機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷培訓課件

1、機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【實驗動物】 家兔 2機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【實驗動物】2機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【實驗器材】兔手術(shù)臺、BL-420生物信息采集系統(tǒng)、Y型氣管插管、動脈夾、動脈插管、靜脈插管、注射器、紗布、棉線、實驗動物常用手術(shù)器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、25%烏拉坦、生理鹽水3機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【實驗器材】兔手術(shù)臺、BL-420生物信息采集系統(tǒng)、Y型氣管【實驗設(shè)計原理】通過腸系膜上動脈結(jié)扎，即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)來阻斷部分腸的血液供應一段時間后再恢復血流灌注，以復

2、制腸缺血/再灌注損傷的動物模型，探討缺血/再灌注損傷的發(fā)生機制4機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【實驗設(shè)計原理】通過腸系膜上動脈結(jié)扎，即SMAO(Super組：持續(xù)缺血組 夾閉腸系膜上動脈1h組：再灌損傷組 夾閉腸系膜上動脈30min，再恢復血流30min 【實驗分組】5機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷組：持續(xù)缺血組 【實驗分組】5機能實驗家兔腸缺血再灌注損【實驗方法與步驟】1. 稱重2. 全麻（耳緣靜脈注射25%烏拉坦4ml/kg） 注意：從耳緣靜脈的遠心端開始注射，排盡氣泡，速度不宜太快 麻醉效果：角膜反射 基本消失，鉗夾家兔 舌頭無回收，四肢松軟6機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【實驗方法與步驟】1

3、. 稱重6機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷培訓課件4.頸部正中切口行動脈插管切口范圍：頸部正中，甲狀軟骨下緣胸骨上切跡，長約5cm分離左側(cè)頸總動脈：胸骨舌骨肌與胸鎖乳突肌之間深面的頸動脈鞘內(nèi)，與 氣管平行，顏色鮮紅、 較細、觸之有搏動感， 長約2-3cm，穿線備用8機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷4.頸部正中切口行動脈插管分離左側(cè)頸總動脈：胸骨舌骨肌與胸鎖注意：（1）鈍性分離 （2）辨清頸A鞘內(nèi)的血管神經(jīng)血管插管先結(jié)扎遠心端，后夾閉近心端，剪口部位盡量靠近遠心端，成45度角朝向近心端剪一小口，約為管徑的1/3-1/2，插管方向朝向近心端，插入1-1.5cm9機能實驗家兔腸缺

4、血再灌注損傷注意：（1）鈍性分離先結(jié)扎遠心端，后夾閉近心端，剪口部位盡量【插管的注意事項】插管內(nèi)事先應加入少量肝素以防凝血；排凈氣泡，記錄前應關(guān)閉三通管插管易滑脫，應雙線固定，結(jié)扎牢靠勿使插管尖端與血管壁形成角度，避免刺破血管10機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【插管的注意事項】插管內(nèi)事先應加入少量肝素以防凝血；排凈氣泡 5.腹部正中切口： 腹正中線自劍突下1.5cm起向下做5cm切口 6.尋找腸系膜上動脈： 將家兔腹腔內(nèi)臟左移，找到齊右腎門對側(cè)垂直向腹主動脈分出的腸系膜上動脈，穿雙線備用，注意避免損傷其他血管（缺血再灌注夾閉時注意墊橡皮管） 7.記錄一段正常血壓曲線 8.復制腸缺血-再灌注模型，

5、輕輕提起腸系膜上動脈的穿線，用動脈夾夾閉，同時觀察各項生理指標變化。 9.分組進行實驗并記錄各項指標。（組：夾閉腸系膜上動脈1h 組：夾閉腸系膜上動脈30min，再恢復血流30min）11機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷 5.腹部正中切口：11機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷腸系膜上動脈示意圖12機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷腸系膜上動脈示意圖12機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷13機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷13機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷14機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷14機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷1. 移動內(nèi)臟時，動作要輕柔2. 分離腸系膜上A時需小心細致，不要使用銳利器械，以免損傷血管造成大出血3

6、. 腸系膜上A夾閉要徹底，缺血再灌注組結(jié)扎時注意墊橡皮管，恢復血流灌流（復流）要完全【注意事項】15機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷1. 移動內(nèi)臟時，動作要輕柔【注意事項】15機能實驗家兔腸缺【結(jié)果分析】 峰表示：結(jié)扎腸系膜上A 血管床容量 有效循環(huán)血量相對BP 壓力感受器 (+) 減壓反射BP 峰表示：松開腸系膜上A 血管床容量有效循環(huán)血量相對 BP升壓反射（再灌注損傷還未來得及發(fā)生）有時峰不出現(xiàn)，BP直到死亡 血壓持續(xù)下降，有再灌注損傷16機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【結(jié)果分析】 峰表示：結(jié)扎腸系膜上A 血管床容量 有組：結(jié)扎BP BP趨于平穩(wěn)（相似于結(jié) 扎前），腸壁粉紅暗紅（淤血）腫脹（水腫

7、），無出血點組：結(jié)扎 BPBP趨于平穩(wěn)（機體自身調(diào)節(jié)） 再灌BP，腸壁暗紅、水腫、出血點BP低于正常1/2時休克 、組比較說明：缺血損傷與 是不同的 損傷過程， 損傷過程，后者損傷更嚴重17機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷組：結(jié)扎BP BP趨于平穩(wěn)（相似于結(jié) 扎前），腸壁【典型結(jié)果】18機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【典型結(jié)果】18機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【結(jié)果不明顯可能存在的問題】（1）實驗過程中是否發(fā)生了大血？（2）缺血是否完全？（3）再灌注是否通暢？（4）記錄結(jié)果時基線是否改變？（5）個體差異 19機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【結(jié)果不明顯可能存在的問題】（1）實驗過程中是否發(fā)生了大血？【I/R的發(fā)生機制】（1）活性氧的作用 ） （2）鈣超載 ） （3）白細胞的作用 ）（4）高能磷酸化合物生成障礙 ）20機能實驗家兔腸缺血再灌注損傷【I/R的發(fā)生機制】（1）活性氧的作用 ） 20機能實驗家兔（1）盡早恢復血流灌流，縮短缺血時間（2）再灌注時遵循低溫、低壓、低鈣的原則（3）清除