乳與乳制品微生物檢驗(yàn)方法芽孢和耐熱芽孢的檢測(cè)

1、乳與乳制品微生物檢驗(yàn)方法芽孢和耐熱芽孢的檢測(cè) YLNB 3.61. 術(shù)語(yǔ)我們通常所指的耐熱芽孢桿菌是指對(duì)滅菌溫度或更高的溫度具有極強(qiáng)的抵抗力的一組能夠形成芽孢的細(xì)菌。2. 儀器及器材2.1 培養(yǎng)箱：3035，5055，； 2.2 恒溫水浴鍋：461，801， 1001；2.3 平皿：直徑90mm；2.4 試管，吸管；2.5 廣口瓶或三角燒瓶：容量為500ml；2.6 溫度計(jì)。3. 培養(yǎng)基和試劑3.1生理鹽水(0.85%NaCL溶液)3.2營(yíng)養(yǎng)瓊脂或孢子計(jì)數(shù)專用培養(yǎng)基80，水浴10min報(bào) 告菌落計(jì)數(shù)每個(gè)皿內(nèi)加入適量營(yíng)養(yǎng)瓊脂選擇2-3個(gè)適宜稀釋度各以1ml分別加入滅菌平皿中做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋

2、液檢樣迅速冷卻4. 方法4.1 芽孢總數(shù)的測(cè)定： 檢驗(yàn)程序見(jiàn)下圖 3035 72h4.1.1 樣品的前處理4.1.1.1以無(wú)菌操作將5-10ml原奶樣品加入一具塞滅菌試管內(nèi)，在另一試管加入與奶等量的水，并在加水的試管中插入一根溫度計(jì)。4.1.1.2將兩支試管同時(shí)放入80的恒溫水浴中，待溫度升至80后，保溫10min。4.1.2 樣品的稀釋及培養(yǎng)4.1.2.1保溫結(jié)束后，將含原奶的試管用冷水迅速冷卻。4.1.2.2根據(jù)樣品的污染程度，選擇2個(gè)適當(dāng)?shù)南♂尪?，分別做10倍遞增稀釋的同時(shí)，即取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液與滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做2個(gè)平皿。4.1.2.3 稀釋液移入平皿后，即使將涼至4

3、6的培養(yǎng)基注入平皿內(nèi)，使其混合均勻。同時(shí)做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。4.1.2.4 待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置30-35培養(yǎng)箱下培養(yǎng)72h。4.1.2.3.菌落計(jì)數(shù)方法參見(jiàn)菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)方法。4.1.2.4 菌落數(shù)的報(bào)告參見(jiàn)菌落總數(shù)的報(bào)告方式。4.2 耐熱芽孢總數(shù)的測(cè)定檢驗(yàn)程序見(jiàn)下圖報(bào) 告菌落計(jì)數(shù)每個(gè)皿內(nèi)加入適量瓊脂選擇2-3個(gè)適宜稀釋度各以1ml分別加入滅菌平皿，每個(gè)稀釋度做4個(gè)平皿，分成2組 中，每個(gè)稀釋度做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液檢樣迅速冷卻100，水浴10min 3035 72h 5055 72h 4.2.1樣品的前處理4.2.1.1以無(wú)菌操作將510ml原奶樣品加入一具塞滅菌試管中，在另一試管加入

4、與奶等量的水，并在加水的試管中插入一根溫度計(jì)。4.2.1.2將兩支試管同時(shí)放入100的恒溫水浴中，待溫度升至100后，保溫10min。如果水達(dá)不到100就沸騰，則等待時(shí)間需延長(zhǎng)?；蛟谒屑尤臌}以提高沸點(diǎn)溫度，但要避免原奶樣品沸騰。4.2.2樣品的稀釋及培養(yǎng)4.2.2.1保溫結(jié)束后，將含原奶的試管用冷水迅速冷卻。4.2.2.2根據(jù)樣品的污染程度，選擇2個(gè)適當(dāng)?shù)南♂尪龋謩e做10倍遞增稀釋的同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液與滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做4個(gè)平皿，分成2組，每組2個(gè)平皿。4.2.2.3稀釋液移入平皿后，即將涼至46的培養(yǎng)基注入平皿內(nèi)，使其混合均勻。同時(shí)做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。4.2.2.4待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，將1組平皿置于3035培養(yǎng)箱，另一組放入5055培養(yǎng)箱內(nèi)，均培養(yǎng)72h。4.2.3菌落計(jì)數(shù)方法參見(jiàn)菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)方法。4.2.4菌落數(shù)的報(bào)告參見(jiàn)菌落總數(shù)的報(bào)告方式。在30-35條件下培養(yǎng)的菌落