生化重點大題

1、沉淀蛋白質(zhì)的方法有哪些?各有何特點？沉淀蛋白質(zhì)的主要方法有:鹽析、有機溶劑、某些酸類、重金屬鹽、加熱凝固。上述方法的特點:中性鹽破壞蛋白質(zhì)的水化膜和電荷,采用不同濃度鹽可將不同蛋白質(zhì)分段析出，鹽析得到的蛋白質(zhì)具有 生物學(xué)活性。有機溶劑可破壞蛋白質(zhì)的水化膜使其沉淀,常溫下操作,蛋白質(zhì)無活性，低溫下操作，則有活性。某些酸類如 鎢酸、三氯醋酸等的酸根與帶正電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀,前提是溶液的pH值小于PI。該法得到的蛋白質(zhì)無活性。與 酸類相反，重金屬離子pb 2+等可與帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀，故要求溶液pH大于PI。該法得到的蛋白質(zhì)也無活 性。在等電點時加熱蛋白質(zhì)可形成凝塊沉淀。該法得到的是變性

2、蛋白質(zhì)。簡述RNA的種類及其生物學(xué)作用。（l）RNA 有三種：mRNA tRNA 和 rRNA生物學(xué)作用：rRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合構(gòu)成核糖體，核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所tRNA攜帶運輸活化了的氨基酸，參與 蛋白質(zhì)的生物合成。mRNA是DNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，含有DNA的遺傳信息，每三個相鄰堿基決定一個氨基酸，是 蛋白質(zhì)生物合成的模板。簡述真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點。成熟的真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點是：大多數(shù)的真核mRNA在 5端以7甲基鳥嘌吟及三磷酸鳥苷為分子的起始結(jié) 構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)稱為帽子結(jié)構(gòu)。帽子結(jié)構(gòu)在mRNA作為模板翻譯成蛋白質(zhì)的過程中具有促進核糖體與mRNA的結(jié)合， 加速翻譯起始速度的作用，同時可以

3、增強mRNA的穩(wěn)定性。在真核mRNA的3末端，大多數(shù)有一段長短不一的多 聚腺苷酸結(jié)構(gòu)，通常稱為多聚A尾。一般由數(shù)十個至一百幾十個腺苷酸連接而成。因為在基因內(nèi)沒有找到它相應(yīng)的結(jié) 構(gòu)，因此認(rèn)為它是在RNA生成后才加進去的。隨著mRNA存在的時間延續(xù)，這段聚A尾巴慢慢變短。因此，目前 認(rèn)為這種3末端結(jié)構(gòu)可能與mRNA從核內(nèi)向胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位及mRNA的穩(wěn)定性有關(guān)。用競爭性作用的原理解釋磺胺藥抑菌作用機制。競爭性抑制作用的強弱取決于抑制劑的濃度和底物濃度的相對比例。在抑制劑濃度不變的情況下，增加底物濃度能減 弱抑制劑的抑制作用；在底物濃度不變的情況下，抑制劑只有達(dá)到一定濃度才能起抑制作用。利用競爭性抑制作用

4、原理可闡明一些藥物的作用機制。例如磺胺類藥物抑制某些細(xì)菌的生長，是因為這些細(xì)菌的生長 需要利用對氨基苯甲酸合成二氫葉酸，而磺胺類藥物的結(jié)構(gòu)與對氨基苯甲酸極其相似，可競爭性的抑制細(xì)菌體內(nèi)的二 氫葉酸合成酶，從而防礙了二氫葉酸的合成，由于這些細(xì)菌只能利用二氫葉酸合成四氫葉酸，而不能直接利用葉酸， 所以對氨基苯磺胺可造成四氫葉酸的缺乏而影響核酸的合成，從而影響細(xì)菌的生長繁殖。根據(jù)競爭性抑制 的特點，在使用磺胺類藥物時，必需保持血液中藥物的濃度遠(yuǎn)高于對氨基苯甲酸的濃度，才能發(fā)揮有效地抑菌作用。5.1分子a一酮戊二酸徹底氧化分解成二氧化碳和水，產(chǎn)生多少分子ATP?a酮戊二酸-三羧酸循環(huán)T草酰乙酸T磷酸烯

5、醇式丙酮酸T丙酮酸T乙酰輔酶A T三羧酸循環(huán)。（寫出詳細(xì)步 驟）簡述磷酸戊糖途徑的生理意義。提供5磷酸核糖，是合成核苷酸的原料。提供NADPH，參與合成代謝（作為供氫體）、 生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)及維護谷胱甘肽的還原性。用超速離心法將血漿脂蛋白分為哪幾類？簡述各類脂蛋白的來源和主要功用。用超速離心法將血漿脂蛋白分為四類，分別是CM （乳糜微粒），VLDL （極低密度脂蛋白），.LDL（低密度脂蛋白），HDL （高密度脂蛋白）。來源和功能分別是CM （乳糜微粒）由小腸黏膜上皮細(xì)胞合成，運輸外源性甘油三酯；VLDL （極低 密度脂蛋白）由肝細(xì)胞合成，運輸內(nèi)源性甘油三酯；LDL （低密度脂蛋白）由VLDL在血

6、漿中生成，向肝外組織運輸膽 固醇；HDL （高密度脂蛋白）由肝細(xì)胞制造，向肝外組織運送磷脂、逆向向肝內(nèi)運送膽固醇。何謂酮體？酮體是如何生成及氧化利用的？酮體包括乙酰乙酸、8羥丁酸和丙酮。酮體是在肝細(xì)胞內(nèi)由乙酰CoA經(jīng)HMGCoA轉(zhuǎn)化而來，但肝臟不利用酮體。在肝 外組織酮體經(jīng)乙酰乙酸硫激酶或琥珀酰CoA轉(zhuǎn)硫酶催化后，轉(zhuǎn)變成乙酰CoA并進入三羧酸循環(huán)而被氧化利用。簡述體內(nèi)乙酰CoA的來源和去路。乙酰CoA的來源有糖的氧化分解，脂肪酸的氧化分解，酮體的分解，氨基酸的氧化分解；去路有氧化供能，合成脂肪 酸，合成膽固醇，轉(zhuǎn)化成酮體，參與乙酰化反應(yīng)。寫出軟脂酸徹底氧化分解的主要過程及ATP的生成。軟脂酸T

7、軟脂酰CoA （2ATP） T7次B氧化生成8分子乙酰CoA+7 （FADH2+NADH+H + ） 8分子乙酰CoAT經(jīng)三羧酸循環(huán)生成CO2+H2O+96ATP7 （FADH2+NADH+H + ） T經(jīng)氧化磷酸化生成H2O + 35ATP故一分子軟脂酸徹底氧化生成CO2和H2O，凈生成96+352=129ATP。試述呼吸鏈的組成成分、存在形式及排列順序。呼吸鏈的組成部分包括NADH、黃素蛋白、CoQ、鐵硫蛋白和細(xì)胞色素體系。大部分成員以復(fù)合體的形式鑲嵌在線粒體內(nèi)膜上，CoQ和Cyt c游離存在于線粒體內(nèi)膜。血液氨基酸的來源與去路。來源：食物蛋白的消化吸收；組織蛋白質(zhì)的分解；體內(nèi)合成。去路：

8、合成組織蛋白質(zhì)；氧化分解；合成其他含氮化合物。舉例說明聯(lián)合脫氨基作圖j 歐錚盼室某竹一用試述丙氨酸徹底氧化（碳鏈部分）的過程，并計算生成多少分子的ATP。答題思路丙氨酸T丙酮酸+NH3 丙酮酸今乙酰輔酶A（要求寫出酶及輔酶）乙酰輔酶A進入三羧酸循環(huán)徹底氧化成CO2和水（要求寫出詳細(xì)的反應(yīng)步驟關(guān)鍵酶和脫氫酶的輔酶）計算ATP （寫出生成的各種還原型輔酶的數(shù)量然后計算ATP數(shù)量）試比較酶的變構(gòu)調(diào)節(jié)與化學(xué)修飾調(diào)節(jié)的異同。相同點：均為細(xì)胞水平的調(diào)節(jié)，屬快速調(diào)節(jié)，受調(diào)節(jié)的酶為代謝途徑的關(guān)鍵酶或限速酶。不同點：變構(gòu)調(diào)節(jié)：變構(gòu)劑與酶非催化部位通過非共價鍵可逆結(jié)合，使酶構(gòu)象發(fā)生改變，活 性改變。無放大效應(yīng)?；?/p>

9、學(xué)修飾調(diào)節(jié)：需酶催化，通過共價鍵連上或去掉一些基團，使酶結(jié)構(gòu)改變，活性 改變，消耗少量ATP,有放大效應(yīng)。簡述參與DNA復(fù)制的酶與蛋白質(zhì)因子，以及它們在復(fù)制中的作用。酶或蛋白質(zhì)因子作用DNA聚合酶III合成DNA新鏈中的3 5磷酸二酯鍵DNA聚合酶I校讀、切除引物、填補空缺拓?fù)洚悩?gòu)酶松弛DNA超螺旋結(jié)構(gòu)成雙螺旋解螺旋酶解開DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)成兩條單鏈單鏈DNA結(jié)合蛋白維持單鏈DNA處于穩(wěn)定狀態(tài)引物酶合成DNA復(fù)制所需的RNA引物DNA連接酶將隨從鏈中各岡崎片段連接起來17.試比較復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯過程的異同點。復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯原料dNTPNTP20種氨基酸主要酶及因子DDDP、拓?fù)洚悩?gòu)、解螺 旋酶、單

10、鏈DNA結(jié)合蛋 白、引物酶、連接酶等DDRP、p因子等氨基酰tRNA合成酶、轉(zhuǎn)肽酶、起始因子、延長 因子等模板DNA的兩條鏈DNA （模板鏈）mRNA鏈延伸方向5今35 93N端9C端方式半保留復(fù)制、半不連續(xù)不對稱轉(zhuǎn)錄核蛋白體循環(huán)配對AT，GCAU，GC密碼子一氨基酸產(chǎn)物子代DNARNA蛋白質(zhì)加工過程無轉(zhuǎn)錄后加工翻譯后加工試述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成過程中的作用。mRNA：蛋白質(zhì)合成的直接模板.tRNA：轉(zhuǎn)運氨基酸到正確的位置rRNA :與其它蛋白質(zhì)結(jié)合組成核蛋白體，是合成蛋白質(zhì)的場所試述乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)及調(diào)控原理?；卮饐栴}要點：乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)含z、y及a3個結(jié)構(gòu)基因，分別編碼B-半乳糖苷

11、酶、透酶和乙?；D(zhuǎn)移酶，此外還有一個操 縱序列O、一個啟動序列P及一個調(diào)節(jié)基因io i基因編碼一種阻遏蛋白，后者與O序列結(jié)合，操縱子受阻遏而處 于關(guān)閉狀態(tài)。在啟動序列P上游還有一個分解代謝基因激活蛋白(CAP)結(jié)合位點。由P序列、O序列和CAP結(jié)合位 點共同構(gòu)成乳糖操縱子的調(diào)控區(qū)。阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)在沒有乳糖存在時，乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài)。此時，i基因在Pi啟動基因操作下表達(dá)一種阻 遏蛋白，此阻遏蛋白與O序列結(jié)合，阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合，抑制轉(zhuǎn)錄起動。當(dāng)有乳糖存在肘，乳糖轉(zhuǎn)變 為半乳糖，后者結(jié)合阻遏蛋白，使構(gòu)象變化，阻遏蛋白與O序列解離。在CAP蛋白協(xié)作下發(fā)生轉(zhuǎn)錄。CAP的正性調(diào)節(jié)：分解

12、代謝基因激活蛋白CAP分子內(nèi)有DNA結(jié)合區(qū)及cAMP結(jié)合位點。當(dāng)沒有葡萄糖及cAMP 濃度較高時，cAMP與CAP結(jié)合，這時CAP結(jié)合在乳糖啟動序列附近的CAP位點，可刺激RNA轉(zhuǎn)錄活性提高； 當(dāng)有葡萄糖存在時，cAMP濃度降低，cAMP與CAP結(jié)合受阻，因此乳糖操縱子表達(dá)下降。簡述腎上腺素使血糖升高的機制。(胰高血糖素？)腎上腺素一 B受體腎上腺素。受體G蛋白(無活性)活性G蛋白腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性AC(無活性)ATP cTMP無活性PKA 活性PKA無活性磷酸化b酶活性磷酸化酶b激酶磷酸化酶b磷酸化酶a糖原G1PG21.結(jié)合膽紅素與游離膽紅素有何區(qū)別？游離膽紅素結(jié)合膽紅素別名間接膽紅素直接膽紅素血膽紅素肝膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合未結(jié)合結(jié)合與重氮試劑反應(yīng)慢或間接反應(yīng)迅速直接反