Bayer1650全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總膽汁酸的試劑交叉污染及消

1、Bayer1650全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總膽汁酸的試劑穿插污染及消bayer1650全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總膽汁酸的試劑穿插污染及消除措施全自動(dòng)生化分析儀具有微量、快速、多項(xiàng)、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于臨床生化檢驗(yàn)中。檢驗(yàn)的工作效率得到了大大進(jìn)步。但同時(shí)出現(xiàn)的穿插污染問(wèn)題卻給工作帶來(lái)了不少費(fèi)事，特別是隨著儀器使用時(shí)間的累加，儀器狀況的下降，穿插污染的程度會(huì)日益加劇。假如不能及時(shí)排除穿插污染，甚至有可能影響病人的檢測(cè)結(jié)果，造成誤診。我們實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)，在批量檢測(cè)中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些總膽汁酸t(yī)ba的異常高值，而單獨(dú)復(fù)查后又正常。為此，我們調(diào)整了工程的檢測(cè)順序1，又設(shè)置了試劑針特殊清洗程序2，但仍不能

2、解決該問(wèn)題。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道3，試劑的穿插污染以比色杯污染更為嚴(yán)重，當(dāng)比色杯清洗不完全或者黏附性增加時(shí)，比色杯中殘留物會(huì)對(duì)在這個(gè)比色杯中進(jìn)展的下一個(gè)檢測(cè)工程造成影響。為了找到確切的原因，我們進(jìn)展了一系列相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。1材料與方法1.1儀器與試劑儀器請(qǐng)為bayer1650全自動(dòng)生化分析儀。試劑：總膽汁酸采用循環(huán)酶法測(cè)定，高密度脂蛋白膽固醇(hdl-)、低密度脂蛋白膽固醇(ldl-)采用直接法測(cè)定，試劑均購(gòu)自上海執(zhí)誠(chéng)生物技術(shù)。三酰甘油(tg)、總膽固醇(t)采用酶法測(cè)定，試劑均購(gòu)自北京康大泰科醫(yī)學(xué)科技。膽堿酯酶采用丁酰硫代膽堿法測(cè)定，試劑購(gòu)自寧波博泰生物技術(shù)。混合血清采用朗道公司的質(zhì)控血清。1.2方法1.

3、3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用spss16.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)展處理，測(cè)定組與對(duì)照組之間比擬采用配對(duì)t檢驗(yàn)，以p0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1疑似穿插污染工程試劑中tba的測(cè)定值在本科室使用的35種常規(guī)生化試劑中tba測(cè)定值前5位的是tg、t、hdl-、ldl-和he，其中he試劑中最低，見(jiàn)表1表15種試劑中tba的測(cè)定值ll)試劑tg單t單hdl-ldl-he2.25種試劑對(duì)tba檢測(cè)的穿插污染情況通過(guò)分析tg、t、hdl-、ldl-、he5個(gè)檢測(cè)組的tba的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，tg、t、hdl-、ldl-4個(gè)工程對(duì)tba的測(cè)定有顯著干擾p0.05，其中干擾最大的是tg，偏倚為42.6ll，相對(duì)偏倚率高達(dá)63

4、.68%，s=43.6，其次是t、hdl-和ldl-，而he對(duì)tba的檢測(cè)無(wú)影響，見(jiàn)表2。表2tg、t、hdl-、ldl-和he對(duì)tba檢測(cè)的穿插污染情況ll)組別例數(shù)tgthdl-ldl-he注：與對(duì)照組比擬，*p0.05；與對(duì)照組比擬，#p0.052.3設(shè)置特殊清洗設(shè)置比色杯特殊清洗程序后，各組的穿插污染能被有效消除，與對(duì)照組比擬差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義p0.05。見(jiàn)表3。表3設(shè)置比色杯特殊清洗程序后穿插污染污染情況ll)組別例數(shù)tgthdl-ldl-注：與對(duì)照組比擬，#p0.053討論tba是臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)工程，對(duì)肝功能損害，膽管阻塞及肝內(nèi)膽汁淤積的診斷具有重要的價(jià)值。鑒于總膽汁酸在臨床應(yīng)

5、用方面的重要作用，須重視試劑間的穿插污染對(duì)總膽汁酸測(cè)定的影響，并采取措施盡可能防止穿插污染的發(fā)生。試穿插污染問(wèn)題較為普通，相對(duì)隱匿且消除費(fèi)事，主要包括：試劑針污染、攪拌棒污染和比色杯污染。實(shí)際工作中通常以比色杯污染最為突出。由表2可知，tgthdl-ldl-4個(gè)工程對(duì)tba的檢測(cè)存在著明顯的正干擾，其中以tg的干擾最大，偏倚率高達(dá)63.68%，且重復(fù)性差(s=43.6)。說(shuō)明tg試劑中的某些成分可能比另外幾個(gè)工程更難清洗，反響杯穿插污染程度參差不齊，有的反響杯未能徹底洗凈造成了較大的污染。試劑間的穿插污染原因是多方面的，主要有：試劑成分中含有某種被污染的工程；試劑中含有下一個(gè)測(cè)試所要測(cè)定底物或

6、含有的某種試劑成分，與下一反響所測(cè)定的底物有作用，因此直接影響下一反響測(cè)定的結(jié)果；該試劑所引導(dǎo)的反響給下一個(gè)工程反響進(jìn)程帶來(lái)了間接干擾4。經(jīng)與試劑研發(fā)人員共同討論，發(fā)現(xiàn)是試劑中膽酸鹽的成份干擾了tba的測(cè)定，這與有些文獻(xiàn)報(bào)道相一致5,6。膽酸鹽是試劑中加速終點(diǎn)反響的輔助成分，往往很多試劑說(shuō)明書(shū)中并沒(méi)有標(biāo)明。它易沉積在反響杯的內(nèi)壁，很可能具有膽汁酸的反響特性，易與tba試劑反響，從而干擾了tba的檢測(cè)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，常規(guī)沖洗不能完全消除穿插污染的現(xiàn)象，設(shè)置比色杯特殊清洗程序后，消除了試劑間的穿插污染現(xiàn)象。綜上所述，當(dāng)平時(shí)工作中遇到試劑穿插污染現(xiàn)象時(shí)，假如調(diào)整工程的檢測(cè)順序和設(shè)置試劑針特殊清洗程序仍然