高考生物一輪專題復習課件：微生物的培養(yǎng)技術及應用

1、專題十四微生物的培養(yǎng)與應用考點四十二 微生物的培養(yǎng)技術及應用考法四微生物培養(yǎng)的基本技術分考點講解1對培養(yǎng)基的認識(1)培養(yǎng)基的主要成分營養(yǎng)物質(zhì)含義作用主要來源碳源能提供碳元素的物質(zhì)構(gòu)成細胞的物質(zhì)，對異養(yǎng)生物來說，碳源也是能源物質(zhì)無機物：CO2、NaHCO3等；有機物：糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅、牛肉膏等氮源能提供氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及其他含氮物質(zhì)無機物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生長因子微生物生長必不可少的微量有機物酶和核酸的成分維生素、氨基酸、堿基等水細胞生命活動必不可少的物質(zhì)不僅是良好的溶劑，還是結(jié)構(gòu)物質(zhì)培養(yǎng)基、大氣、代謝產(chǎn)物無機鹽提供除碳、氮

2、元素以外的各種重要元素，包括某些大量元素作為細胞的組成成分；生理調(diào)節(jié)物質(zhì)；某些化能自養(yǎng)細菌的能源物質(zhì)；酶的激活劑等培養(yǎng)基考法四微生物培養(yǎng)的基本技術分考點講解(2)培養(yǎng)基的分類劃分標準培養(yǎng)基種類特點 用途 物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑 主要用于工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基 加凝固劑，如瓊脂用于微生物分離、鑒定及活菌計數(shù)等 功能選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，用來抑制不需要的微生物的生長，或者促進所需要的微生物的生長 培養(yǎng)和分離特定微生物(如分離細菌和真菌時，可以在培養(yǎng)基中加入青霉素) 鑒別培養(yǎng)基 根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品鑒別不同種類的微生物，如用伊紅亞甲藍培養(yǎng)基鑒別飲用

3、水或乳制品中是否含有大腸桿菌(若有，則菌落呈黑色并帶有金屬光澤) 考法四微生物培養(yǎng)的基本技術分考點講解(3)培養(yǎng)基的配制原則目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等選擇原料配制培養(yǎng)基，如培養(yǎng)自養(yǎng)微生物就不用加入有機營養(yǎng)物質(zhì)。營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。pH要適宜：各種微生物適宜生長的pH范圍不同?？挤ㄋ奈⑸锱囵B(yǎng)的基本技術分考點講解自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物劃分的主要依據(jù)是能否以無機碳作為生長的主要或唯一碳源，與氮源無關。兩者所用培養(yǎng)基的區(qū)別可總結(jié)如下：營養(yǎng)類型碳源氮源生長因子自養(yǎng)CO2、NaHCO3等含碳無機物NH3、銨鹽、硝酸鹽等一般不需要異養(yǎng)糖類、脂肪酸等銨鹽、硝酸鹽、蛋白質(zhì)等

4、有些微生物需要微生物最常用的碳源和氮源：最常用的碳源是糖類；最常用的氮源是銨鹽和硝酸鹽。對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的有機化合物既是碳源，又是氮源。瓊脂的作用：加入培養(yǎng)基中的瓊脂只起凝固作用，一般不能被微生物利用。蛋白胨主要提供氮源，也能提供碳源和維生素；牛肉膏既可作氮源也可作碳源， 還能提供無機鹽和維生素?？挤ㄋ奈⑸锱囵B(yǎng)的基本技術分考點講解2無菌技術獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染，方法包括消毒和滅菌。方法概念常用方法應用的范圍消毒使用較為溫和的物理、化學或生物方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物煮沸消毒法：在100 煮沸56 min 一般物品 巴氏消毒法：在6265 消毒30

5、 min或8090 處理30 s1 min 一些不耐高溫的液體，如牛奶 化學藥物消毒法如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等 紫外線消毒法：用紫外線照射30 min接種室、接種箱、超凈工作臺滅菌使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌：在酒精燈火焰的充分灼燒層灼燒 接種工具等 干熱滅菌：放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160170 的熱空氣中維持23 h 玻璃器皿、金屬用具等 濕熱滅菌：利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進行滅菌。如在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，100 kPa、121 維持1530 min培養(yǎng)基及容器考法四微生物培養(yǎng)的基本技術分考點講解紫外線消毒的原理是破壞微生物體內(nèi)的DNA或RNA

6、，其他無菌技術的原理都是使微生物中的蛋白質(zhì)變性?？挤ㄋ奈⑸锱囵B(yǎng)的基本技術分考點講解3平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較方法平板劃線法稀釋涂布平板法示意圖 注意事項接種環(huán)的灼燒a.第一次劃線前灼燒：為了殺死接種環(huán)上原有的微生物；b.以后每次劃線前灼燒：為了殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端；c.劃線結(jié)束后灼燒：為了殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者。灼燒過的接種環(huán)，要待冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。劃線時用力要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破稀釋操作時，每支試管及其中的 9 mL水、移液管均需滅菌

7、；操作時，試管口和移液管應在離火焰12 cm 處；涂布器末端浸在盛有體積分數(shù)為70%的酒精的燒杯中。取出時，待多余酒精在燒杯中滴盡后，將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃； 不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精；酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管頭不要接觸任何物體缺點不能計數(shù)能分離單菌落，便于計數(shù)，但統(tǒng)計的樣品中菌落數(shù)目往往比實際數(shù)目低(因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落)考法四微生物培養(yǎng)的基本技術分考點講解3 全國201837，15分在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：(1)在實驗中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗

8、器具_(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是_。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能_。在照射前，適量噴灑_，可強化消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過_(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度，最可能的原因是_?？挤ㄋ奈⑸锱囵B(yǎng)的基本技術分考點講解【答案】(1)可以(2)在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡考法四微生

9、物培養(yǎng)的基本技術分考點講解【解析】(1)干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬用具等的滅菌。(2)巴氏消毒法是一種利用較低的溫度即可殺死病菌，并能保持食品中營養(yǎng)物質(zhì)及風味基本不變的消毒法；高溫瞬時消毒法能在很短時間內(nèi)有效地殺死微生物，并較好地保持食品應有的品質(zhì)；煮沸消毒法則需在100 條件下煮沸56 min，常用于一般外科器械、膠管、注射器、飲水和食具的消毒。(3)紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，造成生長性細胞死亡和再生性細胞死亡，達到殺菌消毒的效果。如在照射前，適量噴灑消毒液，可強化消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的；可用酒精擦拭雙手消毒；高錳酸鉀可用于傷口消毒等，但需要準確配制。(5)使

10、用高壓蒸汽滅菌鍋時，當壓力達到一定值時，需打開排氣閥，讓鍋里面的冷空氣排出，而且要確保全部排出，否則會因為不能達到預定的溫度而不能有效地滅菌。0533.0強化模擬限時訓練題型四 微生物培養(yǎng)的基本技術 5某研究小組為了調(diào)查湘江永州段河流的水質(zhì)狀況，測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作。回答下列問題：(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項不需要的是_(填序號)。酒精燈培養(yǎng)皿顯微鏡無菌水(2)在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是_。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口黏附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是_。(4)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的

11、細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干凝固后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_。題型四 微生物培養(yǎng)的基本技術 (5)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過_滅菌，在微生物的培養(yǎng)中，一般要對配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌，其中“高壓”是為了_。(6)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快，原因是_。題型四 微生物培養(yǎng)的基本技術 【答案】(1)(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液過多會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞(4)檢測培養(yǎng)基平板是否被污染(5)灼燒使溫度

12、升高，徹底殺死培養(yǎng)基中的微生物(6)振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率題型四 微生物培養(yǎng)的基本技術 【解析】(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中，需要使用酒精燈、培養(yǎng)皿、無菌水等，但不需要顯微鏡。(2)在涂布平板時，若滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量過多，會導致菌體堆積，影響分離效果，因此在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口黏附有培養(yǎng)基，為了防止培養(yǎng)基污染棉塞，應該用酒精棉球?qū)⑵洳羶簟?4)微生物培養(yǎng)過程需要無菌操作，配制的培養(yǎng)基需要進行高壓蒸汽滅菌，在接種前，可以將滅菌并倒平板后的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

13、，以檢測培養(yǎng)基是否被污染。(5)利用平板劃線法分離細菌時，接種環(huán)應該灼燒滅菌，培養(yǎng)基應該利用高壓蒸汽滅菌法滅菌，其中高壓是為了提高溫度，徹底殺死培養(yǎng)基中的微生物。(6)振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，所以振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快?？挤ㄎ逦⑸锏倪x擇培養(yǎng)與計數(shù)分考點講解(1)原理利用目的菌對某一營養(yǎng)物質(zhì)的偏好，專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì)，使其成為一種加富(或營養(yǎng))培養(yǎng)基。利用微生物對某種物質(zhì)的抗性，在培養(yǎng)基中加入該物質(zhì)，使原來生長占優(yōu)勢的微生物的生長受抑制，而目的菌的生長占優(yōu)勢，從而使其富集并得到分離。(2)常見的分離微生

14、物的方法改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，如培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可用于分離固氮微生物，利用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基分離纖維素分解菌；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，分離尿素分解菌等。在培養(yǎng)基中加入抗生素，如加入青霉素、鏈霉素，可以抑制細菌的生長，從而分離出真菌等真核微生物?？挤ㄎ逦⑸锏倪x擇培養(yǎng)與計數(shù)分考點講解(3)利用透明圈篩選微生物抗生素與透明圈的關系：將含抗生素的濾紙片均勻置于平板培養(yǎng)基上的不同位置，某種細菌形成的透明圈越大，說明該細菌對該抗生素越敏感，該抗生素的抑菌能力越強。若不出現(xiàn)透明圈，說明該細菌對該抗生素不敏感。分解圈(或透明圈)的大小與微生物降解能力的關系：在固體培養(yǎng)基中加入溶解性差、可

15、被特定菌利用的營養(yǎng)成分，形成渾濁、不透明的培養(yǎng)基背景；接種培養(yǎng)物后，目的菌落周圍就會形成分解圈(或透明圈)，分解圈(或透明圈)的大小反映了菌落利用此物質(zhì)的能力，常作為初步快速篩選目的菌的方法。如在培養(yǎng)基中加入可溶性淀粉、酪素或原油，可以分別用于檢測菌株產(chǎn)淀粉酶、產(chǎn)蛋白酶或降解原油能力的大小。(4)微生物數(shù)目的統(tǒng)計方法直接計數(shù)法：常用顯微鏡直接計數(shù)(利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板)。間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)：常用稀釋涂布平板法計數(shù)?？挤ㄎ逦⑸锏倪x擇培養(yǎng)與計數(shù)分考點講解4 浙江2021年6月29節(jié)選回答與甘蔗醋制作有關的問題：(1)為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株，以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進行篩

16、選。首先配制醋酸菌選擇培養(yǎng)基：將適量的葡萄糖、KH2PO4、MgSO4溶解并定容，調(diào)節(jié)pH，再高壓蒸汽滅菌，經(jīng)_后加入3%體積的無水乙醇。然后將10 g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培養(yǎng)基，震蕩培養(yǎng)24 h。用_將少量上述培養(yǎng)液涂布到含CaCO3的分離培養(yǎng)基上，在30 培養(yǎng)48 h。再挑取分離培養(yǎng)基上具有_的單菌落若干，分別接種到與分離培養(yǎng)基成分相同的_培養(yǎng)基上培養(yǎng)24 h后，置于4 冰箱中保存。(2)優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時間后，取合適接種量的菌液在30 、150 r/min條件下震蕩培養(yǎng)。持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上升，或者培養(yǎng)液中_含量達到最低時，發(fā)

17、酵結(jié)束。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量高外，還應有_(答出2點即可)等特點?？挤ㄎ逦⑸锏倪x擇培養(yǎng)與計數(shù)分考點講解【答案】(1)冷卻玻璃刮刀較大透明圈斜面(2)乙醇耐酒精度高、耐酸高【解析】本題以利用甘蔗渣制醋為背景，考查微生物培養(yǎng)、菌種分離等知識。(1)無水乙醇是易揮發(fā)的有機物，且溫度過高會燃燒，高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)基需要降溫冷卻后再加入無水乙醇。涂布分離時用的器具是玻璃刮刀。醋酸菌的產(chǎn)酸能力越強，透明圈的直徑與單菌落直徑的比值越大，因此選擇有較大透明圈的單菌落作為菌種。菌種保存時用固體斜面培養(yǎng)基。(2)發(fā)酵結(jié)束時，培養(yǎng)液中反應物的含量最低或產(chǎn)物的含量不再增多，即需檢測培養(yǎng)液中生成物醋酸的濃度

18、或反應物乙醇的含量。由于醋酸發(fā)酵液中有較高濃度的酒精和醋酸，所以醋酸發(fā)酵所需的優(yōu)良醋酸菌要適應高酒精度、高酸的環(huán)境，這樣有利于發(fā)酵的進行。0533.0強化模擬限時訓練題型五 微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)6聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無污染的“綠色塑料”?？茖W家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如圖所示，下列說法正確的是()取湖水接種在培養(yǎng)基上培養(yǎng)挑取單菌落，分別擴大培養(yǎng)檢測菌的數(shù)目和PHA的產(chǎn)量獲得目標菌株A步驟可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B擴大培養(yǎng)時，接種后需要將培養(yǎng)基放入恒溫箱倒置

19、培養(yǎng)，以防雜菌污染C所用到的培養(yǎng)基應加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D挑取菌落時，應挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細菌的PHA含量題型五 微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)【答案】D【解析】由于該細菌是生活在某咸水湖中的嗜鹽細菌，故步驟可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，A錯誤；擴大培養(yǎng)時應選用液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基中不應加入瓊脂，且不能倒置培養(yǎng)，B、C錯誤；挑取菌落時，應挑取多個菌落并分別測定嗜鹽細菌的PHA含量，D正確。0533.0真題演練微生物的培養(yǎng)技術及應用1天津20211，4分下列操作能達到滅菌目的的是()A用免洗酒精凝膠擦手B制作泡菜前用開水燙洗容器C在火焰上灼燒接種環(huán)D防疫期間

20、用石炭酸噴灑教室【答案】C【解析】本題考查消毒和滅菌。用免洗酒精凝膠擦手屬于消毒，不能達到滅菌目的，A不符合題意；制作泡菜前用開水燙洗容器，不能達到滅菌目的，因為部分微生物有一定的耐熱性，不能被殺死，B不符合題意；接種前對接種環(huán)灼燒是為了徹底殺死接種環(huán)上的細菌、芽孢等可能引起污染的一切生物體，C符合題意；用石炭酸噴灑教室可起到消毒作用，不能達到滅菌目的，D不符合題意。微生物的培養(yǎng)技術及應用2江蘇202118，3分(多選)為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理。下列敘述不合理的是()A將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污

21、染的概率B涂布用的菌濃度應控制在30300個/mLC需通過預實驗考察輻照時間對存活率的影響，以確定最佳誘變時間D挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，純化后進行降解效率分析【答案】AB【解析】本題考查微生物的分離與培養(yǎng)的相關知識。培養(yǎng)基應先滅菌再分裝于培養(yǎng)皿中，A錯誤；微生物計數(shù)時，利用稀釋涂布平板法進行涂布，經(jīng)培養(yǎng)獲得的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)在30300之間才能計數(shù)，B錯誤；預實驗可以為正式實驗摸索條件，C正確；石油降解菌能分解石油，從而能夠在培養(yǎng)基中生存，挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，純化后進行降解效率分析，從而獲得能高效降解石油的菌種，D正確。微生物的培養(yǎng)技術及應用7全國甲202237，15分某同學從

22、被石油污染的土壤中分離得到A和B兩株可以降解石油的細菌，在此基礎上采用平板培養(yǎng)法比較二者降解石油的能力，并分析兩個菌株的其他生理功能。實驗所用的培養(yǎng)基成分如下。培養(yǎng)基：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培養(yǎng)基：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步驟：將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到A、B菌液；液體培養(yǎng)基、中添加瓊脂，分別制成平板、，并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔。微生物的培養(yǎng)技術及應用回答下列問題。(1)實驗所用培養(yǎng)基中作為碳源的成分是_。培養(yǎng)基中NH4NO3的作用是為菌株的生長提供氮源，氮源在菌體內(nèi)可以參與合成_(答出2種即可)等生物大分子。(2)步驟中，在資

23、源和空間不受限制的階段，若最初接種N0個A細菌，繁殖n代后細菌的數(shù)量是_。(3)為了比較A、B降解石油的能力，某同學利用步驟所得到的平板、進行實驗，結(jié)果如表所示(“”表示有透明圈，“”越多表示透明圈越大，“”表示無透明圈)，推測該同學的實驗思路是_。微生物的培養(yǎng)技術及應用菌株 透明圈大小 平板平板 AB(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，根據(jù)上表所示實驗結(jié)果，治理石油污染應選用的菌株是_，理由是_?！敬鸢浮?1)石油蛋白質(zhì)、核酸(2)N02n(3)將等量的A、B菌株分別接種在平板、的甲、乙兩孔中，置于相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后，觀察并比較平板和上A、B周圍透明圈的大小(4)A與菌株B相比

24、，菌株A分解石油的能力強，并且能在無氮源的培養(yǎng)基上分解石油，菌株B無法在無氮源的培養(yǎng)基上分解石油微生物的培養(yǎng)技術及應用【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)、比較與應用。(1)石油主要是碳氫化合物。根據(jù)培養(yǎng)基和的配方可知，其中的碳源為石油。生物大分子主要有三類：多糖、蛋白質(zhì)、核酸，其中含有N元素的生物大分子為蛋白質(zhì)、核酸。氮源提供的氮在生物體內(nèi)主要參與合成蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子。(2)在資源和空間不受限制的階段，種群呈現(xiàn)“J”型增長。因此最初接種N0個A細菌，繁殖n代后細菌數(shù)量為N02n。(3)石油本身呈現(xiàn)黑色或者褐紅色，石油在培養(yǎng)基上被分解后，形成透明圈，可以根據(jù)菌株周圍產(chǎn)生透明圈的大小判斷A、B菌

25、株分解石油能力的大小。根據(jù)題干信息，平板和平板中均有甲、乙兩孔，可以接種菌株A和菌株B，在寫實驗思路時，應寫清楚自變量設置、因變量的觀測指標等信息。由表中結(jié)果可知，等量的菌株A、B依次接種到平板、中比較透明圈大小。實驗思路詳見答案。(4)由題中表格信息可知，在有氮源的平板中菌株A的透明圈大于菌株B的，說明菌株A降解石油能力強；在無氮源的平板中菌株A有透明圈，說明其能在無氮源的條件下降解石油，而菌株B 無透明圈，說明其在無氮源的條件下不能降解石油，現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，說明其氮元素含量少，因此治理石油污染應該選擇菌株A，而不選擇菌株B。微生物的培養(yǎng)技術及應用8全國乙202237，15分化

26、合物S被廣泛應用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)。用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。碳源細胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18回答下列問題。(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，需要對所用的玻璃器皿進行滅菌，滅菌的方法有_(答出2點即可)。(2)由實驗結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是_；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是_。菌株C的生長除需要碳源外，還需要_(答出2點即可)等營養(yǎng)物質(zhì)。微生物的培養(yǎng)技術及應用(3)由實驗結(jié)果可知，碳源為淀粉時菌株C不能生長，其原因是

27、_。(4)若以制糖廢液作為碳源，為進一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學進行了相關實驗。請簡要寫出實驗思路：_。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實現(xiàn)廢物利用，其意義是_(答出1點即可)。微生物的培養(yǎng)技術及應用【答案】(1)高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌(2)葡萄糖制糖廢液水、氮源、無機鹽(答出2點即可)(3)菌株C不能產(chǎn)生淀粉酶(4)配制一系列以不同濃度的制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，分別培養(yǎng)菌株C，放在相同且適宜的條件下培養(yǎng)相同時間，測定含不同濃度制糖廢液的培養(yǎng)基中S的產(chǎn)量，產(chǎn)量最高的濃度接近最適碳源濃度(5)減少污染、節(jié)省原料、降低生產(chǎn)成本微生物的培養(yǎng)技術及應用【解析】本題考查滅菌的方法、微生物培養(yǎng)及相

28、關實驗設計。(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，需要對玻璃器皿進行滅菌，玻璃器皿常用的滅菌的方法有干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等。(2)分析題表結(jié)果可知，碳源為葡萄糖時，菌株C的細胞干重最大，故菌株C生長的最適碳源是葡萄糖；碳源為制糖廢液時，化合物S的產(chǎn)量最大，故用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是制糖廢液。培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、氧氣以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求，故菌株C的生長除需要碳源外，還需要氮源、無機鹽、水等營養(yǎng)物質(zhì)。(3)由實驗結(jié)果可知，碳源為淀粉時菌株C不能生長，說明菌株C不能直接利用淀粉，分析其原因可能是菌株

29、C不能產(chǎn)生淀粉酶，無法將淀粉水解、利用。(4)實驗目的是以制糖廢液作為碳源，進一步確定菌株C生產(chǎn)S的最適碳源濃度，分析可知該實驗自變量是制糖廢液的濃度，因變量是S的產(chǎn)量。實驗思路詳見答案。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實現(xiàn)廢物利用，既有利于減少污染、節(jié)省原料，又能降低生產(chǎn)成本。微生物的培養(yǎng)技術及應用9浙江2022年6月29(一)，7分回答與產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌育種有關的問題：(1)為加速分離產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可將土樣用_制成懸液，再將含有懸液的三角瓶置于80 的_中保溫一段時間，其目的是_。(2)為提高篩選效率，可將菌種的_過程與菌種的產(chǎn)酶性能測定一起進行：將上述懸液稀釋后涂布于淀粉為唯一碳源的

30、固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，采用_顯色方法，根據(jù)透明圈與菌落直徑比值的大小，可粗略估計出菌株是否產(chǎn)酶及產(chǎn)酶性能。(3)為了獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可利用現(xiàn)有菌種，通過_后再篩選獲得，或利用轉(zhuǎn)基因、_等技術獲得。微生物的培養(yǎng)技術及應用【答案】(1)無菌水水浴殺死不耐熱微生物(2)分離 KII2(3)人工誘變原生質(zhì)體融合【解析】本題考查微生物的分離與培養(yǎng)。(1)根據(jù)題中信息分析，將土樣制成懸液時應該使用無菌水。由“保溫”二字可知，含有懸液的三角瓶應該置于80 的水浴中。因為80 的水浴溫度較高，不耐熱的微生物無法在這樣的環(huán)境中生存，由此可推斷此操作的目的是殺死不耐熱微生物。(2)根據(jù)題中“懸液稀釋后涂布于淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)”可推斷這是分離能分解淀粉的菌種，而鑒定淀粉是否被菌種分解，可利用KII2與淀粉的顯色反應來實現(xiàn)。(3)利用現(xiàn)有菌種獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，除通過人工誘變篩選