核醫(yī)學放射自顯影術ARG課件

1、放射自顯影術（ARG） 核醫(yī)學放射自顯影術ARG1放射自顯影術（ARG） 核醫(yī)學放射自顯影術ARG1一、發(fā)展史 1867年 Nieple de st victer發(fā)展鈾鹽能使膠片感光，但引出錯誤的結論 1896年 H.Becqueral證實上述是輻射引起。 1898年 Bq.和居里夫婦 發(fā)現(xiàn)210po，226Ra 1924年 Lacassagae 首次研究鈾在生物體內(nèi)分布 19391945 各種記錄粒子徑跡的專用乳膠 1946年 Belanger和lebland更好的液體乳膠，ARG分辨力大為提高。 1950年 Pelc揭膜乳膠 1956年超微結構及電鏡ARG核醫(yī)學放射自顯影術ARG2一、發(fā)展

2、史核醫(yī)學放射自顯影術ARG2ARG的特點：定位準確 敏感度高 可定量測量，還可做形態(tài)定量分析 不需復雜設備，應用廣泛。 ARG的一般過程： 引入示蹤劑制備標本制備ARG曝光照像處理標本染色分析核醫(yī)學放射自顯影術ARG3ARG的特點：定位準確 敏感度高 可定量二、感光材料組成：銀鹽+明膠：分類： 原子核乳膠：核乳膠，干板，揭膜 氚片 X片 電影正片及幻燈片核醫(yī)學放射自顯影術ARG4二、感光材料組成：銀鹽+明膠：核醫(yī)學放射自顯影術ARG4各類材料的性質和應用1、乳膠及制品a、液體核乳膠：粘稠、10以下呈膠凍狀， 40溫溶，極限50，出廠本底3個銀粒 /1000m應用：核4所有帶電粒子 核2a粒子

3、HW34電鏡ARGb、干板：宏觀及光鏡ARGc、揭膜乳膠：光鏡定量ARG核醫(yī)學放射自顯影術ARG5各類材料的性質和應用核醫(yī)學放射自顯影術ARG5d、國外產(chǎn)品： 美 EastmanKodak NTE 英 Kodak 英 Ilford L-4 比利時 Gevaert Nuc-307 銀粒 0.07-0.4 Exp-6M 按敏感度分為： 0型：a粒子 2型：3H, 125I 5型：用于低電離作用的粒子徑跡ARG核醫(yī)學放射自顯影術ARG6d、國外產(chǎn)品：核醫(yī)學放射自顯影術ARG62、電影正片 or 幻燈片： 粒徑1m，單面涂乳膠，厚15m，外加保護層，除3H以外的各種核素宏觀ARG3、X 光片：粒徑2.

4、5m，敏感性強，但分辨力低，宏觀ARG，低能核素不適應。4、氚片：進口 LKB產(chǎn)品，國產(chǎn)也有了，粒徑1m，暗室安全光相當耐受，宏觀3H ARG5、彩色乳膠片干板：彩顯ARG核醫(yī)學放射自顯影術ARG72、電影正片 or 幻燈片：核醫(yī)學放射自顯影術ARG7三、ARG原理 原理：造成核乳膠的點陣發(fā)生缺陷（形狀不一、顆粒不完整、缺一個或一對離子等）也叫“敏化中心”。 當射線作用乳膠時，電離的電子向“敏化中心”移動，.較多時或形成靜電膜，吸引Ag+移動。雖量少1/100億，但有巨大催化作用，能使溴化銀結晶還原成金屬銀粒。當顯影時兩者被顯出的速度不同，很容易區(qū)分。核醫(yī)學放射自顯影術ARG8三、ARG原理

5、原理：造成核乳膠的點陣發(fā)生缺陷（形狀不一1、潛影形成：2、潛影消退：3、顯影及顯影劑： 最常用的顯影劑： D-196和D-19 1）米吐爾（硫酸甲基對氨基苯酸）主份，強還原劑2）亞硫酸鈉：保護劑，能中和還原劑的氧化物，延長顯影效力，還可溶解部分銀粒，減少其相互結合而導致粒變粗 3）海德爾（以苯二酚）：強還原劑，但與米吐爾不同。但與米吐爾不同。它還原力低，影像出現(xiàn)緩慢，可使影像密度增加 核醫(yī)學放射自顯影術ARG91、潛影形成：核醫(yī)學放射自顯影術ARG94）碳酸鈉：促進劑，增加顯影5）溴化鉀：抑制劑，抑制未感光的銀鹽，防止溴折出而增加灰霧，從而增加顯象的反差，使力象更清晰影響顯影的因素：（1）顯影

6、時間（2）顯影溫度（3）顯影液的攪動（4）顯影液的效力核醫(yī)學放射自顯影術ARG104）碳酸鈉：促進劑，增加顯影核醫(yī)學放射自顯影術ARG104、定影：海波（硫代硫酸鈉）溶去未形成潛影的銀晶體亞硫酸鈉：保護劑，能與酸形成亞硫酸氫根離子，從而抑制海波被酸分解。醋酸：停顯劑：終止顯影液繼續(xù)使用。鉀礬：堅膜劑，防止乳膠在定影和水洗過程中因膨脹而造成脫落，防止操作中的擦傷or劃痕。5、水洗及干燥：洗去雜質等，防止析出硫磺，它與空氣中水份氧化為硫酸，影象變黃。干燥：人工電吹風，or自然干燥，防空氣灰法沾染。 核醫(yī)學放射自顯影術ARG114、定影：核醫(yī)學放射自顯影術ARG11四、射線與乳膠的相互作用1、粒子：

7、質量大，高LET，穿透力弱，但電離密度大，直線傳播，粒子徑跡粗短而致密，不需靈敏度高的乳膠2、粒子：質量輕，射程較粒子長些，穿行路徑易改變，不一定是直線傳播，徑跡為不規(guī)則曲線，射程僅為乳膠表面的幾個顆粒層。3、射線：是一種電磁輻射，本身不帶電，不會引起電離，但它能與核or核外電子碰撞損失能量而產(chǎn)生次級帶電粒子；它穿透力強，在靶物質中損失的能量少，故很難留下清晰的徑跡，但對低能線可形成小點狀徑跡。它產(chǎn)生的次級帶電離子常使乳膠本底增加。 核醫(yī)學放射自顯影術ARG12四、射線與乳膠的相互作用核醫(yī)學放射自顯影術ARG12 4、EC、IT：在電子俘獲和內(nèi)轉換的衰變中產(chǎn)生的、X線不被乳膠記錄，但俄歇電子和

8、內(nèi)轉換電子與粒子的性質相同，可使乳膠感光。純衰變的核素：3H、14C、45Ca、35S、32P r：131I EC：125I IT：99mTc 徑跡ARG：乳膠厚度超過射線粒子的射程，記錄到的是粒子的全部徑跡，物理學研究范疇。 銀粒密度ARG：薄的乳膠層，只要求留下徑跡超始部分的銀粒。ARG常用核素，能量及射程P270表146（參考書 夏宗勤主編實驗核醫(yī)學與核藥學）核醫(yī)學放射自顯影術ARG13 4、EC、IT：在電子俘獲和內(nèi)轉換的衰變中產(chǎn)生的、X線五、ARG的分辨力、效率、本底及示蹤1、分辨力：定義，區(qū)別示蹤物在組織中準確位置的能力。 區(qū)分兩個鄰近結構（放射源）表示方法：半距離HD 半半徑 H

9、R 它是反映影象散射情況的常用指標。應注意：HD、HR指反映顆粒的散射情況，并不說明ARG所能分辨的最小距離或源的大小。HD、HR越小，分辨力越高3H 光鏡ARG HD在0.30.4m 電鏡ARG HD在80180nm核醫(yī)學放射自顯影術ARG14五、ARG的分辨力、效率、本底及示蹤核醫(yī)學放射自顯影術ARG影響分辨力的因素：a、銀粒的大小b、乳膠厚度c、標本與乳膠間距d、射線能量e、曝光時間f、顯影時間g、標本厚度h、本底 核醫(yī)學放射自顯影術ARG15影響分辨力的因素：核醫(yī)學放射自顯影術ARG152、效率：定義：曝光t內(nèi)，示蹤劑每100次衰變所造成的顯影銀顆粒數(shù)目。 表示方法：百分比/100m2

10、 影響效率的因素a、LET f、 曝光時間b、標本厚度 g、 源乳距c、乳膠厚度 h、顯影條件d、 銀粒大小 i、曝光時間太長時e、乳膠敏感度核醫(yī)學放射自顯影術ARG162、效率：核醫(yī)學放射自顯影術ARG163、本底：沒有放射性時的銀顆粒本底增高的因素：a、紅燈過亮b、外環(huán)境輻射c、顯影時間過長d、乳膠受到壓力或張力的作用e、標本中有還原物f、乳膠保存過久核醫(yī)學放射自顯影術ARG173、本底：沒有放射性時的銀顆粒核醫(yī)學放射自顯影術ARG174、示蹤劑用量與曝光時間 一般原則：輻射強時，曝光時間可縮短，而射線弱時，曝光時間相應延長。影響因素：a、核素的性質b、核素引入的途徑c、示蹤劑劑型d、核素

11、在體內(nèi)的分布和蓄積狀況e、標本制備時間長時，核素易丟失f、 感光材料的靈敏度目前最常用的是：實驗確定曝光法。核醫(yī)學放射自顯影術ARG184、示蹤劑用量與曝光時間核醫(yī)學放射自顯影術ARG18六、ARG的各種方法1、宏觀ARG： 接觸法：適于磨片，動物整體切片植物片2、光鏡ARG：用于非擴散性示蹤劑（石蠟切片） 浸膜法：從乳膠中提出來 裱貼法：在溫水中撈起標本和干板 揭膜乳膠法：在溫水中撈起標本和揭膜 用于擴散性示蹤劑（冰凍切片）： 融表法：冷沾取切片 絞鏈接觸法：復雜核醫(yī)學放射自顯影術ARG19六、ARG的各種方法1、宏觀ARG：核醫(yī)學放射自顯影術ARG3、電鏡ARG：亞細胞水平，分辨力極高，要

12、求標本和乳膠層極薄，Ilford L4或HW4乳膠常用，顆粒140nm，示蹤劑用量是光鏡的10倍。 浸膜法： 金屬環(huán)法：4、細胞涂片ARG： a、血涂片ARG b、骨髓涂片ARG核醫(yī)學放射自顯影術ARG203、電鏡ARG：亞細胞水平，分辨力極高，要求標本和乳膠層極薄ARG圖像閱讀分析 圖像中銀粒沉著處，反映標本中核素的存在部位，也表示標記物定位。一、宏觀ARG：可直接看or放大鏡，黑度表示放素所在部位，越黑說明放射性越強，含某物標記物越多，如要精確定位，必須與原標本重合在一起觀察。二、微觀ARG：a、銀粒與組織結構的關系用微調(diào)來確定。b、銀粒與其它顆粒的區(qū)別，用改變焦點來觀察它們的大小，顏色和

13、外形。c、 區(qū)別標本內(nèi)與標本外乳膠中的銀粒d、定量以銀粒計數(shù)表示。 核醫(yī)學放射自顯影術ARG21ARG圖像閱讀分析 圖像中銀粒沉著處，反映標本 定量分析法：預先制作一套已知活度梯度的放射源標準系列片，與待測標本在同一張乳膠上曝，顯，定。圖像用黑度計or光密度計讀數(shù)，以標準梯度活度為縱坐標，光密度值為橫坐標，繪一條標準曲線，即可定量。 還有如下定量法： 視測顆粒計數(shù)：顆粒數(shù)/cm 顯微光度計測定： 電視掃描裝置（三）亞微觀ARG：電鏡ARG，它圖象中銀粒呈扭曲的絲團狀，故易辨認。 核醫(yī)學放射自顯影術ARG22 定量分析法：預先制作一套已知活度梯度的放射八、熒光增敏微觀ARG適于顯影不太清楚or放射性較弱的組織AGR。特點：在乳膠中加入了閃爍劑。九、雙標記ARG當需要研究機體同時攝入的多種放素摻入細胞的區(qū)別時，必須用雙標記。依據(jù)：選用兩種不同的輻射類型不同能量不同半衰期不同分布定位核醫(yī)學放射自顯影術ARG23八、熒光增敏微觀ARG核醫(yī)學放射自顯影術ARG23選用、輻射體，粒子密度大，呈直線形徑跡，密度小，單個銀顆粒。能量不同：兩次涂乳膠法得到ARG影像加以區(qū)別。 3H、14C 第一次乳膠，反映3H、14C之和第二次乳膠，先涂一層火棉膠，只反映高能量14C不同的T1/2： 131I， 3H，兩者衰變速率相差極大，可先涂火棉膠做中間層，阻斷3H射出