DB33-T 2300-2020單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)技術(shù)規(guī)范

ICS65.150CCSB51

DB33浙 江 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB33/T2300—2020單胞藻規(guī)模化培養(yǎng)技術(shù)規(guī)范Technicalspecificationforlarge-scalecultivationofmicroalgae2020-12-30發(fā)布 2021-01-30實(shí)施浙江省市場監(jiān)督管理局 發(fā)布DB33/T2300DB33/T2300—2020II前 言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所，浙江永興水產(chǎn)種業(yè)有限公司，寧波大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：柯愛英、徐繼林、周朝生、肖國強(qiáng)、蔡景波、黃振華、曾國權(quán)、胡園、朱潔、吳越、王瑤華。PAGEPAGE7單胞藻規(guī)模化培養(yǎng)技術(shù)規(guī)范范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)的培養(yǎng)條件和設(shè)施、培養(yǎng)方法、日常管理、收獲和保存等內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)苗種培育和養(yǎng)殖生產(chǎn)中的單胞藻培養(yǎng)。（GB11607漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)NY5051無公害食品淡水養(yǎng)殖用水水質(zhì)NY5052無害品 水養(yǎng)用水質(zhì)下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1指數(shù)生長期細(xì)胞迅速生長繁殖，藻細(xì)胞數(shù)量隨著培養(yǎng)時間的延長呈幾何級數(shù)遞增的時期。3.2一級培養(yǎng)以0.3L～5.0L廣口瓶或三角燒瓶作培養(yǎng)容器，嚴(yán)格消毒，用濾紙封口的培養(yǎng)方式。3.3二級培養(yǎng)用容積為50L～100L白塑料桶、尼龍袋、光生物反應(yīng)器等作為培養(yǎng)容器，嚴(yán)格消毒，連續(xù)充氣的培養(yǎng)方式。3.4三級培養(yǎng)采用育苗場現(xiàn)有的水泥培養(yǎng)池、帆布池等作為培養(yǎng)容器，消毒，連續(xù)充氣的培養(yǎng)方式。海水應(yīng)符合GB11607、NY5052規(guī)定。淡水應(yīng)符合GB11607、NY5051規(guī)定。0.3L～5.0L10L～20L50L～100A。。5～102505～1050L～100L20mg/L～50mg/L8015mg/L～30mg/L50mg/L～100mg/L1000mg/L+250mg/L接種藻種應(yīng)無污染，無雜藻、藻細(xì)胞無附壁。接種時間宜在早上6：00～10：00進(jìn)行，藻種在指數(shù)生長后期，一級培養(yǎng)接種濃度為1：5～1：10；二級培養(yǎng)接種濃度1：10～1：50；三級培養(yǎng)根據(jù)天氣、生產(chǎn)需要來接種，接種濃度1：15～1：30。水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)見附錄B。培養(yǎng)液常用培養(yǎng)液配方見附錄C、附錄D。觀察空調(diào)控溫，光照用日光燈調(diào)節(jié)，每天搖晃藻種瓶4次～6次，培養(yǎng)用的消毒水應(yīng)在5天～7天用完?？販?，用遮光簾或遮陽布等設(shè)施，調(diào)節(jié)光照，充氣微沸。收獲保存培養(yǎng)的單胞藻利用500目尼龍篩網(wǎng)富集、暗沉淀、加0.5g/L～1.0g/L明礬或氫氧化鈣收集藻類，冷藏或冷凍保存，以備隨時投喂使用。單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)技術(shù)模式圖見附錄E。附 錄 A（資料性）單胞藻培養(yǎng)常用消毒方法單胞藻培養(yǎng)常用消毒方法見表A.1表A.1 胞培常毒方法項(xiàng)目名稱煮沸烘箱干燥高壓滅菌高錳酸鉀漂白粉或漂白片鹽酸玻璃容器5分鐘～10分鐘120℃恒溫2小時121℃，維持20分鐘濃度10mg/L～20mg/L浸泡5分鐘～10分鐘濃度10mg/L～100mg/L浸泡12小時鹽酸：水1：1～1：5金屬工具5分鐘～10分鐘120℃恒溫2小時121℃，維持20分鐘///塑料容器///濃度10mg/L～20mg/L浸泡5分鐘～10分鐘濃度10mg/L～100mg/L浸泡12小時鹽酸：水1：1～1：5充氣管散氣石5分鐘～10分鐘//濃度10mg/L～20mg/L浸泡5分鐘～10分鐘濃度10mg/L～100mg/L浸泡12小時/水泥池玻璃缸///濃度10mg/L～20mg/L浸泡5分鐘～10分鐘濃度10mg/L～100mg/L浸泡12小時鹽酸：水1：1～1：5光生物反應(yīng)器、管道///濃度10mg/L～20mg/L浸泡5分鐘～10分鐘濃度10mg/L～100mg/L浸泡12小時鹽酸：水1：1～1：5附 錄 B（資料性）水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)見表B.1。表B.1水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微藻種類生態(tài)條件參數(shù)品種隸屬PH適溫范圍（℃）鹽度范圍（‰）光照強(qiáng)度（ｌｘ）三角褐指藻硅藻門7.0～10.05～2515～351000～8000小新月菱形藻7.0～10.05～2820～351000～8000纖細(xì)角毛藻6.5～9.510～4010～305000～15000牟氏角毛藻6.5～9.510～4010～305000～15000假微型海連藻7.0～10.020～3015～351000～10000威氏海連藻7.0～10.020～3015～353000～10000中肋骨條藻7.0～10.010～2510～403000～7000等鞭金藻金藻門7.0～9.515～3510～503000～9000球等鞭金藻7.0～10.010～3510～503000～10000叉鞭金藻7.0～9.59～3510～503000～15000綠色巴夫藻7.0～9.510～355～803000～15000亞心形扁藻綠藻門7.0～10.07～3010～401000～20000青島大扁藻7.0～10.010～3510～401000～10000塔胞藻7.0～10.07～3010～401000～20000小球藻6.0～8.510～360～451000～20000微綠球藻7.0～9.510～364～363000～20000柵藻5.0-7.510～3501000-10000附 錄 C（資料性）常用海洋微藻培養(yǎng)液配方常用海洋微藻培養(yǎng)液配方見表C.1。表C.1常用海洋微藻培養(yǎng)液配方隸屬培養(yǎng)液配方成分一級培養(yǎng)mg二級培養(yǎng)mg三級培養(yǎng)mg金藻門硝酸鈉或硝酸鉀100.0050.0020.00磷酸二氫鉀15.0010.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.501.5硫酸錳0.250.25/EDTA20.0010.00/尿素/10.0010.00維生素B10.10.05/維生素B20.00050.0005/碳酸氫鈉1.00//消毒水1L1L1L硅藻門硝酸鈉或硝酸鉀90.0050.0020.00磷酸二氫鉀20.004.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.501.5硫酸錳0.250.25/EDTA20.0010.00/尿素/10.0010.00維生素B10.10.001/維生素B20.00050.000008/碳酸氫鈉1.00//硅酸鈉10.0010.0010.00消毒水1L1L1L綠藻門硝酸鈉或硝酸鉀100.0020.0020.00磷酸二氫鉀20.004.003.00硫酸亞鐵或檸檬酸鐵2.502.501.0硫酸錳0.250.25/EDTA20.0010.00/尿素/20.0020.00維生素B10.10.001/維生素B20.00050.000008/碳酸氫鈉1.00//消毒水1L1L1L附 錄 D（資料性）常用淡水藻類水生4號培養(yǎng)液配方常用淡水藻類水生4號培養(yǎng)液配方見表D.1。表D.1常用淡水藻類水生4號培養(yǎng)液配方成分硫酸銨mg/L磷酸氫二鉀mg/L過磷酸鈣mg/L硫酸鎂mg/L氯化鉀mg/L碳酸氫鈉mg/L三氯化鐵1%水溶液土壤浸出液ml用量200103080251001滴0.5注：土壤浸出液配制：（菜園土1份+2份水）混合搖勻，靜止，取上清液。11DB33/T2300—2020附 錄 E（資料性）單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)技術(shù)模式圖單胞藻規(guī)?；囵B(yǎng)技術(shù)模式見圖E.1。一級培養(yǎng)二級培養(yǎng)三級培養(yǎng)將保種室中培養(yǎng)的藻種擴(kuò)種到將經(jīng)過濾培養(yǎng)水燒開注入桶將經(jīng)過濾培養(yǎng)水注入桶內(nèi)，加漂白將經(jīng)過濾水加有效氯濃度50將池子沖洗干凈，加經(jīng)過濾的水到0.3L～5L的玻璃瓶，用水需內(nèi)密封，冷卻后加培養(yǎng)液，接片有效氯濃度20mg/L～50mg/L,mg/L～100mg/L,用水泵注入管水位80cm～120cm,充氣潑灑經(jīng)經(jīng)過脫脂棉過濾煮沸，培養(yǎng)液種培養(yǎng)。充氣管、氣石煮沸消充氣-停氣-密封，12小時～24小道，1