農(nóng)殘文獻綜述

1、 氣相色譜-質(zhì)譜法同時測定茶葉中有機磷和有機氯農(nóng)藥殘留量胡飛(安徽農(nóng)業(yè)大學研究生學院學號14720798)摘要：本文建立了茶葉中有機氯農(nóng)藥、有機磷農(nóng)藥殘留的氣相色悴質(zhì)譜(GC-MS)分析方法。優(yōu)化色譜條件，采用選擇離子監(jiān)測(SIM)模式進行質(zhì)譜檢測。該方法的回收率范圍為65.3%142.3%，相對標準偏差為3.0%20.6%(n=6)。以信噪比RSN=3計算各農(nóng)藥的最低檢出限為0.010.08mg/kg范圍。相對于國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，該方法結果準確、重現(xiàn)性好，滿足茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測要求。大量實際樣品的檢測結果表明,此方法適于出口茶葉中農(nóng)藥殘留檢測實際工作的需要。關鍵詞：氣相色譜-質(zhì)譜法；茶葉；

2、農(nóng)藥殘留；有機磷；有機氯1前言“民以食為天，食以安為先”，食品安全問題是關系到人類健康和國計民生的重大問題，作為食品的茶葉不僅是我國人民喜愛的一種主要消費飲料，而且也是我國一項傳統(tǒng)的大宗出口農(nóng)產(chǎn)品12。目前世界上有160多個國家有飲茶的習慣，被譽為“東方文明象征”的茶在西方正在發(fā)出絢麗的光彩。隨著茶葉出口數(shù)量的不斷增加，內(nèi)需的不斷擴大，對茶葉質(zhì)量安全也提出了更高的要求34。近幾年來，隨著無公害食品行動計劃的實施，各級政府對食品安全的高度重視，正加大力度禁止在茶葉中使用高毒、高殘留農(nóng)藥，扶持龍頭企業(yè)加速茶葉加工廠的改造，來提高我國茶葉質(zhì)量安全水平。茶葉是直接泡飲的食品，其衛(wèi)生質(zhì)量與人類健康息息相

3、關。近年來，為限制濫用農(nóng)藥，維護人民利益，國內(nèi)外市場都加強了對茶葉衛(wèi)生質(zhì)量的監(jiān)測，對茶葉中的各類農(nóng)藥殘留也提出了越來越苛刻限量要求。茶葉作為我國傳統(tǒng)的經(jīng)濟作物和出口商品，近幾年隨著出口貿(mào)易量的不斷增長，貿(mào)易技術問題也不斷涌現(xiàn)，農(nóng)藥殘留問題尤為突出。有機磷農(nóng)藥是茶葉種植戶經(jīng)常使用的一種殺蟲劑，由于價格便宜，殺蟲效果好，被廣泛使用。隨著人們生活質(zhì)量的提高和我國對外貿(mào)易的擴大,茶葉的安全衛(wèi)生越來越受到人們的重視,已經(jīng)成為國際貿(mào)易中的技術焦點。但是我國茶葉農(nóng)藥殘留超標問題嚴重,歐盟已將我國列入農(nóng)藥殘留量或潛在水平較高的國家之一,并加大了從我國進口茶葉的監(jiān)控56。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn),由于暖冬時常發(fā)生,蟲害加大

4、,一些農(nóng)民更愿意使用高毒高殘留的農(nóng)藥,這樣一方面可以降低農(nóng)藥的購買成本,另一方面也降低了施藥的頻度,節(jié)約了勞動力。在我國加入世界貿(mào)易組織后,除了采取必要的農(nóng)業(yè)措施,降低茶樹、土壤和灌溉水中的農(nóng)藥殘留量,還需發(fā)展茶葉中農(nóng)藥殘留的快速檢測方法,特別是一些禁止使用在茶葉中的高毒高殘留的農(nóng)藥,來適應世界貿(mào)易市場和我國人民的需要。另外許多國家制定了茶葉中農(nóng)藥殘留的限量標準，歐盟所頒布的農(nóng)藥殘留標準涉及茶葉指標的目前已達189種，一些農(nóng)藥指標的設置，已降為原有指標的1%10%，更有超過85%的指標采用儀器檢測低限作為標準規(guī)定，即要求分析儀器不得檢出，日本在2006年6月開始實施的新食品衛(wèi)生法，不僅將茶葉設

5、限農(nóng)藥數(shù)量增加到214種，還規(guī)定設限外的500多種農(nóng)藥殘留以“一律標準”嚴格要求，即統(tǒng)一以0.Olmg/kg為限量，同時將檢測茶湯的方法由原先采用的茶湯檢測法，修改為更嚴格的試劑直接提取干茶法。農(nóng)藥殘留量問題一直受到國內(nèi)外的普遍關注，并成為制約我國茶葉及其制品出口的主要問題。如何通過檢測，更快、更有效地控制農(nóng)藥殘留的問題是打破貿(mào)易壁壘的關鍵，為提高農(nóng)產(chǎn)品中有機磷殘留檢驗結果的準確性和保障人民健康及各國的正常貿(mào)易，如何檢測出茶葉中有機磷農(nóng)藥就顯得尤為重要。2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀2.1有機磷和有機氯農(nóng)藥殘留前期處理方法農(nóng)藥殘留分析方法通常包括樣品前處理和檢測兩部分，樣品的前處理技術是農(nóng)藥殘留分析的基礎與

6、關鍵，具有濃縮被測的痕量組分、提高方法靈敏度及去除干擾物質(zhì)的作用。近年來,新的前處理技術不斷推出和應用,既節(jié)省了分析時間,提高了工作效率,也使整個分析過程更趨綠色環(huán)保。這些新的前處理技術包括超臨界流體萃取技術、固相萃取技術、固相微萃取技術、攪拌棒吸附萃取技、基質(zhì)固相分散技術、液相微萃取技術以及分散液相微萃取技術等。211超臨界萃取技術(SFE)超臨界萃取技術(supercriticalfluidextraction,SFE)是用超臨界液體作為萃取劑，根據(jù)樣品中組分在不同壓力和溫度條件下溶解能力變化的性質(zhì)，通過改變萃取劑流體的壓力,從而將不同組分萃取出來。其最大優(yōu)點是使用CO2等流體代替有機溶劑

7、，對人體無害、綠色環(huán)保,且有效地防止了熱敏性物質(zhì)的氧化和逸散,提高了樣品回收率。因而較適合于萃取熱不穩(wěn)定物質(zhì)和有毒化合物7叫D.H.Kim等已將SFE用于萃取面粉里的有機磷和有機氯殘留，避免了樣品濃縮和分析過程的干擾，提高了萃取速度,60min有7g的樣品萃取量，且聯(lián)用GC-NPD分析后，檢測限低至10ng/g。SFE是多種農(nóng)藥殘留分析中比較有前景的一個方法，十幾年來有了長足的發(fā)展,但該方法對羥基基團的萃取稍顯困難且常規(guī)分析應用還較少。212固相萃取技術(SPE)固相萃取技術(solidphaseextraction,SPE)基于液-固分配原理，利用固體吸附劑將液體中的農(nóng)殘化合物吸附，然后用洗

8、脫液淋洗，富集目標化合物進行分析。該技術高效、可靠、消耗試劑少，且技術成熟，應用廣泛，是目前國內(nèi)外有機磷和有機氯殘留分析樣品前處理中的主流技術9，使許多復雜的樣品處理難題迎刃而解。但該方法使用的裝置較貴，操作繁瑣，不同批次生產(chǎn)的SPE裝置重現(xiàn)性差且樣品用量較大。213固相微萃取技術(SPME)固相微萃取技術(solid-phasemicroextraction,SPME)，是在1990年首次提出的，1994年即被應用在農(nóng)藥檢測中。SPME是在SPE的基礎上發(fā)展起來的，集采樣、萃取、濃縮、進樣于一體的綜合技術。其原理是將涂有聚合物(固定相)的熔融石英纖維伸進樣品基質(zhì)或懸于樣品上方的頂空體中，目標

9、化合物被吸附在固定相上，經(jīng)解析后直接測定10。它與SPE相比，不使用有機溶劑為萃取劑，操作簡便，只需幾分鐘即可完成目標物萃取，與GC聯(lián)用可測定血液等微量樣品中的有機磷和有機氯農(nóng)殘，檢測限低至ng/g級。214攪拌棒吸附萃取技術(SBSE)攪拌棒吸附萃取(Stirbarsportiveextraction,SBSE)是由荷蘭教授E.Baltussen等人于1999年提出的比較符合環(huán)保要求的萃取技術。其原理與SPME相似，是將涂有聚二甲基硅氧烷(PDMS)固定相的磁性攪拌棒直接伸進樣品中攪拌并萃取30240min后,去除攪拌棒上的水分，經(jīng)專用的熱解析裝置解析，聯(lián)用色譜或質(zhì)譜分析。該技術簡單、高效，

10、無溶劑，不會造成二次污染，與纖維針式固相微萃取(F-iber-SPME)相比，SBSE的萃取固定相體積和靈敏度提高了50250倍，所以更適合痕量有機物的萃取富集。但由于SBSE使用了更多的固定相，因而也需更長的時間吸附溶質(zhì)。近年來，該技術在環(huán)境、生物及農(nóng)殘等樣品分析中都取得了良好的效果。在與SPME的對比中，SBSE被推薦為更適合萃取蜂蜜等高粘性樣品中有機磷的方法。C.Blasco等11萃取分析了15種商業(yè)蜂蜜中包括地蟲磷在內(nèi)的6種有機磷殘留，結果顯示SBSE的精密度和靈敏度分別是SPME的510倍及1050倍。最近，已有文獻研究新的固定相應用于SBSE，但目前商品化的只有GestelGmbH

11、公司的PDMS固定相一種。因此，開發(fā)更多可商品化的固定相涂料應用于該技術將是未來研究的方向之一。2.1.5基質(zhì)固相分散技術(MSPD)基質(zhì)固相分散(matrixsolid-phasedispersion，MSPD)是一種特殊的固相萃取技術。自1989年由Barker教授12首次提出以來便成為萃取果蔬、牛奶和水果中有機磷、有機氯農(nóng)殘的有效手段。其原理是將試樣直接與適量吸附劑(如C18)研磨、混勻制成半固態(tài)物質(zhì)裝柱，然后用有機溶劑洗提、分離待測物進行測定。該方法成功避免了液-液分配中出現(xiàn)的乳化現(xiàn)象以及樣品損失，節(jié)約溶劑,污染少，且與其它一些分離、檢測方法有良好的兼容性。在檢測高脂肪和高粘性雞蛋樣品

12、里的有機磷等農(nóng)殘時，采用C18作為吸附劑研磨,乙酸乙酯和乙腈為洗脫液的MSPD前處理方法，通過GC-QqQ-MS/MS準確定量和定性，結果表明該方法檢測種類高達57種,樣品分離僅需17.70min,同時避免了傳統(tǒng)萃取時待測物的損失。由于MSPD技術可對固體、半固體或粘性液體樣品中目標物質(zhì)進行萃取且易自動化，因此可以預見該技術在現(xiàn)代農(nóng)殘檢測的應用將會越來越廣泛。216液相微萃取技術(LPME)液相微萃取(Liquid-phasemicroextraction,LPME)也稱溶劑微萃取(solventmicroextraction,SME),是1996,Jeannot等在改進液液萃取(LLE)的基

13、礎上，最先提出的一種前處理技術。一般來說，液相微萃取有兩種模式，一種是直接液相微萃取(DI-LPME),另一種是頂空液相微萃取(HS-LPME)。直接微萃取是將掛在微量進樣器上的有機溶劑滴浸入水樣中，待測物通過擴散進入有機溶劑,過了設定時間后將液滴抽回注射器，直接注入GC分析,不需任何預處理和提純。頂空液相微萃取與直接微萃取的操作基本類似，所不同的是進樣器上的有機溶劑液滴是懸于密封瓶中水樣的上方。LPME具有簡單、低廉和使用溶劑少，易與GC、HPLC或LC-MS直接聯(lián)用等優(yōu)點。Khalili-Zanjani等應用LPME-GC-FPD萃取、檢測了水樣中的9種有機磷殺蟲劑，在最佳條件下，方法的的

14、檢出限為0.010.04mg/L,基體加標回收率為96%104%。此外，利用室溫離子液體代替有機溶劑，結合LPME技術分析環(huán)境中的有機磷等污染物，取得了低的檢測限和良好回收率，拓展了LPME的應用范圍。2.1.7分散液相微萃取技術（DLLME）分散液相微萃?。╠ispersiveliquid-liquidmicroextraction,DLLME）由M.Rezaee等14于2006年首次提出，其原理與LPME相同，是對LPME的改進和發(fā)展。目的是為了解決待測物損失、縮短樣品處理時間等問題。研究人員把少量的有機分散劑加入到有機萃取劑中一起混合快速地注入水樣形成乳濁液，水樣中的待測物被分散的有機萃

15、取劑富集,經(jīng)過幾分鐘的離心分層，用微量進樣器吸取萃取溶劑直接注入GC或HPLC進行分析。實驗證明，分散液相微萃取需要的萃取溶劑非常少，與SPME等相比，萃取時間更短，只需幾分鐘卻對萃取結果毫無影響,同時溫度和鹽濃度也對萃取結果幾乎不產(chǎn)生影響。分散劑的選擇對實驗結果有一定的影響,但并不顯著，唯一具有影響的是萃取劑的選擇。因此,DLLME只適用于親脂性高或中等的分析物（K500）,對于高度親水的中性分析物，是不適用的;而對于具有酸堿性的分析物，可通過控制樣品溶液的pH值使分析物以非離子化狀態(tài)存在，從而提高分配系數(shù)。目前，該技術應用于水樣中有機化合物以及農(nóng)殘的萃取分析較為普遍。選取氯苯為萃取劑，丙酮

16、為分散劑,結果只需5mL的樣品量及少于3min的提取時間便可萃取水中13種有機磷殘留，檢測限更低至3pg/mLE.C.Zhao等將DLLME運用范圍擴展到食品行業(yè)，用于萃取西瓜和黃瓜的有機磷殘留,結果表明回收率為67%111%,相對標準偏差為2%9%。該技術已成為前處理技術領域新的研究熱點，引起農(nóng)藥殘留分析界的高度關注。218超聲波輔助提取法超聲波提取法就是利用超聲波來加速物質(zhì)的化學反應、或啟動新的反應途徑、或改善其溶解能力等物理化學性能，以提高化學反應產(chǎn)率、或獲得新的化學反應物質(zhì)、或提高物質(zhì)的分離提取效率。超聲波提取法在提取過程中產(chǎn)生的沖擊波能直接反復高頻沖擊食品，破壞食品和農(nóng)藥的表面吸附，

17、加速農(nóng)藥在提取液中的溶解和擴散，這大大縮短了分析測試的時間，加快了分析的速度，提高了農(nóng)藥殘留的提取率。超聲波輔助提取法已在食品的農(nóng)殘分析中得到廣泛應用，杜曉剛等將超聲波提取-吸附分離的預處理技術用于氣相色譜法檢測茶葉中的農(nóng)藥殘留，經(jīng)試驗表明該方法回收率高，靈敏度高。夏瀟瀟等15采用超聲波萃取LC-MS-MS分析技術對葉菜中28種農(nóng)藥殘留建立了快速檢測方法，回收率為83.6%98.7%。魏俊嶺等對比超聲波提取與其他傳統(tǒng)提取法在氣相色譜法測定蔬菜中有機氯農(nóng)藥殘留，結果表明，超聲波提取法回收率達到82.8%-110.2%,回收率高于震蕩提取和索式提取。2.1.9其他處理方法除了上述常用方法外還有凝膠

18、滲透色譜技術（GPC）、微波輔助萃取技術（MAE）、加速溶液萃?。ˋSE）、旋轉蒸發(fā)、索氏提取等。2.2有機磷和有機氯分析方法有機磷和有機氯農(nóng)藥的測定方法有酶抑制法、生物傳感器法、分光光度法、比色分析法、電化學法和色譜法等。由于有機磷在茶葉中含量很低，屬于痕量級。所以對方法的靈敏度等的要求比較高。酶抑制法酶抑制法主要是根據(jù)有機磷和有機氯農(nóng)藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酯酶的活性，造成神經(jīng)傳導介質(zhì)乙酰膽堿的積累，影響正常傳導，使昆蟲中毒致死的毒理學原理來檢測農(nóng)藥殘留16。利用農(nóng)藥對膽堿酯酶的抑制作用，加入特定顯色劑，通過顏色深淺的變化確定是否有農(nóng)藥殘留及其相對量。按膽堿酯酶分解底物和采

19、用儀器不同，常分為酶抑制率測定法和速測卡法兩種。酶抑制率測定法，利用農(nóng)藥對膽堿酯酶的抑制作用與農(nóng)藥殘留量成正相關，膽堿酯酶催化水解物與顯色劑反應，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用速測儀在410nm等特定波長處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率并依此判別樣品中是否有農(nóng)藥殘留。目前市場上速測儀產(chǎn)品眾多，有2、4、8、10、24、36、96通道等多種，大多是由分光光度計在結果計算功能上進行改進的專用農(nóng)殘速測儀。使用的膽堿酯酶以乙酰膽堿酯酶（AChE）和乙酰膽堿酯酶（BChE）為主，用抑制率判定超標與否。該方法用簡單方便，可直接顯示檢測結果，也可通過數(shù)據(jù)管理軟件上傳檢測數(shù)據(jù)，是目前省市和縣區(qū)質(zhì)檢單位日常檢測的主要

20、速測儀器。速測卡法（紙片法），將膽堿酯酶和淀粉乙酸酯固化在卡片上，利用膽堿酯酶催化水解淀粉乙酸酯（紅色）為乙酸和淀粉（藍色），有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶的催化有抑制作用，使催化、水解、變色過程發(fā)生改變，從而判斷樣品中是否有農(nóng)藥殘留存在，使用的膽堿酯酶以AChE為主17。該方法常使用部分專用速測儀進行酶反應等操作，可用肉眼進行顏色的辨認以判斷超標與否，其操作簡單、使用方便，靈敏度比酶抑制率測定法低，因此適用于生產(chǎn)基地、農(nóng)貿(mào)市場以及超市的一般性監(jiān)測篩查。生物傳感器法生物傳感器通常是利用生物活性物質(zhì)（如酶、抗原、抗體、細胞、組織等）作為傳感器的識別元件，當活性物質(zhì)與樣品中的待測物發(fā)生特異性反

21、應（如發(fā)光、發(fā)熱、顏色變化、形成復合物等）時，產(chǎn)生的光、熱等可以通過信號轉換器轉變?yōu)殡娦盘柡凸庑盘柕?，由檢測器經(jīng)過分析處理，實現(xiàn)對待測物的定性和定量檢測。目前常見的有酶生物傳感、免疫生物傳感器、微生物傳感器、細胞傳感器等，按信號轉化器的不同又可分為化學傳感器、光導纖維生物傳感器、半導體生物傳感器、熱生物傳感器、表面等離子體共振生物傳感器等。酶生物傳感器是利用有機磷農(nóng)藥與乙酰膽堿酯酶的活性部位發(fā)生不可逆的鍵合從而抑制酶活性，酶反應產(chǎn)生的pH值變化由電位型生物傳感器檢測1819。免疫生物傳感器是利用抗體和抗原之間的特異性結合所產(chǎn)生的免疫化學反應，微生物傳感器則是利用細菌、放線菌和真菌等微生物活細胞

22、的代謝功能制成傳感器檢測污染物。表面等離子體共振（SPR）生物傳感器是利用在金屬和電介質(zhì)界面處入射光場在適當?shù)臈l件（能量與動量匹配）下引發(fā)金屬表面的自由電子相干振蕩的一種物理現(xiàn)象，可分為棱鏡耦合復合結構SPR傳感器和光纖SPR傳感器。例如，可以將已知的生物分子固定在5nm的Au膜表面，加入與其互補的目標生物分子，兩者結合將使Au膜與溶液界面的折射率上升，依據(jù)共振角改變程度對互補的目標生物分子進行定量檢測。生物傳感器已在環(huán)境監(jiān)測、食品、醫(yī)藥等領域得到廣泛應用，其操作方便、靈敏度高、反應時間短、儀器自動化程度高，是一種發(fā)展迅速的在線快速檢測方法。但目前生物傳感器技術在農(nóng)殘檢測方面還存在穩(wěn)定性和重現(xiàn)

23、性差、使用壽命短等尚未解決的技術問題，短時期內(nèi)還無法廣泛應用于農(nóng)殘檢測中。分光光度法分光光度法是較早用于有機磷和有機氯農(nóng)藥殘留測定的方法之一。由于在分光光度法的操作過程中沒有分離步驟，因此目標化合物顏色反應的特異性便成為其定量分析的主要手段。將經(jīng)過前處理的樣品在堿性條件下水解，產(chǎn)生磷酸鹽，在一定酸度條件下能和鉬酸銨反應，產(chǎn)生磷鉬雜多酸，回入還原劑氯化亞錫時，磷鉬雜多酸變成藍色絡合物，用分光光度計進行測定。近年來分光光度法主要集中在西維因分析上，并且對不同的樣品前處理技術、不同的耦合試劑或不同的波長條件下的測定進行了研究。分光光度法用于農(nóng)藥殘留量測量，要求進行必要的樣品富集以提高靈敏度，同時操作

24、煩瑣，易受其他物質(zhì)，現(xiàn)已經(jīng)很少使用。2.2.4氣相色譜法（GC）氣相色譜是農(nóng)殘分析中最常見的方法之一，常用于氣相色譜法的檢測器主要有電子捕獲檢測器（ECD）、熱導檢測器（TCD）、氫火焰離子化檢測器（FID）、氮磷檢測器/堿火焰離子化檢測器（NPD/AFID）、原子發(fā)射檢測器（AED）等。有機磷和有機氯農(nóng)藥不能進行分離檢測。因此，在實際操作中，將有機磷農(nóng)藥水解，或通過衍生反應提高有機磷農(nóng)藥的熱穩(wěn)定性，達到GC對有機磷農(nóng)藥的測定的要求。方法快速、簡便、準確，具有良好的通用性。遺憾的是，學校沒有NPD的檢測器。2.2.5氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用（GC/MS）GC/MS是將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀串聯(lián)起來，成

25、為一個整機使用的檢測技術。它既有氣相色譜的高分離性能，又具有質(zhì)譜準確鑒定化合物結構的特點，可達到同時定性、定量的目的，氣相色譜一離子捕獲質(zhì)譜法（GCITMs）是一種多殘留檢測方法，可用來檢測土壤中的有機磷等一些污染物20。氣相色譜一化學電離質(zhì)譜法（GCCIMS）可用來分析水果、蔬菜中多種致癌農(nóng)藥殘量GC/MS可以減少物的影響，提高食品的靈敏度。GC/MS法不僅根據(jù)樣品中待測組分在圖譜上的保留時間，更主要是根據(jù)在此保留時間內(nèi)殘留農(nóng)藥裂解的特征離子碎片原理，由質(zhì)譜儀按其分子量和分子結構對農(nóng)藥準確定性分析，并以此作為定量的依據(jù)，從而克服了由于未凈化掉的雜質(zhì)峰與農(nóng)藥保留時間重疊而造成將雜質(zhì)峰誤碼判為農(nóng)

26、殘的缺點。雖然GC/MS具有高的分享和確認能力，但對于穩(wěn)定性差的化合物的分析卻存在一些困難。GC/MS技術在農(nóng)藥殘留檢測中已經(jīng)有許多成功的實例。萬益群21等用氣質(zhì)聯(lián)用測定土壤中12種有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留分析方法，該方法對0.1ug.mL-1和0.5ug.mL-12個嘗試添加水平的回收率分別為70.1119.0%和78.1119.1%，相對標準偏差分別為6.309.80和5.208.23.劉芃巖等22大米中多種殘留農(nóng)藥的萃取氣相色譜質(zhì)譜分析。該方法簡便、快速、靈敏，能夠滿足同時測定大米中多種農(nóng)藥殘留的要求，可以作為大米中農(nóng)藥多殘留的例行分析和確證分析的方法。2.2.6高效液相色譜法（HP

27、LC）從1977年第一次采用HPLC柱后衍生測定有機磷農(nóng)藥殘留以來，采用HPLC柱后水解或柱后衍生方法對復雜介質(zhì)中有機磷農(nóng)藥的殘留量進行檢測越來越普遍。有機磷農(nóng)藥的HPLC檢測大多數(shù)米用反相C18或C8柱，常用的流動相為甲醇一水或乙腈一水。早期常用的檢測手段是紫外檢測器（UV）。一般說來，高效液相色譜法的檢出限比氣相色譜的要高。HPLC對于氣相色譜法不能分析的高沸點或熱不穩(wěn)定的農(nóng)藥可以進行有效的分享檢測與GC相經(jīng)HPLC的流動相參與分離機制，其組成、比例和PH值可以靈活調(diào)節(jié)，這樣更有利于分離。此法干擾性強、柱效高、分離能力強、安全率高、準確度和精密度好。2.2.7液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術（LC/M

28、S）LC/MS可首先由色譜將待測混合物進行分離，再由質(zhì)譜檢測器檢測，依次得到化合物的分子、離子及碎片信息，質(zhì)譜數(shù)據(jù)用作化合物的確證鑒定，此過程不僅可以得到更有意義的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，而且可以在一定程度上排除基質(zhì)的干擾，克服離子抑制，優(yōu)化質(zhì)譜檢測信號。LC/MS技術是殘留分析的理想檢測手段。對于需要高靈敏度、寬適用范圍、復雜基質(zhì)的多殘留特快速篩選工作而言，液質(zhì)聯(lián)用無疑是首選的最佳檢測手段23。HPLC/MS不僅具有良好的分享和確認能力，并且能對熱不穩(wěn)定化全物進行更好的分析，因此HPLC/MS無疑是一個分析有機磷農(nóng)藥殘留的解決辦法。2.2.8其他分析方法在農(nóng)藥殘留分析中還有活體生物檢測法、免疫分析法、化學

29、計量法、比色卡法等23。農(nóng)藥殘留分析的發(fā)展趨勢隨著人們對環(huán)境保護和安全衛(wèi)生意識的提高，農(nóng)殘檢測要求也越來越高。色譜分析由于其高效能的色譜柱可將各組分或雜技分離，高靈敏度和專一性強的檢測器解決了早期不能檢出的微量農(nóng)藥、代謝物和降解產(chǎn)物的分析，在農(nóng)殘的檢測領域運用越來越普遍，幾乎已經(jīng)代替了原來的化學法、比色法和生物測定法。利用高靈敏度和高精密度分析食品及其在線聯(lián)用技術來分析農(nóng)藥殘留成為了必然趨勢。在樣品的制備和前處理方面也呈現(xiàn)出微量化、自動化、無毒化、快速化和低成本的趨勢24。國外的農(nóng)藥殘留方面的非常嚴格，并且有相應在的標準，相比這下，中國在這方面還較薄弱。因此應該盡快制定各行業(yè)殘留標準，盡量減少

30、有機磷農(nóng)藥施用量，完善農(nóng)殘檢測體系。茶葉中有機磷農(nóng)藥殘留的測定可以用乙腈作為提取劑，超聲波萃取作為前處理，用氣相與質(zhì)譜聯(lián)用來檢測。結論茶葉樣品前處理方法和技術已經(jīng)成為農(nóng)藥痕量分析進一步發(fā)展的瓶頸，尋找準確高效的前處理方法一直是國際農(nóng)產(chǎn)品和食品安全研究領域的一個重要課題。目前我國對出口茶葉農(nóng)藥殘留的檢測方法主要是采取浸漬法或均質(zhì)器提取法提取，固相萃取小柱凈化，氣相色譜法進行測定。但是茶葉中雜質(zhì)多，傳統(tǒng)的樣品前處理法存在操作復雜，過柱耗時長，成本高等缺陷，不能滿足大批量樣品快速檢測的要求。因此，尋求檢測時間短、靈敏度高、選擇性強、重現(xiàn)性好、操作簡單的茶葉農(nóng)殘分析技術，特別是對甲胺磷、乙酰甲胺磷、三

31、唑磷等一些高毒高殘留的茶葉農(nóng)藥殘留的檢測具有重要的意義。本論文的目的是尋找一種能對茶葉中甲胺磷、乙酰甲胺磷、久效磷等有機磷農(nóng)殘留進行定性、定量分析的最佳方法。參考文獻劉韶光，蔣顧偉,羅國武茶葉農(nóng)藥殘留檢測技術概述J茶葉通訊,2006,32:14-18.ZhiQiangHuang,YongJunLi,BoChenaeta1.Simultaneousdeterminationof102pesticideresiduesinChineseteasbygaschromatography-massspectrometerJ.JournalofChromatographyB,2007,853:154-162.吳洵對現(xiàn)行有機茶行業(yè)標準的幾點看法和建議J茶葉,2005,31:153-155.魯成銀無公害茶葉質(zhì)量管理標準體系J.茶葉,2004,30(4):187-189.陳石榕對歐盟茶葉農(nóng)藥殘留新標準的思考J.農(nóng)業(yè)標準化,2000,7:28-291.楊揚,金鳳明，杜曉剛，等.對堿浸法離子選擇電極測定茶葉中氟含量方法的改進J.蘇工業(yè)學院學報,2004,16(4):33-351.陳紅平，劉新，汪慶華，等氣相色譜)串聯(lián)質(zhì)譜法測定茶葉中88種農(nóng)藥殘留量J.色譜,2011,29(5):409-416.邱月明,溫可可,白樺