干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)

1、干細(xì)胞治療糖尿病及糖尿病足有效性和安全性評(píng)價(jià)1干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)糖尿病是一種慢性全身性免疫代謝性疾病。在臨床上，糖尿病分為型和型，約占患者總?cè)藬?shù)10%為型患者要依賴胰島素治療；30%的型患者其后期也需要依賴胰島素治療。2干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)3干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)4干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)目前用干細(xì)胞治療糖尿病的方法如下： (1)自體骨髓干細(xì)胞移植：抽取糖尿病患者自身的骨髓干細(xì)胞，在體外經(jīng)過藥物的誘導(dǎo)，將骨髓干細(xì)胞定向培養(yǎng)、分化成能夠產(chǎn)生胰島素的細(xì)胞，再注入患者體內(nèi)治療糖尿病。這種方法具有取材容易、價(jià)格

2、低廉、療效穩(wěn)定、重復(fù)性好，無排斥反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，是能夠治療糖尿病的方法。 5干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)目前用干細(xì)胞治療糖尿病的方法如下：(2)自體外周血干細(xì)胞移植：即采用血液成分分離技術(shù)，經(jīng)過小時(shí)以上的反復(fù)過濾，將患者自身血液內(nèi)分散的骨髓干細(xì)胞集中起來，在體外經(jīng)藥物的作用，對(duì)干細(xì)胞的DNA進(jìn)行修飾、擴(kuò)增、更新和改造，使其基因重組，變成能分泌胰島素的細(xì)胞，再由滅毒的感冒病毒做載體，輸入到患者體內(nèi)相應(yīng)的臟器。 6干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)目前用干細(xì)胞治療糖尿病的方法如下：(3)人胚胎干細(xì)胞移植：胚胎干細(xì)胞是一種未分化的多功能細(xì)胞，存在于胚胎、骨髓、臍帶、胎盤和成人的

3、血細(xì)胞中，它可以培養(yǎng)成肌肉、神經(jīng)、骨、胰島細(xì)胞，以治療相應(yīng)的病癥。從胚囊中分離出胚胎干細(xì)胞，并定向誘導(dǎo)分化為能分泌胰島素的細(xì)胞，再移植到發(fā)病部位，就能修復(fù)受損的胰島組織，從而治療糖尿病。人胚胎干細(xì)胞移植具有免疫原性低、排斥反應(yīng)輕等優(yōu)點(diǎn)。但此種方法正在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中試用。 7干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)目前用干細(xì)胞治療糖尿病的方法如下：(4)臍血干細(xì)胞移植：臍血干細(xì)胞再生能力強(qiáng)，是成人骨髓干細(xì)胞再生能力的1020倍。抽取的臍血可定向培養(yǎng)，從而分化出多種組織細(xì)胞以治療相應(yīng)的疾病，如糖尿病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、白血病等。8干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)一、糖尿病足的簡(jiǎn)介根據(jù)世界衛(wèi)

4、生組織（WHO）定義：糖尿病足是指糖尿病患者由于合并神經(jīng)病變及各種不同程度末梢血管病變而導(dǎo)致下肢感染、潰瘍形成和（或）深部組織的破壞 。在臨床上，由于糖尿病患者由于長(zhǎng)期受到高血糖的影響，下肢血管硬化、血管壁增厚、彈性下降，血管容易形成血栓，并集結(jié)成斑塊，而造成下肢血管閉塞、支端神經(jīng)損傷，從而造成下肢組織病變。而“足”離心臟最遠(yuǎn)，閉塞現(xiàn)象最嚴(yán)重，從而引發(fā)水腫、發(fā)黑、腐爛、壞死，形成脫疽。目前，各大醫(yī)院對(duì)糖尿病足患者一般采取截肢、搭橋或干細(xì)胸移植手術(shù)。9干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)10干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)糖尿病足患者常表現(xiàn)為四種情況（1）管腔狹窄早期：行走時(shí)

5、出現(xiàn)疼痛為特征的間歇性跛行 （2）隨著狹窄的加重可出現(xiàn)靜息痛甚至喪失行走能力 （3）嚴(yán)重肢體缺血致組織潰瘍發(fā)生 （4）組織壞疽 11干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)12干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)13干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)14干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)15干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)糖尿病足患者常表現(xiàn)為四種情況 后兩種情況預(yù)后極差，5年生存率僅為50%或更低。截肢目前被認(rèn)為是這部分患者最好的治療選擇，但截肢后的總死亡率大約為25%-50%，圍手術(shù)期的死亡率為5%-20%，二次截肢率大約為30%。由于彌漫性的、多

6、節(jié)段的病變和/或遠(yuǎn)端流出道閉塞，或者由于存在并發(fā)癥，糖尿病足患者在圍手術(shù)期存在死亡的風(fēng)險(xiǎn)。盡管微創(chuàng)接入技術(shù)和外科干預(yù)技術(shù)發(fā)展很快，大約40%的患者不符合進(jìn)行血循重建的指征或進(jìn)行血循重建不能得到有益的反應(yīng)，而且目前又缺乏有效的藥物治療。因此，探索缺血肢體血循重建的新的治療策略對(duì)于減少患者截肢，提高其生活質(zhì)量具有非常重要的臨床意義 。16干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)二、干細(xì)胞治療糖尿病足的機(jī)理 干細(xì)胞治療糖尿病足等缺血性下肢血管病是國內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的一項(xiàng)新技術(shù)，近年來經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，國內(nèi)外已有數(shù)家醫(yī)院進(jìn)行了2000例左右患者的臨床研究。其理論基礎(chǔ)是干細(xì)胞具有多向分化潛能，

7、在特定環(huán)境中可分化為各種機(jī)體組織細(xì)胞，包括成血管細(xì)胞和血管內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPC)，進(jìn)一步形成新生毛細(xì)血管。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，對(duì)缺血肢體行骨髓干細(xì)胞（BMSC）、外周血干細(xì)胞（PBSC）和內(nèi)皮祖細(xì)胞移植后，可分泌諸如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）等促進(jìn)血管生成因子，形成新的血管內(nèi)皮細(xì)胞及血管。將干細(xì)胞移植到下肢和足部缺血部位，可從先前存在的血管床發(fā)芽生成新的毛細(xì)血管，它能給血管狹窄或閉塞的患者提供一個(gè)治療性生物“旁路”，稱之為細(xì)胞性血管搭橋手術(shù)。17干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)18干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)19干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)三、國內(nèi)外研究現(xiàn)

8、狀20干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)三、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀2002年Eriko等報(bào)告采用自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植治療缺血性下肢血管病變?nèi)〉脻M意療效。2003年黃平平等采用自體外周血單個(gè)核細(xì)胞移植治療1例下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥，使該例患者避免了截肢致殘的后果。此后，采用干細(xì)胞療法治療糖尿病足的報(bào)道不斷增加，PubMed檢索已達(dá)百余篇。資料顯示干細(xì)胞療法療效顯著：一般冷感疼痛緩解率為83%100%，ABI改善率為44%92%，保肢率為78%85%。最常采用的是成人自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植和成人自體外周血單個(gè)核細(xì)胞移植的方法。21干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)四、干細(xì)胞治療糖尿病足臨

9、床研究（一）病人的選擇 1、干細(xì)胞移植適用于一下幾種情況（1）動(dòng)脈血管閉塞在下肢末端，動(dòng)脈流出道差的患者，如腘動(dòng)脈、腓動(dòng)脈、足背動(dòng)脈血管閉塞的病人（2）血管閉塞在股動(dòng)脈及以上部位，但因年齡、基礎(chǔ)疾病、身體情況差而不能耐受血管搭橋、介入相關(guān)治療者 (3)血管閉塞較為廣泛，不但存在高位動(dòng)脈閉塞，同時(shí)有流出道差的患者，外科治療較難進(jìn)行者 (4)上段動(dòng)脈行介入治療后，配合膝關(guān)節(jié)以下干細(xì)胞移植，將得到更好的治療效果（5）血栓閉塞性脈管炎往往累及上肢，多見肱動(dòng)脈以下血管閉塞，給予行干細(xì)胞移植，效果良好。22干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)23干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)以下情況

10、不適宜干細(xì)胞移植1.足部急性缺血，常見原因?yàn)樯隙窝軆?nèi)栓子脫落，隨血流下行，閉塞下端官腔較細(xì)的動(dòng)脈，導(dǎo)致該動(dòng)脈供血區(qū)急性缺血；或動(dòng)脈內(nèi)急性血栓形成，閉塞血管，導(dǎo)致急性缺血，該兩種情況表現(xiàn)為肢體急性缺血，足部發(fā)涼、皮膚顏色變暗發(fā)展較快，疼痛嚴(yán)重2.足部缺血病變嚴(yán)重，多個(gè)足趾和部分足部壞疽3.足部破潰合并感染4.較嚴(yán)重心腦血管病變不穩(wěn)定期，如患者3個(gè)月內(nèi)曾發(fā)生腦梗塞、心肌梗塞5.存在較為嚴(yán)重的基礎(chǔ)病變，如慢性心功能不全、腎功能不全等6.存在腫瘤疾病24干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（二）干細(xì)胞移植術(shù)前準(zhǔn)備1.病人的準(zhǔn)備 對(duì)于適合干細(xì)胞移植的患者，在入院后常規(guī)檢查心電圖、胸片、化驗(yàn)血象

11、、肝腎功能、血脂等各項(xiàng)，同時(shí)對(duì)其基礎(chǔ)疾病如高血壓、高血糖積極治療，如以上檢查無明顯異常，并血糖、血壓控制在較好的范圍后，可以給予治療。25干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（二）干細(xì)胞移植術(shù)前準(zhǔn)備2.干細(xì)胞來源的選擇 目前應(yīng)用于臨床的干細(xì)胞有自體骨髓干細(xì)胞、自體外周血干細(xì)胞、臍血干細(xì)胞、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。 （1）自體骨髓干細(xì)胞是經(jīng)骨髓穿刺獲得干細(xì)胞； （2）自體外周血干細(xì)胞來源于患者外周血，但在正常外周血中，干細(xì)胞含量很少，為了得到大量干細(xì)胞，應(yīng)用重組人粒細(xì)胞集落刺激因子刺激骨髓中的干細(xì)胞釋放入外周血中，該過程稱之為干細(xì)胞動(dòng)員。研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)動(dòng)員的自體外周血中干細(xì)胞含量數(shù)量高，得到的干

12、細(xì)胞數(shù)量較采集骨髓的多。 （3）目前高齡、自體骨髓干細(xì)胞活性差、不宜進(jìn)行骨髓采集的年老體弱患者采用臍帶血、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植，取得較好療效。26干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備27干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備1.自體骨髓血干細(xì)胞采集分離 骨髓干細(xì)胞采集一般穿刺點(diǎn)選擇在雙側(cè)髂后上棘，患者俯臥位，暴露穿刺點(diǎn)，嚴(yán)格無菌操作，局部麻醉，穿刺成功后緩慢抽取骨髓，為減少混血及保證干細(xì)胞含量，給予換部位多點(diǎn)穿刺，結(jié)合年紀(jì)、體重、需要移植范圍決定采集量。28干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)29干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)

13、（三）干細(xì)胞制備2.自體外周血干細(xì)胞動(dòng)員和采集2.1 自體外周血干細(xì)胞動(dòng)員 用粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）進(jìn)行干細(xì)胞動(dòng)員，5-10ug/kg/d,分早晚兩次皮下注射，連續(xù)動(dòng)員5天，動(dòng)員期間每日監(jiān)測(cè)外周血WBC計(jì)數(shù)。動(dòng)員5天后，絕大多數(shù)患者外周血WBC計(jì)數(shù)均可達(dá)30 x109/L以上，此時(shí)行干細(xì)胞采集，獲取的CD133+、CD34+細(xì)胞較多，基本滿足治療要求。30干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備2.自體外周血干細(xì)胞動(dòng)員和采集2.2外周血單個(gè)核細(xì)胞（MNC）采集利用細(xì)胞分離機(jī)行MNC采集，取雙側(cè)肱靜脈為穿刺點(diǎn)，循環(huán)800010000毫升血量，采集約100120毫升M

14、NC懸液，取樣進(jìn)行計(jì)數(shù)檢測(cè)，根據(jù)統(tǒng)計(jì)資料顯示該細(xì)胞懸液中單個(gè)核細(xì)胞總數(shù)為6.08.6x1010,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示其中CD34+細(xì)胞含量為（0.321.1）%、CD133+細(xì)胞含量為（0.130.35）%。31干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)32干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備3.臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制備 取自足月剖宮產(chǎn)健康產(chǎn)婦。臍帶采集時(shí)留血進(jìn)行艾滋病毒抗體、乙型肝炎病毒抗體、丙型肝炎病毒抗體、梅毒螺旋體抗體、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、支原體等檢測(cè)，全部合格后方可進(jìn)行制備。臍帶采集后用植塊法進(jìn)行培養(yǎng)，待貼壁細(xì)胞呈梭形或多角形條索狀融合大約90%即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。33

15、干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備4.干細(xì)胞移植的方法 干細(xì)胞治療缺血性下肢血管病的移植方法為自體缺血部位的肌肉內(nèi)種植。在無菌手術(shù)室進(jìn)行，一般選擇全憑靜脈全身麻醉術(shù)，常規(guī)消毒手術(shù)野，結(jié)合其血管閉塞情況選擇手術(shù)范圍，雙下肢局部種植選擇在膝關(guān)節(jié)以下到足部，將采集的干細(xì)胞懸液按3cmX3cm間距進(jìn)行肌肉注射，每點(diǎn)注射1毫升，足部按1cmX1cm間距注射，每點(diǎn)注射0.3毫升，按患者干細(xì)胞數(shù)量及移植范圍具體情況一般注射點(diǎn)數(shù)在100左右。34干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)35干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備5.療效評(píng)估方法5.1主觀癥狀評(píng)

16、估指標(biāo) 行走距離、疼痛評(píng)分、冷感評(píng)分。1.行走距離：以米為單位，測(cè)定患者術(shù)前無疼痛行走距離，術(shù)后定期隨訪測(cè)定無疼痛行走距離，對(duì)照分析；2.疼痛評(píng)分為0-10分，0分為無痛、10分為最痛，術(shù)前后隨訪對(duì)照；3.冷感評(píng)分0+，0分為無發(fā)涼、4+為最涼，術(shù)前后對(duì)照分析。36干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)37干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備5.療效評(píng)估方法5.2客觀檢查評(píng)估指標(biāo) 應(yīng)用經(jīng)皮氧分壓、踝肱指數(shù)、皮溫測(cè)定、足底深感覺測(cè)定及動(dòng)脈CT、MRI成像進(jìn)行療效評(píng)估。1.經(jīng)皮氧分壓，使用多導(dǎo)聯(lián)經(jīng)皮氧分壓測(cè)定儀測(cè)定足背皮下組織氧含量，治療后，隨著局部毛細(xì)血管網(wǎng)形成，循

17、環(huán)改善，其經(jīng)皮氧分壓將逐漸上升；2.踝肱指數(shù)，在動(dòng)脈供血狀態(tài)改善后，其踝肱血壓比值將有一定程度上升3.皮溫測(cè)定，對(duì)其足踝部、踝背、足趾等處使用皮溫儀測(cè)定皮溫，治療后足部皮溫往往是最先改善的指標(biāo)4.足底感覺測(cè)定，足部血運(yùn)改善，使局部神經(jīng)功能得到一定改善，足底感覺測(cè)定也是一評(píng)估缺血狀態(tài)改善的一重要指標(biāo)5.動(dòng)脈CT、MRI成像，通過對(duì)于干細(xì)胞治療前后的患者肢體進(jìn)行計(jì)算機(jī)斷層血管造影（CTA）或核磁共振血管造影可發(fā)現(xiàn)治療前后細(xì)小血管網(wǎng)和側(cè)支持循環(huán)增加。38干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)39干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià) （三）干細(xì)胞制備5.療效評(píng)估方法 5.3干細(xì)胞移植效果

18、分析 自2003年以來，應(yīng)用干細(xì)胞移植技術(shù)治療556例糖尿病足及各種下肢血管病患者，總效率達(dá)87.6%。在這556例疾病中，糖尿病足206例（37.0%），血栓閉塞性脈管炎199例（35.8%），下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥151例（27.2%）。有效率依次為：血栓閉塞性脈管炎92.1%,下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥87.6%，糖尿病足85.0%。干細(xì)胞來源方面：自體外周血干細(xì)胞移植372例（66.9%），自體骨髓干細(xì)胞移植168例（30.2%），臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植16例（2.9%），有效率依次為：外周血干細(xì)胞移植91.7%，骨髓干細(xì)胞移植83.8%，臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植80.4%。無效患者占12.4%，因足部

19、壞疽、股動(dòng)脈嚴(yán)重閉塞、下肢廣泛性血管閉塞、急性下肢動(dòng)脈血栓形成、全身性嚴(yán)重疾病等干細(xì)胞治療無效，最終接受截肢手術(shù)。 40干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備5.療效評(píng)估方法5.3干細(xì)胞移植效果分析 臨床研究結(jié)果顯示，我國北方地區(qū)高發(fā)的、截肢率很高的血栓閉塞性脈管炎，干細(xì)胞移植可作為本病的首選方案。糖尿病足的干細(xì)胞治療受到很多因素干擾，療效較其他疾病稍差。干細(xì)胞來源的選擇方面，自體外周血干細(xì)胞療效優(yōu)于骨髓和臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植，但應(yīng)說明的是，選擇骨髓和臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植方案的患者病情和年齡均差于外周血干細(xì)胞移植患者。3例患者在干細(xì)胞動(dòng)員期間出現(xiàn)心、腦血管病變，經(jīng)處理后痊

20、愈，無移植相關(guān)性死亡病例。對(duì)254例患者隨訪一年以上，遠(yuǎn)期療效穩(wěn)定，一部分決定行截肢手術(shù)的患者保住肢體，避免了致殘的嚴(yán)重后果。41干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià) （三）干細(xì)胞制備6.干細(xì)胞移植不良效果及處理6.1干細(xì)胞動(dòng)員和采集 自體骨髓干細(xì)胞治療是經(jīng)穿刺抽取骨髓液分離干細(xì)胞，盡管給予充分的局部麻醉，患者仍會(huì)出現(xiàn)局部疼痛，但一般均可耐受，無特殊處理。采集后部分患者可出現(xiàn)輕度的乏力、精神不振、但經(jīng)休息后能恢復(fù)。外周血干細(xì)胞移植需用G-CSF進(jìn)行動(dòng)員，部分患者出現(xiàn)流行性感冒樣癥狀、肌痛、發(fā)熱、和骨痛，不需特殊處理。動(dòng)員期間因“高白細(xì)胞血癥”，血液粘稠度上升，可能出現(xiàn)心慌、胸悶等癥狀，

21、一般經(jīng)給予吸氧等簡(jiǎn)單處理后均能緩解。少數(shù)嚴(yán)重者可有呼吸困難或誘發(fā)嚴(yán)重心腦血管意外，高齡或心腦血管病變的患者多不采用外周血干細(xì)胞治療。42干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)43干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備6.干細(xì)胞移植不良效果及處理6.2干細(xì)胞移植技術(shù) 糖尿病足患者接受干細(xì)胞局部肌肉內(nèi)移植，均采用全憑靜脈麻醉。局部肌肉注射過程中，因短時(shí)間注射多點(diǎn)，偶爾出現(xiàn)小的皮下血腫，一般術(shù)后3-5天吸收，無特殊處理。44干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)（三）干細(xì)胞制備6.干細(xì)胞移植不良效果及處理6.3干細(xì)胞移植后 因干細(xì)胞注射于局部肌肉中，患者在術(shù)后感覺注

22、射部位酸脹疼痛不適，活動(dòng)時(shí)加重，但可耐受，約3-7天自行緩解。目前尚無因局部移植干細(xì)胞而引起肢體紅腫、潰爛、缺血加重等情況。45干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)五、存在問題1.適應(yīng)癥和禁忌癥 同其他疾病治療手段一樣，并非所有糖尿病足患者、在疾病的任何階段都適合接受干細(xì)胞移植治療。如患者足部一旦發(fā)生壞疽，應(yīng)進(jìn)行截肢治療，否則會(huì)危及生命。目前有些醫(yī)生對(duì)干細(xì)胞治療糖尿病足的適應(yīng)癥和禁忌癥掌握寬嚴(yán)不當(dāng)，影響這一技術(shù)的發(fā)展。46干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)五、存在問題2.干細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量問題 干細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量是決定療效的重要因素，沒有高數(shù)量、高質(zhì)量的干細(xì)胞就沒有患者的滿意療

23、效。獲得高數(shù)量、高質(zhì)量干細(xì)胞的前提是要建立GMP實(shí)驗(yàn)室，配置分離、培養(yǎng)干細(xì)胞的各種設(shè)備和儀器，配置血細(xì)胞分離機(jī)獲得外周血干細(xì)胞，配置流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的免疫表型和數(shù)量，配置細(xì)胞安全檢測(cè)系統(tǒng)確保產(chǎn)品無污染，制定嚴(yán)格的SOP體系等。還要有經(jīng)驗(yàn)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)員完成細(xì)胞產(chǎn)品的制備工作。47干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安全性評(píng)價(jià)五、存在問題3.療效評(píng)估問題目前所有應(yīng)用干細(xì)胞移植技術(shù)治療血管病的醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)患者術(shù)前后隨訪觀察項(xiàng)目均是疼痛、發(fā)涼程度、無痛行走距離等主觀指標(biāo)和皮溫測(cè)定、經(jīng)皮氧分壓測(cè)定、臂踝指數(shù)測(cè)定等客觀指標(biāo)，較好的還做到術(shù)前后動(dòng)脈血管CT、MRI造影的對(duì)照研究，但這些均是宏觀上的觀察，對(duì)一些基礎(chǔ)項(xiàng)目，如局部肌肉血管的病理學(xué)檢查、細(xì)胞分化的示蹤、血管結(jié)構(gòu)成分的分析以及局部微環(huán)境細(xì)胞因子變化等，均難以進(jìn)行深入的研究。48干細(xì)胞診療糖尿病及糖尿病足有效性及安