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1、 口蹄疫監(jiān)測(cè)計(jì)劃(一)監(jiān)測(cè)目的了解口蹄疫病原感染分布情況及高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域的發(fā)病情況,跟蹤監(jiān)測(cè)病毒變異特點(diǎn)與趨勢(shì),查找傳播風(fēng)險(xiǎn)因素。評(píng)估畜群免疫效果,掌握群體免疫狀況。(二)監(jiān)測(cè)對(duì)象豬、牛、羊、鹿等偶蹄類動(dòng)物。(三)監(jiān)測(cè)范圍對(duì)豬、牛、羊、鹿等偶蹄類動(dòng)物的種畜場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)、散養(yǎng)戶、屠宰場(chǎng)等進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在做好口蹄疫監(jiān)測(cè)的同時(shí),對(duì)豬塞內(nèi)卡病毒進(jìn)行摸底調(diào)查。注:散養(yǎng)戶以一個(gè)自然村為一個(gè)監(jiān)測(cè)采樣的流行病學(xué)單元。(四)監(jiān)測(cè)時(shí)間養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)、屠宰場(chǎng)等上、下半年各進(jìn)行一次集中監(jiān)測(cè),分別在5月底前和11月底前完成。(五)監(jiān)測(cè)方式1. 被動(dòng)監(jiān)測(cè)各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心收到任何單位和個(gè)人發(fā)現(xiàn)豬、牛、羊、鹿等偶蹄動(dòng)物或野生

2、動(dòng)物出現(xiàn)水泡、跛行、爛蹄等類似口蹄疫癥狀的報(bào)告,應(yīng)及時(shí)采樣進(jìn)行監(jiān)測(cè)。2. 主動(dòng)監(jiān)測(cè)(1)病原監(jiān)測(cè)采用先抽取場(chǎng)群,在場(chǎng)群內(nèi)再抽取個(gè)體的抽樣方式開(kāi)展監(jiān)測(cè)采樣。選擇場(chǎng)群時(shí)要考慮豬、牛、羊、鹿等偶蹄類動(dòng)物的種畜場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)、散養(yǎng)戶、屠宰場(chǎng)的比例。(2)抗體監(jiān)測(cè)選擇場(chǎng)群時(shí)要綜合考慮豬、牛、羊、鹿等偶蹄類動(dòng)物的種畜場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)、散養(yǎng)戶及屠宰場(chǎng)的比例。(六)監(jiān)測(cè)分工和數(shù)量1. 市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)全市原種豬場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)、原種羊場(chǎng)、種公牛站、種牛場(chǎng),以及XX農(nóng)場(chǎng)的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)、牛場(chǎng)免疫抗體和感染抗體監(jiān)測(cè),以及全市所有O-P液樣品的病原學(xué)監(jiān)測(cè)。采集本市所有原種豬場(chǎng)血清和扁桃體樣品,血清樣品每場(chǎng)每次不少

3、于30份,扁桃體樣品每場(chǎng)每次不少于15份;采集所有生豬屠宰場(chǎng)血清和頜下淋巴結(jié)樣品,每場(chǎng)每次各不少于30份;采集2個(gè)原種羊場(chǎng)血清和O-P液樣品,血清樣品每場(chǎng)每次不少于70份,O-P液樣品每場(chǎng)每次不少于30份;采集種公牛站、種牛場(chǎng)的血清和O-P液樣品,血清樣品每場(chǎng)每次不少于80份,O-P液樣品每場(chǎng)每次不少于30份。XX農(nóng)場(chǎng)生豬養(yǎng)殖場(chǎng)血清樣品每場(chǎng)每次不少于15頭份,豬扁桃體或全血樣品每場(chǎng)每次不少于5頭份;牛場(chǎng)血清樣品每場(chǎng)每次不少于15份。2. 各區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)轄區(qū)內(nèi)擴(kuò)繁豬場(chǎng)、規(guī)模豬場(chǎng)(家庭農(nóng)場(chǎng))、奶牛場(chǎng)、擴(kuò)繁羊場(chǎng)、規(guī)模羊場(chǎng)(專業(yè)戶)的免疫抗體和感染抗體監(jiān)測(cè)。采集所有擴(kuò)繁豬場(chǎng)、規(guī)模豬場(chǎng)血清

4、樣品,每場(chǎng)每次不少于30頭份;采集5戶生豬家庭農(nóng)場(chǎng)或養(yǎng)羊?qū)I(yè)戶血清樣品,每戶每次不少于15頭份;采集所有奶牛場(chǎng)、擴(kuò)繁羊場(chǎng)、規(guī)模羊場(chǎng)血清樣品,每場(chǎng)每次不少于30頭份;通過(guò)國(guó)家疫病凈化場(chǎng)認(rèn)證的奶牛場(chǎng),每場(chǎng)每次采集O-P液不少于30份,送市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心檢測(cè)。(七)檢測(cè)方法1. 病原檢測(cè)食道一咽部分泌物(O-P液)、頜下淋巴結(jié)和扁桃體,采用RT-PCR或熒光RT-PCR方法檢測(cè)O型、A型口蹄疫病原。牛羊豬口蹄疫感染情況采用非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP)抗體ELISA方法檢測(cè)。對(duì)NSP抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的,牛羊采集O-P液用RT-PCR或熒光RT-PCR方法檢測(cè),如檢測(cè)結(jié)果為陰性,應(yīng)間隔15天再采樣檢測(cè)一

5、次,RT-PCR檢測(cè)陽(yáng)性的判定為陽(yáng)性畜。生豬屠宰場(chǎng)采集頜下淋巴結(jié),養(yǎng)豬場(chǎng)采集扁桃體。豬頜下淋巴結(jié)或扁桃體RT-PCR檢測(cè)陽(yáng)性的判定為陽(yáng)性豬。對(duì)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)采集的生豬樣品,在免疫狀況下,對(duì)NSP抗體檢測(cè)陽(yáng)性的,2-4周后(期間不能進(jìn)行免疫)對(duì)豬進(jìn)行二次采樣檢測(cè)(兩次采樣檢測(cè)的豬要保持一致)。第二次NSP抗體陽(yáng)性率等于或低于首次檢測(cè)結(jié)果的,可排除感染。2. 非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測(cè)采用非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA方法進(jìn)行檢測(cè)。3. 免疫抗體檢測(cè)豬免疫28天后,其他畜免疫21天后,采集血清樣品進(jìn)行免疫效果監(jiān)測(cè)。O型口蹄疫抗體:液相阻斷ELISA或正向間接血凝試驗(yàn),合成肽疫苗采用VP1結(jié)構(gòu)蛋白ELISA進(jìn)行檢測(cè);A型口蹄疫抗體:液相阻斷ELISA。(八)判定標(biāo)準(zhǔn)1. 免疫合格個(gè)體 正向間接血凝試驗(yàn):牛、羊抗體效價(jià)28;豬抗體效價(jià)27; 液相阻斷ELISA:抗體效價(jià)26; VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA:抗體效價(jià)25。 2. 免疫合格群體 免疫合格個(gè)體數(shù)量占群體總數(shù)的70%(含)以上。 3. 疑似陽(yáng)性個(gè)體 免疫家畜非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測(cè)陽(yáng)性的; 未免疫家畜血清抗體檢測(cè)陽(yáng)性的; 牛羊的食道一咽部分泌物(O-P液),豬的頜下淋巴結(jié)或扁桃體用RT-PCR或熒光RT-PCR方法檢測(cè),結(jié)果為陽(yáng)性的。4. 疑似陽(yáng)性群體群體內(nèi)至少檢

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