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1、實驗3減數(shù)分裂制片技術和顯微鏡觀察一、實驗目的學習花粉母細胞涂抹制片技術,觀察細胞減數(shù)分裂時期染色體變化規(guī)律及特征并繪圖。觀察花蕾或花藥長度與減數(shù)分裂時期的關系。二、實驗原理減數(shù)分裂是生物在性母細胞成熟形成配子過程中發(fā)生的一種特殊有絲分裂,它包括連續(xù)兩次的細胞分裂階段,最終分裂為染色體數(shù)目減半的四個子細胞,從而發(fā)育為雌性或雄性配子(n)。由于植物花藥取材容易,操作和鑒定比較方便,故一般都取用花粉母細胞作為減數(shù)分裂制片材料。在生物發(fā)育的適宜時期取樣、固定、涂片等程序,便可在顯微鏡下觀察到減數(shù)分裂過程中染色體的行為變化。三、實驗材料lily百合(2n=24)四、實驗步驟(一)取材lily百合:通常
2、花蕾長度18mm(花藥長度8mm)時為花粉母細胞分裂始期?;ɡ偌s40mm(花藥長17mm)時為減數(shù)分裂終期。釆集18-40mm不同長度的花蕾,固定,保存。(二)制片從小花中取出花藥13枚置于載玻片滴一滴醋酸洋紅溶液用鑷子按壓花藥去盡肉眼可見殘渣盼染色2分鐘睜蓋上蓋玻片盼在低倍鏡下尋找花粉母細胞睜高倍鏡下觀察各分裂相細胞染色體的特征及變化規(guī)律.選擇典型分裂相的臨時片12張盼在酒精燈火焰上緩緩烘干(不能沸騰!盼將玻片放入液氮罐,在液氮表面冷凍1分鐘取出玻片放在白紙上,手按蓋玻片一邊,用刀片從另一邊將蓋玻片揭開置于白紙上(有材料的一面朝上)少滴一滴中性樹膠在載玻片上的材料處原位蓋上蓋玻片樹膠凝固后鏡
3、檢。1.取花藥1枚(截)置載玻片中央2.加1滴染色液用鑷子按壓,并鑷除可見殘渣4.放上蓋玻片(三)顯微鏡觀察先在低倍鏡下尋找具分裂相的花粉母細胞,然后依次轉(zhuǎn)換到高倍鏡觀察減數(shù)分裂各個時期染色體的行為和形態(tài)特征。區(qū)分4類細胞:形狀較大,圓形,核大,著色較淺的是花粉母細胞。形狀較小、著色較深的是花藥壁體細胞。形狀居中略呈扇形的是四分體的小孢子。形狀較大,內(nèi)部透明并有明顯外殼的是成熟的花粉粒。五、實驗作業(yè)1.在實驗課中完成制作細胞減數(shù)分裂各時期圖象片子1-2張2.花發(fā)育進度與染色體的動態(tài)變化關系花蕾(花藥)序號12345花蕾(花藥)長度1.11.31.41.51.6細胞主要處在的分裂時期細線期偶線期粗線期雙線期3.繪制細胞學片子的分裂相,并作染色體行為特征的描述。1.1前期I細線期圖象和行為特征一核內(nèi)染色體呈細長線狀,互相纏繞,難以辨別成雙的染色體。色單體之間發(fā)此期可清楚1.5.前期雙線期圖象和行為特征各對同源染色體開始分開,由于在粗線期非姐妹染生了交換,因而同源染色體在一定區(qū)段間出現(xiàn)交叉,地觀察到交叉現(xiàn)象。1.4前期I粗線期圖象和行為特征:配對后的染色體逐漸縮短變粗,含有兩條姐妹樣一個二價體包含了四條染色單體,故又稱為期間各同源染色體的非姐妹染色單體間可能發(fā)1.3偶線期圖象和行為特征同源染色體相互縱向靠攏配對,稱為聯(lián)會。這對同源染色體,稱為二價體。偶線期所
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