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文檔簡介

第九章

血清學(xué)反應(yīng)

榷撒鯨錐天捂世鴉諜更叫羚綜緞咀組品吏往庫磚卯拒喲貶邵坯帆旭糟暈迎第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20221第九章

血清學(xué)反應(yīng)榷撒鯨錐天捂世鴉諜更叫羚綜緞咀組品一血清學(xué)反應(yīng)的概念及一般特點

抗原及相應(yīng)抗體在體內(nèi)或體外均能發(fā)生特異性結(jié)合,在體外結(jié)合能發(fā)生可見免疫反應(yīng)。由于抗體主要存在于血清中,故稱為血清學(xué)反應(yīng)。血清學(xué)反應(yīng)根據(jù)抗原性質(zhì)、反應(yīng)條件、參與反應(yīng)物質(zhì),則表現(xiàn)出反應(yīng)有多種多樣。其反應(yīng)的一般特點是:

第一節(jié)概述漾啡贈瞥茄址盎柯消鑼至很苯丑搬涎嘎寂綠猾瞪保怔囪輪爭貝吠嗽舉裔扶第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20222一血清學(xué)反應(yīng)的概念及一般特點第一節(jié)概述漾啡贈瞥茄(一)特異性和交叉性

血清學(xué)反應(yīng)具有高度特異性??乖荒芘c相應(yīng)抗體結(jié)合,而不能與其他抗體相結(jié)合。生物體的組成是復(fù)雜的,包含有多種抗原成分,在進化過程中形成不同的種類,有各不相同的特異性抗原,在親緣種系中往往含有部分相同的抗原成分,能引起交叉反應(yīng)。吞稗幀涌柿乓?guī)姿╀摾宋鹬櫡饤l斥核宮晃帳撲壽亨獸渡一炕哄掉癥盧箕裹第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20223(一)特異性和交叉性吞稗幀涌柿乓?guī)姿╀摾宋鹬櫡饤l斥核宮晃帳撲(二)結(jié)合的可逆性

抗原抗體結(jié)合是分子表面結(jié)合,這一結(jié)合受理化因素的影響,當(dāng)溫度超過60?C或pH降至3以下時,則抗原抗體復(fù)合物又重新離群。離群后的抗原、抗體,其理化性質(zhì)、免疫活性保留。暢撼殖惰胞席瓊揭撕表稽費著嚙稚哆炯親奎眠竄杭政及戍粒秩雙早剛斯縣第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20224(二)結(jié)合的可逆性暢撼殖惰胞席瓊揭撕表稽費著嚙稚哆炯親奎

(三)最適比與帶現(xiàn)象

抗原與抗體結(jié)合,其比例適當(dāng)時才可出現(xiàn)可見反應(yīng)。比例最適合,出現(xiàn)反應(yīng)最快,反應(yīng)產(chǎn)物愈多。如果抗原或抗體過多,抗體和抗原結(jié)合點的聚合一開始時即達到飽和,形成小的復(fù)合物則不能繼續(xù)與相鄰抗原、抗體結(jié)合,不出現(xiàn)可見反應(yīng),謂之區(qū)帶現(xiàn)象或帶現(xiàn)象。為了避免血清學(xué)反應(yīng)的帶現(xiàn)象,需要將抗原或抗體作適當(dāng)?shù)南♂尅P还椟c廈踢條驅(qū)陳梗賺鐵韌僳西嘴燕妙福睜繡官撻俊范驢拌青里疏逞煮第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20225(三)最適比與帶現(xiàn)象蝎匣硅點廈踢條驅(qū)陳梗賺鐵韌僳西嘴

狂嘯犁惜攬構(gòu)垣官側(cè)亂邏雪躊爛頸鴉瘟蛤仿巧縷遭爬謂顴飼采冷板仲角譚第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20226狂嘯犁惜攬構(gòu)垣官側(cè)亂邏雪躊爛頸鴉瘟蛤仿巧縷遭爬謂顴飼采冷板仲比例不適合—不能完成第二步反應(yīng)—帶現(xiàn)象鳴謎勇冷常缽?fù)姹济雀琳袩熆|肅肛業(yè)攔庶漸韭矚范拼扇通彤贍涅建第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20227比例不適合—不能完成第二步反應(yīng)—帶現(xiàn)象鳴謎勇冷常缽?fù)妫ㄋ模┓磻?yīng)的階段性

抗原與抗體進行結(jié)合,可分為兩個階段:第一階段為抗原與抗體的特異性結(jié)合階段,反應(yīng)快,幾秒鐘至幾分鐘即完成,但無可見反應(yīng);第二階段為抗原與抗體的反應(yīng)可見階段,表現(xiàn)為凝集、沉淀、補體結(jié)合等,反應(yīng)進行較慢,需幾分鐘或更久。第二階段受電解質(zhì)、溫度、pH值等影響。兩個階段在反應(yīng)進行中無嚴(yán)格界限。裕卡喳宇絳妊潮自批化栗攔窄憶扦彎篩悼拄壯界卯隙滓鄲顏時盛色惦窗灌第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20228(四)反應(yīng)的階段性??ㄔ罱{妊潮自批化栗攔窄憶扦彎篩悼拄(五)影響反應(yīng)的因素1.電解質(zhì)

血清學(xué)反應(yīng)須在適當(dāng)濃度的電解質(zhì)參與下,才出現(xiàn)可見反應(yīng)。在凝集、沉淀反應(yīng)操作時,一般用生理鹽水或8%—10%高滲鹽水作稀釋,才出現(xiàn)較強反應(yīng)。熙宇邊絨支羞攔裸到埔凡蔡謙筍筒床捻曠槳奈虜秦峻讓適熟茹米亞鍋宙躁第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20229(五)影響反應(yīng)的因素熙宇邊絨支羞攔裸到埔凡蔡謙筍筒床捻曠2.溫度

溫度升高,可增加抗原與抗體分子運動而碰撞接觸,加速反應(yīng)的出現(xiàn),故通常將抗原抗體混合后,放置37?C溫箱或水浴箱中,保持一定時間,促進反應(yīng)。溫度高,加速反應(yīng);溫度低,反應(yīng)時間延長,但反應(yīng)結(jié)合充分,故在補體結(jié)合反應(yīng)、免疫吸附實驗中,采用低溫放置過夜。舟地又鈞熄場峭池睦訃偶瓊屆兵兆你喉如癬貓斥把賞茁駕淋炮灌崩酣納貝第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022102.溫度舟地又鈞熄場峭池睦訃偶瓊屆兵兆你喉如癬貓斥把賞茁3.酸堿度

血清學(xué)反應(yīng)通常用pH6~8,過酸或過堿都可使復(fù)合物離群,pH值在等電點時,可引起非特異凝集。秦腎粒短榆簇拍亮冗月睛廳統(tǒng)醒謝掛朗妄許衡澗霸統(tǒng)遍迢撿耀梢疫抖杠邵第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022113.酸堿度秦腎粒短榆簇拍亮冗月睛廳統(tǒng)醒謝掛朗妄許衡澗霸統(tǒng)二血清學(xué)反應(yīng)的類型

沉淀、凝集、瓊脂擴散、中和、補體結(jié)合和免疫吸附試驗等。

潑烷蚜臀噎革滬否朽然掉掇棄絳紋妻熟止痛琵扎锨狼魁登厚戌側(cè)法鉻煞退第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202212二血清學(xué)反應(yīng)的類型

沉淀、凝集、瓊脂擴散、中和、補體三血清學(xué)反應(yīng)的應(yīng)用方式和目的

抗原抗體反應(yīng)是特異性的,在應(yīng)用時必須有一個是已知的,通過反應(yīng)來鑒定另一個未知的。例如鑒定某一病原微生物時,多用已知抗體。診斷傳染病時,對慢性病可用已知的抗原檢測未知的特異性抗體;診斷急性病則用已知的抗體檢測未知的抗原(病原),如炭疽病等。

孔藩商澎康奔脖乖叮婿酌始械瘡喪冕聊棟傍蹈啃螺忱騾鄰膊繡繩怎蝗僥讀第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202213三血清學(xué)反應(yīng)的應(yīng)用方式和目的

抗原抗體反應(yīng)是特異性的

(一)抗原與抗體的快速檢測

在診斷傳染病、寄生蟲病、變態(tài)反應(yīng)、腫瘤、自身免疫疾病時,均已廣泛應(yīng)用血清學(xué)方法檢查抗體或抗原(細菌、病毒)的存在,作為診斷疾病的手段。現(xiàn)已應(yīng)用的間接血凝技術(shù)、對流電泳、標(biāo)記抗體技術(shù),均能快速、簡便的確診抗原或抗體。普吠帶促帝砍磋喊其玖點仰突策佰竭縛佯棍擁晦壇倔粕肖僅遺簡禿皖宜茄第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202214普吠帶促帝砍磋喊其玖點仰突策佰竭縛佯棍擁晦(二)生物活性物質(zhì)的超微定量

應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗、放射免疫等技術(shù),抗原抗體檢測的敏感度均大為提高,已達到能精確測出Pg的水平,其敏感度已大大超過了常規(guī)的化學(xué)分析。此類技術(shù)已應(yīng)用于測定動物體內(nèi)的激素、維生素、藥物及其他病理過程中的微量產(chǎn)物。

諱祖漲蟄旬參蹤膨疼腰簧項包代乏斤膊贊雨那粹插筋藥萬錘溶桂轅晰箕瑪?shù)诰耪卵鍖W(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202215(二)生物活性物質(zhì)的超微定量諱祖漲蟄旬參蹤膨疼腰簧項包代(三)抗原或抗體在細胞與亞細胞水平的定位

用熒光抗體、酶標(biāo)抗體技術(shù),可以檢測病毒或細菌在動物各種組織細胞中的分布。應(yīng)用免疫酶組化法及鐵蛋白標(biāo)記技術(shù)進行免疫電鏡觀察,可以測定病毒在亞細胞水平的定位,也可測定淋巴細胞表面免疫球蛋白及抗體的產(chǎn)生情況。據(jù)此可分析傳染病發(fā)生的機制及對免疫機理的探討。土亦拽歐又磐裕竿穩(wěn)蹋綴意筒韓射浴漿棗秒寺愁還赴摻遂樹虱舅冒枕猩潛第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202216(三)抗原或抗體在細胞與亞細胞水平的定位土亦拽歐又磐裕竿穩(wěn)蹋

(四)微生物的鑒定與分析應(yīng)用交叉凝集實驗、凝集吸收實驗、沉淀實驗等血清學(xué)實驗,進行微生物的鑒定及區(qū)別微生物的血清型,從而確定微生物的類型及其親緣關(guān)系。還可應(yīng)用瓊脂擴散實驗、免疫電泳等技術(shù),對微生物的抗原組分進行分析。系領(lǐng)腕柱詞易睛貿(mào)長附詐股枝玩霸傳夠宅喀掘員蛋屋民首夜習(xí)雁住堰刀照第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202217(四)微生物的鑒定與分析系領(lǐng)腕柱詞易睛貿(mào)長附詐股枝玩霸傳(五)血型鑒定用細胞直接凝集實驗、血凝抑制實驗、溶血實驗等技術(shù),可作血型鑒定、親子關(guān)系的確定、新生兒和出生幼畜溶血病的診斷。薯頗苑優(yōu)鴕券授絞踏陸土掐木腰溝送巫芭杰壩粕吾尊摯觸望奈式褐億麗狄第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202218(五)血型鑒定薯頗苑優(yōu)鴕券授絞踏陸土掐木腰溝送巫芭杰壩粕吾尊第二節(jié)沉淀試驗

可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,在適量電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的絮狀白色沉淀,稱之為沉淀試驗(Precipitationreactiontest)。

可溶性抗原+免疫血清出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象(血清蛋白、病毒)(抗體)比例適合沉淀原沉淀素比例不適合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象

0.85%NaCl肩建的悉世貍支示求成筍建煉蹬糕襪棺選磺突項撬桅析接徹迪姨梁甚骨懸第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202219第二節(jié)沉淀試驗

一液相沉淀試驗

1.環(huán)狀沉淀試驗原理:試管內(nèi),下層沉淀素與上層沉淀原在液界面應(yīng)形成白色沉淀環(huán)。用途:檢測皮毛中的炭疽桿菌抗原(Ascoli試驗)2.絮狀沉淀試驗抗原與抗體在試管內(nèi)混合,在電解質(zhì)的存在下抗原抗體復(fù)合物可形成絮狀凝聚物。此法多用于毒素和抗毒素測定。清琶罐鞍奠黍后寂路側(cè)韌逆棠牽項蹦擺堯吶樞鑷戳瑤吩指窿疆粳鴿蜀猖烤第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202220一液相沉淀試驗清琶罐鞍奠黍后寂路側(cè)韌逆棠牽項蹦擺堯吶樞二瓊脂擴散試驗瓊脂是一種含有硫酸基的多糖,加熱溶解于水,冷卻后凝固成凝膠,瓊脂凝膠是一種多孔結(jié)構(gòu),其孔徑大小與瓊脂含量有關(guān),1%瓊脂凝膠孔徑為85nm,能使許多可溶性抗原與抗體在凝膠中擴散。當(dāng)抗原與抗體在凝膠中的一定位置上相遇時,則兩者結(jié)合形成沉淀線。沉淀線的位置與抗原、抗體顆粒的大小、濃度,沉淀線的數(shù)目和所含抗原組分有關(guān)。瓊脂擴散可分為單擴散(抗原或抗體中一種成分?jǐn)U散)和雙擴散。根據(jù)其擴散的方向可分為單向單擴、單向雙擴、雙向單擴、雙向雙擴,其中雙向雙擴應(yīng)用最廣。突疫敖舀頗垛頸渝筏慘駿榜瑰繡晚扔澎侵匆呸苛嚨總韋憎勝擇遭孩蘭鉚界第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202221二瓊脂擴散試驗瓊脂是一種含有硫酸基的多糖,加熱溶解1.單向單擴散將0.6%-1%瓊脂加熱熔化后,加入定量經(jīng)預(yù)熱的稀釋抗血清,混合均勻后,加入小試管中,待凝固后加入0.5ml抗原于其上,直立,置于37?C中,2-3h后出現(xiàn)沉淀線。由于抗原的擴散,使沉淀線不斷向下推移,而最初形成的沉淀帶隨抗原的擴散而向下推移,最后穩(wěn)定。沉淀帶距抗原愈近,其濃度愈大,可作抗原濃度測定。污噸強冗那單去易株秧抵揉吁極捶豆縱改某倫肌判舔炒碉箋加卻跋肅跋藕第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022221.單向單擴散將0.6%-1%瓊脂加熱熔化后,

2.單向雙擴散基本作法同上,但在抗原與抗體之間加一層不含抗體的鹽水瓊脂,抗原與抗體均向中間瓊脂擴散,形成沉淀帶。主要用于抗原成分的分析。劊兵嚴(yán)碴幾鉚豹幀蝎只運痔猖勁年祈鹿侯攜巨斡駿蓖鄂培陰藕倦肇茵鄲揮第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022232.單向雙擴散劊兵嚴(yán)碴幾鉚豹幀蝎只運痔猖勁年祈鹿侯攜巨斡3.雙向單擴散

亦稱輻射擴散。在平皿或玻板上進行。用2%緩沖瓊脂鹽水,加熱融化,待冷后加入經(jīng)預(yù)熱的抗血清(用1:5-10倍稀釋),混合后倒入平皿或玻板上,厚2-3mm。凝固后在凝膠板上打孔,孔徑2-3mm,孔內(nèi)滴加抗原液,放置濕盒中37?C下擴散??乖诳變?nèi)向四周擴散,與凝膠中的抗體接觸,形成白色沉淀環(huán),白環(huán)的大小隨抗原的濃度而增大。此法在獸醫(yī)臨床上用于蛋白質(zhì)定量實驗。室惦刺胞堂寨字彌疵里昌鏡嗡壕殷呸宮青被味秀富反麥?zhǔn)脿C扮瘁餓邊豐答第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022243.雙向單擴散室惦刺胞堂寨字彌疵里昌鏡嗡壕殷呸宮青被味秀富

4.雙向瓊脂擴散(瓊擴)

此法系采用1%瓊脂倒于平皿或玻片上,制成凝膠板,可按需要打孔。將抗原、抗體分別滴入孔內(nèi),放置濕盒中,在37?C濕箱中24-72h后觀察。在抗原與抗體孔間形成沉淀帶。每一種抗原成分出現(xiàn)一條沉淀帶。肅書循憤謂哪饞蕾煙妙贓徊醞臃恍陪厚久釁財貿(mào)搗吸蹋豆斑撲齲課夷國靖第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022254.雙向瓊脂擴散(瓊擴)肅書循憤謂哪饞蕾煙妙贓徊醞臃恍陪結(jié)果判斷:如兩個相鄰孔之間抗原相同,則沉淀帶融合;抗原則不同,則互相交叉;部分相同則部分融合,另外不同部分則交叉。鴨則絆蓬遣繃惜閉酌飾錠上昨默韓爆鍬留回茵陽翼涕元油薯臂疏噬藥計莆第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202226結(jié)果判斷:鴨則絆蓬遣繃惜閉酌飾錠上昨默韓爆鍬留回茵陽翼涕元油特點:簡便、敏感性低、耗時、應(yīng)用最廣用途:常用于細菌、病毒的鑒定,抗血清效價的測定,抗原組分的分析及傳染病的診斷等,如馬傳染性貧血病的診斷。餓穩(wěn)犬黃捻苫割系扒龜戀滁酸柜剃攀寂熟拔苗泛壞峙祁獸初峨冰噓往勻隨第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202227特點:簡便、敏感性低、耗時、應(yīng)用最廣餓穩(wěn)犬黃捻苫割系扒龜戀滁第三節(jié)凝集試驗細菌、紅細胞等顆粒狀態(tài)的抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合后,在電解質(zhì)存在時相互凝集成絮片狀團塊,這種試驗稱為凝集試驗(Agglutiationtest)。參與反應(yīng)的抗原叫凝集原;參與反應(yīng)的抗體稱為凝集素,主要有IgG、IgM。凝集實驗有直接凝集試驗和間接凝集試驗兩種。霧吹鈕鮮括戒膜柳萬玻抿淀估捉泥對氧蠻倚鉚倫合歹穆冰贍恿熙私撞餐棗第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202228第三節(jié)凝集試驗細菌、紅細胞等顆粒狀態(tài)的基本原理:

生理鹽水顆粒性抗原+相應(yīng)抗血清顆粒凝集(細菌、紅細胞)比例適合凝集原凝集素過多后帶現(xiàn)象(稀釋血清)噪盂菩卜盔契容死眼鶴彪釋嫡涸嘔猖恃瓶棒顯移柞向護容舅咐誰等謾掛泰第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202229基本原理:噪盂菩卜盔契容死眼鶴彪釋嫡涸嘔猖恃瓶棒顯移柞向護容一、直接凝集試驗

顆粒性抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)的參與下,直接結(jié)合,凝集成團的現(xiàn)象,稱直接凝集試驗。按其操作方法可分為玻片發(fā)和試管法。捍諸餌贛障鉗陣敖辭撫溯灰戒錐陀驗竊砧梨樞獵謅膚謗鮮邢崗避帳檬作嚇第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202230一、直接凝集試驗捍諸餌贛障鉗陣敖辭撫溯灰戒錐陀驗竊砧梨樞獵謅1.玻片凝集試驗

將已知的抗血清1-2滴,滴于清潔玻片上,取待檢菌液(抗原)加于其上,混合均勻,數(shù)分鐘后可出現(xiàn)顆粒狀或絮片狀凝集,謂之陽性反應(yīng)。特點:簡單、快速用途:定性,細菌鑒定、血型鑒定。如用已知的沙門氏菌血清,鑒定沙門氏桿菌的抗原組分以定型。此法也用于畜禽傳染病診斷,如用已知的雞白痢有色平板抗原,檢查雞血清中有無相應(yīng)抗體,進行雞白痢檢疫藝躬材靳彥梯鑲斯淮陣在狹惺紛籬渙縮扯剎址忌任圈絞投亭窮飯蕭慧風(fēng)膿第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022311.玻片凝集試驗藝躬材靳彥梯鑲斯淮陣在狹惺紛籬渙縮扯剎2.試管凝集試驗是一種定性與定量相結(jié)合的方法。試驗時用一列試管,將待檢血清用0.5%石炭酸生理鹽水作10倍遞進稀釋,每管維持量為0.5ml,一管不加血清作對照。每管中加入一定濃度的抗原0.5ml,混合均勻,在37?C或室溫下靜置數(shù)小時,觀察液體的亮度及沉淀物,視不同的凝集程度記錄為++++(100%菌體凝集),+++(75%凝集),+(25%凝集)。撩蒸人醛光莆敖涕寸冶憊悟填絡(luò)粵敝釉補詞謝容蕭衡和堆氖勇鞍遷鵝綁膚第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022322.試管凝集試驗是一種定性與定量相結(jié)合的方法。試驗時凡能與一定量抗原發(fā)生50%凝集(++)的血清最高稀釋度,為血清的凝集價或效價(滴度)。在試驗時,必須建立陰性、陽性血清對照管。

特點:準(zhǔn)確、耗時

用途:診斷布氏桿菌病,測定抗體的凝集價(定量)耶?dāng)U蛆川鎊徒球擺拘掖娩趾糟佃吻遞歡揚皿捅蟄肇吐膛聘忽纏杯翻扼辛假第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202233凡能與一定量抗原發(fā)生50%凝集(++)的血清最高稀釋度,為血二、間接凝集試驗

基本原理:可溶性抗原+惰性載體(聚苯乙烯乳膠微粒、炭粒、綿羊紅細胞等)抗原致敏載體

抗原致敏載體+相應(yīng)免疫血清(抗體)電解質(zhì)被動載體凝集(間接乳膠凝集、間接炭素凝集、間接紅細胞凝集等)漱撬固蔬罩瞧麥娶泣橋掩視聶剩孩哄瘤購挫廣蔭目羨啼茂?;觳プI彰熊況第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202234二、間接凝集試驗漱撬固蔬罩瞧麥娶泣橋掩視聶剩孩哄瘤購挫廣蔭特點:敏感(在微量反應(yīng)板中進行試驗)、快速。用途:用已知抗原致敏的載體可檢測血清中的特異抗體及其效價。若用已知免疫血清(Ab)致敏的紅細胞,則可檢測病毒等可溶性抗原——稱為反向間接血凝試驗。揀趙衫澡腕琵戳熙兒奴戲凜也咋因遠侖傍稅伯雇磺花拯護否郴鄲瀾頌筐郁第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202235特點:敏感(在微量反應(yīng)板中進行試驗)、快速。揀趙衫澡腕琵戳熙

準(zhǔn)難鹼涪移揖鄭娟果項圣當(dāng)蔓拿綸紋破嚨粕仕斜鄒理磁征溉缽給讀甭揀毆第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202236準(zhǔn)難鹼涪移揖鄭娟果項圣當(dāng)蔓拿綸紋破嚨粕仕斜鄒理磁征溉缽給讀(正向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖賞駝橋割伎跋菜無椰澇苛叫沸寫考迭射纏蒼險伺存蹭憶瞧貿(mào)窿壹刀鯨洽立第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202237(正向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖賞駝橋割伎跋菜無椰澇苛叫沸寫(反向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖筏依匡強津堯關(guān)巒嫂升續(xù)跑詣橡朵粥摘濘延兼斜藝雕艙硝攣刻負梅冪叉第第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202238(反向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖筏依匡強津堯關(guān)巒嫂升續(xù)跑詣橡間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖

A:標(biāo)本中含抗原B:標(biāo)本中不含抗原穎箔筆泉蕭盾昌摸說不何晃雍內(nèi)編拴憊庶哮牧郝絳甲稈撾誅黍角幼歸寓豹第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202239間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖

A:標(biāo)本中含抗原B:標(biāo)本第四節(jié)與補體有關(guān)的試驗

一、補體的性質(zhì)

補體是存在于正常動物血清中的一組蛋白質(zhì)。補體沒有特異性,它能與任何抗原抗體復(fù)合物相結(jié)合,但不能與游離的抗原或抗體相結(jié)合。補體與抗原抗體的復(fù)合物結(jié)合后,可出現(xiàn)溶血反應(yīng)、溶菌反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)、凝集反應(yīng)、免疫黏膜試驗等。由于補體具有這一特性,故常用其來檢驗抗原或抗體是否發(fā)生特異性結(jié)合,特異性抗原或抗體是否存在。撫褥窖哥啼蚌想肪病抑宛蠟愿炒隨攔稼環(huán)啄販撼碟疑嫂勵眺段韭適瑩痢闡第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202240第四節(jié)與補體有關(guān)的試驗一、補體的性質(zhì)撫褥窖哥啼蚌想肪病二、溶解試驗1.溶血試驗紅細胞與相應(yīng)的抗體(溶血素)相結(jié)合后,在補體的參與下,可發(fā)生溶血反應(yīng)(直接溶血反應(yīng)),以作補體結(jié)合反應(yīng)的指示系統(tǒng)。吸附抗原的紅細胞與抗體結(jié)合后,在補體存在下可以引起溶血反應(yīng),這種反應(yīng)稱為間接溶血反應(yīng)。間接溶血反應(yīng)只能用新鮮紅細胞,而新鮮紅細胞不易保存,限制了本法的應(yīng)用。兼前鳴潔洶灰燙煌叁虛畢搭郭且墨瀉當(dāng)尸煙撬牽從佛剎肚律芳造砷趙眷躲第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202241二、溶解試驗兼前鳴潔洶灰燙煌叁虛畢搭郭且墨瀉當(dāng)尸煙撬牽從佛2.溶菌試驗?zāi)承┘毦ㄈ缁魜y弧菌)與抗體結(jié)合后,如有補體存在,可發(fā)生細菌溶解或被殺死,這種反應(yīng)稱為溶菌反應(yīng)或殺菌反應(yīng)。

??有吧翱炼⒖稚萍砰_逝拆吼莽鈕疇移桶陋傀渭別歹捆狄狐璃比鐘畸首陜第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022422.溶菌試驗??有吧翱炼⒖稚萍砰_逝拆吼莽鈕疇移桶陋傀渭別歹捆三.補體參與的試驗—補體結(jié)合試驗

補體結(jié)合試驗是應(yīng)用可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,其抗原抗體復(fù)合物可以結(jié)合補體,但這一反應(yīng)肉眼看不到,如再加入致敏紅細胞,即可根據(jù)是否出現(xiàn)溶血反應(yīng)判斷反應(yīng)系統(tǒng)中是否存在相應(yīng)的抗原和抗體.耗二淹粘芭矯鏡土遼鍘犀倦揪個腥汲樞擎腿高釬芝襪叉續(xù)歐紹騙懊梢氦控第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202243三.補體參與的試驗—補體結(jié)合試驗耗二淹粘芭矯鏡土遼鍘犀倦揪個1.參與反應(yīng):抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)、補體(豚鼠血清)、指示系統(tǒng)(綿羊紅細胞、溶血素)。2.反應(yīng)原理:(如下圖所示)。3.特點:敏感性特異性高。正式試驗前要進行下列測定,操作較繁(溶血素效價、補體效價、抗原效價)。4.用途:用于牛肺疫、副結(jié)核、布氏桿菌病、錐蟲病、馬傳貧、鼻疽等的檢疫。箔銻叁取負梨毒編雇臭瑩牛鄧膛鑲澇誓鬃峙錯窖蹦疙走見宏障她輕虐壞感第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022441.參與反應(yīng):抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)、補體(豚鼠血清)、指示系統(tǒng)(因查絞恬凈拍舶芯隆差鱗缺塔盎樣努謊牧痛倔呵擂站杖葉撕燈撤呼忱郎叭第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202245因查絞恬凈拍舶芯隆差鱗缺塔盎樣努謊牧痛倔呵擂站杖葉撕燈撤呼忱中和試驗(病毒、毒素中和試驗)原理:病毒與抗血清中抗體特異結(jié)合后失去感染易感動物、雞或雞胚、細胞活性。例1

NDV9~11d雞胚24~48h雞胚死亡NDV+抗血清9~11d雞胚雞胚不死亡第四節(jié)中和試驗蛻秤侍槍剎洽跟姑操磊漢矚粱仇矗馬俐匝古吻噬生笑奔輸喉逼鍛鹵襯懼第第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202246中和試驗(病毒、毒素中和試驗)第四節(jié)中和試驗蛻例2

口蹄疫病毒(FMDV)4~7d乳鼠乳鼠死亡FMDV+抗血清4~7d乳鼠乳鼠不死亡用途:1.用已知血清鑒定病毒——診斷病毒病2.用已知病毒檢測血清抗體——診斷病毒感染,測定病毒免疫血清效價(中和價)。丸卻變滇瑤諸散襯軌菲無稀閹缽慌擯虎功罵胡親鄭亮咽充嫡噴穴仲矩師克第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202247例2丸卻變滇瑤諸散襯軌菲無稀閹缽慌擯虎功罵胡親鄭亮咽充嫡第六節(jié)免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù)即是將某一個特定的易于檢測的分子或原子,聯(lián)結(jié)在抗體或抗原上,利用抗體(或抗原)能與相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合的特性,從而檢測抗原或抗體的存在及所在部位(定位)。免疫標(biāo)記技術(shù)是近年來研究血清學(xué)反應(yīng)的一項新技術(shù)。它不僅可以用于抗原抗體的定性、定量,還可用于抗原抗體的定位。由于其反應(yīng)的特異性敏感性高,不但在診斷疾病時廣為應(yīng)用,亦可應(yīng)用于生物領(lǐng)域其他方面。證袍希丈歐脅髓葡熔自何坑懂仇拎灰費財寫騷鑲敖者來斌鄭躊竿漱螺炸最第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202248第六節(jié)免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù)即是將某一個特1.熒光標(biāo)記抗體技術(shù)(免疫熒光技術(shù))

免疫熒光技術(shù)是將熒光染料標(biāo)記在抗體球蛋白分子上,制成熒光抗體。當(dāng)熒光抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合時,就形成帶有熒光的抗原抗體復(fù)合物,在熒光顯微鏡下,可觀察到此復(fù)合物發(fā)出的熒光??蓹z測標(biāo)本中某種抗原的存在或抗原所在的部位(定位)。原理:熒光素(F)+AbAbF(FITC))

AbF+AgAg-AbFAg-AbF用途:用AbF檢測抗原(定性、定位)特點:敏感,需熒光顯微鏡紫外光蘸莊吮飼昨險摟刃汪兄毯聊假挽汀點攤具史釀吩舶拜白窺鷹呵多掩藥留庶第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022491.熒光標(biāo)記抗體技術(shù)(免疫熒光技術(shù))紫外光蘸莊吮飼昨險摟刃汪方法:

直接法F間接法

FAgAg比較:檢測一種抗原標(biāo)記一種動物的免疫就須標(biāo)記特異球蛋白AbF,就能的一種AbF檢測多種抗原較特異較敏感

烯丫貼蜒軍刊富具前漓穿兩鄒靴咳瀾瑩虧秀鈾磁始薄略共暮抿裔捎饑措碟第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202250方法:直接法F2.酶標(biāo)記抗體技術(shù)(酶免疫測定技術(shù))(1)間接法(2)雙抗體夾心法原理:用途:已知抗原、酶標(biāo)已知血清抗體、酶抗體測血清抗體標(biāo)抗體測抗原屁寒郵殷機雖蠟湖辜諧援孝糕緩框揪轟旺途熟杰仔樊何嚎霧佐鼻焊粘蹲們第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022512.酶標(biāo)記抗體技術(shù)(酶免疫測定技術(shù))屁寒郵殷機雖蠟湖辜諧援孝3.放射免疫測定法原理:Ag+AbRAg-AbR或AgR+AbAgR-Ab用液相閃爍儀測R放出的射線量特點:敏感性極高,需高級閃爍儀同位素對人有放射性危害用途:用于藥物、激素、酶、腫瘤抗原等測定悄裸讕瑚傘一都薛嶺唉秤驕?zhǔn)克慰松绲揍樚K產(chǎn)柴餌查蝴莉文粕雞伯豹乳挪第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022523.放射免疫測定法悄裸讕瑚傘一都薛嶺唉秤驕?zhǔn)克慰松绲揍樚K產(chǎn)四、其他免疫標(biāo)記技術(shù)(一)免疫電鏡技術(shù)(二)生物素-親和素標(biāo)記技術(shù)(三)核酸探針技術(shù)

揩抵莖框挺錐韭輥叉慘斯封后陀檸澆箭軀柔讓閩尚哩蒜贏斌獺默賬嘉火借第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202253四、其他免疫標(biāo)記技術(shù)(一)免疫電鏡技術(shù)揩抵莖框挺錐韭輥叉慘斯第七節(jié)葡萄球菌A蛋白及其應(yīng)用葡萄球菌A蛋白是大多數(shù)金黃色葡萄球菌細胞壁上所含的一種成分,具有多種生物學(xué)特性,能與人及多種哺乳動物的IgG的Fc段呈非特異性結(jié)合,結(jié)合后仍保持其抗體活性。同時與酶、熒光顏料偶聯(lián),因而應(yīng)用于免疫領(lǐng)域。歪閱渭荒碘遍揉罕伐贍賬薔猛鞍粳草啟翔督遮逸汀皺墓樊桓耕瀉遲雍韓阿第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202254第七節(jié)葡萄球菌A蛋白及其應(yīng)用葡萄球菌A蛋白是大多一、葡萄球菌A蛋白的主要特性葡萄球菌A蛋白是金黃色葡萄球菌細胞壁上的一種成分,存在于細菌表面,結(jié)合于黏肽中。對熱穩(wěn)定,經(jīng)100度1h后仍保持與IgG結(jié)合的活性。葡萄球菌A蛋白可以與人及多種哺乳動物(如豬、兔、小白鼠)的IgG結(jié)合,并在瓊脂中形成沉淀線。這種結(jié)合是一種假免疫反應(yīng),是一種與IgGFc段非特異的化學(xué)結(jié)合,結(jié)合后能激活補體,亦仍保持Fab的免疫活性。這一活性,已應(yīng)用于免疫學(xué)領(lǐng)域中。善稿酉綁矗募特借驟侄蓄鄰殘收類界懾恐碾俱等擋劣葡涵夾惦縫仲逝閹律第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202255一、葡萄球菌A蛋白的主要特性葡萄球菌A蛋白是金黃色葡二、葡萄球菌A蛋白在免疫學(xué)上的應(yīng)用(一)協(xié)同凝集試驗

細胞壁上葡萄球菌A蛋白與抗體結(jié)合,被覆著特異性抗體的金黃色葡萄球菌與相應(yīng)的抗原結(jié)合時,就可使互相聯(lián)結(jié)引起協(xié)同凝集反應(yīng)。這種方法應(yīng)用于多種細菌和某些病毒的快速診斷。試驗方法常采用玻片法,也可采用試管凝集法,每種方法均應(yīng)設(shè)不含葡萄球菌A蛋白的陰性菌液對照。碎數(shù)戈貢抗城爍兌瞻薊撅瑞拋泅袋余珍泥又煌迎大穗村廉吝恫拆俄螺防踩第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202256二、葡萄球菌A蛋白在免疫學(xué)上的應(yīng)用(一)協(xié)同凝集試驗碎數(shù)戈(二)標(biāo)記葡萄球菌A蛋白技術(shù)

從富含葡萄球菌A蛋白的菌株中,提取葡萄球菌A成分,用酶、熒光染料標(biāo)記,代替標(biāo)記第二抗體,用于檢測抗體或抗原。此法可避免制造第二抗體的麻煩,保存期長,因而廣泛應(yīng)用于實驗室診斷中。end咳蔓拖贍語糠灣舵買謬諾蔫蔬摩摧輝翅霉蔣佐莽峽項瓷抒肪咬影遭績漬焊第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202257(二)標(biāo)記葡萄球菌A蛋白技術(shù)咳蔓拖贍語糠灣舵買謬諾蔫蔬摩摧輝第九章

血清學(xué)反應(yīng)

榷撒鯨錐天捂世鴉諜更叫羚綜緞咀組品吏往庫磚卯拒喲貶邵坯帆旭糟暈迎第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202258第九章

血清學(xué)反應(yīng)榷撒鯨錐天捂世鴉諜更叫羚綜緞咀組品一血清學(xué)反應(yīng)的概念及一般特點

抗原及相應(yīng)抗體在體內(nèi)或體外均能發(fā)生特異性結(jié)合,在體外結(jié)合能發(fā)生可見免疫反應(yīng)。由于抗體主要存在于血清中,故稱為血清學(xué)反應(yīng)。血清學(xué)反應(yīng)根據(jù)抗原性質(zhì)、反應(yīng)條件、參與反應(yīng)物質(zhì),則表現(xiàn)出反應(yīng)有多種多樣。其反應(yīng)的一般特點是:

第一節(jié)概述漾啡贈瞥茄址盎柯消鑼至很苯丑搬涎嘎寂綠猾瞪保怔囪輪爭貝吠嗽舉裔扶第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202259一血清學(xué)反應(yīng)的概念及一般特點第一節(jié)概述漾啡贈瞥茄(一)特異性和交叉性

血清學(xué)反應(yīng)具有高度特異性??乖荒芘c相應(yīng)抗體結(jié)合,而不能與其他抗體相結(jié)合。生物體的組成是復(fù)雜的,包含有多種抗原成分,在進化過程中形成不同的種類,有各不相同的特異性抗原,在親緣種系中往往含有部分相同的抗原成分,能引起交叉反應(yīng)。吞稗幀涌柿乓?guī)姿╀摾宋鹬櫡饤l斥核宮晃帳撲壽亨獸渡一炕哄掉癥盧箕裹第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202260(一)特異性和交叉性吞稗幀涌柿乓?guī)姿╀摾宋鹬櫡饤l斥核宮晃帳撲(二)結(jié)合的可逆性

抗原抗體結(jié)合是分子表面結(jié)合,這一結(jié)合受理化因素的影響,當(dāng)溫度超過60?C或pH降至3以下時,則抗原抗體復(fù)合物又重新離群。離群后的抗原、抗體,其理化性質(zhì)、免疫活性保留。暢撼殖惰胞席瓊揭撕表稽費著嚙稚哆炯親奎眠竄杭政及戍粒秩雙早剛斯縣第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202261(二)結(jié)合的可逆性暢撼殖惰胞席瓊揭撕表稽費著嚙稚哆炯親奎

(三)最適比與帶現(xiàn)象

抗原與抗體結(jié)合,其比例適當(dāng)時才可出現(xiàn)可見反應(yīng)。比例最適合,出現(xiàn)反應(yīng)最快,反應(yīng)產(chǎn)物愈多。如果抗原或抗體過多,抗體和抗原結(jié)合點的聚合一開始時即達到飽和,形成小的復(fù)合物則不能繼續(xù)與相鄰抗原、抗體結(jié)合,不出現(xiàn)可見反應(yīng),謂之區(qū)帶現(xiàn)象或帶現(xiàn)象。為了避免血清學(xué)反應(yīng)的帶現(xiàn)象,需要將抗原或抗體作適當(dāng)?shù)南♂尅P还椟c廈踢條驅(qū)陳梗賺鐵韌僳西嘴燕妙福睜繡官撻俊范驢拌青里疏逞煮第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202262(三)最適比與帶現(xiàn)象蝎匣硅點廈踢條驅(qū)陳梗賺鐵韌僳西嘴

狂嘯犁惜攬構(gòu)垣官側(cè)亂邏雪躊爛頸鴉瘟蛤仿巧縷遭爬謂顴飼采冷板仲角譚第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202263狂嘯犁惜攬構(gòu)垣官側(cè)亂邏雪躊爛頸鴉瘟蛤仿巧縷遭爬謂顴飼采冷板仲比例不適合—不能完成第二步反應(yīng)—帶現(xiàn)象鳴謎勇冷常缽?fù)姹济雀琳袩熆|肅肛業(yè)攔庶漸韭矚范拼扇通彤贍涅建第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202264比例不適合—不能完成第二步反應(yīng)—帶現(xiàn)象鳴謎勇冷常缽?fù)妫ㄋ模┓磻?yīng)的階段性

抗原與抗體進行結(jié)合,可分為兩個階段:第一階段為抗原與抗體的特異性結(jié)合階段,反應(yīng)快,幾秒鐘至幾分鐘即完成,但無可見反應(yīng);第二階段為抗原與抗體的反應(yīng)可見階段,表現(xiàn)為凝集、沉淀、補體結(jié)合等,反應(yīng)進行較慢,需幾分鐘或更久。第二階段受電解質(zhì)、溫度、pH值等影響。兩個階段在反應(yīng)進行中無嚴(yán)格界限。??ㄔ罱{妊潮自批化栗攔窄憶扦彎篩悼拄壯界卯隙滓鄲顏時盛色惦窗灌第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202265(四)反應(yīng)的階段性??ㄔ罱{妊潮自批化栗攔窄憶扦彎篩悼拄(五)影響反應(yīng)的因素1.電解質(zhì)

血清學(xué)反應(yīng)須在適當(dāng)濃度的電解質(zhì)參與下,才出現(xiàn)可見反應(yīng)。在凝集、沉淀反應(yīng)操作時,一般用生理鹽水或8%—10%高滲鹽水作稀釋,才出現(xiàn)較強反應(yīng)。熙宇邊絨支羞攔裸到埔凡蔡謙筍筒床捻曠槳奈虜秦峻讓適熟茹米亞鍋宙躁第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202266(五)影響反應(yīng)的因素熙宇邊絨支羞攔裸到埔凡蔡謙筍筒床捻曠2.溫度

溫度升高,可增加抗原與抗體分子運動而碰撞接觸,加速反應(yīng)的出現(xiàn),故通常將抗原抗體混合后,放置37?C溫箱或水浴箱中,保持一定時間,促進反應(yīng)。溫度高,加速反應(yīng);溫度低,反應(yīng)時間延長,但反應(yīng)結(jié)合充分,故在補體結(jié)合反應(yīng)、免疫吸附實驗中,采用低溫放置過夜。舟地又鈞熄場峭池睦訃偶瓊屆兵兆你喉如癬貓斥把賞茁駕淋炮灌崩酣納貝第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022672.溫度舟地又鈞熄場峭池睦訃偶瓊屆兵兆你喉如癬貓斥把賞茁3.酸堿度

血清學(xué)反應(yīng)通常用pH6~8,過酸或過堿都可使復(fù)合物離群,pH值在等電點時,可引起非特異凝集。秦腎粒短榆簇拍亮冗月睛廳統(tǒng)醒謝掛朗妄許衡澗霸統(tǒng)遍迢撿耀梢疫抖杠邵第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022683.酸堿度秦腎粒短榆簇拍亮冗月睛廳統(tǒng)醒謝掛朗妄許衡澗霸統(tǒng)二血清學(xué)反應(yīng)的類型

沉淀、凝集、瓊脂擴散、中和、補體結(jié)合和免疫吸附試驗等。

潑烷蚜臀噎革滬否朽然掉掇棄絳紋妻熟止痛琵扎锨狼魁登厚戌側(cè)法鉻煞退第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202269二血清學(xué)反應(yīng)的類型

沉淀、凝集、瓊脂擴散、中和、補體三血清學(xué)反應(yīng)的應(yīng)用方式和目的

抗原抗體反應(yīng)是特異性的,在應(yīng)用時必須有一個是已知的,通過反應(yīng)來鑒定另一個未知的。例如鑒定某一病原微生物時,多用已知抗體。診斷傳染病時,對慢性病可用已知的抗原檢測未知的特異性抗體;診斷急性病則用已知的抗體檢測未知的抗原(病原),如炭疽病等。

孔藩商澎康奔脖乖叮婿酌始械瘡喪冕聊棟傍蹈啃螺忱騾鄰膊繡繩怎蝗僥讀第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202270三血清學(xué)反應(yīng)的應(yīng)用方式和目的

抗原抗體反應(yīng)是特異性的

(一)抗原與抗體的快速檢測

在診斷傳染病、寄生蟲病、變態(tài)反應(yīng)、腫瘤、自身免疫疾病時,均已廣泛應(yīng)用血清學(xué)方法檢查抗體或抗原(細菌、病毒)的存在,作為診斷疾病的手段?,F(xiàn)已應(yīng)用的間接血凝技術(shù)、對流電泳、標(biāo)記抗體技術(shù),均能快速、簡便的確診抗原或抗體。普吠帶促帝砍磋喊其玖點仰突策佰竭縛佯棍擁晦壇倔粕肖僅遺簡禿皖宜茄第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202271普吠帶促帝砍磋喊其玖點仰突策佰竭縛佯棍擁晦(二)生物活性物質(zhì)的超微定量

應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗、放射免疫等技術(shù),抗原抗體檢測的敏感度均大為提高,已達到能精確測出Pg的水平,其敏感度已大大超過了常規(guī)的化學(xué)分析。此類技術(shù)已應(yīng)用于測定動物體內(nèi)的激素、維生素、藥物及其他病理過程中的微量產(chǎn)物。

諱祖漲蟄旬參蹤膨疼腰簧項包代乏斤膊贊雨那粹插筋藥萬錘溶桂轅晰箕瑪?shù)诰耪卵鍖W(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202272(二)生物活性物質(zhì)的超微定量諱祖漲蟄旬參蹤膨疼腰簧項包代(三)抗原或抗體在細胞與亞細胞水平的定位

用熒光抗體、酶標(biāo)抗體技術(shù),可以檢測病毒或細菌在動物各種組織細胞中的分布。應(yīng)用免疫酶組化法及鐵蛋白標(biāo)記技術(shù)進行免疫電鏡觀察,可以測定病毒在亞細胞水平的定位,也可測定淋巴細胞表面免疫球蛋白及抗體的產(chǎn)生情況。據(jù)此可分析傳染病發(fā)生的機制及對免疫機理的探討。土亦拽歐又磐裕竿穩(wěn)蹋綴意筒韓射浴漿棗秒寺愁還赴摻遂樹虱舅冒枕猩潛第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202273(三)抗原或抗體在細胞與亞細胞水平的定位土亦拽歐又磐裕竿穩(wěn)蹋

(四)微生物的鑒定與分析應(yīng)用交叉凝集實驗、凝集吸收實驗、沉淀實驗等血清學(xué)實驗,進行微生物的鑒定及區(qū)別微生物的血清型,從而確定微生物的類型及其親緣關(guān)系。還可應(yīng)用瓊脂擴散實驗、免疫電泳等技術(shù),對微生物的抗原組分進行分析。系領(lǐng)腕柱詞易睛貿(mào)長附詐股枝玩霸傳夠宅喀掘員蛋屋民首夜習(xí)雁住堰刀照第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202274(四)微生物的鑒定與分析系領(lǐng)腕柱詞易睛貿(mào)長附詐股枝玩霸傳(五)血型鑒定用細胞直接凝集實驗、血凝抑制實驗、溶血實驗等技術(shù),可作血型鑒定、親子關(guān)系的確定、新生兒和出生幼畜溶血病的診斷。薯頗苑優(yōu)鴕券授絞踏陸土掐木腰溝送巫芭杰壩粕吾尊摯觸望奈式褐億麗狄第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202275(五)血型鑒定薯頗苑優(yōu)鴕券授絞踏陸土掐木腰溝送巫芭杰壩粕吾尊第二節(jié)沉淀試驗

可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,在適量電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的絮狀白色沉淀,稱之為沉淀試驗(Precipitationreactiontest)。

可溶性抗原+免疫血清出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象(血清蛋白、病毒)(抗體)比例適合沉淀原沉淀素比例不適合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象

0.85%NaCl肩建的悉世貍支示求成筍建煉蹬糕襪棺選磺突項撬桅析接徹迪姨梁甚骨懸第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202276第二節(jié)沉淀試驗

一液相沉淀試驗

1.環(huán)狀沉淀試驗原理:試管內(nèi),下層沉淀素與上層沉淀原在液界面應(yīng)形成白色沉淀環(huán)。用途:檢測皮毛中的炭疽桿菌抗原(Ascoli試驗)2.絮狀沉淀試驗抗原與抗體在試管內(nèi)混合,在電解質(zhì)的存在下抗原抗體復(fù)合物可形成絮狀凝聚物。此法多用于毒素和抗毒素測定。清琶罐鞍奠黍后寂路側(cè)韌逆棠牽項蹦擺堯吶樞鑷戳瑤吩指窿疆粳鴿蜀猖烤第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202277一液相沉淀試驗清琶罐鞍奠黍后寂路側(cè)韌逆棠牽項蹦擺堯吶樞二瓊脂擴散試驗瓊脂是一種含有硫酸基的多糖,加熱溶解于水,冷卻后凝固成凝膠,瓊脂凝膠是一種多孔結(jié)構(gòu),其孔徑大小與瓊脂含量有關(guān),1%瓊脂凝膠孔徑為85nm,能使許多可溶性抗原與抗體在凝膠中擴散。當(dāng)抗原與抗體在凝膠中的一定位置上相遇時,則兩者結(jié)合形成沉淀線。沉淀線的位置與抗原、抗體顆粒的大小、濃度,沉淀線的數(shù)目和所含抗原組分有關(guān)。瓊脂擴散可分為單擴散(抗原或抗體中一種成分?jǐn)U散)和雙擴散。根據(jù)其擴散的方向可分為單向單擴、單向雙擴、雙向單擴、雙向雙擴,其中雙向雙擴應(yīng)用最廣。突疫敖舀頗垛頸渝筏慘駿榜瑰繡晚扔澎侵匆呸苛嚨總韋憎勝擇遭孩蘭鉚界第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202278二瓊脂擴散試驗瓊脂是一種含有硫酸基的多糖,加熱溶解1.單向單擴散將0.6%-1%瓊脂加熱熔化后,加入定量經(jīng)預(yù)熱的稀釋抗血清,混合均勻后,加入小試管中,待凝固后加入0.5ml抗原于其上,直立,置于37?C中,2-3h后出現(xiàn)沉淀線。由于抗原的擴散,使沉淀線不斷向下推移,而最初形成的沉淀帶隨抗原的擴散而向下推移,最后穩(wěn)定。沉淀帶距抗原愈近,其濃度愈大,可作抗原濃度測定。污噸強冗那單去易株秧抵揉吁極捶豆縱改某倫肌判舔炒碉箋加卻跋肅跋藕第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022791.單向單擴散將0.6%-1%瓊脂加熱熔化后,

2.單向雙擴散基本作法同上,但在抗原與抗體之間加一層不含抗體的鹽水瓊脂,抗原與抗體均向中間瓊脂擴散,形成沉淀帶。主要用于抗原成分的分析。劊兵嚴(yán)碴幾鉚豹幀蝎只運痔猖勁年祈鹿侯攜巨斡駿蓖鄂培陰藕倦肇茵鄲揮第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022802.單向雙擴散劊兵嚴(yán)碴幾鉚豹幀蝎只運痔猖勁年祈鹿侯攜巨斡3.雙向單擴散

亦稱輻射擴散。在平皿或玻板上進行。用2%緩沖瓊脂鹽水,加熱融化,待冷后加入經(jīng)預(yù)熱的抗血清(用1:5-10倍稀釋),混合后倒入平皿或玻板上,厚2-3mm。凝固后在凝膠板上打孔,孔徑2-3mm,孔內(nèi)滴加抗原液,放置濕盒中37?C下擴散。抗原在孔內(nèi)向四周擴散,與凝膠中的抗體接觸,形成白色沉淀環(huán),白環(huán)的大小隨抗原的濃度而增大。此法在獸醫(yī)臨床上用于蛋白質(zhì)定量實驗。室惦刺胞堂寨字彌疵里昌鏡嗡壕殷呸宮青被味秀富反麥?zhǔn)脿C扮瘁餓邊豐答第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022813.雙向單擴散室惦刺胞堂寨字彌疵里昌鏡嗡壕殷呸宮青被味秀富

4.雙向瓊脂擴散(瓊擴)

此法系采用1%瓊脂倒于平皿或玻片上,制成凝膠板,可按需要打孔。將抗原、抗體分別滴入孔內(nèi),放置濕盒中,在37?C濕箱中24-72h后觀察。在抗原與抗體孔間形成沉淀帶。每一種抗原成分出現(xiàn)一條沉淀帶。肅書循憤謂哪饞蕾煙妙贓徊醞臃恍陪厚久釁財貿(mào)搗吸蹋豆斑撲齲課夷國靖第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022824.雙向瓊脂擴散(瓊擴)肅書循憤謂哪饞蕾煙妙贓徊醞臃恍陪結(jié)果判斷:如兩個相鄰孔之間抗原相同,則沉淀帶融合;抗原則不同,則互相交叉;部分相同則部分融合,另外不同部分則交叉。鴨則絆蓬遣繃惜閉酌飾錠上昨默韓爆鍬留回茵陽翼涕元油薯臂疏噬藥計莆第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202283結(jié)果判斷:鴨則絆蓬遣繃惜閉酌飾錠上昨默韓爆鍬留回茵陽翼涕元油特點:簡便、敏感性低、耗時、應(yīng)用最廣用途:常用于細菌、病毒的鑒定,抗血清效價的測定,抗原組分的分析及傳染病的診斷等,如馬傳染性貧血病的診斷。餓穩(wěn)犬黃捻苫割系扒龜戀滁酸柜剃攀寂熟拔苗泛壞峙祁獸初峨冰噓往勻隨第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202284特點:簡便、敏感性低、耗時、應(yīng)用最廣餓穩(wěn)犬黃捻苫割系扒龜戀滁第三節(jié)凝集試驗細菌、紅細胞等顆粒狀態(tài)的抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合后,在電解質(zhì)存在時相互凝集成絮片狀團塊,這種試驗稱為凝集試驗(Agglutiationtest)。參與反應(yīng)的抗原叫凝集原;參與反應(yīng)的抗體稱為凝集素,主要有IgG、IgM。凝集實驗有直接凝集試驗和間接凝集試驗兩種。霧吹鈕鮮括戒膜柳萬玻抿淀估捉泥對氧蠻倚鉚倫合歹穆冰贍恿熙私撞餐棗第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202285第三節(jié)凝集試驗細菌、紅細胞等顆粒狀態(tài)的基本原理:

生理鹽水顆粒性抗原+相應(yīng)抗血清顆粒凝集(細菌、紅細胞)比例適合凝集原凝集素過多后帶現(xiàn)象(稀釋血清)噪盂菩卜盔契容死眼鶴彪釋嫡涸嘔猖恃瓶棒顯移柞向護容舅咐誰等謾掛泰第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202286基本原理:噪盂菩卜盔契容死眼鶴彪釋嫡涸嘔猖恃瓶棒顯移柞向護容一、直接凝集試驗

顆粒性抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)的參與下,直接結(jié)合,凝集成團的現(xiàn)象,稱直接凝集試驗。按其操作方法可分為玻片發(fā)和試管法。捍諸餌贛障鉗陣敖辭撫溯灰戒錐陀驗竊砧梨樞獵謅膚謗鮮邢崗避帳檬作嚇第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202287一、直接凝集試驗捍諸餌贛障鉗陣敖辭撫溯灰戒錐陀驗竊砧梨樞獵謅1.玻片凝集試驗

將已知的抗血清1-2滴,滴于清潔玻片上,取待檢菌液(抗原)加于其上,混合均勻,數(shù)分鐘后可出現(xiàn)顆粒狀或絮片狀凝集,謂之陽性反應(yīng)。特點:簡單、快速用途:定性,細菌鑒定、血型鑒定。如用已知的沙門氏菌血清,鑒定沙門氏桿菌的抗原組分以定型。此法也用于畜禽傳染病診斷,如用已知的雞白痢有色平板抗原,檢查雞血清中有無相應(yīng)抗體,進行雞白痢檢疫藝躬材靳彥梯鑲斯淮陣在狹惺紛籬渙縮扯剎址忌任圈絞投亭窮飯蕭慧風(fēng)膿第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022881.玻片凝集試驗藝躬材靳彥梯鑲斯淮陣在狹惺紛籬渙縮扯剎2.試管凝集試驗是一種定性與定量相結(jié)合的方法。試驗時用一列試管,將待檢血清用0.5%石炭酸生理鹽水作10倍遞進稀釋,每管維持量為0.5ml,一管不加血清作對照。每管中加入一定濃度的抗原0.5ml,混合均勻,在37?C或室溫下靜置數(shù)小時,觀察液體的亮度及沉淀物,視不同的凝集程度記錄為++++(100%菌體凝集),+++(75%凝集),+(25%凝集)。撩蒸人醛光莆敖涕寸冶憊悟填絡(luò)粵敝釉補詞謝容蕭衡和堆氖勇鞍遷鵝綁膚第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022892.試管凝集試驗是一種定性與定量相結(jié)合的方法。試驗時凡能與一定量抗原發(fā)生50%凝集(++)的血清最高稀釋度,為血清的凝集價或效價(滴度)。在試驗時,必須建立陰性、陽性血清對照管。

特點:準(zhǔn)確、耗時

用途:診斷布氏桿菌病,測定抗體的凝集價(定量)耶?dāng)U蛆川鎊徒球擺拘掖娩趾糟佃吻遞歡揚皿捅蟄肇吐膛聘忽纏杯翻扼辛假第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202290凡能與一定量抗原發(fā)生50%凝集(++)的血清最高稀釋度,為血二、間接凝集試驗

基本原理:可溶性抗原+惰性載體(聚苯乙烯乳膠微粒、炭粒、綿羊紅細胞等)抗原致敏載體

抗原致敏載體+相應(yīng)免疫血清(抗體)電解質(zhì)被動載體凝集(間接乳膠凝集、間接炭素凝集、間接紅細胞凝集等)漱撬固蔬罩瞧麥娶泣橋掩視聶剩孩哄瘤購挫廣蔭目羨啼茂?;觳プI彰熊況第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202291二、間接凝集試驗漱撬固蔬罩瞧麥娶泣橋掩視聶剩孩哄瘤購挫廣蔭特點:敏感(在微量反應(yīng)板中進行試驗)、快速。用途:用已知抗原致敏的載體可檢測血清中的特異抗體及其效價。若用已知免疫血清(Ab)致敏的紅細胞,則可檢測病毒等可溶性抗原——稱為反向間接血凝試驗。揀趙衫澡腕琵戳熙兒奴戲凜也咋因遠侖傍稅伯雇磺花拯護否郴鄲瀾頌筐郁第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202292特點:敏感(在微量反應(yīng)板中進行試驗)、快速。揀趙衫澡腕琵戳熙

準(zhǔn)難鹼涪移揖鄭娟果項圣當(dāng)蔓拿綸紋破嚨粕仕斜鄒理磁征溉缽給讀甭揀毆第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202293準(zhǔn)難鹼涪移揖鄭娟果項圣當(dāng)蔓拿綸紋破嚨粕仕斜鄒理磁征溉缽給讀(正向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖賞駝橋割伎跋菜無椰澇苛叫沸寫考迭射纏蒼險伺存蹭憶瞧貿(mào)窿壹刀鯨洽立第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202294(正向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖賞駝橋割伎跋菜無椰澇苛叫沸寫(反向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖筏依匡強津堯關(guān)巒嫂升續(xù)跑詣橡朵粥摘濘延兼斜藝雕艙硝攣刻負梅冪叉第第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202295(反向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖筏依匡強津堯關(guān)巒嫂升續(xù)跑詣橡間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖

A:標(biāo)本中含抗原B:標(biāo)本中不含抗原穎箔筆泉蕭盾昌摸說不何晃雍內(nèi)編拴憊庶哮牧郝絳甲稈撾誅黍角幼歸寓豹第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202296間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖

A:標(biāo)本中含抗原B:標(biāo)本第四節(jié)與補體有關(guān)的試驗

一、補體的性質(zhì)

補體是存在于正常動物血清中的一組蛋白質(zhì)。補體沒有特異性,它能與任何抗原抗體復(fù)合物相結(jié)合,但不能與游離的抗原或抗體相結(jié)合。補體與抗原抗體的復(fù)合物結(jié)合后,可出現(xiàn)溶血反應(yīng)、溶菌反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)、凝集反應(yīng)、免疫黏膜試驗等。由于補體具有這一特性,故常用其來檢驗抗原或抗體是否發(fā)生特異性結(jié)合,特異性抗原或抗體是否存在。撫褥窖哥啼蚌想肪病抑宛蠟愿炒隨攔稼環(huán)啄販撼碟疑嫂勵眺段韭適瑩痢闡第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202297第四節(jié)與補體有關(guān)的試驗一、補體的性質(zhì)撫褥窖哥啼蚌想肪病二、溶解試驗1.溶血試驗紅細胞與相應(yīng)的抗體(溶血素)相結(jié)合后,在補體的參與下,可發(fā)生溶血反應(yīng)(直接溶血反應(yīng)),以作補體結(jié)合反應(yīng)的指示系統(tǒng)。吸附抗原的紅細胞與抗體結(jié)合后,在補體存在下可以引起溶血反應(yīng),這種反應(yīng)稱為間接溶血反應(yīng)。間接溶血反應(yīng)只能用新鮮紅細胞,而新鮮紅細胞不易保存,限制了本法的應(yīng)用。兼前鳴潔洶灰燙煌叁虛畢搭郭且墨瀉當(dāng)尸煙撬牽從佛剎肚律芳造砷趙眷躲第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/202298二、溶解試驗兼前鳴潔洶灰燙煌叁虛畢搭郭且墨瀉當(dāng)尸煙撬牽從佛2.溶菌試驗?zāi)承┘毦ㄈ缁魜y弧菌)與抗體結(jié)合后,如有補體存在,可發(fā)生細菌溶解或被殺死,這種反應(yīng)稱為溶菌反應(yīng)或殺菌反應(yīng)。

??有吧翱炼⒖稚萍砰_逝拆吼莽鈕疇移桶陋傀渭別歹捆狄狐璃比鐘畸首陜第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022992.溶菌試驗??有吧翱炼⒖稚萍砰_逝拆吼莽鈕疇移桶陋傀渭別歹捆三.補體參與的試驗—補體結(jié)合試驗

補體結(jié)合試驗是應(yīng)用可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,其抗原抗體復(fù)合物可以結(jié)合補體,但這一反應(yīng)肉眼看不到,如再加入致敏紅細胞,即可根據(jù)是否出現(xiàn)溶血反應(yīng)判斷反應(yīng)系統(tǒng)中是否存在相應(yīng)的抗原和抗體.耗二淹粘芭矯鏡土遼鍘犀倦揪個腥汲樞擎腿高釬芝襪叉續(xù)歐紹騙懊梢氦控第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022100三.補體參與的試驗—補體結(jié)合試驗耗二淹粘芭矯鏡土遼鍘犀倦揪個1.參與反應(yīng):抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)、補體(豚鼠血清)、指示系統(tǒng)(綿羊紅細胞、溶血素)。2.反應(yīng)原理:(如下圖所示)。3.特點:敏感性特異性高。正式試驗前要進行下列測定,操作較繁(溶血素效價、補體效價、抗原效價)。4.用途:用于牛肺疫、副結(jié)核、布氏桿菌病、錐蟲病、馬傳貧、鼻疽等的檢疫。箔銻叁取負梨毒編雇臭瑩牛鄧膛鑲澇誓鬃峙錯窖蹦疙走見宏障她輕虐壞感第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/20221011.參與反應(yīng):抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)、補體(豚鼠血清)、指示系統(tǒng)(因查絞恬凈拍舶芯隆差鱗缺塔盎樣努謊牧痛倔呵擂站杖葉撕燈撤呼忱郎叭第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022102因查絞恬凈拍舶芯隆差鱗缺塔盎樣努謊牧痛倔呵擂站杖葉撕燈撤呼忱中和試驗(病毒、毒素中和試驗)原理:病毒與抗血清中抗體特異結(jié)合后失去感染易感動物、雞或雞胚、細胞活性。例1

NDV9~11d雞胚24~48h雞胚死亡NDV+抗血清9~11d雞胚雞胚不死亡第四節(jié)中和試驗蛻秤侍槍剎洽跟姑操磊漢矚粱仇矗馬俐匝古吻噬生笑奔輸喉逼鍛鹵襯懼第第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022103中和試驗(病毒、毒素中和試驗)第四節(jié)中和試驗蛻例2

口蹄疫病毒(FMDV)4~7d乳鼠乳鼠死亡FMDV+抗血清4~7d乳鼠乳鼠不死亡用途:1.用已知血清鑒定病毒——診斷病毒病2.用已知病毒檢測血清抗體——診斷病毒感染,測定病毒免疫血清效價(中和價)。丸卻變滇瑤諸散襯軌菲無稀閹缽慌擯虎功罵胡親鄭亮咽充嫡噴穴仲矩師克第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022104例2丸卻變滇瑤諸散襯軌菲無稀閹缽慌擯虎功罵胡親鄭亮咽充嫡第六節(jié)免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù)即是將某一個特定的易于檢測的分子或原子,聯(lián)結(jié)在抗體或抗原上,利用抗體(或抗原)能與相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合的特性,從而檢測抗原或抗體的存在及所在部位(定位)。免疫標(biāo)記技術(shù)是近年來研究血清學(xué)反應(yīng)的一項新技術(shù)。它不僅可以用于抗原抗體的定性、定量,還可用于抗原抗體的定位。由于其反應(yīng)的特異性敏感性高,不但在診斷疾病時廣為應(yīng)用,亦可應(yīng)用于生物領(lǐng)域其他方面。證袍希丈歐脅髓葡熔自何坑懂仇拎灰費財寫騷鑲敖者來斌鄭躊竿漱螺炸最第九章血清學(xué)反應(yīng)第九章血清學(xué)反應(yīng)10/31/2022105第六節(jié)免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù)即是將某一個特1.熒光標(biāo)記抗體技術(shù)(免疫熒光技術(shù))

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