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1、作為細(xì)胞培養(yǎng)支架材料的可酶降解小分子水凝膠Enzyme Degradable Small Molecular Hydrogel as Cell Culture Scaffold Material 2011年3月19日綜合實(shí)驗(yàn)樓A204第九屆本科創(chuàng)新科研“百項(xiàng)工程”重點(diǎn)項(xiàng)目1項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)張游,生命科學(xué)學(xué)院2009級(jí)生物技術(shù)。孟祥溪,化學(xué)學(xué)院2009級(jí)分子科學(xué)院與工程。刁惠天,生命科學(xué)學(xué)院2010級(jí)伯苓班。2指導(dǎo)教師楊志謀 教授生物活性材料教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室生命科學(xué)學(xué)院Photo downloaded: 3答辯內(nèi)容項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容預(yù)期的成果經(jīng)費(fèi)預(yù)算412341.項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)跨學(xué)科應(yīng)用型基礎(chǔ)研

2、究,具有重大的理論意義和應(yīng)用前景。Nano-MaterialPeptide ChemistryBio Material51.項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)小分子水凝膠由小分子自組裝形成的水凝膠優(yōu)秀的生物相容性,可降解藥物釋放、細(xì)胞培養(yǎng)、化學(xué)傳感、無(wú)機(jī)材料合成模板Gao et al; J. Ame. Chem. Soc; 2009, 131, 112861128761.項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)小分子水凝膠進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)三維培養(yǎng),克服傳統(tǒng)對(duì)貼壁依附性細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)胞形貌不真實(shí)的情況。超分子體系,生物相容性好。制約其發(fā)展的重要瓶頸是培養(yǎng)后細(xì)胞和細(xì)胞支架材料的粘連問(wèn)題。71.項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)解決方案:酶降解傳統(tǒng)的水凝膠的

3、降解方法主要有搖溶法、升溫法、化學(xué)法和光催化法,雖然各有優(yōu)勢(shì)但處理細(xì)胞支架材料均不理想。我們提出用酶降解的方法。Yang et al; J. Ame. Chem. Soc; 2006, 128 (9), 3038-3043.8答辯內(nèi)容項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容預(yù)期的成果經(jīng)費(fèi)預(yù)算412392.項(xiàng)目?jī)?nèi)容Small Molecular Hydrogel分子設(shè)計(jì)Cell CultureAssayProtocolMolecular DesignEnzyme Degradation102.項(xiàng)目?jī)?nèi)容I.分子設(shè)計(jì)與成膠擬采用本課題組報(bào)道的二硫鍵還原法成膠。Ren et al; Chem Comm; 2011,

4、47 (5), 1619-1621.112.項(xiàng)目?jī)?nèi)容I.分子設(shè)計(jì)與成膠結(jié)合各種需要,設(shè)計(jì)合成如下的目標(biāo)產(chǎn)物:122.項(xiàng)目?jī)?nèi)容II.酶降解從“高度專一性”的酰胺水解酶中選擇胰蛋白酶作為主要的降解試劑。非常適合在該體系中使用。Leiros et al.Protein Sci.13(4): 105670.132.項(xiàng)目?jī)?nèi)容I.分子設(shè)計(jì)與成膠結(jié)合各種需要,設(shè)計(jì)合成如下的目標(biāo)產(chǎn)物:142.項(xiàng)目?jī)?nèi)容II.酶降解Yang et al; Soft Mat.; 2007, 3 (5), 515520.Ren et al; Chem Comm; 2011, 47 (5), 1619-1621.152.項(xiàng)目?jī)?nèi)容III

5、.純化與表征分子的分離純化HPLC、TLC分子的表征UV-Vis、CD、NMR等凝膠力學(xué)性能的表征倒置小瓶法、流變儀等凝膠的形貌表征SEM/TEM、AFM等162.項(xiàng)目?jī)?nèi)容IV.細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)的細(xì)胞將采用常用的小鼠成纖維細(xì)胞(NIH 3T3)。用倒置式生物顯微鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡進(jìn)行“原位”表征使用MTT法或者計(jì)數(shù)法對(duì)細(xì)胞的增值率進(jìn)行測(cè)定。Gelain et al; PLoS ONE; 2006, (1), 1-11.17答辯內(nèi)容項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容預(yù)期的成果經(jīng)費(fèi)預(yù)算4123183.預(yù)期的成果目標(biāo)小分子水凝膠分子設(shè)計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)理化表征酶降解Small Molecular Hydrogel分

6、子設(shè)計(jì)Cell CultureAssayMolecular DesignEnzyme Degradationprotocol193.預(yù)期的成果獲得明確實(shí)驗(yàn)證據(jù)證明酶促降解的有效性。實(shí)現(xiàn)真正意義上的以小分子水凝膠為細(xì)胞支架材料的三維細(xì)胞培養(yǎng),得到明確的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案。申請(qǐng)專利:以實(shí)驗(yàn)方案為保護(hù)對(duì)象申請(qǐng)中國(guó)發(fā)明專利或以氨基酸序列為保護(hù)對(duì)象申請(qǐng)中國(guó)發(fā)明專利或?qū)嵱眯滦蛯@?。發(fā)表論文。20答辯內(nèi)容項(xiàng)目意義和創(chuàng)新點(diǎn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容預(yù)期的成果經(jīng)費(fèi)預(yù)算4123214.經(jīng)費(fèi)預(yù)算預(yù)算科目支出項(xiàng)目金額實(shí)驗(yàn)業(yè)務(wù)費(fèi)測(cè)試分析費(fèi)用:使用SEM/TEM、CD、MS、1HNMR、HPLC和聯(lián)用儀器等分析方法對(duì)材料進(jìn)行各類表征;細(xì)胞培養(yǎng)各類評(píng)價(jià)試驗(yàn)的費(fèi)用。¥2500實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)原材料、試劑、藥品的購(gòu)置費(fèi)用:氨基酸及其衍生物、固相合成樹脂等肽合成試劑及耗材,酶、培養(yǎng)基、血清等化學(xué)及生化試劑的購(gòu)置。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)耗材的購(gòu)買。¥6500圖書資料費(fèi)參考圖書、文獻(xiàn)傳遞和資料復(fù)印。¥500其他儀器設(shè)備的購(gòu)置、試制和改造。¥500合計(jì)-¥10,00022致謝感謝指導(dǎo)教師楊志謀教授給在申請(qǐng)階段提供的大力支持

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