實(shí)習(xí)報(bào)告-有魯抗樂公司605車間

1、樂公司 605 車間發(fā)酵工段實(shí)習(xí)摘要：為了提高的工程知識(shí)，了解藥廠廠區(qū)布局，車間布局，熟悉相關(guān)原則；熟悉相關(guān)生產(chǎn)工藝流程(從原料到成品)，學(xué)習(xí)各車間物料流程，加強(qiáng)專業(yè)知識(shí)和安全知識(shí)的學(xué)習(xí)，把理論與實(shí)踐相結(jié)合；了解日常工作，親自體驗(yàn)，并自我總結(jié)；提高溝通及人際關(guān)系處理能力；感受現(xiàn)實(shí)工作生活。豐富專業(yè)知識(shí)，積累工程實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，為以后走上工作崗位打基礎(chǔ)；找到自身之處，早日彌補(bǔ)，增強(qiáng)自己適應(yīng)社會(huì)能力。為此今年 8 月末到 9 月末，去山東藥業(yè)有限公司為期 20 多天的實(shí)習(xí)。下面我將為大家介紹實(shí)習(xí)過程中的經(jīng)歷和所學(xué)到的東西。:；實(shí)習(xí)；發(fā)酵2014 年 8 月 30 號(hào)來到了山東，接下來的 20 多天里，在

2、這里完成的實(shí)習(xí)任務(wù)。開始四天里，進(jìn)行了簡(jiǎn)短的培訓(xùn)，主要是讓了，同時(shí)進(jìn)行安全教育，被分成好幾個(gè)組，分別進(jìn)了不同的車間，我被分到了 605 車間，605 車間分進(jìn)去的有 10 個(gè)人，被分別分到了三個(gè)崗位：菌種、發(fā)酵、包裝。我被分到了發(fā)酵工段，和我一起的還有其他三個(gè)。開始都體驗(yàn)了其他兩個(gè)崗位，在菌種和包裝崗位分別實(shí)習(xí)了一天的時(shí)間之后就固定了崗位。在發(fā)酵工段的主要任務(wù)是了解 T605 生產(chǎn)的工藝流程，學(xué)習(xí)工人們?nèi)绾尾僮鳎瑢W(xué)習(xí)到放大后的不同，同時(shí)去感受的企業(yè)文化，更重要的是豐富自己工程化知識(shí)，提高自己的社會(huì)經(jīng)驗(yàn)。1介紹和 605 車間及其產(chǎn)品介紹1.1介紹要的抗生素研發(fā)、生產(chǎn)，國(guó)家重點(diǎn)高新技術(shù)企業(yè)，擁有

3、國(guó)家級(jí)企業(yè)技術(shù)中心。（600789）于 1997 年 2 月在證券交易所掛牌上市，現(xiàn)有資產(chǎn) 38 億元，占地近 4000 畝，擁有 5 家全資子公司、7 家控股子公司、1 家參股公司，員工 6500 余人，其中各類專業(yè)技術(shù) 3100 余人。以發(fā)展生態(tài)、服務(wù)人類健康為使命，以專業(yè)領(lǐng)先，行業(yè)領(lǐng)跑、基業(yè)長(zhǎng)青為愿景，堅(jiān)持誠(chéng)信、創(chuàng)新、共贏的價(jià)值觀，大力創(chuàng)建資源節(jié)約型和環(huán)境友好型企業(yè)，制造安全高效的藥品，保障病患者健康，造福自然，造福人類。擁有年產(chǎn)各類微生物發(fā)酵及半原料藥 15000 噸、粉針 30 億支、片劑 100 億片、膠囊 50 億粒、水針 2 億支、大容量注射劑 1.5 億瓶的生產(chǎn)要產(chǎn)品有人用藥

4、、動(dòng)植物藥等 500 余個(gè)品種，已通過ISO9001 質(zhì)量體系認(rèn)證、ISO14000 環(huán)境體系認(rèn)證和OSHMS職業(yè)健康安全體系認(rèn)證，青霉素鈉原料藥及粉針獲得國(guó)家質(zhì)量金獎(jiǎng)，酒石酸泰樂霉素、大觀霉素原料藥獲得歐盟 CEP，大觀霉素通過德國(guó)cGMP 認(rèn)證，AIV、鹽酸大觀霉素均通過 FDA 認(rèn)證。產(chǎn)品暢銷，遠(yuǎn)銷亞洲、歐洲、非洲、美洲 40 多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，年出口創(chuàng)匯過億。山東是國(guó)家大型生物制藥企業(yè)，國(guó)家重以科技為先導(dǎo)，走科技興企，運(yùn)用現(xiàn)物技術(shù)，生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)抗生素類、氨基酸類、心腦類、半抗生素類原料藥，生素、淀粉、葡萄糖等。“”牌商標(biāo)被重點(diǎn)培育和發(fā)展的出口名牌”，先后獲得了“質(zhì)量效益型先進(jìn)企業(yè)”、“用戶滿

5、意企業(yè)”、術(shù)企業(yè)；2011 年研發(fā)中心被認(rèn)定為國(guó)家級(jí)企業(yè)技術(shù)中心，2012年被確定為山東省科技興貿(mào)出口創(chuàng)新。“十二五”期間，圍繞發(fā)展，以市場(chǎng)，以體制機(jī)制和管理創(chuàng)新為保障，以科技創(chuàng)新和技術(shù)進(jìn)步為動(dòng)力，優(yōu)化資源配置，管理能力，打造生物制藥、生物制品、生物制藥三條產(chǎn)業(yè)鏈，大力發(fā)展（人用）、動(dòng)保、環(huán)境科技、生物四塊，建設(shè)、科技、生物制造、四大產(chǎn)業(yè)園區(qū)，努力培育和企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力，使躋身于國(guó)內(nèi)一流制藥企業(yè)行列。1.2 605 車間及其產(chǎn)品介紹1.2.1 605 車間的主要設(shè)備車間的主要設(shè)備有：發(fā)酵罐、一級(jí)罐、二級(jí)罐、儲(chǔ)罐、油罐、空氣過濾器、質(zhì)檢設(shè)備和灌裝設(shè)備等。1.2.2 產(chǎn)品及菌種介紹605 車間是以 Bt

6、（芽孢桿菌）發(fā)酵為主，生產(chǎn)具有殺死一些幼蟲，如：直翅目、鞘翅目、雙翅目、膜翅目，特別是鱗翅目的“優(yōu)秀企業(yè)”等榮譽(yù)稱號(hào)，2009 年被認(rèn)定為國(guó)家級(jí)高新技生物藥品以及相關(guān)制劑、輸液、中成藥、動(dòng)物用抗多種害蟲的制劑T605。605 車間的生產(chǎn)產(chǎn)品就是 BT 發(fā)酵液，發(fā)酵液的有效成分是芽孢單體和單胞晶體。發(fā)酵液不需要經(jīng)過其它處理就直接灌裝，可以直接使用，而且產(chǎn)品對(duì)無(wú)害，無(wú)毒，主要銷售于非洲等地用于改善水質(zhì)，進(jìn)化水源。桿菌簡(jiǎn)稱是目前產(chǎn)量最大、使用最廣的生物殺蟲劑。它的主要活性成分是一種或數(shù)種殺蟲晶體蛋白，又稱-內(nèi)毒素，對(duì)鱗翅目、鞘翅目、雙翅目、膜翅目、同翅目等昆蟲，以及動(dòng)植物線蟲、蜱螨等節(jié)肢動(dòng)物都有特異

7、性的毒殺活性，而對(duì)非目標(biāo)生物安全因此，Bt殺蟲劑具有專一、高效和對(duì)人畜安全等優(yōu)點(diǎn)目前桿菌商品制劑已達(dá) 100 多種，是世界上應(yīng)用最為廣泛、用量最大、效果最好的微生物殺蟲劑，因而倍受人們關(guān)注。但是，商品 Bt 制劑在生產(chǎn)防治中也顯示出某些局限性，如速效性差、對(duì)高齡幼蟲不敏感、田間持效期短以及重組工程菌株遺傳性狀不穩(wěn)定等都已成為影響 Bt 進(jìn)一步成功推廣使用的制約。因此，為了提高 Bt 制劑的殺蟲效果，對(duì)其增效途徑的研究已成為世界性的研究熱點(diǎn)，主要包括：篩選增效菌株；利用化學(xué)添加劑、植物它感素、酶作為增效物質(zhì)；昆蟲病原微生物間的互作增效等。2 T605 生產(chǎn)工藝T605 制劑生產(chǎn)工藝流程相對(duì)比較簡(jiǎn)

8、單，冷凍的菌種通過兩次斜面和一次搖瓶培養(yǎng)，接種到罐，30、8.0 左右，進(jìn)行 24 個(gè)小時(shí)的菌種擴(kuò)大培養(yǎng)，之后移種到 18t 發(fā)酵罐中，在同樣的條件下，發(fā)酵約 48 個(gè)小時(shí)，當(dāng)芽孢囊體裂解，出芽孢和單胞晶體，添加防腐劑，質(zhì)檢，無(wú)雜菌后進(jìn)行灌裝。下圖是 T605 發(fā)酵的工藝流程圖。圖一 T605 發(fā)酵工藝流程圖 培養(yǎng)基的成分主要是酵母粉和玉米淀粉，加完水后用，用堿水調(diào)節(jié) 在 8.5 到 9.0；發(fā)酵條件：溫度 30， 為 8.0；培養(yǎng)時(shí)間：24h；發(fā)酵時(shí)間：48h；通氣速度：300m/h；接種量：5%-7%。 灌裝發(fā)酵罐滅菌罐滅菌搖瓶斜面斜面菌種T605 產(chǎn)品的特殊性，對(duì)產(chǎn)品的要求嚴(yán)格，發(fā)酵過程

9、不能染菌，發(fā)酵液不能帶任何雜菌，產(chǎn)品發(fā)酵完成后要加防腐劑，之后又要進(jìn)行質(zhì)檢，檢查有無(wú)染雜菌，無(wú)雜菌后才能灌裝。3 發(fā)酵罐和罐的滅菌由于 605 車間發(fā)酵的特殊性，對(duì)菌種的要求非常嚴(yán)格，發(fā)酵過程中不能出現(xiàn)任何的染菌的現(xiàn)象，所以對(duì)滅菌這塊要求非常之高。為此，605 車間對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行了空消和實(shí)消兩次滅菌，空消就是不裝培養(yǎng)液，只對(duì)罐和管道進(jìn)行滅菌；實(shí)消就是把培養(yǎng)液裝進(jìn)發(fā)酵罐或罐后，在進(jìn)行滅菌。605 車間對(duì)發(fā)酵罐的滅菌采用高壓蒸汽濕熱滅菌。3.1 滅菌前的準(zhǔn)備工作在通入蒸汽前，要進(jìn)行、檢修、試漏。檢修：對(duì)閥門，管道，壓力表、視鏡、罐體等進(jìn)行檢查；檢漏：用肥皂水對(duì)各個(gè)焊接口、閥門及閥門連接處、管道連接處

10、等進(jìn)行檢漏；確保生產(chǎn)工藝路線的嚴(yán)密性，無(wú)； 空消前排空降溫夾層，或蛇管中的水，關(guān)閉進(jìn)水閥和回水閥，打開上下排空閥；確保罐內(nèi)無(wú)雜物，蒸汽壓力可達(dá)到 0.3MP 以上；實(shí)罐滅菌時(shí)調(diào)節(jié)8.0-9.0，然后緊罐蓋。3.1 發(fā)酵罐的滅菌在完成了滅菌前的操作后，往發(fā)酵罐通入蒸汽，就可以進(jìn)行空罐液：堿水；滅菌了。根據(jù)發(fā)酵罐結(jié)構(gòu)（圖二），發(fā)酵罐滅菌通入蒸汽的系統(tǒng)有出料管系統(tǒng)、取樣管系統(tǒng)、空氣管系統(tǒng)、移種管系統(tǒng)和補(bǔ)料管系統(tǒng)。在進(jìn)行保壓的時(shí)候補(bǔ)料管進(jìn)汽一般會(huì)關(guān)閉，有時(shí)會(huì)進(jìn)行氣封。開始通入蒸汽后，等到溫度達(dá)到 110以上，壓力超過 0.1MPa 后，通過調(diào)節(jié)排氣閥進(jìn)行保壓，維持一個(gè)小時(shí)的保壓滅菌。圖二機(jī)械攪拌式發(fā)酵

11、罐3.2罐滅菌罐滅菌與發(fā)酵罐滅菌基本相同，空消與實(shí)消前都要做同樣的工作，唯一不同的就是一級(jí)罐的進(jìn)蒸汽系統(tǒng)分別是出料管系統(tǒng)、取樣管系統(tǒng)、空氣管系統(tǒng)和補(bǔ)料管系統(tǒng)，沒有移種管系統(tǒng)。滅菌時(shí)要注意：1、保壓前一定要將罐內(nèi)的空氣排凈，防止造成假壓，滅菌不徹底；2、蒸汽流量要適中，過大，造成浪費(fèi)，不安全；過小，滅菌不完全；3、保證蒸汽流通，不留死角。4 染菌對(duì)發(fā)酵的影響及其治理發(fā)酵染菌：指在發(fā)酵過程中生產(chǎn)菌以外的其他微生物侵入了發(fā)酵系統(tǒng)，從而使發(fā)酵過程失去真正意義上的純種培養(yǎng)。4.1 染菌對(duì)發(fā)酵的影響4.1.1 染菌對(duì)不同發(fā)酵過程的影響青霉素發(fā)酵過程：由于許多雜菌都能產(chǎn)生青霉素酶，因此不管染菌是發(fā)生在發(fā)酵前

12、期、中期或后期，都會(huì)使青霉素迅速分解破壞，使目的產(chǎn)物得率降低，危害十分嚴(yán)重。核苷或核苷酸發(fā)酵過程：由于所用的生產(chǎn)菌種是多種營(yíng)養(yǎng)缺陷型微生物，其生長(zhǎng)能力差，所需的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富，因此容易受到雜菌的污染，且染菌后，培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分迅速被消耗，嚴(yán)重抑制了生產(chǎn)菌的生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物的生成。檸檬酸等有機(jī)酸發(fā)酵過程：一般在產(chǎn)酸后發(fā)酵液的值比較低，雜菌生長(zhǎng)十分，在發(fā)酵中、后期不太會(huì)發(fā)生染菌，主要是要預(yù)防發(fā)酵前期染菌。谷氨酸發(fā)酵：周期短，生產(chǎn)菌繁殖快，培養(yǎng)基不太豐富，一般較少污染雜菌，但噬菌體污染對(duì)谷氨酸發(fā)酵的影響較大。4.1.2 染菌發(fā)生的不同時(shí)間對(duì)發(fā)酵的影響4.1.2.1培養(yǎng)期染菌培養(yǎng)主要是使微生物細(xì)胞生長(zhǎng)

13、與繁殖，此時(shí)，微生物菌體濃度低，培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)十分豐富，比較容易染菌。若將污染的帶入發(fā)酵罐，則危害極大，因此應(yīng)嚴(yán)格控制染菌的發(fā)生。一旦發(fā)現(xiàn)種子受到雜菌的污染，應(yīng)經(jīng)滅菌后棄去，并對(duì)罐、管道等進(jìn)行仔細(xì)檢查和徹底滅菌。4.1.2.2 發(fā)酵前期染菌在發(fā)酵前期，微生物菌體主要是處于生長(zhǎng)、繁殖階段，此時(shí)期代謝的產(chǎn)物很少，相對(duì)而言這個(gè)時(shí)期也容易染菌。染菌后的雜菌將迅速繁殖，與生產(chǎn)菌種爭(zhēng)奪培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，嚴(yán)重干擾生產(chǎn)菌的正常生長(zhǎng)、繁殖及產(chǎn)物的生成。4.1.2.3 發(fā)酵中期染菌發(fā)酵中期染菌將會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)大量消耗，并嚴(yán)重干擾生產(chǎn)菌的代謝，影響產(chǎn)物的生成。有的染菌后雜菌大量繁殖，產(chǎn)生酸性物質(zhì)，使值下降，糖

14、、氮等的消耗加速；菌體自溶，致使發(fā)酵液發(fā)粘，產(chǎn)生大量的，代謝產(chǎn)物的積累減少或停止；有的染菌后會(huì)使已生成的產(chǎn)物被利用或破壞。從目前的情況來看，發(fā)酵中期染菌一般較難挽救，危害性較大，在生產(chǎn)過程中應(yīng)盡力做到早發(fā)現(xiàn)、快處理。4.1.2.4 發(fā)酵后期染菌由于發(fā)酵后期培養(yǎng)基中的糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)已接近耗盡，且發(fā)酵的產(chǎn)物也已積累較多，如果染菌量不太多，對(duì)發(fā)酵影響相對(duì)來說就要小一些，可繼續(xù)進(jìn)行發(fā)酵。對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物來說，發(fā)酵后期染菌對(duì)不同的產(chǎn)物的影響也是不同的，如抗生素、檸檬酸的發(fā)酵，染菌對(duì)產(chǎn)物的影響不大；肌苷酸、谷氨酸等地發(fā)酵，后期染菌也會(huì)影響產(chǎn)物的產(chǎn)量、提取和產(chǎn)品的質(zhì)量。4.2 發(fā)酵異?，F(xiàn)象及原因分析發(fā)酵過程中的培養(yǎng)

15、和發(fā)酵的異?，F(xiàn)象是指發(fā)酵過程中某些物理參數(shù)、化學(xué)參數(shù)或生物參數(shù)發(fā)生與原有規(guī)律不同的改變，這些改變必然影響發(fā)酵水平，使生產(chǎn)蒙受損失。對(duì)此應(yīng)及時(shí)查明原因，加以解決。4.2.1培養(yǎng)和發(fā)酵的異常現(xiàn)象1、培養(yǎng)異常（表現(xiàn)為培養(yǎng)的質(zhì)量不合格）：菌體生長(zhǎng)緩慢；菌絲結(jié)團(tuán)；代謝不正常。2、發(fā)酵異常：菌體生長(zhǎng)差；值過高或過低；溶解氧水平異常；過多；菌體濃度過高或過低；菌體生長(zhǎng)差。4.2.2 染菌的檢查和判斷發(fā)酵過程是否染菌應(yīng)以無(wú)菌試驗(yàn)的結(jié)果為依據(jù)進(jìn)行判斷。在發(fā)酵過程中，如何及早發(fā)現(xiàn)雜菌的污染并及時(shí)采取措施加以處理，是避免染菌造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失的重要。因此，生產(chǎn)上要求能準(zhǔn)確、迅速的檢查出雜菌的污染。目前常用于檢查是否染

16、菌的無(wú)菌試驗(yàn)方法主要有：顯微鏡檢查法、肉湯培養(yǎng)法、平板（雙碟）培養(yǎng)法、發(fā)酵過程的異常觀察法（如溶氧量）等。此法檢查雜菌最簡(jiǎn)單、最直接、最常用。必要時(shí)還可進(jìn)行芽胞染色或鞭毛染色。1、顯微鏡檢查法（鏡檢法）用革蘭氏染色法（Grams stain）對(duì)樣品進(jìn)行涂片、染色，然后在顯微鏡下觀察微生物的形態(tài)特征，根據(jù)生產(chǎn)菌與雜菌的特征進(jìn)行區(qū)別、判斷是否染菌。如發(fā)現(xiàn)有與生產(chǎn)菌形態(tài)特征不一樣的其它微生物的存在，就可判斷為發(fā)生了染菌。2、肉湯培養(yǎng)法（用于檢查培養(yǎng)基和無(wú)菌空氣是否帶菌，同時(shí)此法也可用于噬菌體的檢查）通常用葡萄糖酚紅肉湯作為培養(yǎng)基，將待測(cè)樣品直接接入經(jīng)完全滅菌后湯培養(yǎng)基中，分別于 37、27進(jìn)行培養(yǎng)，

17、隨時(shí)觀察微生物的生長(zhǎng)情況，并取樣進(jìn)行鏡檢，判斷是否有雜菌。葡萄糖酚紅肉湯培養(yǎng)基配方：0.3牛肉膏、0.5葡萄糖、0.5NaCl、0.8蛋白胨、0.4酚紅溶液，7.2。3、平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法將待測(cè)樣品在無(wú)菌平板上劃線，分別于 37、27進(jìn)行培養(yǎng)，一般 24h 后即可進(jìn)行鏡檢觀察，檢查是否有雜菌。有時(shí)為了提高平板培養(yǎng)法的靈敏度，也可將需要檢查的樣品先置于 37培養(yǎng) 6h，使雜菌迅速增殖后再劃線培養(yǎng)。4、無(wú)菌試驗(yàn)時(shí)，如果肉湯連續(xù)三次發(fā)生變色反應(yīng)（紅色黃色）或產(chǎn)生混濁，或平板培養(yǎng)連續(xù)三次發(fā)現(xiàn)有異常菌落的出現(xiàn)，即可判斷為染菌；有時(shí)肉湯培養(yǎng)的陽(yáng)性反應(yīng)不夠明顯，而發(fā)酵樣品的各項(xiàng)參數(shù)確有可疑染菌，并

18、經(jīng)鏡檢等其它方法確認(rèn)連續(xù)三次樣品有相同類型的異常菌存在，也應(yīng)該判斷為染菌；一般來講，無(wú)菌試驗(yàn)湯或培養(yǎng)平板應(yīng)保存并觀察至本批（罐）放罐后 12h，確認(rèn)為無(wú)雜菌后才能棄去；無(wú)菌試驗(yàn)期間應(yīng)每 6h 觀察一次無(wú)菌試驗(yàn)樣品，以便能及早發(fā)現(xiàn)染菌。4.2.3 發(fā)酵染菌原因分析1、染菌的雜菌種類分析表 1染菌的雜菌種類分析2、發(fā)酵染菌的規(guī)模分析雜菌原因耐熱的芽胞桿菌培養(yǎng)基或設(shè)備滅菌不徹底、設(shè)備存在死角等球菌、無(wú)芽胞桿菌等帶菌、空氣過濾效率低、除菌不徹底、設(shè)備滲漏、操作問題等真菌設(shè)備或冷卻盤管滲漏、無(wú)菌室滅菌不徹底、無(wú)菌 操作不當(dāng)、糖液滅菌不徹底（糖液放置時(shí)間較長(zhǎng)）等表 2大批量發(fā)酵罐染菌：表 3部分發(fā)酵罐染菌

19、：個(gè)別發(fā)酵罐連續(xù)染菌（如果采用間歇滅菌工藝，一般不會(huì)發(fā)生）：大都由于設(shè)備滲漏造成，應(yīng)仔細(xì)檢查閥門、罐體或罐器是否清潔等。3、不同污染時(shí)間分析染菌發(fā)生在培養(yǎng)階段，或稱培養(yǎng)期染菌。通常是由帶菌、培養(yǎng)基或設(shè)備滅菌不徹底，以及接種操作不當(dāng)或設(shè)備等原因而引起染菌。在發(fā)酵過程的初始階段發(fā)生染菌，或稱發(fā)酵前期染菌。大部分也是由于帶菌、培養(yǎng)基或設(shè)備滅菌不徹底，以及接種操作不當(dāng)或設(shè)備、無(wú)菌空氣等原因而引起。染菌時(shí)期原因發(fā)酵前期帶菌、連消系統(tǒng)滅菌不徹底發(fā)酵后期中間補(bǔ)料染菌，如補(bǔ)料液帶菌、補(bǔ)料管滲漏染菌時(shí)期原因發(fā)酵前期帶菌、連消設(shè)備染菌發(fā)酵中、后期如雜菌類型相同，一般是空氣凈化系統(tǒng)存在空氣系統(tǒng)結(jié)構(gòu)不合理、空氣過濾介

20、質(zhì)失效等問題發(fā)酵后期染菌大部分是由空氣過濾不徹底、中間補(bǔ)料染菌、設(shè)備滲漏、頂蓋以及操作問題而引起。4.3 雜菌污染的預(yù)防4.3.1帶菌及其防治1、保藏斜面試管菌種染菌、培養(yǎng)基和器具滅菌不徹底、轉(zhuǎn)移和接種過程染菌、培養(yǎng)所涉及的設(shè)備和裝置染菌。2、嚴(yán)格控制無(wú)菌室的污染，根據(jù)生產(chǎn)工藝的要求和特點(diǎn)，建立相應(yīng)的無(wú)菌室，交替使用各種滅菌對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行處理；在時(shí)對(duì)砂土管、斜面、三角瓶及搖瓶均嚴(yán)格進(jìn)行管理，防止雜菌的進(jìn)入而受到污染。為了防止染菌保存管的棉花塞應(yīng)有一定的緊密度，且有一定的長(zhǎng)度，保存溫度盡量保持相對(duì)穩(wěn)定，不宜有太大變化；對(duì)每一級(jí)的培養(yǎng)物均應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌檢查，確保任何一級(jí)均未受雜菌污染后才能使用；對(duì)

21、菌種培養(yǎng)基或器具進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理，保證在利用滅菌鍋進(jìn)行滅菌前，先完全排除鍋內(nèi)的空氣，以免造成假壓，使滅菌的溫度達(dá)不到預(yù)定值，造成滅菌不徹底而使染菌。4.3.2 空氣帶菌及其防治要杜絕無(wú)菌空氣帶菌，就必須從空氣的凈化工藝和設(shè)備的設(shè)計(jì)、過濾介質(zhì)的選用和裝填、過濾介質(zhì)的滅菌和管理等方面完善空氣凈化系統(tǒng)。1、加強(qiáng)生產(chǎn)環(huán)境的衛(wèi)生管理，減少生產(chǎn)環(huán)境中空氣的含菌量，正確選擇采氣口，如提高采氣口的位置或前置粗過濾器，加強(qiáng)空氣壓縮前的預(yù)處理，如提高空壓機(jī)進(jìn)口空氣的潔凈度。2、設(shè)計(jì)合理的空氣預(yù)處理工藝，盡可能減少生產(chǎn)環(huán)境中空氣帶油、水量，提高進(jìn)入過濾器的空氣溫度，降低空氣的相對(duì)濕度，保持過濾介質(zhì)的干燥狀態(tài)，防止

22、空氣冷卻器漏水，防止冷卻水進(jìn)入空氣系統(tǒng)等。3、設(shè)計(jì)和安裝合理的空氣過濾器，防止過濾器失效。選用除菌效率高的過濾介質(zhì)，在過濾器滅菌時(shí)要防止過濾介質(zhì)被沖翻而造成短路，避免過濾介質(zhì)烤焦或著火，防止過濾介質(zhì)的裝填不均而使空氣走短路，保證一定的介質(zhì)充填密度。當(dāng)突然停止進(jìn)空氣時(shí)，要防止發(fā)酵液倒流入空氣過濾器，在操作中要防止空氣壓力的劇變和流速的急增。4.3.3 操作導(dǎo)致染菌及其防治1、通常對(duì)于淀粉質(zhì)培養(yǎng)滅菌采用實(shí)罐滅菌較好，一般在升溫前先通過攪拌混合均勻，并加入一定量的淀粉酶進(jìn)行液化；有大顆粒存在時(shí)應(yīng)先經(jīng)過篩除去，再行滅菌；對(duì)于麩皮、黃豆餅一類的固形物含量較多的培養(yǎng)基，采用罐外預(yù)先配料，再轉(zhuǎn)至發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行

23、實(shí)罐滅菌較為有效。2、在滅菌升溫時(shí)，要打開排氣閥門，使蒸汽能通過并驅(qū)除罐內(nèi)冷空氣，一般可避免“假壓”造成染菌。3、要嚴(yán)防升頂，盡可能添加消泡劑防止的大量產(chǎn)生。4、避免蒸汽壓力的波動(dòng)過大，應(yīng)嚴(yán)格控制滅菌溫度，過程最好采用自動(dòng)控溫。5、發(fā)酵過程越來越多的采用自動(dòng)控制，一些控制儀器逐漸被應(yīng)用。一般常采用化學(xué)試劑浸泡等方法來滅菌。4.3.4 設(shè)備滲漏或“死角”造成的染菌及其防治設(shè)備滲漏主要是指發(fā)酵罐、補(bǔ)糖罐、冷卻盤管、管道閥門等，由于化學(xué)腐蝕（發(fā)酵代謝所產(chǎn)生的有機(jī)酸等發(fā)生腐蝕作用）、電化學(xué)腐蝕、磨蝕、加工制作不良等原因形成微小漏孔后發(fā)生滲漏染菌。4.4 染菌的挽救和處理4.4.1培養(yǎng)期染菌的處理1、一

24、旦發(fā)現(xiàn)受到雜菌污染，該不能再接入發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵，應(yīng)經(jīng)滅菌后棄之，并對(duì)罐、管道等進(jìn)行仔細(xì)檢查和徹底滅菌。2、采用備用，選擇生長(zhǎng)生產(chǎn)無(wú)染菌的接入發(fā)酵罐，繼續(xù)進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。3、如無(wú)備用，則可選擇一個(gè)適當(dāng)菌齡的發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵液作為，進(jìn)行“倒種”處理，接入新鮮的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，從而保證發(fā)酵生產(chǎn)的正常進(jìn)行。4.4.2 發(fā)酵前期染菌的處理1、當(dāng)發(fā)酵前期發(fā)生染菌后，如培養(yǎng)基中的碳、氮源含量還比較高時(shí)，終止發(fā)酵，將培養(yǎng)基加熱至規(guī)定溫度，重新進(jìn)行滅菌處理后，再接入進(jìn)行發(fā)酵；2、如果此時(shí)染菌已造成較大的危害，培養(yǎng)基中的碳、氮源的消耗量已比較多，則可放掉部分料液，補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基，重新進(jìn)行滅菌處理后，再接種進(jìn)行發(fā)

25、酵。3、也可采取降溫培養(yǎng)、調(diào)節(jié)值、調(diào)整補(bǔ)料量、補(bǔ)加培養(yǎng)基等措施進(jìn)行處理。4.4.3 發(fā)酵中、后期染菌處理1、發(fā)酵中、后期染菌或發(fā)酵前期輕微染菌而發(fā)現(xiàn)較晚時(shí)，可以加入適當(dāng)?shù)貧⒕鷦┗蚩股匾约罢５陌l(fā)酵液，以抑制雜菌的生長(zhǎng)速度，也可采取降低培養(yǎng)溫度、降低通風(fēng)量、停止攪拌、少量補(bǔ)糖等其它措施，進(jìn)行處理。2、如果發(fā)酵過程的產(chǎn)物代謝已達(dá)到一定水平，此時(shí)產(chǎn)品的含量若達(dá)一定值，只要明確是染菌也可放罐。3、對(duì)于沒有提取價(jià)值得發(fā)酵液，廢棄前應(yīng)加熱至 120以上、保持 30min 后才能排放。4.4.4 染菌后對(duì)設(shè)備的處理染菌后的發(fā)酵罐在重新使用前，必須在放罐后進(jìn)行徹底，空罐加熱滅菌至 120以上、保持 30mi

26、n 后才能使用。也可用熏蒸或溶液浸泡 12h 以上等方法進(jìn)行處理。4.5 噬菌體污染及其防治1、癥狀：發(fā)酵液光密度不上升或回降； 值逐漸上升；氨利用停止；糖耗、緩慢或停止；產(chǎn)生大量，使發(fā)酵液呈粘膠狀；鏡檢時(shí)菌體數(shù)量顯著減少，甚至找不到完整菌體；發(fā)酵周期延長(zhǎng)、產(chǎn)物生成量減少或停止等。2、根源：環(huán)境污染噬菌體是造成噬菌體的主要根源。3、防治：嚴(yán)禁活菌體排放，切斷噬菌體的“根源”；做好環(huán)境衛(wèi)生，消滅噬菌體與雜菌；嚴(yán)防噬菌體與雜菌進(jìn)入罐或發(fā)酵罐內(nèi)；抑制罐內(nèi)噬菌體的生長(zhǎng)；輪換使用菌種或使用抗性菌株。4、挽救措施盡快提取產(chǎn)品；藥物抵抗（如四環(huán)素可抵抗乳糖桿菌噬菌體；吐溫 60 等表面活性劑可抑制噬菌體的增

27、殖和吸附）；罐內(nèi)滅噬菌體法（60-70，5min 可滅活）。5 閥門的種類和用途5.1 閥門按用途和作用分類1、截?cái)嚅y類： 主要用于截?cái)嗷蚪油ń橘|(zhì)流。包括閘閥、截止閥、隔膜閥、旋塞閥、球閥、蝶閥等。2、調(diào)節(jié)閥類： 主要用于調(diào)節(jié)介質(zhì)的流量、壓力等。包括調(diào)節(jié)閥、節(jié)流閥、減壓閥等。3、止回閥類：用于介質(zhì)倒流。包括各種結(jié)構(gòu)的止回閥。4、分流閥類：用于分配、分離或混合介質(zhì)。包括各種結(jié)構(gòu)的分配閥和疏水閥等。5、安全閥類：用于超壓安全保護(hù)。包括各種類型的安全閥5.2 605 發(fā)酵車間所用閥門的介紹5.2.1 隔膜閥隔膜閥的結(jié)構(gòu)形式與一般閥門大不相同，是一種新型的閥門，是一種特殊形式的截?cái)嚅y，它的啟閉件是一塊

28、用軟質(zhì)材料制成的隔膜，把閥體內(nèi)腔與閥蓋內(nèi)腔及驅(qū)動(dòng)隔開，現(xiàn)廣泛使用在各個(gè)領(lǐng)域。常用的隔膜閥有襯膠隔膜閥、襯氟隔膜閥、無(wú)襯里隔膜閥隔膜閥。自身特點(diǎn)1、流體阻力小。2、能用于含硬質(zhì)懸浮物的介質(zhì)；由于介質(zhì)只與閥體和隔膜接觸，所以無(wú)需填料函，不存在填料函泄漏問題，對(duì)閥桿部分無(wú)腐蝕可能。3、適用于有腐蝕性、粘性、漿液介質(zhì)。4、不能用于壓力較高的場(chǎng)合。5.2.2 球閥球閥用于流體的調(diào)節(jié)與控制，其中硬密封 V 型球閥其 V 型球芯與堆焊硬質(zhì)合金的金屬閥座之間具有很強(qiáng)的剪切力，特別適用于含、微小固體顆料等的介質(zhì)。而多通球閥在管道上不僅可靈活控制介質(zhì)的合流、分流、及流向的切換，同時(shí)也可關(guān)閉任一通道而使另外兩個(gè)通道

29、相連。本類閥門在管道中一般應(yīng)當(dāng)水平安裝。球閥分類：氣動(dòng)球閥，電動(dòng)球閥，手動(dòng)球閥。球閥的優(yōu)點(diǎn)1、流體阻力小，全通徑基本沒有流阻。2、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、體積小、重量輕。3、緊密可靠。它有兩個(gè)密封面，而且球閥的密封面材料廣泛使用各種，密封性好，能實(shí)現(xiàn)完全密封。在真空系統(tǒng)中也已廣泛使用。4、操作方便，開閉迅速，高性能球閥從全開到全關(guān)只要旋轉(zhuǎn)90，便于遠(yuǎn)距離的控制。5、維修方便，球閥結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，密封圈一般都是活動(dòng)的，拆卸更換都比較方便。6、在全開或全閉時(shí)，球體和閥座的密封面與介質(zhì)，介質(zhì)通過時(shí)，不會(huì)引起閥門密封面的侵蝕。7、適用范圍廣，通徑從小到幾毫米，大到，從高真空至高壓力都可應(yīng)用。8、由于球閥在啟閉過程中有擦拭

30、性，所以可用于帶懸浮固體顆粒的介質(zhì)中。加工精度高，造價(jià)昂貴，高溫中不易使用，如管道內(nèi)有雜質(zhì)，容易被雜質(zhì)堵塞，導(dǎo)致閥門無(wú)法打開。5.2.3 閘閥閘閥的啟閉件是閘板，閘板的運(yùn)動(dòng)方向與流體方向相垂直，閘閥只能作全開和全關(guān),不能作調(diào)節(jié)和節(jié)流。閘板有兩個(gè)密封面,最常用的模式閘板閥的兩個(gè)密封面形成楔形、楔形角隨閥門參數(shù)而異,通常為5,介質(zhì)溫度不高時(shí)為252。楔式閘閥的閘板可以做成一個(gè)整 體，叫做剛性閘板；也可以做成能產(chǎn)生微量變形的閘板,以改善其工藝性,彌補(bǔ)密封面角度在加工過程中產(chǎn)生的偏差,這種閘板叫做彈性閘板。閘閥關(guān)閉時(shí),密封面可以只依靠介質(zhì)壓力來密封,即依靠介質(zhì)壓力將閘板的密封面壓向另一側(cè)的閥座來保證密封面的密封，這就是自密封。大部分閘閥是采用強(qiáng)制密封的,即閥門關(guān)閉時(shí)，要依靠外力強(qiáng)行將閘板壓向閥座,以保證密封面的密封性。閘閥的閘板隨閥桿一起作直線運(yùn)動(dòng)的，叫升降桿閘閥亦叫明桿閘閥。通常在升降桿上有梯形螺紋，通過閥門頂端的螺母以及閥體上的導(dǎo)槽，將旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)變?yōu)橹本€運(yùn)動(dòng),也就是將操作轉(zhuǎn)矩變?yōu)椴僮魍屏?。開啟閥門時(shí)，當(dāng)閘板高度等于閥門通徑的 1：1 倍時(shí)，流體的通道完全暢通，但在運(yùn)行時(shí)，此位置是無(wú)法監(jiān)視的。實(shí)際使用時(shí)，是以閥桿的頂點(diǎn)作為標(biāo)志，即開不動(dòng)的位置，作為它的全開位置。為考慮溫度變化出現(xiàn)鎖死現(xiàn)象,通常在開到頂點(diǎn)位置上,再倒