傳染病樣品采集方法

/9如果樣品較熱或較冷，但沒有明顯的溶血或結(jié)冰，可以處理樣品，但要在工作表的報告上注明溫度條件。不要馬上加熱和冷凍樣品以使其達到室溫，因為這樣會對免疫表型檢測的結(jié)果產(chǎn)生不利的影響，散射光模式的不正常會顯示出所受到的影響。不可檢測溶血或結(jié)冰的樣品。不可檢測凝血的樣品。如果樣品的采集時間已超出48h,不可檢測。流腦標本采集1、腦脊液（CSF）：如果懷疑為腦膜炎，CSF是用于分離和鑒定病原體最好的標本。取患者CSF2-3ml,注入無菌的試管內(nèi)。3000轉(zhuǎn)/分，離心20分鐘，用無菌吸管取沉淀物直接接種到10%羊血巧克力色瓊脂平皿上做細菌培養(yǎng)。CSF沉渣還可涂片，作革蘭氏染色鏡檢。CSF離心后的上清液可置-20℃，供做血清學(xué)檢查腦膜炎奈瑟氏菌（Nm）群特異性抗原。2、血液：疾病早期，病人高熱時采取靜脈血5?7ml，往盛有50ml葡萄糖肉湯的三角瓶內(nèi)注入3?5ml血做增菌培養(yǎng)。留2ml血注入無菌試管內(nèi)分離血清，做血清學(xué)檢查腦膜炎奈瑟氏菌（Nm）群特異抗原和急性期抗體。在病人病后1-3周采取第二次血液2ml,注入無菌試管內(nèi)分離血清，檢查病人恢復(fù)期抗體。若恢復(fù)期抗體的滴度比急性期升高4倍或4倍以上，具有追溯診斷的意義。3、淤血點：選病人皮膚上的新鮮淤斑或淤血點，消毒后用針頭挑破，擠出組織液，用無菌棉簽蘸取先接種含雙抗的葡萄糖增菌肉湯管中增菌8~12小時后分離培養(yǎng)或直接接種EPV平板，再涂片染色直接鏡檢。涂片也可做免疫熒光檢查。4、鼻咽拭子：對健康人群或病人密切接觸者進行帶菌檢驗時一般采咽拭子。咽拭子直接接種到10%巧克力色雙抗血瓊脂平皿或卵黃雙抗瓊脂平皿上分離Nm。咽拭子也可以插入卵黃雙抗液體培養(yǎng)基或雙抗兔血清肉湯中37℃，5%CO2增菌后再分離。5、尿液標本：取病人急性期尿液5ml加20ml無水乙醇，置4℃2小時，離心（3000轉(zhuǎn)/分鐘，15分鐘），棄上清，收集沉淀部分加0.25ml磷酸鹽緩沖液將其溶解，同前離心，吸取上清液檢測腦膜炎奈瑟氏菌（Nm）群特異抗原。菌種保存a）保溫運送：腦膜炎雙球菌對溫度較為敏感，溫度過低或過高均可導(dǎo)致菌株死亡。在運送樣品及培養(yǎng)物（葡萄糖肉湯或平板培養(yǎng)基）時，應(yīng)保持樣品處于20－36℃之間，切記不能低溫運送（檢測抗體的血清標本除外）2）分離出腦膜炎雙球菌的保存與運送：將鮮牛奶煮沸三次，每次煮沸后冷卻，去除奶液上層的油脂（奶液上層的奶皮），8磅15分鐘高壓后分裝成小管。將腦膜炎雙球菌挑入含1ml脫脂