TLC顯色試劑及配方

1、TLC 顯色試劑及配方顯色劑可以分成兩大類：一類是檢查一般有機(jī)化合物的通用顯色劑；另一類是根據(jù)化合物分類或特殊官能團(tuán)設(shè)計(jì)的專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多，本章只能列舉一些常用的顯色劑。l 通用顯色劑硫酸常用的有四種溶液：硫酸-水（1： 1）溶液；硫酸-甲醇或乙醇（1： 1）溶液；1.5mol/L硫酸溶液與0.5-1.5mol/L硫酸銨溶液，噴后110oC烤15min，不同有機(jī)化合物顯不同顏色。）.5 %碘的氯仿溶液對(duì)很多化合物顯黃棕色。中性 0.05高錳酸鉀溶液 易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。堿性高錳酸鉀試劑 還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色。溶液I： 1%高錳酸鉀溶液；溶液II： 5 %碳

2、酸鈉溶液；溶液I和溶液II等量混合應(yīng)用。酸性高錳酸鉀試劑 噴1.6%高錳酸鉀濃硫酸溶液（溶解時(shí)注意防止爆炸），噴后薄層于180oC加熱152）min。酸性重鉻酸鉀試劑 噴5%重鉻酸鉀濃硫酸溶液，必要時(shí)150oC烤薄層。5%磷鉬酸乙醇溶液噴后120oC烘烤，還原性化合物顯藍(lán)色，再用氨氣薰，則背景變?yōu)闊o色。鐵氰化鉀-三氯化鐵試劑 還原性物質(zhì)顯藍(lán)色，再噴2mol / L鹽酸溶液，則藍(lán)色加深。溶液I： 1%鐵氰化鉀溶液；溶液II： 2%三氯化鐵溶液；臨用前將溶液I和溶液II等量混合。2專屬性顯色劑由于化合物種類繁多，因此專屬性顯色劑也是很多的，現(xiàn)將在各類化合物中最常用的顯色劑列舉如下：（1）烴類硝酸銀

3、/過氧化氫檢出物：鹵代烴類。溶液：硝酸銀O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇100ml，用丙酮稀釋至200ml，再加30%過氧化氫1滴。方法：噴后置未過濾的紫外光下照射；結(jié)果：斑點(diǎn)呈暗黑色。熒光素/溴檢出物：不飽和烴。溶液：I.熒光素0.1g溶于乙醇100ml；II. 5%溴的四氯化碳溶液。方法：先噴（I）,然后置含溴蒸氣容器內(nèi)，熒光素轉(zhuǎn)變?yōu)樗匿鍩晒馑兀ㄊ锛t），熒光消失，不飽和烴斑點(diǎn)由于溴的加成，阻止生成曙紅而保留熒光，多數(shù)不飽和烴在粉紅色背景上呈黃色。四氯鄰苯二甲酸酐檢出物：芳香烴。溶液： 2%四氯鄰苯二甲酸酐的丙酮與氯代苯（10： 1）的溶液。方法：噴后置紫外光下觀察。甲醛/硫酸溶液：3

4、7%甲醛溶液0.2ml溶于濃硫酸lOml。(2)醇類3, 5 一二硝基苯酰氯檢出物：醇類。溶液：I. 2%本品甲苯溶液；II. 0.5%氫氧化鈉溶液；III. 0.002%羅丹明溶液。方法：先噴(I),在空氣中干燥過夜，用蒸氣薰2min,將紙或薄層通過試液(II)30s,噴水洗，趁濕通過(II$15s, 空氣干燥,紫外燈下觀察。硝酸鈰銨檢出物：醇類。溶液：I. 1%硝酸鈰銨的0.2mol/L硝酸溶液；II. N,N-二甲基-對(duì)苯二胺鹽酸鹽1.5g溶于甲醇、水與乙酸(128m1+25m1+1. 5m1)混合液中，用前將(I)與(II)等量混合。噴板后于105oC加熱5min。香草醛/硫酸檢出物：

5、高級(jí)醇、酚、甾類及精油。溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。方法：噴后于120oC加熱至呈色最深。二苯基苦基偕肼 檢出物：醇類、萜烯、羰基、酯與醚類。溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。方法：噴后于110oC加熱5lOmin。結(jié)果：紫色背景呈黃色斑點(diǎn)。(3)醛酮類品紅/亞硫酸檢出物：醛基化合物。溶液：I. 0.01%品紅溶液，通入二氧化硫直至無色；II. 0.05mol / L氯化汞溶液；III. O.05mol / L 硫酸溶液。方法：將I、II、II以1： 1： 10混合，用水稀釋至lOOml。鄰聯(lián)茴香胺檢出物：醛類、酮類。溶液：本品乙酸飽和溶液。2, 4-二硝基苯肼檢出物：醛基、酮基及

6、酮糖。溶液：I . 0.4%本品的2mol / L鹽酸溶液；II.本品O.1g溶于乙醇lOOml中，加濃鹽酸lml。方法：噴溶液I或II后，立即噴鐵氰化鉀的2mol / L鹽酸溶液。結(jié)果：飽和酮立即呈藍(lán)色；飽和醛反應(yīng)慢，呈橄欖綠色；不飽和羰基化合物不顯色。繞丹寧檢出物：類胡蘿卜素醛類。溶液：I. 1%5%繞丹寧乙醇溶液；II. 25%氫氧化銨或27%氫氧化鈉溶液。方法：先噴溶液I,再噴溶液II,干燥。（4）有機(jī)酸類溴甲酚綠檢出物：有機(jī)酸類。溶液：溴甲酚綠0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml。方法：浸板。結(jié)果：藍(lán)色背景產(chǎn)生黃色斑點(diǎn)。高錳酸鉀/硫酸檢出物：脂肪酸衍生物。溶

7、液：見通用顯色劑酸性高錳酸鉀。過氧化氫檢出物：芳香酸。溶液： 0.3%過氧化氫溶液。方法：噴后置紫外光（365nm ）下觀察。結(jié)果：呈強(qiáng)藍(lán)色熒光。2, 6-二氯苯酚-靛酚鈉檢出物：有機(jī)酸與酮酸。溶液： 0.1%本品的乙醇溶液。方法：噴后微溫。結(jié)果：藍(lán)色背景呈紅色。（5）酚類Emerson試劑（4-氨基安替比林/鐵氰化鉀（I助檢出物：酚類、芳香胺類及揮發(fā)油。溶液：I. 4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml；II.鐵氰化鉀（II$4g溶于水50ml，用乙醇稀釋至100ml。方法：先噴溶液I,在熱空氣中干燥5min,再噴溶液II,再于熱空氣中干燥5min，然后將板置含有氨蒸氣（25氨溶液）的密閉容

8、器中。結(jié)果：斑點(diǎn)呈橙-淡紅色。揮發(fā)油在亮黃色背景下呈紅色斑點(diǎn)。Boute反應(yīng)檢出物：酚類、氯、溴、烷基代酚。方法：將薄層置有NO2蒸氣（含濃硝酸）的容器中310min，再用NH2蒸氣（濃氨液）處理。氯釀（四氯代對(duì)苯釀）檢出物：酚類。溶液： 1本品的甲苯溶液。DDQ（二氯二氰基苯釀）試劑檢出物：酚類。溶液：2本品的甲苯溶液。TCNE （四氰基乙烯）試劑檢出物：酚類、芳香碳?xì)浠铩㈦s環(huán)類、芳香胺類。溶液：0.5%1%本品的甲苯溶液。Gibbs（26-二溴苯釀氯亞胺）試劑檢出物：酚類。溶液： 2%本品的甲醇溶液。氯化鐵檢出物：酚類、羥酰胺酸。溶液： 1%5%氯化鐵的 0.5molL 鹽酸溶液。結(jié)果：

9、酚類呈藍(lán)色、羥酰胺酸呈紅色。（6）含氮化合物FCNP （硝普鈉/鐵氰化物）試劑檢出物：脂 肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲與硫脲及其衍生物，肌酸及肌酐。溶液： 10氫氧化鈉溶液、10硝普鈉溶液、10鐵氰化鉀溶液與水按 1： 1： 1： 3 混合，在室溫至少放置20min，冰箱保存數(shù)周，用前將混合液與丙酮等體積混合。Dragendorff（碘化鉍鉀試劑）試劑檢出物：芳香族含氮化合物，如生物堿類、抗心律不齊藥物。溶液：I堿式硝酸鉍0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中；II.碘化鉀8g溶于水20ml中。將上述溶液I及II等量混合，置棕色瓶中作為儲(chǔ)備液，用前取儲(chǔ)備液lml、冰醋酸2ml與水l0ml

10、混合。結(jié)果：呈橘紅色斑點(diǎn)。4-甲基傘形酮檢出物：含氮雜環(huán)化合物。溶液：本品0.02g溶于乙醇35ml,加水至100ml。方法：噴板后置25%氨水蒸氣的容器中，取出后于紫外燈（365nm）下觀察。碘鉑酸鉀檢出物：生物堿類及有機(jī)含氮化物。溶液：10%六氯鉑酸溶液3ml與水97ml混合，加6%碘化鉀溶液，混勻。臨用前配制。硫酸高鈰銨/硫酸檢出物：生物堿及含碘有機(jī)化物。溶液：硫酸鈰1g混懸于4ml水中，加三氯乙酸1g,煮沸，逐滴加入濃硫酸直至混濁消失。方法：噴后薄層于1l0oC加熱數(shù)分鐘。結(jié)果：阿樸嗎啡、馬錢子堿、秋水仙堿、罌粟堿、毒扁豆堿與有機(jī)碘化物均能檢出。Ehrlich （對(duì)二甲氨基苯甲醛/鹽酸

11、）試劑檢出物：吲哚衍生物及胺類。溶液： 1%本品的濃鹽酸溶液與甲醇按1： 1混合。方法：噴后板于 50oC 加熱 20min。結(jié)果：呈不同顏色的斑點(diǎn)。(7)胺類肖酸/乙醇檢出物：脂肪族胺類。溶液：50滴65%硝酸于乙醇100ml中。方法：需要時(shí)120oC加熱。2, 6-二氯釀氯亞胺檢出物：抗氧劑、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳?xì)浠铩⑺幬?、苯氧基乙酸除草劑等。溶液：新鮮制備的0.5%2%本品乙醇溶液。方法：噴后薄層于110oC加熱10min，再用氨蒸氣處理。茜素檢出物：胺類。溶液：0.1%本品的乙醇溶液。丁二酮單肟/氯化鎳檢出物：胺類。溶液：I丁二酮單肟1.2g溶于熱水35

12、ml中，加氯化鎳0. 95g,冷卻后加濃氨水2ml；II.鹽酸羥胺0.12g溶于200ml水中。方法：將溶液I及II混合，放置1天，過濾。Pauly (對(duì)氨基苯磺酸)試劑檢出物：酚類、胺類和能偶合的雜環(huán)化合物。溶液：磺酸4. 5g溶于溫?zé)岬?2mol/L鹽酸45ml中，用水稀釋至500ml,取lOml于冰中冷卻，加4. 5%亞硝酸鈉冷溶液lOml，于OoC放置15min。用前加等體積10%碳酸鈉溶液。硫氰酸鉆(II).檢出物：生物堿、伯、仲、叔胺類。溶液：硫氰酸銨3g與氯化鉆1g溶于水20ml。結(jié)果：白色至粉紅色背景上呈藍(lán)色斑點(diǎn)， 2h 后顏色消退。若將薄層噴水或放入飽和水蒸氣容器內(nèi)，可重現(xiàn)

13、色點(diǎn)。1, 2-萘釀-4-磺酸鈉檢出物：芳香胺類。溶液：本品0.5g溶于95ml水，加乙酸5ml,濾去不溶物即得。方法：噴后反應(yīng) 30min 顯色。葡萄糖/磷酸檢出物：芳香胺類。溶液：葡萄糖2g溶于85%磷酸l0ml與水40ml混合液中，再加乙醇與正丁醇各30ml。方法：噴后于115C加熱lOmin。(8)硝基及亞硝基化合物x-萘胺檢出物： 3，5 一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。溶液：I. O. 5%a-萘胺乙醇溶液；II. 10%氫氧化鉀甲醇溶液。方法：先噴溶液I,再噴溶液II。結(jié)果：呈紅褐色斑點(diǎn)。二苯胺/氯化鈀檢出物：亞硝胺類。溶液：1.5%二苯胺乙醇溶液與0.1g氯化鈀的0.2%氯化鈉溶液lOOml,按5： 1混合。方法：噴后置紫外光(254nm)下觀察。結(jié)果：顯紫色斑點(diǎn)。(9)氨基酸及肽類茚三酮檢出物：