臨床免疫學檢驗：第18章 免疫自動化儀器分析及應用

1、第十八章 免疫自動化儀器分析及應用(Chapter 17 automation of immunoassays and its application)臨床免疫學檢驗第十八章 免疫自動化儀器分析及應用第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)第二節(jié) 自動化化學發(fā)光分析系統(tǒng)第三節(jié) 自動化熒光免疫分析系統(tǒng)第四節(jié) 自動化酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)第五節(jié) 免疫自動化儀器分析選擇與應用第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)免疫檢驗自動化（automation of immunoassays）是將免疫檢驗過程中的取樣、加試劑、混合、溫育、固相載體分離、信號檢測、數(shù)據(jù)處理、結果報告和檢測后的儀器清洗等步驟由計算機控制，儀器自動完成整個免

2、疫檢驗過程。優(yōu)點減輕了勞動強度縮短了分析流程提高了試驗結果的精確度和準確度第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)免疫比濁法透射免疫比濁法（turbidimetric immunoassay）散射免疫比濁法（nephelometry immunoassay）速率散射比濁法定時散射比濁法第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)一、免疫透射比濁法原理液相沉淀反應比濁劑抗體過量吸光度與抗原量呈正比波長：340nm第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)一、免疫透射比濁法原理儀器工作過程 試劑區(qū) 試劑針 樣本區(qū)和稀釋液 加樣針 反應區(qū) 清洗工作站124365124365第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)一、免疫透射比濁法原理儀器工作過

3、程方法評價靈敏度較好抗體用量較大免疫復合物要足夠大，足夠多耗時長第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)二、免疫膠乳比濁法原理第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)二、免疫膠乳比濁法原理方法評價靈敏度提高類風濕因子的測定會出現(xiàn)非特異性凝集免疫膠乳輕度自凝或抗體活性降低第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法原理散射光強度與顆粒的分子量、數(shù)目、大小及入射光強度呈正比；與微粒至檢測器的距離、入射光波長呈反比。II042（dn/dc) 2 Mc(1+cos) N24第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法原理散射光強度與顆粒的分子量、數(shù)目、大小及入射光強度呈正比；與微粒至檢測器的距離、入射光波長呈反比

4、。不同大小微粒形成的散射光分布不同，選用適當?shù)慕嵌葴y量散射光強度。第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法原理 顆粒直徑1/10 Rayleigh 散射1/10顆粒直徑 Debye 散射 顆粒直徑 Mile 散射第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法定時散射比濁法預反應階段：避開抗原抗體反應的不穩(wěn)定階段（7.5-120秒）反應階段：在抗原抗體反應的最佳階段讀數(shù)（2-6min）抗原過量檢測 抗體過量 抗原過量閾值限定第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法定時散射比濁法第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法速率散射比濁法速率指抗原抗體反應在單位時間內形成的免疫

5、復合物的量。第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法速率散射比濁法原理速率指抗原抗體反應在單位時間內形成的免疫復合物的量。速率峰指單位時間內免疫復合物形成量最多的速率。速率峰與抗原濃度呈正相關抗原濃度-速率峰反應曲線第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法速率散射比濁法第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法速率散射比濁法原理速率指抗原抗體反應在單位時間內形成的免疫復合物的量。速率峰指單位時間內免疫復合物形成量最多的速率。速率峰與抗原濃度呈正相關抗原濃度-速率峰反應曲線第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法速率散射比濁法原理第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免

6、疫散射比濁法速率散射比濁法原理速率指抗原抗體反應在單位時間內形成的免疫復合物的量。速率峰指單位時間內免疫復合物形成量最多的速率。速率峰與抗原濃度呈正相關抗原濃度-速率峰反應曲線抗原過量檢測第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法速率散射比濁法第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)三、免疫散射比濁法速率散射比濁法原理速率指抗原抗體反應在單位時間內形成的免疫復合物的量。速率峰指單位時間內免疫復合物形成量最多的速率。速率峰與抗原濃度呈正相關抗原濃度-速率峰反應曲線抗原過量檢測方法評價：靈敏度高第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)四、免疫濁度分析的影響因素抗原抗體比例抗體的質量增濁劑的使用偽濁度入射光光源和

7、波長計量單位標準曲線的制備與質量控制第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)檢測菜單（舉例介紹，并不包含全部）第一節(jié) 自動化免疫濁度分析系統(tǒng)檢測菜單（舉例介紹，并不包含全部）自身免疫性疾病免疫球蛋白A (IGA) 免疫球蛋白G (IGG) 免疫球蛋白M (IGM) 補體C3 (C3) 補體C4 (C4) 輕鏈(KAP) 輕鏈(LAM) Free 輕鏈* Free 輕鏈*C-反應蛋白(CRP) 觸珠蛋白(HPT) 備解素B因子(PFB)類風濕因子(RF)炎癥狀態(tài)監(jiān)測白蛋白(ALB)-酸性糖蛋白(AAG)抗胰蛋白酶(AAT)銅藍蛋白(CER) C-反應蛋白(CRP) 觸珠蛋白(HPT) 類風濕性關節(jié)炎類風濕

8、因子(RF)C-反應蛋白(CRP)抗鏈球菌溶血素O(ASO) ADNase-B腎功能監(jiān)測尿微白蛋白(MA)尿免疫球蛋白(IGU)尿轉鐵蛋白(TRU)1微球蛋白(A1M)2巨球蛋白(AMG)2 微球蛋白*胱抑素C*傳染病抗DNA酶B(DNB)抗鏈球菌溶血素O(ASO)2 微球蛋白*貧血抗凝血酶III (AT3)鐵蛋白(FER)轉鐵蛋白(TRF)觸珠蛋白(HPT)免疫功能障礙評估免疫球蛋白A (IGA)免疫球蛋白E (IGE)免疫球蛋白G (IGG)免疫球蛋白M (IGM)IgG1亞型*IgG2亞型* IgG3亞型* IgG4亞型* 輕鏈(KAP)輕鏈(LAM)補體C3 (C3)補體C4 (C4)C-反應蛋白(CRP)超敏CRP (CRPH)肝臟疾病抗胰蛋白酶(AAT) 抗凝血酶III (AT3) 銅藍蛋白(CER)補體C3(C3)補體C4(C4)免疫球蛋白A(IGA)免疫球蛋白M(IGM)尿轉鐵蛋白(TRU)前白蛋白(PAB)第四節(jié) 自動化酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)一、儀器組成與性能步驟固相包被加樣溫育洗滌加酶結合物溫育洗滌加底物溫育比色第四節(jié) 自動化酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)一、儀器組成與性能條形碼識別系統(tǒng)樣本架和加樣系統(tǒng)試劑架溫育系