胃癌微轉(zhuǎn)移檢測及臨床應用的研究進展

1、胃癌微轉(zhuǎn)移檢測及臨床應用的研究進展【摘要】胃癌是常見的惡性腫瘤，由于缺乏特異性病癥，早期不易發(fā)現(xiàn)；而進展期胃癌易在微轉(zhuǎn)移根底上發(fā)生轉(zhuǎn)移。近年來，隨著分子生物學的開展，胃癌的微轉(zhuǎn)移已成為研究熱點。胃癌微轉(zhuǎn)移的檢測方法包括常規(guī)HE染色法、免疫組織化學法、RT-PR等，也可通過對腹腔沖洗液進展檢測獲得胃癌轉(zhuǎn)移的相關證據(jù)。EA、細胞角蛋白ytkeratin,K、糖類抗原arbhydrateantigens,A等是檢測胃癌微轉(zhuǎn)移的常用腫瘤標記物。胃癌微轉(zhuǎn)移的檢測對胃癌患者選擇術式、確定淋巴結(jié)去除范圍、術后確立分期、建立個體化的化療方案及判斷預后均有幫助?！娟P鍵詞】胃腫瘤微轉(zhuǎn)移腫瘤標記物胃癌是常見的惡性腫

2、瘤。我國胃癌患者的年死亡率為25.53人/10萬人，在各種惡性腫瘤中居首位1。許多患者即使給予了標準R2根治，仍死于遠處復發(fā)，可能是由于腫瘤發(fā)生了微轉(zhuǎn)移2-4。微轉(zhuǎn)移(iretastases)是指在機體組織、體液及細胞移植物中檢測到的鏡下及亞顯微程度的腫瘤殘留,是常規(guī)臨床病理學方法不能檢出的、隱匿在原發(fā)灶以外組織的轉(zhuǎn)移-。目前認為，臨床轉(zhuǎn)移一般都是由微轉(zhuǎn)移開展而來的。明確腫瘤有無發(fā)生微轉(zhuǎn)移，可以更好地對患者進展臨床分期并指導治療。近年來，組織化學和分子生物學技術的迅速開展使得微轉(zhuǎn)移研究領域也有了較快的開展；隨著免疫組織化學和RT-PR的開展和應用，胃癌微轉(zhuǎn)移的檢出成為可能。1胃癌微轉(zhuǎn)移的檢測方

3、法1.1常規(guī)連續(xù)切片HE染色法連續(xù)切片法一般用于淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移檢測,其檢出率與切片間距有很大關系。僅切取12個切面的常規(guī)病理切片檢查對淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移灶的檢出率很低，連續(xù)切片可以進步淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的檢出率。據(jù)報道，對連續(xù)切片進展細致分析，能從常規(guī)病理組織學檢查陰性的淋巴結(jié)中檢出l0的微轉(zhuǎn)移。但是連續(xù)切片法需要一個標本切幾十乃至幾百張切片，工作量大，且敏感度低，對未形成轉(zhuǎn)移灶的少量癌細胞難以檢出，故近年來已很少使用。1.2免疫組織化學法免疫組織化學法是選用針對腫瘤細胞特異標記物的抗體，用顯色劑標記，通過抗原抗體反響和組織化學的成色反響，尋找組織、血液、淋巴結(jié)、骨髓中的腫瘤細胞。免疫組織化學法可以檢測出

4、常規(guī)HE染色不能發(fā)現(xiàn)的小簇癌細胞，能從105個細胞中檢測出1個癌細胞，是比擬靈敏的方法。aehara等報道應用免疫組織化學法檢測淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的34例早期胃癌的420枚淋巴結(jié)，發(fā)現(xiàn)其中8例15枚淋巴結(jié)發(fā)生了微轉(zhuǎn)移。免疫組織化學法具有簡便、直觀、靈敏度高、結(jié)果可靠等優(yōu)點；缺點是需時較長，費用較昂貴，會因遺漏而出現(xiàn)假陰性，或單抗與基質(zhì)或炎癥細胞穿插反響出現(xiàn)假陽性。1.3RTPRRTPR技術因其高敏感性和特異性被應用于腫瘤微轉(zhuǎn)移的檢測，其原理是選擇腫瘤細胞特異性標記基因擴增，檢測該基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，判斷是否存在轉(zhuǎn)移的癌細胞。ri等應用RT-PR擴增EA檢測胃腸道腫瘤淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移灶的存在情況，發(fā)現(xiàn)此法敏

5、感度為10-4，陽性率由20進步到60。RT-PR所需樣品少，省時，經(jīng)濟，是目前認為最適于發(fā)現(xiàn)腫瘤早期轉(zhuǎn)移的方法，尤其適用于微量樣本中目的基因的獲取或微量腫瘤細胞的檢測。本方法尚有缺乏，如外源基因污染、假基因干擾、RNA的非法轉(zhuǎn)錄可致假陽性，而基因表達產(chǎn)物變異、取材的局限等可致假陰性。隨著新的腫瘤特異性標志物的發(fā)現(xiàn)，反響條件的優(yōu)化，RTPR有可能成為檢測腫瘤微轉(zhuǎn)移的常規(guī)方法。1.4腹腔沖洗液的檢測進展期胃癌根治術后最常見的復發(fā)為腹膜轉(zhuǎn)移，約占總復發(fā)的33%50%，胃癌腹膜轉(zhuǎn)移患者5年生存率在35%以下，是導致患者死亡的主要原因之一。腹腔內(nèi)脫落的癌細胞exfliatedanerells，E是形成

6、腹腔轉(zhuǎn)移的先決條件和胃癌預后的一個獨立不良因素。腹腔沖洗液細胞學檢查peritneallavageytlgy，PL是檢測E的常用方法，成為預測腹膜微轉(zhuǎn)移的重要手段，但其缺點是對微量癌細胞檢測敏感性低，陽性率僅為1421，有較高的漏診率-。盛勇等4應用免疫細胞化學染色方法對30例胃癌患者行腹腔沖洗液K20和EA檢測及常規(guī)PL檢查，結(jié)果顯示免疫細胞化學陽性檢出率明顯高于PL。王劍鋒等5搜集43例胃癌和7例胃良性病變患者的術中腹腔沖洗液，通過RT-PR測定沖洗液中游離細胞的EARNA表達，其陽性率為55.8，明顯高于PL32.6，且與胃癌浸潤深度、漿膜受浸潤程度及類型相一致，從而認為RT-PR較PL

7、檢測腹腔微量游離癌細胞更有優(yōu)勢，是判斷胃癌有無腹膜微轉(zhuǎn)移的一種較好的方法。2胃癌微轉(zhuǎn)移檢測的常用腫瘤標記物腫瘤標記物是指由腫瘤細胞產(chǎn)生的，可以反映腫瘤自身存在的某些化學物質(zhì)。腫瘤標記物在正常組織中表達量甚微,可在腫瘤患者的血液或組織中檢出。EA、細胞角蛋白ytkeratin,K、糖類抗原arbhydrateantigens,A等是檢測胃癌微轉(zhuǎn)移的常用指標。2.1EA楊萬勇等應用RT-PR和ELISA檢測40例胃癌、14例胃炎患者及20例安康成人外周血EARNA和EA蛋白，結(jié)果發(fā)現(xiàn)40例胃癌患者EARNA陽性率為602440，而安康者均為陰性，外周血EARNA的表達與胃癌遠處轉(zhuǎn)移親密相關，且隨著

8、病期進展而增加，因此認為EARNA檢測是預測胃癌微轉(zhuǎn)移的有效指標，外周血EARNA陽性提示腫瘤早期轉(zhuǎn)移。ri等的研究也得出同樣結(jié)論。2.2K盛勇等4應用免疫化學染色方法在30例胃癌患者腹腔沖洗液K20和EA及常規(guī)PL檢查E，K20單抗檢出13例腹膜腔沖洗液中陽性表達12例92.3%，優(yōu)于EA的檢出率76.9%。Kakeji等檢測106例胃癌患者，研究顯示20.8%22106患者骨髓中出現(xiàn)K陽性細胞，其陽性率與腫瘤浸潤深度及是否有肝轉(zhuǎn)移相關。2.3A李培武等對65例胃癌患者切除的385枚陰性淋巴結(jié)檢測A72-4的表達，結(jié)果發(fā)現(xiàn)14例26枚淋巴結(jié)呈陽性表達，Safi等研究也得出同樣的結(jié)果。王貴英等

9、認為，K20，EA及A72-4抗體結(jié)合檢測可進步胃癌微轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)檢出率,可以更準確地進展病理分期及預后評價。3胃癌微轉(zhuǎn)移檢測的臨床意義3.1指導臨床分期目前通用的胃癌分期是國際TN分期法，將腫瘤大孝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠處轉(zhuǎn)移作為分期標準。免疫組織化學、分子生物學等檢測方法的出現(xiàn)，提供了更準確的分期方法。孫海軍等對1104例承受R2根治術胃癌患者的預后進展統(tǒng)計分析，結(jié)果顯示，與根據(jù)淋巴結(jié)與原發(fā)灶的間隔 進展分期相比，以轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的數(shù)目進展的分期可以更好地判斷預后。3.2指導治療微轉(zhuǎn)移的概念讓術者認識到即使胃癌未進犯到漿膜層，腹腔未見到轉(zhuǎn)移灶，術中仍要堅持無瘤操作，以防腫瘤細胞脫落種植。而假設能在術前及

10、術中應用免疫組織化學、放射免疫及RT-PR等技術，通過顯示腫瘤相關抗原及癌基因來確定胃癌微轉(zhuǎn)移灶，將為術式選擇及去除范圍提供更客觀、更直接的根據(jù)；假設能在術后檢出，可以指導患者及時的進展輔助治療。atsut等認為術中快速檢測微轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)可起到類似乳腺癌的前哨淋巴結(jié)檢測的作用，對淋巴結(jié)的術中去除范圍有指導價值。另外對于外周血、骨髓中檢測到微轉(zhuǎn)移的胃癌患者，應親密追蹤隨訪，定期進展檢查，并積極給予針對性輔助或補救性治療，如全身化療、門靜脈置管等措施。進展期胃癌的患者根治性手術治療后5年生存率為40?；颊咄烙趶桶l(fā)和轉(zhuǎn)移。免疫學和分子生物學的開展使得發(fā)現(xiàn)常規(guī)病理組織學檢查陰性淋巴結(jié)中的微轉(zhuǎn)移成為可

11、能。此外，磁激活細胞別離術agnetiativatedellsrting,AS作為一種新的檢測胃癌微轉(zhuǎn)移的方法正在臨床上應用，初步研究發(fā)現(xiàn)此方法能簡便高效的檢測血循環(huán)中的癌細胞，為腫瘤的微轉(zhuǎn)移提供指導4。這將為臨床工作中判斷預后、選擇術式、確定淋巴結(jié)去除范圍、術后確立分期及建立個體化的化學治療方案提供更可靠的根據(jù)。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.【參考文獻】1吳在德.外科學.6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2022，460.2HhenbergerP,GretshhEiS.GastrianerJ.Lanet,2022,3629380:305-315.3yaaK,Terashia,TakaganeA,etal.

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