同濟醫(yī)院檢驗科ISO15189體系文件06.血小板第3因子有效性測定

1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科血液組項目操作指導書TJYYJYKMY/XMZ106第2版標題：血小板第3因子有效性測定第1章 第6節(jié)第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁 目的：保證血小板第3因子有效性測定的準確、可靠。 適用范圍：檢測血小板第3因子有效性 項目名稱：血小板第3因子有效性測定（PF3測定） 檢測方法：白陶土復鈣法 原理：血小板第3因子是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的重要凝血成分，PF3缺乏時復鈣時間延長。本實驗是利用正常人和病人含血小板多的血漿以及含血小板少的血漿相互配合，以白陶土作為活化劑，測定各組標本的復鈣時間，比較各組差異而了解PF3有否缺陷。 試劑：6.1 品牌： 白陶土 上

2、海試劑三廠 氯化鈣 上海試劑三廠 生理鹽水 上海同濟醫(yī)院6.2 貨號 白陶土 13-2010279188II 氯化鈣 13-20102820II 生理鹽水 B（91） 6.3 包裝規(guī)格： 100g/每瓶6.4 內(nèi)含物： 10g/L白陶土生理鹽水懸液0.025mol/LCaCl2溶液 手工操作 操作步驟8.1 標本：前綴為02的條碼真空管采集的抗凝血。8.2 以8001000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘左右，用吸管吸出上層血漿于另一試管中，以此為PRP8.3 剩余血標本以3000轉(zhuǎn)/分離心15分鐘左右，用吸管吸出上層血漿于另一試管，此為PPP8.4 分別計數(shù)受檢者與正常對照者的PRP血小板數(shù)，且用自生PRP

3、調(diào)節(jié)血小板數(shù)到200350109/L，PPP也要求達1020109/L以下。8.5 按下表配置兩組試驗標本 組別 受檢者（ml） 正常對照者（ml） 40g/L白陶土 PRP PPP PRP PPP 懸液 = 1 * ROMAN I 0.1 0.1 0.2 = 2 * ROMAN II 0.1 0.1 0.2 0.1 0.1 0.2 0.1 0.1 0.28.6 在上述兩組中加入1%的白陶土生理鹽水懸液0.2ml.,置37水浴中20分鐘（期間搖動數(shù)次）加入0.025mol/LCaCl2溶液0.2ml,立即開動秒表，將試管浸入水浴中，不斷輕輕搖動，30秒鐘后取出試管觀察，記錄出現(xiàn)纖維白絲的時間。

4、9 線性范圍：無10 參考范圍：第 = 1 * ROMAN I組比第 = 2 * ROMAN II組結(jié)果延長5秒以上為PF3有效性減低。11 臨床意義：PF3有效性減低見于先天性血小板病，血小板無力癥，尿毒癥，肝臟病，異常蛋白血癥，骨髓增生綜合癥，SLE，纖維蛋白溶解，血小板減少性紫癜，以及某些藥物的影響。12 病人準備標本要求：3.2%枸櫞酸鈉（Na3C4H5O4.2H20溶液抗凝（血液與抗凝劑比例9：1）,無溶血無脂血 注意事項13.1 血液與抗凝劑混合后應立即離心，防止血小板懸液中血小板的減少13.2 校正后，血小板要重新計數(shù)一次13.3 血小板懸液內(nèi)不能混有紅細胞13.4 判斷試驗終點時，要嚴格掌握出現(xiàn)纖維蛋白