儀器分析第三章

1、儀器分析第三章第1頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日2.液相色譜中影響色譜峰展寬的因素有哪些? 與氣相色譜相比較, 有哪些主要不同之處?解:液相色譜中引起色譜峰擴展的主要因素為渦流擴散、流動的流動相傳質、滯留的流動相傳質以及柱外效應。在氣相色譜中徑向擴散往往比較顯著，而液相色譜中徑向擴散的影響較弱，往往可以忽略。另外，在液相色譜中還存在比較顯著的滯留流動相傳質及柱外效應。第2頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日3. 在液相色譜中, 提高柱效的途徑有哪些?其中最有效的途徑是什么?解:液相色譜中提高柱效的途徑主要有:1.提高柱內填料裝填的均勻性;2.改

2、進固定相 減小粒度; 選擇薄殼形擔體; 選用低粘度的流動相; 適當提高柱溫其中,減小粒度是最有效的途徑.第3頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日4. 液相色譜有幾種類型?它們的保留機理是什么? 在這些類型的應用中,最適宜分離的物質是什么?解:液相色譜有以下幾種類型:液-液分配色譜; 液-固吸附色譜; 化學鍵合色譜;離子交換色譜; 離子對色譜; 空間排阻色譜等.液-固吸附色譜是通過組分在兩相間的多次吸附與解吸平衡實現分離的.最適宜分離的物質為中等相對分子質量的油溶性試樣，凡是能夠用薄層色譜分離的物質均可用此法分離。其中;液-液分配色譜的保留機理是通過組分在固定相和流動相間的

3、多次分配進行分離的?？梢苑蛛x各種無機、有機化合物。第4頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日化學鍵合色譜中由于鍵合基團不能全部覆蓋具有吸附能力的載體,所以同時遵循吸附和分配的機理,最適宜分離的物質為與液-液色譜相同。離子交換色譜和離子色譜是通過組分與固定相間親合力差別而實現分離的.各種離子及在溶液中能夠離解的物質均可實現分離，包括無機化合物、有機物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白質等。第5頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日在離子對色譜色譜中,樣品組分進入色譜柱后,組分的離子與對離子相互作用生成中性化合物,從而被固定相分配或吸附進而實現分離的.各種有機

4、酸堿特別是核酸、核苷、生物堿等的分離是離子對色譜的特點。空間排阻色譜是利用凝膠固定相的孔徑與被分離組分分子間的相對大小關系,而分離、分析的方法。最適宜分離的物質是：另外尚有手性色譜、膠束色譜、環(huán)糊精色譜及親合色譜等機理。第6頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日5. 在液-液分配色譜中，為什么可分為正相色譜及反相色譜？解：采用正相及反相色譜是為了降低固定液在流動相中的溶解度從而避免固定液的流失。第7頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日6.何謂化學鍵合固定相?它有什么突出的優(yōu)點?解:利用化學反應將固定液的官能團鍵合在載體表面形成的固定相稱為化學鍵合固定相

5、.優(yōu)點:固定相表面沒有液坑,比一般液體固定相傳質快的多. 無固定相流失,增加了色譜柱的穩(wěn)定性及壽命.可以鍵合不同的官能團,能靈活地改變選擇性,可應用與多種色譜類型及樣品的分析.有利于梯度洗提,也有利于配用靈敏的檢測器和餾分的收集.第8頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日7. 何謂化學抑制型離子色譜及非抑制型離子色譜?試述它們的基本原理.解:在離子色譜中檢測器為電導檢測器,以電解質溶液作為流動相,為了消除強電解質背景對電導檢測器的干擾,通常除了分析柱外,還增加一根抑制柱,這種雙柱型離子色譜法稱為化學抑制型離子色譜法.第9頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星

6、期日但是如果選用低電導的流動相（如10- 5 10-4M的苯甲酸鹽或鄰苯二甲酸鹽），則由于背景電導較低，不干擾樣品的檢測，這時候不必加抑制柱，只使用分析柱，稱為非抑制型離子色譜法例如為了分離陰離子,常使用NaOH溶液為流動相，鈉離子的干擾非常嚴重，這時可在分析柱后加一根抑制柱，其中裝填高容量H+型陽離子交換樹脂，通過離子交換，使NaOH轉化為電導值很小的H2O，從而消除了背景電導的影響第10頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日何謂梯度洗提？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？解：在一個分析周期內，按一定程序不斷改變流動相的組成或濃度配比，稱為梯度洗提是改進液相色譜分離的

7、重要手段梯度洗提與氣相色譜中的程序升溫類似，但是前者連續(xù)改變的是流動相的極性、pH或離子強度，而后者改變的溫度程序升溫也是改進氣相色譜分離的重要手段第11頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日高效液相色譜進樣技術與氣相色譜進樣技術有和不同之處？解：在液相色譜中為了承受高壓，常常采用停流進樣與高壓定量進樣閥進樣的方式第12頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日10以液相色譜進行制備有什么優(yōu)點？解：以液相色譜進行制備時，分離條件溫和，分離檢測中不會導致試樣被破壞，切易于回收原物第13頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日11.在毛細管中實

8、現電泳分離有什么優(yōu)點？解：毛細管由于散熱效率很高，可以減少因焦耳熱效應造成的區(qū)帶展寬，因而可以采用較高的電壓，克服了傳統電泳技術的局限，極大地提高分離效率，而且分離時間縮短，試樣分析范圍寬，檢測限低對于大分子的分離往往比色譜方法具有更高的柱效第14頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日12.試述CZE, CGE,MECC的基本原理毛細管區(qū)帶電泳（CZE)是在指外加電場的作用下，溶質在毛細管內的背景電解質溶液中以一定速度遷移而形成一個一個獨立的溶質帶的電泳模式，其分離基礎是淌度的差別因為中性物質的淌度差為零，所以不能分離中性物質。帶電粒子的遷移速度為電泳速度與電滲流的矢量和在

9、緩沖溶液中帶正電的粒子由于遷移方向與電滲流相同，流動速度最快，最先流出，負電荷粒子的運動方向與電滲流相反，最后流出，中性粒子的電泳速度與電滲流相同，因而遷移速度介于二者之間這樣各種粒子因差速遷移而達到區(qū)帶分離，這就是CZE的分離原理第15頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日毛細管凝膠電泳(CGE) 是毛細管內填充凝膠或其他篩分介質，如交聯或非交聯的聚丙烯酰胺。荷質比相等，但分子的大小不同的分子，在電場力的推動下在凝膠聚合物構成的網狀介質中電泳，其運動受到網狀結構的阻礙。大小不同的分子經過網狀結構時受到的阻力不同，大分子受到的阻力大，在毛細管中遷移的速度慢；小分子受到的阻力小，在毛細管中遷移的速度快，從而使它們得以分離。這就是CGE的分離原理第16頁，共17頁，2022年，5月20日，13點51分，星期日膠束電動色譜 (MECC)是以膠束為假固定相的一種電動色譜，是電泳技術與色譜技術的結合。多數MECC在毛細管中完成，故又稱為膠束電動毛細管色譜 。MECC是在電泳緩沖液中加入表面活性劑，當溶液中表面活性