肌肉植入試驗課件

1、肌肉植入試驗課件肌肉植入試驗課件動物的選擇 短期植入（12周以內(nèi)）試驗首選動物為大鼠、兔。 長期植入（12周以上）可選擇兔、狗、羊、山羊、豬等壽命相對長的動物。 我們目前選擇的動物為新西蘭白兔，體重2kg 動物的選擇 短期植入（12周以內(nèi)）試驗首選動物為 對于短期植入，動物選擇與植入周期如下： 植入周期 對于短期植入，動物選擇與植入周期如下：植入周期植入周期對于長期植入，動物選擇與植入周期如下：植入周期對于長期植入，動物選擇與植入周期如下：試驗?zāi)康?采用植入后局部反應(yīng)試驗，評估受試物植入家兔肌肉組織后的刺激和毒性反應(yīng)。 試驗?zāi)康?采用植入后局部反應(yīng)試驗，評估受試物植入家植入樣品的制備1. 固體

2、材料（不包括粉劑） 植入物應(yīng)該經(jīng)過與最終產(chǎn)品相同的制造、處理、清潔和滅菌過程，確保植入物未被損壞并且是無菌的。 規(guī)格要求：長10mm，寬13mm，邊緣光滑。植入樣品的制備1. 固體材料（不包括粉劑）植入樣品的制備2. 非固體材料（包括粉劑、液體、半固體等） 植入物應(yīng)該經(jīng)過與最終產(chǎn)品相同的制造、處理、清潔和滅菌過程。 無菌條件下將樣品填充至兩端開口的PP、PE、或者PTFE空心小管內(nèi)，填充物與管口齊平，并防止中間有空氣。植入樣品的制備2. 非固體材料（包括粉劑、液體、半固體等）對照樣品的制備 對照樣品的尺寸、形狀、表面條件應(yīng)盡可能與試驗樣品一致。 對照樣品的處理、清洗及滅菌方式應(yīng)盡可能與試驗樣品

3、一致。對照樣品的制備 對照樣品的尺寸、形狀動物的麻醉 10%水合氯醛耳緣靜脈注射，2ml/kg 氯胺酮肌肉注射，50mg/kg 戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射，30mg/kg 實際麻醉過程中，由于動物體質(zhì)狀況等的差異，需適量調(diào)整劑量。動物的麻醉 10%水合氯醛耳緣靜脈注射，2ml/ 固定兔，去除背部肌肉上方約1020cm面積的兔毛。用碘伏和75%乙醇清潔暴露皮膚。水合氯醛麻醉。 將載有對照樣品的穿刺針與表面皮膚呈45角插入肌肉，當(dāng)回抽穿刺針時,用細(xì)探針將樣品留于肌肉中。每只家兔左側(cè)肌肉植入四個對照樣品；右側(cè)直接用樣品肌肉注射四個點，每點0.2ml。 較大的不能用穿刺針植入的樣品，用外科手術(shù)方法植入。

4、植入過程中需注意無菌。 植入完成后注射適量青鏈霉素防止感染。 植入過程 固定兔，去除背部肌肉上方約1020cm面積的植入后臨床觀察 植入后每天觀察動物的一般狀況，如 精神狀態(tài)、被毛光澤、眼神、反應(yīng)等。 植入后每天觀察植入點皮膚反應(yīng)，有無出血、紅腫、壞死和試驗樣品排出等異?，F(xiàn)象。 植入后臨床觀察 植入后每天觀察動物的一般狀況，如 于四周后，將家兔無痛處死，解剖并觀察植入部位有無皮下和肌肉異常病變，在低倍放大鏡下觀察組織反應(yīng)（包括出血腫、水腫、囊腫和增生），并記錄。 解剖觀察 于四周后，將家兔無痛處死，解剖并觀察植入部位有 取出脊柱兩側(cè)肌肉，切取包裹試樣周圍0.51.0cm的肌肉組織，然后放置于1

5、0福爾馬林溶液中固定。 組織保存 取出脊柱兩側(cè)肌肉，切取包裹試樣周圍0.5 組織學(xué)觀察 固定之后，肌肉組織標(biāo)本經(jīng)修整、包埋、切片等步驟，再進(jìn)行常規(guī)HE染色。 于光學(xué)顯微鏡下觀察，比較供試品與對照品周圍的組織反應(yīng)，纖維囊腔厚度，炎癥細(xì)胞和其他細(xì)胞存在情況及試樣/組織界面處的其他異常情況等。 組織學(xué)觀察 固定之后，肌肉組織標(biāo)本經(jīng)修整、組織學(xué)評價體系評分01234嗜中性粒細(xì)胞0極少,1-5/phf5-10/phf大量浸潤大量堆積淋巴細(xì)胞0極少,1-5/phf5-10/phf大量浸潤大量堆積漿細(xì)胞0極少,1-5/phf5-10/phf大量浸潤大量堆積巨噬細(xì)胞0極少,1-5/phf5-10/phf大量浸

6、潤大量堆積巨細(xì)胞0極少,1-5/phf5-10/phf大量浸潤大量堆積壞死0輕微輕度重度嚴(yán)重新生血管0局灶性毛細(xì)血管增生1-3個小芽4-7支毛細(xì)血管增生并有成纖維細(xì)胞支持大量毛細(xì)血管增生并有成纖維細(xì)胞支持毛細(xì)血管廣泛增生并有成纖維細(xì)胞支持纖維化0窄束中等厚度較厚廣泛纖維化脂肪浸潤0極少脂肪浸潤和纖維化少量脂肪浸潤和纖維化植入部位大量堆積脂肪細(xì)胞脂肪細(xì)胞完全包裹植入物phf= 每高倍視野（400）組織學(xué)評價體系評分01234嗜中性粒細(xì)胞0極少,1-5/ph 評分標(biāo)準(zhǔn)無刺激0.0 2.9輕度刺激3.0 8.9重度刺激9.0 -15.0重度刺激15 樣品組得分減去陰性對照組得分即為試驗樣品的最終得分。 評分標(biāo)準(zhǔn)無刺激0.0參考文獻(xiàn)醫(yī)療器械的生物學(xué)評價 第 6 部分: 植入后局部反應(yīng)試驗ISO 10993-6:2007醫(yī)療器械的生物學(xué)評價 第12部分: 樣品制備和參照樣品ISO 10993-12:2007醫(yī)療器械的生物學(xué)評