艾滋病檢測質(zhì)量控制培訓(xùn)課件

1、艾滋病檢測質(zhì)量控制艾滋病檢測質(zhì)量控制全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009年修訂版 第九章艾滋病檢測實驗室質(zhì)量管理2艾滋病檢測質(zhì)量控制全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009年修訂版2艾滋病檢測質(zhì)量控艾滋病檢測實驗室質(zhì)量管理范圍質(zhì)量保證質(zhì)量控制質(zhì)量評價3艾滋病檢測質(zhì)量控制艾滋病檢測實驗室質(zhì)量管理范圍質(zhì)量保證3艾滋病檢測質(zhì)量控制一、質(zhì)量保證為了提供足夠的信任，表明實體能夠滿足質(zhì)量要求，而在質(zhì)量體系中實施，并根據(jù)需要進(jìn)行證實的，全部有計劃和有系統(tǒng)的活動。4艾滋病檢測質(zhì)量控制一、質(zhì)量保證為了提供足夠的信任，表明實體能夠滿足質(zhì)量要求，而質(zhì)量保證內(nèi)容1、行政支持2、人員培訓(xùn)3、環(huán)境條件4、樣品采集、運(yùn)送和處理5、檢測方法

2、和試劑的選擇6、設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)7、實驗耗材8、文件和文件管理5艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)量保證內(nèi)容1、行政支持5艾滋病檢測質(zhì)量控制1 、行政支持行政領(lǐng)導(dǎo)應(yīng)將艾滋病檢測實驗室的建設(shè)、發(fā)展和質(zhì)量管理納入地方衛(wèi)生行政規(guī)劃；保證實驗室負(fù)責(zé)人和主要技術(shù)人員隊伍的穩(wěn)定；給予充足的經(jīng)費(fèi)支持，進(jìn)行經(jīng)常性監(jiān)督檢查。6艾滋病檢測質(zhì)量控制1 、行政支持行政領(lǐng)導(dǎo)應(yīng)將艾滋病檢測實驗室的建設(shè)、發(fā)展和質(zhì)量2、人員培訓(xùn)檢測技術(shù)人員需經(jīng)過上崗培訓(xùn)和在崗持續(xù)培訓(xùn)。 上崗培訓(xùn)內(nèi)容至少應(yīng)包括：艾滋病檢測相關(guān)基礎(chǔ)知識，艾滋病相關(guān)檢測技術(shù)及管理要求，實驗操作，質(zhì)量保證與質(zhì)量控制，生物安全。要求掌握相關(guān)專業(yè)知識和技能，能獨立熟練地操作，并經(jīng)考核

3、合格，持證上崗。 在崗持續(xù)培訓(xùn)指在工作中要根據(jù)需要接受復(fù)培訓(xùn)，確證實驗室技術(shù)人員每年至少1次，篩查實驗室技術(shù)人員至少每2年1次，除接受檢測基本培訓(xùn)內(nèi)容外，要求了解相關(guān)技術(shù)、質(zhì)控及安全要求的新進(jìn)展。實驗室在使用新方法前，須對技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn)，獲得資格后方可開展相應(yīng)工作。檢測人員應(yīng)分為檢驗人、復(fù)核人、簽發(fā)人。復(fù)核人、簽發(fā)人應(yīng)具備對檢測過程進(jìn)行分析和解決問題的能力。7艾滋病檢測質(zhì)量控制2、人員培訓(xùn)檢測技術(shù)人員需經(jīng)過上崗培訓(xùn)和在崗持續(xù)培訓(xùn)。73、環(huán)境條件 抗體檢測實驗室環(huán)境 艾滋病確證實驗室及篩查實驗室的設(shè)置及其建筑、設(shè)施、設(shè)備必須符合全國艾滋病檢測工作管理辦法的要求。HCV，HBV及梅毒等血清學(xué)檢測

4、在滿足實驗室管理要求和保證生物安全的條件下，可以與HIV檢測共享空間和設(shè)備，應(yīng)避免交叉污染。8艾滋病檢測質(zhì)量控制3、環(huán)境條件 抗體檢測實驗室環(huán)境8艾滋病檢測質(zhì)量控制4、樣品采集、運(yùn)送和處理樣品種類 全血、血清、血漿、唾液、尿液樣品可用于HIV抗體檢測。9艾滋病檢測質(zhì)量控制4、樣品采集、運(yùn)送和處理樣品種類9艾滋病檢測質(zhì)量控制4.1采樣前準(zhǔn)備按照臨床采血技術(shù)規(guī)范的要求操作，遵守生物安全要求，根據(jù)檢測項目的具體要求，確定采集樣品的種類、處理、保存及運(yùn)輸?shù)臅r限和方法。要檢查所需物品是否已備齊，是否在有效期內(nèi)，有無破損，是否足量，特別應(yīng)檢查受檢者信息與樣品容器表面的標(biāo)記是否一致，并注明樣品采集時間。選擇

5、合適的室內(nèi)（外）采血空間，受檢者坐（臥）于合適的位置，準(zhǔn)備采血用具、皮膚消毒用品、采血管及試管架、硬質(zhì)廢棄物容器等。10艾滋病檢測質(zhì)量控制4.1采樣前準(zhǔn)備10艾滋病檢測質(zhì)量控制4.1.1樣品的編碼和記錄 樣品制定唯一性編碼（編號），保證其唯一性。4.1.2采血前，要將標(biāo)簽貼在試管的側(cè)面，最好使用預(yù)先印制好的、專門用于冷凍儲存的耐低溫標(biāo)簽。核對后編碼。4.1.3應(yīng)使用專門的樣品記錄本或登記表記錄樣品，同時錄入電腦保存。11艾滋病檢測質(zhì)量控制4.1.1樣品的編碼和記錄11艾滋病檢測質(zhì)量控制4.2血液采集 1、抗凝全血：消毒局部皮膚，用加有抗凝劑（EDTA鈉鹽或鉀鹽、枸櫞酸鈉、肝素鈉）的真空采血管抽

6、取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管中，輕輕顛倒混勻68次，備用。2、末梢全血：消毒局部皮膚（成人和1歲以上兒童可選擇耳垂、中指、無名指或食指。1歲以下兒童采用足跟部）。用采血針刺破皮膚，用無菌紗布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，備用。3、血漿：將采集的抗凝全血15003000r/min離心15min，上層即為血漿，吸出置于合適的容器中，備用。4、血清：根據(jù)需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取510ml靜脈血，室溫下自然放置12h，待血液凝固、血塊收縮后再用15003000r/min離心15min，吸出血清，置于合適的容器中，備用。5、采血完成后的穿刺針頭必須丟棄

7、于尖銳危險品容器里，妥善處理，防止發(fā)生職業(yè)暴露。12艾滋病檢測質(zhì)量控制4.2血液采集 1、抗凝全血：消毒局部皮膚，用加有抗凝劑4.3樣品的保存用于抗體和抗原檢測的血清或血漿樣品，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于28， 一周以上應(yīng)存放于-20以下。艾滋病檢測篩查實驗室檢測的篩查陽性樣品應(yīng)及時送確證實驗室，篩查陰性樣品，可根據(jù)具體需要決定保存時間，建議至少保存12個月。特殊用途或?qū)ｍ楉椖康臉悠犯鶕?jù)具體要求確定保存時間。 13艾滋病檢測質(zhì)量控制4.3樣品的保存13艾滋病檢測質(zhì)量控制4.4樣品的運(yùn)送1、要獲得相應(yīng)部門批準(zhǔn)并由具有資質(zhì)的人員專程護(hù)送。2、應(yīng)符合生物安全要求,應(yīng)采用三層容器對樣品進(jìn)行包裝，

8、隨樣品應(yīng)附有與樣品唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標(biāo)明受檢者姓名、樣品種類等信息，并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。14艾滋病檢測質(zhì)量控制4.4樣品的運(yùn)送14艾滋病檢測質(zhì)量控制3、用于抗體檢測的血清和血漿樣品應(yīng)在凍存條件下運(yùn)送。4、用于CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞測定的樣品應(yīng)在室溫下（1825）或4（特殊要求時）運(yùn)送。5、用于病毒載量檢測的樣品應(yīng)在-20以下運(yùn)輸。15艾滋病檢測質(zhì)量控制3、用于抗體檢測的血清和血漿樣品應(yīng)在凍存條件下運(yùn)送。15艾滋6、運(yùn)送樣品必須有記錄。7、特殊情況下經(jīng)有關(guān)部門批準(zhǔn)可以用特快專遞郵寄樣品，但必須按三層包裝，將樣品管包扎好，嚴(yán)禁使用玻璃容器。16艾滋病檢測質(zhì)量控制

9、6、運(yùn)送樣品必須有記錄。16艾滋病檢測質(zhì)量控制4.5樣品的接收1、樣品包裹必須在具有處理感染性材料能力的實驗室內(nèi)、由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣、戴口罩、防護(hù)眼鏡的工作人員在生物安全柜中打開，用后的包裹應(yīng)及時進(jìn)行消毒。2、核對樣品與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器消毒，同時報告實驗室負(fù)責(zé)人和上一級實驗室技術(shù)人員。3、檢查樣品的狀況，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受，應(yīng)將樣品安全廢棄。并將樣品情況立即通知送樣人。4、接收樣品時應(yīng)填寫樣品接收單。17艾滋病檢測質(zhì)量控制4.5樣品的接收1、樣品包裹必

10、須在具有處理感染性材料能5、檢測方法和試劑的選擇應(yīng)使用經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)的試劑。應(yīng)選擇敏感性高、特異性好的試劑；診斷試劑臨床質(zhì)量評價；更換試劑批號時，應(yīng)進(jìn)行平行試驗，即新批號試劑在測定質(zhì)控品（已知結(jié)果）時能夠獲得與原試劑相同的結(jié)果。所有試劑盒須嚴(yán)格按要求條件保存。試劑盒拆封時，要記錄拆封時間，所有試劑嚴(yán)格控制在有效期內(nèi)使用。18艾滋病檢測質(zhì)量控制5、檢測方法和試劑的選擇18艾滋病檢測質(zhì)量控制6、設(shè)備校準(zhǔn)與維護(hù)6.1 設(shè)備校準(zhǔn)實驗室應(yīng)設(shè)立常用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以保證檢測工作正常運(yùn)轉(zhuǎn)。必須經(jīng)國家法定部門計量部門定期（每年至少1次）校準(zhǔn)的儀器至少包括：酶標(biāo)儀/洗板機(jī)，加樣器，溫度計

11、，高壓滅菌器 。必要時可根據(jù)需求每12個季度進(jìn)行期間核查。其他精密儀器及出具實驗結(jié)果的儀器，如生物安全柜，全自動蛋白印跡儀，CD4細(xì)胞測定儀、病毒載量測定儀、耐藥檢測儀、離心機(jī)等也必須定期（每年1次）校準(zhǔn)，可請生產(chǎn)廠家校準(zhǔn)。19艾滋病檢測質(zhì)量控制6、設(shè)備校準(zhǔn)與維護(hù)19艾滋病檢測質(zhì)量控制6.2設(shè)備維護(hù)及使用紀(jì)錄酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī) 每天：核對濾光片波長，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。 每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵。每月：檢查洗滌時各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求。每年：檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點則要更換。根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對濾

12、光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。 實驗過程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要的部件20艾滋病檢測質(zhì)量控制6.2設(shè)備維護(hù)及使用紀(jì)錄酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)20艾滋病檢測移液器 定期（每年至少1次）校準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)隨時進(jìn)行校準(zhǔn)。 標(biāo)定方法包括有色溶液光譜分析法、稱量校準(zhǔn)法、同位素計數(shù)法以及使用配套校準(zhǔn)盒等。 校準(zhǔn)多道移液器時，必須保證每一個加樣頭都能夠連續(xù)、準(zhǔn)確地加樣。移液器的精密度應(yīng)在廠家說明書規(guī)定的范圍內(nèi)。 21艾滋病檢測質(zhì)量控制移液器21艾滋病檢測質(zhì)量控制冰箱和孵育箱每天檢查和記錄冰箱溫度，每個工作日檢查記錄孵育箱溫度，并做好記錄。 使用經(jīng)過計量部門校準(zhǔn)合格的溫度計測量冰箱

13、和孵育箱的實際溫度；根據(jù)不同規(guī)格冰箱和凍存樣品性質(zhì)對溫度要求不同，保存抗體檢測樣品及考核盤適宜在-20冰箱，要求冰箱溫度低于-15；放置要求4保存的試劑盒的冰箱溫度應(yīng)在28；用于培養(yǎng)的孵育箱溫度誤差應(yīng)小于1。用于冷凍核酸和抗原檢測的血漿、淋巴細(xì)胞和病毒上清適宜在-70冰箱，要求冰箱溫度低于-65；22艾滋病檢測質(zhì)量控制冰箱和孵育箱22艾滋病檢測質(zhì)量控制其它儀器 離心機(jī)、生物安全柜、高壓滅菌器全自動蛋白印跡儀、CDT淋巴細(xì)胞測定儀、病毒載量測定儀等，每次使用前檢查儀器是否處于正常運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)，并做好記錄。 使用過程中或使用后檢查發(fā)現(xiàn)問題，應(yīng)及時報告，并請專業(yè)公司進(jìn)行維修，直至運(yùn)轉(zhuǎn)正常。23艾滋病檢測

14、質(zhì)量控制其它儀器23艾滋病檢測質(zhì)量控制7、實驗耗材 實驗室需選購質(zhì)量優(yōu)良的耗材，以保證檢測工作安全和結(jié)果的可靠性，并定期（每批次）或在更換產(chǎn)品時對耗材進(jìn)行質(zhì)量評價。24艾滋病檢測質(zhì)量控制7、實驗耗材24艾滋病檢測質(zhì)量控制8、文件和文件管理25艾滋病檢測質(zhì)量控制8、文件和文件管理25艾滋病檢測質(zhì)量控制8.1標(biāo)準(zhǔn)操作程序 （SOP）文件：是指各級艾滋病實驗室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件 篩查及確證實驗室SOP文件至少應(yīng)包括：（1）樣品的接收、登記、處理、保存和運(yùn)輸；（2）檢測方法和步驟；（3）試劑使用和保存；（4）儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)；（5）質(zhì)量控制要求及程序；（6）結(jié)果解釋與報告；（7）保

15、密程序；（8）實驗室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存；（9）不確定樣品追蹤和處理；（10）實驗室安全防護(hù)及實驗室的清理和消毒。26艾滋病檢測質(zhì)量控制8.1標(biāo)準(zhǔn)操作程序 （SOP）文件：是指各級艾滋病實驗室要SOP另外包括以下內(nèi)容（1）標(biāo)題和編號；（2）編寫和修訂日期；（3）編寫和修訂人員姓名；（4）方法、目的和應(yīng)用范圍；（5）附錄，包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說明書等。27艾滋病檢測質(zhì)量控制SOP另外包括以下內(nèi)容（1）標(biāo)題和編號；27艾滋病檢測質(zhì)量SOP編寫及修訂由各崗位工作人員起草，實驗室主任審定，每年修訂一次。修訂應(yīng)該在實驗室主管人員（技術(shù)負(fù)責(zé)人）的領(lǐng)導(dǎo)下進(jìn)行。所有工作人員要在所從事

16、工作的SOP文件上簽名表示已經(jīng)閱讀并掌握了有關(guān)內(nèi)容。實驗過程中應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），不得擅自修改。28艾滋病檢測質(zhì)量控制SOP編寫及修訂由各崗位工作人員起草，實驗室主任審定，每年修8.2實驗原始記錄表 應(yīng)按實驗要求，設(shè)計試驗操作原始記錄表，標(biāo)明空白對照、陽性對照、陰性對照、外部對照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實驗人員加樣。要注明試劑盒廠家、測定方法、批號、效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測日期。附表1原始記錄表、2原始記錄表29艾滋病檢測質(zhì)量控制8.2實驗原始記錄表 應(yīng)按實驗要求，設(shè)計試驗操作原始記8.3 結(jié)果報告分析結(jié)果及發(fā)出檢測報告前，應(yīng)注意須在試劑盒及外部質(zhì)控品結(jié)果滿足要求的

17、前提下，對樣品進(jìn)行分析。試劑盒及外部質(zhì)控品不合格，樣品需要重新檢測；復(fù)核人對檢測結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)復(fù)核并對結(jié)果提出結(jié)論，簽發(fā)人對試驗結(jié)論進(jìn)行審核、分析、總結(jié)、簽字。 30艾滋病檢測質(zhì)量控制8.3 結(jié)果報告30艾滋病檢測質(zhì)量控制8.4 樣品登記和保存收到樣品后，建立唯一編碼，及時登記有關(guān)信息，包括受檢者姓名或代號、試管編號、性別、年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢驗結(jié)果、送檢日期、報告日期、備注（必要時記錄通信地址）等。HIV陽性樣品的保存記錄應(yīng)包括HIV陽性樣品的類型、貯存量、貯存溫度、貯存起始時間以及樣品保管人姓名。31艾滋病檢測質(zhì)量控制8.4 樣品登記和保存31艾滋病檢測質(zhì)量控制8.5文件存檔實

18、驗原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、免疫印跡試驗的膜反應(yīng)條帶或其照片、檢測記錄表、樣品登記、樣品保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄、人員培訓(xùn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存10年以上。最好同時使用計算機(jī)保存各種文件和記錄。32艾滋病檢測質(zhì)量控制8.5文件存檔實驗原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、免疫印跡試驗的膜一、質(zhì)量保證1、行政支持2、人員培訓(xùn)3、環(huán)境條件4、樣品采集、運(yùn)送和處理5、檢測方法和試劑的選擇6、設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)7、實驗耗材8、文件和文件管理33艾滋病檢測質(zhì)量控制一、質(zhì)量保證1、行政支持33艾滋病檢測質(zhì)量控制二、質(zhì)量控制34艾滋病檢測質(zhì)量控制二、質(zhì)量控制34艾滋病檢測質(zhì)量控制現(xiàn)代質(zhì)量控制理論全過程的實驗室質(zhì)量控制

19、是指實驗室內(nèi)為達(dá)到質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動，適用于得出檢驗結(jié)果所有的步驟和活動。有些實驗室工作人員僅注重畫質(zhì)控圖， 這是一種“狹義的” 質(zhì)控;檢驗的全過程質(zhì)控 (簡稱：全程質(zhì)控) 是一種“廣義的” 質(zhì)控。 內(nèi)部質(zhì)量控制（室內(nèi)質(zhì)控） 外部質(zhì)量控制（室間質(zhì)控） 能力驗證35艾滋病檢測質(zhì)量控制現(xiàn)代質(zhì)量控制理論全過程的實驗室質(zhì)量控制35艾滋病檢測質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量控制 室內(nèi)質(zhì)量控制又稱統(tǒng)計質(zhì)量控制，用來監(jiān)測試驗的分析性能，控制檢驗誤差來源。通常通過分析質(zhì)控物來執(zhí)行質(zhì)量控制，用統(tǒng)計分析的數(shù)據(jù)來描述分析性能。 統(tǒng)計質(zhì)量控制可監(jiān)測到儀器、試劑、環(huán)境、操作者的變異對檢測過程及結(jié)果的影響，并判斷檢測結(jié)果能否接受（

20、在控或失控）。 對失控情況采取的最好措施是找出問題的原因，并消除原因，而不是常規(guī)的重復(fù)質(zhì)控測定。36艾滋病檢測質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量控制36艾滋病檢測質(zhì)量控制抗體檢測的統(tǒng)計學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制試劑盒內(nèi)部對照試劑盒內(nèi)部對照質(zhì)控品即為試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清。試劑盒內(nèi)部對照用于判斷每次實驗的有效性，但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品使用。每一次檢測臨床樣品時，必須有試劑盒內(nèi)部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。內(nèi)部對照結(jié)果無效，必須重新試驗。37艾滋病檢測質(zhì)量控制抗體檢測的統(tǒng)計學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制37艾滋病檢測質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)控品為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品，是為了監(jiān)控檢測的重復(fù)性而設(shè)置的，包括強(qiáng)陽性、弱陽性和陰性質(zhì)控血清

21、。也可以只設(shè)置一個弱陽性質(zhì)控，以該試劑盒臨界值（Cut-off）的23倍為宜。外部質(zhì)控品的作用是:判斷該批臨床樣品檢測的有效性，同時可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異。因此，每次實驗必須包含室內(nèi)質(zhì)控品，其結(jié)果無效，必須重新試驗。室內(nèi)質(zhì)控品可以是商品或?qū)嶒炇易孕兄苽洹Ｊ覂?nèi)質(zhì)控品的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測系統(tǒng)預(yù)期的變異（cv20%），并且質(zhì)控品應(yīng)穩(wěn)定、無菌，且不含有影響試劑反應(yīng)的防腐劑。38艾滋病檢測質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)控品38艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)控圖的建立及應(yīng)用統(tǒng)計室內(nèi)質(zhì)控最常用的質(zhì)控圖是Levey-Jennings質(zhì)控圖，該圖使用累計和技術(shù)或趨勢分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。下面以ELI

22、SA方法檢測HIV抗體為例，描述建立質(zhì)控圖步驟：39艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)控圖的建立及應(yīng)用39艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)控圖參數(shù)： 平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、控制限、變異系數(shù)40艾滋病檢測質(zhì)量控制40艾滋病檢測質(zhì)量控制建立質(zhì)控圖參數(shù)（1）算術(shù)平均值：代表一組質(zhì)控血清測定的S/CO值的均值。（2）標(biāo)準(zhǔn)差（s）：是描述樣品與均數(shù)之間離散程度的一個指標(biāo)。一組S/CO值的標(biāo)準(zhǔn)差以s表示。（3）控制限：由實驗室根據(jù)對外部質(zhì)控品檢測結(jié)果的均值和標(biāo)準(zhǔn)差來確定。例如12S質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部質(zhì)控品S/CO均值加減2個標(biāo)準(zhǔn)差；13S質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部質(zhì)控品S/CO均值加減3個標(biāo)準(zhǔn)差。 （4）變異系數(shù)（cv）：是反映各次S/

23、CO值相對于均值離散程度的一個指標(biāo)，可以用來衡量檢測的重復(fù)性或精密度。41艾滋病檢測質(zhì)量控制建立質(zhì)控圖參數(shù)（1）算術(shù)平均值：代表一組質(zhì)控血清測定的S/C均數(shù)計算公式為： x X = n s 計算公式為： （ xn - X ）2 s = n-1 cv 計算公式為： s cv = 100 % X42艾滋病檢測質(zhì)量控制42艾滋病檢測質(zhì)量控制繪制質(zhì)控圖質(zhì)控圖是把檢測數(shù)據(jù)與已確定的（計算出的）“控制限”進(jìn)行比較的圖，包含一條中心橫線和其上、下兩條平行的控制線，并按時間順序點入本實驗室每批次試驗質(zhì)控血清的測定值。質(zhì)控圖繪制步驟包括： （1）在常規(guī)條件下，對同一批血清連續(xù)測定20次（天）或以上，獲得一組S/

24、CO值，求均數(shù)（X）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）, 超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。如果僅做少量批次的檢測，也至少做5個批次的檢測，每個批次中不少于4個質(zhì)控血清測定結(jié)果，以建立一個臨時性的均值和標(biāo)準(zhǔn)差，當(dāng)達(dá)到20批次數(shù)據(jù)后，替代臨時性的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。 （2）將均值（X）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）分別在質(zhì)控框架圖中標(biāo)示出來。以S/CO值作縱座標(biāo)（Y軸），每一批次試驗作橫座標(biāo)（x軸），繪制質(zhì)控圖。（3）從第21次起，將每次質(zhì)控血清的檢測結(jié)果依次點入該質(zhì)控框架圖中，檢驗進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)43艾滋病檢測質(zhì)量控制繪制質(zhì)控圖43艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)控規(guī)則及使用 實驗室在報告實驗結(jié)果之前必須評價質(zhì)控數(shù)據(jù)，可通過圖形記錄的檢查或由計算機(jī)審核結(jié)

25、果來決定。目前許多質(zhì)控規(guī)則已被采用，常用的是12S和13S規(guī)則。 44艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)控規(guī)則及使用44艾滋病檢測質(zhì)量控制（1）告警（12S）：當(dāng)質(zhì)控物的測定值超出 +2s范圍時，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，是否可以繼續(xù)檢測需要進(jìn)一步觀察。若將12S做失控標(biāo)準(zhǔn)，有較高的假失控概率，所以一般不采用。（2）失控（13S）：當(dāng)質(zhì)控物的測定值超出 +3s范圍時，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，本次實驗結(jié)果不能被接受，可能是系統(tǒng)誤差或外部對照滴度下降造成。 (隨機(jī)誤差引起的可能性小于.) 45艾滋病檢測質(zhì)量控制45艾滋病檢測質(zhì)量控制（3）位移：連續(xù)幾次（7-10次）外部對照S/CO值都落在均值的一側(cè)則稱為位移，提示

26、實驗條件發(fā)生了較大的變化。（4）趨勢：連續(xù)幾次（5-7次）外部對照S/CO值幾乎按一個方向分布時稱為趨勢，通常由參數(shù)的緩慢改變引起。 46艾滋病檢測質(zhì)量控制（3）位移：連續(xù)幾次（7-10次）外部對照S/CO值都落在均質(zhì)控圖的分析及失控處理當(dāng)出現(xiàn)失控時進(jìn)行如重復(fù)質(zhì)控測定或重新分析新的質(zhì)控物不是最有效的方法，必須找出問題原因，找出解決故障的方法，并消除原因，防止將來出現(xiàn)同樣的問題。 47艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)控圖的分析及失控處理當(dāng)出現(xiàn)失控時進(jìn)行如重復(fù)質(zhì)控測定或重新分質(zhì)量控制的核心問題：在于努力分清誤差類型。檢驗誤差類型1）隨機(jī)誤差：嚴(yán)密監(jiān)測和控制，使其限制在臨床允許的范圍之內(nèi)，并逐步使之縮小。2）系

27、統(tǒng)誤差：要求盡快發(fā)現(xiàn)，及時校正。3）過失誤差：盡量消滅。48艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)量控制的核心問題：在于努力分清誤差類型。48艾滋病檢測質(zhì)量失控后處理失控原因的查找過程并無固定模式，一般原理是由易到難，由近到遠(yuǎn)地查找1）分析原始數(shù)據(jù)及初步估計失控原因：2）對檢測過程進(jìn)行回顧分析：3）選擇性復(fù)查分析判斷失控原因：4）決定處理方法：49艾滋病檢測質(zhì)量控制失控后處理失控原因的查找過程并無固定模式，一般原理是由易到失控后處理失控原因初步查找 示例50艾滋病檢測質(zhì)量控制失控后處理失控原因初步查找 示例 原始數(shù)據(jù)分析空白對照陰性對照陽性對照標(biāo)準(zhǔn)一致：無明顯系統(tǒng)誤差，失控原因在質(zhì)控血清或該管操作造成的可能性較

28、大分析同一瓶質(zhì)控血清的其他項目測定是否也有結(jié)果異常有異常：質(zhì)控血清本身問題無異常：該管操作有問題51艾滋病檢測質(zhì)量控制 CDC不一致：該批檢測中可能有系統(tǒng)誤差，失控原因來自試劑儀器或操作等的可能性較大觀察儀器檢測其他項目的結(jié)果有無異常有異常：儀器原因無異常：試劑或操作等原因從質(zhì)控圖觀察失控是否發(fā)生在漸變的基礎(chǔ)上是漸變：由漸變的誤差因素造成不是漸變：由突然發(fā)生的誤差因素造成52艾滋病檢測質(zhì)量控制 質(zhì)控小結(jié)1、定期召開質(zhì)控分析會，討論質(zhì)量控制情況。 2、要在常規(guī)條件下建立質(zhì)控圖參數(shù)，用S/CO比值繪制質(zhì)控圖。3、采用自制的質(zhì)控物，是一種經(jīng)濟(jì)的方法，關(guān)鍵是要確保質(zhì)控物的性質(zhì)穩(wěn)定;4、使用新批次的外部

29、對照質(zhì)控物時，必須重新繪制質(zhì)控圖。變異系數(shù)(cv)小于20，表示外部對照處于穩(wěn)定狀態(tài)。 53艾滋病檢測質(zhì)量控制質(zhì)控小結(jié)1、定期召開質(zhì)控分析會，討論質(zhì)量控制情況。 53艾滋 5、建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒，更換不同廠家的試劑盒后，必須重新繪制質(zhì)控圖。改用新批號試劑盒也應(yīng)重新制作質(zhì)控圖。 6、發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果失控，應(yīng)填寫報告單，上交質(zhì)量負(fù)責(zé)人，分析原因并決定是否發(fā)出檢測報告。 54艾滋病檢測質(zhì)量控制 5、建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒，更換不同廠 做好全過程質(zhì)控！55艾滋病檢測質(zhì)量控制 做好全過程質(zhì)控！55艾滋病檢測質(zhì)量控制三、質(zhì)量評價包括內(nèi)部質(zhì)量評價和外部質(zhì)量評價。內(nèi)部質(zhì)量評價指

30、由本實驗室組織的質(zhì)量評價，實驗室應(yīng)定期組織內(nèi)部質(zhì)量評價，應(yīng)包括樣品接收、檢測、保存至發(fā)出檢測報告的各個環(huán)節(jié)。確證中心實驗室應(yīng)通過實驗室認(rèn)證認(rèn)可，并按照認(rèn)證認(rèn)可的相關(guān)要求建立質(zhì)量評價機(jī)制；鼓勵確證實驗室及篩查實驗室通過實驗室認(rèn)證認(rèn)可或按照認(rèn)證認(rèn)可的有關(guān)條款建立適宜的內(nèi)部質(zhì)量評價機(jī)制。56艾滋病檢測質(zhì)量控制三、質(zhì)量評價56艾滋病檢測質(zhì)量控制外部質(zhì)量評價由本實驗室之外的機(jī)構(gòu)或單位組織，包括對質(zhì)量保證和質(zhì)量控制工作的評價。職能工作考核主要是評價實驗室質(zhì)量保證工作，能力驗證（PT）或室間質(zhì)量評價主要是評價實驗室質(zhì)量控制工作，是檢驗實驗室對未知樣品獲得正確結(jié)果的能力。所有艾滋病檢測實驗室必須參加外部質(zhì)量評

31、價，確證中心實驗室應(yīng)參加國家級職能工作考核和PT，確證實驗室應(yīng)參加省級職能工作考核和國家級PT，篩查實驗室應(yīng)參加省級職能工作考核和PT。57艾滋病檢測質(zhì)量控制外部質(zhì)量評價由本實驗室之外的機(jī)構(gòu)或單位組織，包括對質(zhì)量保證和艾滋病檢測質(zhì)量控制培訓(xùn)課件頻度：每年對實驗室進(jìn)行一次職能工作考核。方式：職能工作考核采取問卷調(diào)查和現(xiàn)場評價相結(jié)合的方式進(jìn)行。所有實驗室必須接受問卷調(diào)查，可對部分實驗室（510%）進(jìn)行現(xiàn)場抽查。59艾滋病檢測質(zhì)量控制頻度：每年對實驗室進(jìn)行一次職能工作考核。59艾滋病檢測質(zhì)量（1）問卷調(diào)查1）省級考核至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：人員培訓(xùn)及能力，環(huán)境條件，儀器設(shè)備使用及校準(zhǔn)，管理性文件及試驗紀(jì)

32、錄，檢測報告，試劑使用情況，樣品接受及保存情況，質(zhì)量保證和質(zhì)量控制。國家級考核除上述內(nèi)容外，應(yīng)包括：全省實驗室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)、檢測、培訓(xùn)、試劑考評、省級職能工作考核、PT、現(xiàn)場督導(dǎo)等情況。根據(jù)需要問卷內(nèi)容可進(jìn)行合理調(diào)整。2）考核程序：由組織者發(fā)放問卷，各參評實驗室應(yīng)嚴(yán)格按照要求，根據(jù)當(dāng)年實際情況逐項如實填寫實驗室問卷調(diào)查表，并在規(guī)定時間內(nèi)反饋。3）考核結(jié)果判定：組織者接到調(diào)查問卷后，根據(jù)評分標(biāo)準(zhǔn)對各實驗室的問卷進(jìn)行匯總、統(tǒng)計、分析和評估。必要時可調(diào)用有關(guān)實驗的原始記錄和免疫印跡條帶進(jìn)行分析核查。分析各實驗室考核結(jié)果，并進(jìn)行評分和評價： 90分以上為優(yōu)秀，8090分為良好，6080分為合格， 60分以

33、下為不合格。60艾滋病檢測質(zhì)量控制（1）問卷調(diào)查60艾滋病檢測質(zhì)量控制（2） 現(xiàn)場評價篩查及確證實驗室現(xiàn)場評價至少應(yīng)包括：1、實驗室人員組成及其職責(zé)分工；2、實驗室分區(qū)、布局、恒溫設(shè)施；3、儀器設(shè)備及其使用、校準(zhǔn)記錄；3、質(zhì)量保證文件、實驗室SOP文件及原始記錄；4、驗室的安全防護(hù)措施，安全用品及安全規(guī)程；5、消毒與污物處理方法及設(shè)施；6、HIV檢測資料數(shù)據(jù)庫的建設(shè)、存檔、備份、安全和保密；7、樣品保存和安全；8、開展的HIV檢測項目和檢測試劑。9、其它：包括檢測對象，各人群檢測情況，檢測前后咨詢，檢測中遇到的難題，等。61艾滋病檢測質(zhì)量控制（2） 現(xiàn)場評價篩查及確證實驗室現(xiàn)場評價至少應(yīng)包括：

34、61現(xiàn)場評價工作程序?qū)嶒炇胰藛T全部到場，匯報人員組成及其職責(zé)分工、正常情況下實驗室收樣、檢測、直至發(fā)出報告的全過程（專家組可隨時提問）。全面聽取上級主管部門和實驗室人員介紹歷年檢測工作情況匯報、存在問題、對專家組的工作建議和今后工作的設(shè)想。實驗室應(yīng)提供相應(yīng)的文字資料和數(shù)據(jù)。對實驗室人員業(yè)務(wù)素質(zhì)、儀器設(shè)備、場地布局、室內(nèi)質(zhì)控及檢測對象、安全防護(hù)措施等進(jìn)行現(xiàn)場評價。討論分析年度考核中存在的問題和經(jīng)驗，指出不正確或有出入的結(jié)果，共同分析原因（可隨時提出問題）。專家組對評價情況進(jìn)行討論，根據(jù)評價全面情況寫出實驗室現(xiàn)場抽查報告并簽字。（當(dāng)?shù)貙嶒炇胰藛T回避）?，F(xiàn)場反饋：專家組向被評價單位及上級主管部門匯報

35、評價情況及發(fā)現(xiàn)問題，對今后工作提出建議。評價報告一式兩份，一份保留在實驗室；另一份由專家組上報考核組織單位存檔。62艾滋病檢測質(zhì)量控制現(xiàn)場評價工作程序62艾滋病檢測質(zhì)量控制3.2 能力驗證（PT）實驗室能力驗證是指利用實驗室間的比對確定實驗室的檢測能力。實施內(nèi)容和程序主要包括：63艾滋病檢測質(zhì)量控制3.2 能力驗證（PT）實驗室能力驗證是指利用實驗室間的比組織者：參比實驗室負(fù)責(zé)組織確證中心及確證實驗室的HIV、HCV和梅毒抗體檢測，CD4T淋巴細(xì)胞測定，HIV、HCV病毒學(xué)測定及其他新開展項目的PT考核。各艾滋病確證中心實驗室負(fù)責(zé)轄區(qū)內(nèi)所有艾滋病篩查實驗室的HIV、HCV和梅毒抗體檢測PT考核

36、，鼓勵有條件的確證中心實驗室組織本省CD4T淋巴測定的PT考核。64艾滋病檢測質(zhì)量控制組織者：參比實驗室負(fù)責(zé)組織確證中心及確證實驗室的HIV、H頻度： 1、抗體檢測PT考核國家級每年3次，省級每年至少1次，有條件的省可根據(jù)需要每年組織23次。 2、CD4+T淋巴細(xì)胞檢測：國家級每年23次，省級每年12次。 3、病毒學(xué)檢測：國家級每年12次。其他新項目的PT可根據(jù)需要定期開展。65艾滋病檢測質(zhì)量控制頻度：65艾滋病檢測質(zhì)量控制樣品來源及構(gòu)成：可由國家參比實驗室或確證中心實驗室提供，或購置商用質(zhì)控品。根據(jù)需要，抗體檢測PT考核盤可由510份樣品組成，包括強(qiáng)陽性、弱陽性和陰性樣品。66艾滋病檢測質(zhì)量控制樣品來源及構(gòu)成：可由國家參比實驗