來(lái)生產(chǎn)人類所需藥物，這類轉(zhuǎn)基因動(dòng)物被稱為_。答案：（1）胰蛋白酶保證細(xì)胞有氧呼吸（2）目的基因PCR限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體顯微注射法 DNA分子探針 m RNA（3）胚胎分割 B 囊胚期荷斯坦奶牛因?yàn)閭€(gè)體的核遺傳物質(zhì)大部分來(lái)自荷斯坦奶牛，只是為胚胎發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)和場(chǎng)所，并沒有獲得的遺傳信息（4）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)用激素使其發(fā)情免疫排斥反應(yīng)（5）否是經(jīng)核移植技術(shù)得到的，而試管動(dòng)物是體外受精獲得的中國(guó)荷斯坦奶牛（1997年以