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耐酸耐熱菌的測定(企業(yè)內(nèi)控法)耐酸耐熱菌的測定(企業(yè)內(nèi)控法)耐酸耐熱菌的測定(企業(yè)內(nèi)控法)資料僅供參考文件編號:2022年4月耐酸耐熱菌的測定(企業(yè)內(nèi)控法)版本號:A修改號:1頁次:1.0審核:批準:發(fā)布日期:耐酸耐熱菌的測定(企業(yè)內(nèi)控法)適用范圍本方法僅適用于濃縮蘋果清汁中耐酸耐熱菌的測定。2、設備和材料2.1、廣口三角瓶,250mL、1000mL。2.2水浴箱:80℃2.3、冰箱。2.4、量筒:50mL。2.5、滅菌鑷子。2.6、酒精燈。2.7、培養(yǎng)箱:50±1℃2.8、玻璃鉛筆。2.9、溶劑過濾器。2.10、μm濾膜:?50mm。2.11、真空泵。2.12、溫度計。2.13、培養(yǎng)皿。2.14、高壓蒸汽滅菌鍋。3、培養(yǎng)基和試劑3.1、K氏培養(yǎng)基3.1.1、組成A:酵母浸膏1.25g蛋白胨2.50g葡萄糖0.5g瓊脂7.5g吐溫80將上述各種試劑放入1L的三角瓶中,加入500mL的蒸餾水,在電爐上加熱溶解后,在121℃3.1.2、組成B:蘋果酸1.25g將蘋果酸用10mL的蒸餾水溶解,通過一次性無菌注射器和針頭式過濾器連接,將蘋果酸溶液過濾到已滅菌的培養(yǎng)基中,混勻。3.1.3、平板制作當已酸化的K氏培養(yǎng)基溫度降至50℃3.2、蒸餾水。4、檢驗程序:檢樣適當稀釋80℃無菌水膜過濾檢樣膜過濾膜放入平板培養(yǎng)基培養(yǎng)50±1℃菌落計數(shù)報告5、操作步驟5.1、將裝有150mL蒸餾水的三角瓶、μm的濾膜、50mL量筒、過濾裝置于121℃5.2、用已滅菌的50mL量筒取待檢濃縮果汁50mL,加入已滅菌的盛有150mL滅菌蒸餾水的三角瓶中,混勻。5.3將稀釋的樣品放入80℃的水浴中,同時放置一個帶有溫度計的控制樣,做為溫度控制。觀察溫度計,待溫度升至805.4、用已滅菌的μm的濾膜及真空抽濾裝置過濾熱處理后的果汁,移取抽濾裝置的上部,將鑷子在酒精燈上滅菌后,用鑷子將濾膜移置于預先準備好的K氏培養(yǎng)基上,輕敲濾膜幾次,使其與濾膜充分接觸。同時還必須做空白對照(即用滅菌水代
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