藥物分析抗生素類藥物的分析詳解演示文稿

1、藥物分析抗生素類藥物的分析詳解演示文稿第一頁，共九十三頁。（優(yōu)選）藥物分析抗生素類藥物的分析第二頁，共九十三頁?？股刭|(zhì)量的復(fù)雜性 產(chǎn)品穩(wěn)定性差分子結(jié)構(gòu)大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用發(fā)酵過程不易控制易受污染生產(chǎn)工藝復(fù)雜發(fā)酵液中雜質(zhì) 無機(jī)鹽、脂肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)物、色素、熱原、毒性物質(zhì) 第三頁，共九十三頁。增加 異常毒性、細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌 檢查含量測定方法（一）生物學(xué)方法測定抗生素抑菌或殺菌的能力優(yōu)點1、與臨床效果一致2、靈敏度高3、干擾物質(zhì)少缺點1、操作繁瑣2、培養(yǎng)時間長2、測定誤差大第四頁，共九十三頁。（二）化學(xué)及物理化學(xué)方法以理化方法測定主藥含量優(yōu)點

2、1. 準(zhǔn)確度高2. 簡單、快速1. 不一定代表生物效價缺點2. 易受雜質(zhì)干擾分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）： 內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類、林可霉素類、其他抗生素類第五頁，共九十三頁。第二節(jié) 內(nèi)酰胺類抗生素 青霉素類第六頁，共九十三頁。頭孢菌素類青霉素（青霉素G、芐青霉素）第七頁，共九十三頁。氨芐西林（氨芐青霉素）阿莫西林（羥氨芐青霉素）第八頁，共九十三頁。普魯卡因青霉素頭孢氨芐第九頁，共九十三頁。頭孢拉定頭孢羥氨芐第十頁，共九十三頁。頭孢噻吩鈉第十一頁，共九十三頁。結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽，易溶于水 （一）羧基 酸性第十二頁，共九十三頁。

3、與有機(jī)堿(普魯卡因)成鹽，難溶于水 普魯卡因青霉素第十三頁，共九十三頁。（二）手性C 旋光性 (5%頭孢唑啉鈉溶液 1824)頭孢菌素類 C6 C7青霉素類 C3 C5 C6 第十四頁，共九十三頁。 （三）共軛體系 UV 頭孢菌素類 母核有共軛體系 青霉素類 母核無明顯UV 多數(shù)有苯環(huán)取代基 第十五頁，共九十三頁。青霉素鈉UV7-20第十六頁，共九十三頁。第十七頁，共九十三頁。（四）內(nèi)酰胺環(huán) 水溶液 不穩(wěn)定 干燥純凈 穩(wěn)定 不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大 酰胺鍵易水解 （某些金屬離子）（溫度）某些氧化劑第十八頁，共九十三頁。例青霉素的降解反應(yīng)青霉素青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉酸H2OpH210

4、0青霉噻唑?；u胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2第十九頁，共九十三頁。二、K+、Na+反應(yīng)（一）鑒別 焰色鮮黃色 + 醋酸氧鈾鋅黃 Na+ 焰色紫色 + 0.1%四苯硼鈉 + Ac 白 K+（二）呈色反應(yīng)1. 羥肟酸鐵反應(yīng) -內(nèi)酰胺類NaOH呈色Fe3+/3H+第二十頁，共九十三頁。H+Fe3+/3 （紅、棕、褐）第二十一頁，共九十三頁。2、與H2SO4 - HNO3反應(yīng)頭孢菌素類3. 茚三酮反應(yīng) -氨基第二十二頁，共九十三頁。-氨基、伯胺某些羥基胺類酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍(lán)紫色第二十三頁，共九十三頁。4. 雙縮脲反應(yīng)-內(nèi)酰胺類（開環(huán)分解）似肽鍵藍(lán)紫色第二十四頁，共

5、九十三頁。（三）沉淀反應(yīng)1. 遇酸在過量HCl或有機(jī)溶劑中溶解2. 有機(jī)胺鹽反應(yīng)重氮化 - 偶合反應(yīng) 重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基第二十五頁，共九十三頁。普魯卡因普魯卡因青霉素第二十六頁，共九十三頁。光譜法（四）1、UV法樣品、分解產(chǎn)物Cu2+頭孢氨芐 max = 262nm青霉素V鈉 A280nm/A264nm = 1.301.50第二十七頁，共九十三頁。Cu2+pH3.8第二十八頁，共九十三頁。第二十九頁，共九十三頁。氯唑青霉素 341 0.682雙氯青霉素 342 0.653苯唑青霉素 339 1.328(nm)第三十頁，共九十三頁。2、IR法-內(nèi)酰胺環(huán)酰胺第三十一頁，共九十三頁。色譜法（五

6、）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法第三十二頁，共九十三頁。三、 含量測定（水解）碘量法（一）1.原理水解產(chǎn)物定量過量剩余-內(nèi)酰胺類ChP第三十三頁，共九十三頁。反應(yīng)分兩步進(jìn)行：1. 水解反應(yīng) (按化學(xué)計算量進(jìn)行)2. 氧化-還原反應(yīng) (無固定的量關(guān)系，受溫度、PH值和時間等因素影響，應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)條件并采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定)第一步第二步第三十四頁，共九十三頁。V樣空V樣對照液+緩沖液+碘液+回滴+堿+酸+緩沖液+碘液+回滴 V對空V對2.方法供試液+緩沖液+碘液+回滴+堿+酸+緩沖液+碘液+回滴 空白試驗A、消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾B、消除樣品中其他消耗碘的雜質(zhì)的干擾C、消除碘揮發(fā)造成

7、的誤差 以未經(jīng)水解的樣品作空白測定第三十五頁，共九十三頁?？瞻讟悠稩2Na2S2O3I-I2 采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對照測定A、可消除溫度、pH、操作、環(huán)境等條件的影響B(tài)、使本法測定結(jié)果與微生物檢定法一致第三十六頁，共九十三頁。3.條件（1）弱酸性 pH4.5堿 I2 IO3- + I-酸 普魯卡因與碘在酸性條件下會產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀（2）溫度 2426溫度38 未水解的供試品亦消耗碘（3）水解時間以水解20分鐘后的耗碘量最大（4）反應(yīng)時間反應(yīng)20分鐘后，耗碘量隨時間的變化較小，可減小含量測定的誤差。第三十七頁，共九十三頁。4.特點（1）靈敏度高樣品 : 碘 = 1 : 8（2）反應(yīng)條件、實驗操作要求高V對

8、、V對空V樣、V樣空1份含量加試劑次序、反應(yīng)時間、滴定速度相同4I28I-5.計算原料第三十八頁，共九十三頁。汞量法（二）1.原理（水解）青霉素族ChP2.方法醋酸鹽緩沖液pH4.6滴定水解pH4.6滴定樣品 以未經(jīng)水解的樣品作空白測定第三十九頁，共九十三頁。3、討論（1）以第二次滴定突躍為終點 電位法指示終點 （2）反應(yīng)摩爾比 1 : 1（3）空白試驗 消除已降解產(chǎn)物干擾（4）優(yōu)點 不需標(biāo)準(zhǔn)品4、計算第四十頁，共九十三頁。 精密稱取含水量為0.5%的青霉素鈉0.0502g，按藥典方法測定總青霉素含量時，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)6.97ml。另精密稱取上述樣品0.5013g

9、，按藥典方法測定降解物含量時，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)1.33ml。以干燥品計算，求樣品中青霉素的含量。(去硝酸汞滴定液的理論濃度為0.02mol/L)homework酸堿滴定法（三）1、原理（鈉鹽）-內(nèi)酰胺類ChP第四十一頁，共九十三頁。2、方法第四十二頁，共九十三頁。3、討論（1）水解前先中和溶劑和樣品（2）加熱時避免吸收CO2不能使酚酞變紅（3）空白試驗校正(消除Na2CO3干擾)（4）特點 簡便快速，不適用于有殘留酯的產(chǎn)品第四十三頁，共九十三頁。（水解）可見-紫外分光光度法（四）1、酸水解法（銅鹽法）（1）原理穩(wěn)定劑JP青霉素族（2）計算2、硫醇汞鹽法（1）原理（咪

10、唑）青霉素族ChP第四十四頁，共九十三頁。咪唑第四十五頁，共九十三頁。（2）方法對照品法計算pH 9（3）討論a. 咪唑催化的水解產(chǎn)率高，硫醇汞鹽穩(wěn)定（3h）b. 側(cè)鏈有-NH2時，需加醋酐先將其乙?；蟛拍馨l(fā)生上述反應(yīng)第四十六頁，共九十三頁。pH9（4）特點A、簡便快速B、用標(biāo)準(zhǔn)品對照，重現(xiàn)性良好，RSD1%第四十七頁，共九十三頁。HPLC法（五）特點 快速、高效、靈敏 專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好 一法多用（鑒別、檢查、含測）第四十八頁，共九十三頁。第三節(jié) 氨基糖苷類抗生素鏈霉素 雙氫鏈霉素 新霉素 卡那霉素慶大霉素 巴龍霉素鏈霉素鏈霉胍 + 鏈霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 苷元糖鏈霉雙糖胺第四

11、十九頁，共九十三頁。鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第五十頁，共九十三頁。鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第五十一頁，共九十三頁。慶大霉素 糖 苷元絳紅糖胺 + 脫氧鏈霉胺 + 加洛糖胺 糖 第五十二頁，共九十三頁。絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第五十三頁，共九十三頁。絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第五十四頁，共九十三頁。慶大霉素C復(fù)合物 慶大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 慶大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 慶大霉素C1a R、R1、R2=H 慶大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 慶大霉素

12、C2b R=R1=H R2=CH3第五十五頁，共九十三頁。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)多與硫酸成鹽鏈霉素 3個慶大霉素 5個堿性中心堿性（一）水溶性溶解性（二）第五十六頁，共九十三頁。鏈霉素 pH57.5慶大霉素 pH212 穩(wěn)定UV（三）穩(wěn)定性（四）鏈霉素水解產(chǎn)物反應(yīng)（五）第五十七頁，共九十三頁。坂口反應(yīng)N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)第五十八頁，共九十三頁。二、 鑒別 茚三酮反應(yīng)（一）羥基胺結(jié)構(gòu)第五十九頁，共九十三頁。N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)（二）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+紅色（Elson-Morgan反應(yīng)）第六十頁，共九十三頁。(縮合)第六十一頁，共九十三頁。紅色對二甲氨基苯甲醛H+第六十

13、二頁，共九十三頁。 麥芽酚反應(yīng)（三） 鏈霉糖特有反應(yīng)H+分子重排第六十三頁，共九十三頁。紫紅麥芽酚第六十四頁，共九十三頁。鏈霉胍特有反應(yīng)（或-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應(yīng)（四） -萘酚第六十五頁，共九十三頁。第六十六頁，共九十三頁。（四）反應(yīng)H+UV法（五）IR法（六）慶大霉素?zé)oUV吸收TLC法（七）第六十七頁，共九十三頁。三、 檢查鏈霉素雜質(zhì)（一）鏈霉素B（甘露糖鏈霉素） 方法 TLC中的對照品法 （BP）1. 來源 反應(yīng)中間體第六十八頁，共九十三頁。對微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同工藝差別C組分比例不一致規(guī)定控制各組分的相對百分含量ChPUSPBPJP慶大霉素C組分的

14、測定（二）第六十九頁，共九十三頁。max = 330nm衍生化原理 1.第七十頁，共九十三頁。1-烷基硫代-2-烷基異吲哚衍生物第七十一頁，共九十三頁。第七十二頁，共九十三頁。第四節(jié) 四環(huán)素類抗生素ABCD第七十三頁，共九十三頁。123456789101112第七十四頁，共九十三頁。四環(huán)素（TC）tetracycline第七十五頁，共九十三頁。金霉素 (CTC) chlortetracycline氯四環(huán)素第七十六頁，共九十三頁。土霉素 (OTC) oxytetracycline氧四環(huán)素第七十七頁，共九十三頁。多西環(huán)素 (DOTC) doxycycline脫氧土霉素第七十八頁，共九十三頁。美他環(huán)素（METC） metacycline第七十九頁，共九十三頁。第八十頁，共九十三頁。一、 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)兩性（一）1.與酸、堿均能成鹽2.強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中溶解度 酚羥基、烯醇型羥基 弱酸性二甲胺基 弱堿性第八十一頁，共九十三頁。吸濕性（二）多含結(jié)晶水與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ UV（三）與金屬離子絡(luò)合（四）pH3 7.5 熒光 第八十二頁，共九十三頁。第八十三頁，共九十三頁。不穩(wěn)定性（四）1.差向異構(gòu)化淡黃黑藍(lán)色熒光第八十四頁，共九十三頁。差向四環(huán)素第八十五頁，共九十三頁。（土霉素、多西環(huán)素不易差