666DDT檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書

1、666DDT檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書1.試劑及其配制1.1硫酸：=1.84g/ml，超純。1.2無水硫酸鈉（Na2SO4）：600灼燒4h以上，冷卻后密閉保存，有效期1個(gè)月。1.3硫酸鈉溶液（20g/l）：將20g無水硫酸鈉溶于水中，稀釋至1000ml。1.4正己烷（含量大于99%）：于全玻璃磨口回流蒸餾器中每1000ml正己烷加入1g固體氫氧化鈉，回流4h。換上分餾柱水浴蒸餾，收集（6669）餾分，棄去前5%和最后10%的餾分。1.5苯：經(jīng)全玻璃蒸餾器重蒸，收集80%餾分。1.6異辛烷：經(jīng)全玻璃蒸餾器重蒸。1.7丙酮：經(jīng)全玻璃蒸餾器重蒸，收集（3839）餾分。1.8色譜擔(dān)體：Gas Chrom Q,1

2、00目120目（150um120um）。1.9固定液：OV-17,OV-210。1.10 666、DDT各組分標(biāo)準(zhǔn)品：-666、-666、-666、-666、o.p-DDT、p.p-DDE、p.p-DDT、p.p-DDD，色譜純。1.11 666、DDT各組分標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：分別稱取1.00mg-666、-666、-666，4.00mg-666，p.p-DDE、5.00mg p.p-DDD，8.00mg o.p-DDT和10.0mg p.p-DDD于8個(gè)10.0ml的量瓶中，用正己烷或異辛烷溶解并稀釋至標(biāo)線，混勻。各標(biāo)準(zhǔn)貯備液的濃度分別為：0.100mg/ml, 0.100mg/ml，0.100

3、mg/ml，0.400mg/ml，0.400mg/ml，0.500mg/ml，0.800mg/ml，1.00mg/ml。1.12 666、DDT各組分混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：分別準(zhǔn)確移取一定體積666、DDT各組分標(biāo)準(zhǔn)貯備液于同一量瓶中用正己烷稀釋定容，最終制成混合標(biāo)準(zhǔn)使用液的濃度分別為：-666、0.010ng/ul；-666，0.010ng/ul；-666，0.040ng/ul；-666，0.010ng/ul；p.p-DDE， 0.040ng/ul；o.p-DDT，0.080ng/ul；p.p-DDD，0.050ng/ul；p.p-DDT ，0.100ng/ul。將上述混合標(biāo)準(zhǔn)使用液分裝于2ml

4、安瓿瓶（經(jīng)450灼燒4h以上）中封存，置冰箱內(nèi)保存。每支安瓿瓶裝0.3ml0.5ml標(biāo)準(zhǔn)使用液，臨用時(shí)啟封。2.色譜柱制備a)色譜柱預(yù)處理：玻璃柱用鹽酸溶液（1+1）浸泡過夜，用水沖凈，烘干。注入10%（V/V）二甲基二氯硅烷的甲苯溶液浸泡2h，棄去溶液，用氮?dú)獯蹈?；b）固定相制備：稱取0.080G OV-17和0.320g OV-210于100ml圓底燒杯內(nèi)，用適量丙酮溶解。燒杯與冷凝管聯(lián)接，置于水浴中回流2h。稍冷后將5g預(yù)熱過的色譜擔(dān)體倒入，控制丙酮頁面略高于擔(dān)體，在微沸下回流4h。冷卻后自然晾干（不時(shí)搖動(dòng)，以防粘結(jié)）；c）色譜柱裝柱：將玻璃柱與固定相在120下預(yù)熱2h，冷卻。在柱的一端

5、填上一小塊玻璃毛，高度約為5min，并接到真空系統(tǒng)的抽濾瓶。柱的另一端接一小漏斗，在減壓下邊振蕩，邊填柱，使固定相填充均勻。填完后取下漏斗，并填上一小塊玻璃毛；d）色譜柱老化：將已填好的色譜柱一端接色譜儀注射進(jìn)樣口，另一端放空，依次在150，180，210各老化2h，最后在230老化16h以上；e)連接檢測(cè)器：將已老化的色譜柱放空端接入檢測(cè)器，在工作條件下用氮?dú)獯迪?h。注射666、DDT各組分混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，根據(jù)其色譜圖檢驗(yàn)色譜柱的分離效果，應(yīng)得到完全分離的8種異構(gòu)體的色譜峰。3.樣品測(cè)定a)樣品萃取：量取500ml海水樣品于錐形分液漏斗中，加入10.0ml正己烷，劇烈振蕩2min，靜置分

6、層后棄去水層；b）凈化：正己烷相用硫酸凈化2次，每次5ml，劇烈振蕩1min，再用硫酸鈉溶液洗滌2次，每次10ml，振蕩1min。正己烷相經(jīng)無水硫酸鈉柱脫水。用10ml正己烷分兩次洗滌分液漏斗并經(jīng)脫水柱。最后用5ml正己烷沖洗脫水柱。所有流經(jīng)脫水住的正己烷均采集在濃縮瓶?jī)?nèi)；c）濃縮：將濃縮瓶裝到K-D濃縮器或蒸發(fā)濃縮裝置，在8090的水浴中濃縮至3ml5ml。取下濃縮瓶，在常溫下用氮?dú)獯捣魇谷芤后w積小于0.5ml，最后用正己烷定容至0.50ml。若不能立即進(jìn)行色譜測(cè)定，將溶液封存在安瓿瓶?jī)?nèi)，冰箱保存；d）色譜測(cè)定：分別抽取相同體積的樣品濃縮液和混合標(biāo)準(zhǔn)使用液按選定的氣相色譜儀工作條件測(cè)量各異構(gòu)體的峰高h(yuǎn)w和ho；e）同時(shí)，取10ml正己烷按步驟測(cè)定試劑空白hb。4.記錄與計(jì)算將測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)空白和水樣的有機(jī)氯農(nóng)藥各異構(gòu)體的數(shù)據(jù)記入表中，按式計(jì)算水樣中有機(jī)氯農(nóng)藥各異構(gòu)體的濃度。 666、DDT=co（hw-hb）V/hoV1(27)式中：666、DDT水樣中有機(jī)氯農(nóng)藥各異構(gòu)體濃度，單位為納克每升（ng/l）；co標(biāo)準(zhǔn)使用溶液中該異構(gòu)體的濃度，單位為納克每微升（ng/ul）；hw樣品提取液相應(yīng)的異