多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)

多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)的原理

它是基于雙抗夾心法的化學(xué)發(fā)光檢測方法，在固相基質(zhì)上包被12種腫瘤標(biāo)志物的抗體，捕捉被檢者血清中對應(yīng)的腫瘤標(biāo)志物，結(jié)合第二抗體（標(biāo)有示蹤標(biāo)記物），然后催化化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生光信號，用專門的芯片閱讀儀讀取光信號，對腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行定量檢測。多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片的應(yīng)用范圍

1.臨床應(yīng)用

腫瘤患者的輔助診斷、療效判斷、病情檢測、預(yù)后評估；評價手術(shù)、放療、化療是否有效。反映手術(shù)是否根除，有無復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移等。

2.篩查應(yīng)用

腫瘤高危人群的定期篩查，高危人群包括：45歲以上人群；各慢性炎癥和慢性疾病患者、有腫瘤家族史者、腫瘤高發(fā)區(qū)居民等。

3.研究應(yīng)用

腫瘤分子流行病學(xué)調(diào)查及腫瘤標(biāo)志物生物學(xué)研究。多腫瘤標(biāo)志物的臨床意義

腫瘤標(biāo)志物是指腫瘤細(xì)胞分泌或脫落到體液或組織中的物質(zhì)，或是宿主對體內(nèi)寄生物反應(yīng)而產(chǎn)生并進(jìn)入到體液或組織中的物質(zhì)。

目前臨床上常用的腫瘤標(biāo)志物大多是腫瘤相關(guān)抗原。這些腫瘤標(biāo)志物并非腫瘤細(xì)胞所特有，而是腫瘤細(xì)胞的表達(dá)量明顯增加，與正常細(xì)胞存在量的差異。

腫瘤標(biāo)志物大多無器官特異性（廣譜標(biāo)志物），因此基本上不可以定位。同一種腫瘤可以有幾種不同的腫瘤標(biāo)志物，不同腫瘤可能有相同的腫瘤標(biāo)志物。如CA125不僅是卵巢癌相關(guān)抗原，也是其他腫瘤（肺癌、肝癌、胰腺癌、胃腸道癌等）的相關(guān)抗原。

腫瘤標(biāo)志物在一些良性疾病和炎癥時也會有不同程度升高。一般表現(xiàn)為中等程度升高。此時，僅僅根據(jù)腫瘤標(biāo)志物一次檢測是很難定性的，而應(yīng)連續(xù)監(jiān)測，通過動態(tài)觀察可以判斷腫瘤的消退、療效及預(yù)后復(fù)發(fā)。

將最常見的12種腫瘤標(biāo)志物集成在一張芯片上，使原來需要進(jìn)行12次實驗的操作一次完成。一次檢測提供12種腫瘤標(biāo)志物的信息，使醫(yī)生可以更好的從相對全方位的信息角度做出準(zhǔn)確判斷。腫瘤標(biāo)志物參考值臨床意義癌胚抗原（Carcinoembryonicantigen，CEA）<5μg/L點擊甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）<20μg/L點擊癌抗原125（Cancerantigen125，CA125）<35kU/L點擊癌抗原15-3（Cancerantigen15-3，CA15-3）<35kU/L點擊糖鏈抗原19-9（Carbohydrateantigen19-9，CA19-9）<35kU/L點擊糖鏈抗原242（Carbohydrateantigen242，CA242）<20kU/L點擊前列腺特異性抗原（Prostatespecificantigen，PSA）和游離型前列腺特異性抗原（Free-PSA）PSA<5μg/L

f-PSA<1μg/L點擊神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specificenolase，NSE）<13μg/L點擊人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonagotropin，hCG、β-HCG）β-HCG<3μg/L點擊生長激素（HGH）<7.5μg/L點擊鐵蛋白（Ferritin，F(xiàn)e）男性:<322μg/L;

女性:<219μg/L點擊注：以上資料僅供醫(yī)生參考，臨床醫(yī)生須根據(jù)病例具體分析。如何合理應(yīng)用腫瘤標(biāo)志物

由于各種免疫標(biāo)記技術(shù)的快速發(fā)展，所檢腫瘤指標(biāo)越來越多，對腫瘤的早期診斷、觀察評價治療效果及判斷預(yù)后具有極大意義，但至今仍沒有一種標(biāo)記物是對腫瘤完全特異的。其原因是一些良性病變也能出現(xiàn)程度不同的陽性反應(yīng)，即便是腫瘤本身也?？捎捎谠诎l(fā)生發(fā)展過程中的各種因素而呈一過性或階段性陰性反應(yīng)。故此，近年來國內(nèi)外學(xué)者一致認(rèn)為動態(tài)觀察和多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測，并緊密結(jié)合臨床表現(xiàn)，特別是影像特點綜合判斷，是提高腫瘤診斷陽性率最富有成效的方法與措施。

一、影響腫瘤標(biāo)志物測定的因素

到目前為止還未發(fā)現(xiàn)有理想的具有100%靈敏度和100%特異性的腫瘤標(biāo)志物，因為腫瘤標(biāo)志物不僅在發(fā)生癌變時產(chǎn)生，在正常的和良性疾病情況下也有不同程度表達(dá)，腫瘤標(biāo)志物的產(chǎn)生還受到一些生物活性因子的影響。因此，在腫瘤標(biāo)志物檢測中要注意假陽性和假陰性的問題。

1、引起假陽性的因素：

（1）良性疾?。貉装Y性疾病一些腫瘤標(biāo)志物表達(dá)增加。肝臟良性疾病時AFP、CA19-9、CEA及腎功能衰竭時CA15-3、CA19-9、CEA和PSA水平均會升高。

（2）生理變化：妊娠時AFP、CA125、HGH和月經(jīng)時CA125也會升高。

（3）腫瘤手術(shù)/放療/化療過程中：由于腫瘤組織受到破壞或腫瘤壞死時某些腫瘤標(biāo)志物產(chǎn)生增加，從而影響腫瘤標(biāo)志物的測定，造成假陽性。

（4）樣本中的免疫球蛋白可通過與測定中所使用的特異性抗體發(fā)生反應(yīng)而影響測定結(jié)果。如自身免疫疾病患者常有可與抗體反應(yīng)的類風(fēng)濕因子（RF）及針對動物免疫球蛋白的嗜異性抗體均會引起假陽性反應(yīng)，表現(xiàn)為所有指標(biāo)或除PSA、f-PSA外其他指標(biāo)全部陽性。

2、引起假陰性的因素：

（1）產(chǎn)生腫瘤標(biāo)志物的腫瘤細(xì)胞數(shù)目少。

（2）細(xì)胞或細(xì)胞表面被封閉。

（3）機體體液中一些抗體與腫瘤標(biāo)志物（腫瘤抗原）形成免疫復(fù)合物。

（4）腫瘤組織本身血循環(huán)差，所產(chǎn)生的腫瘤標(biāo)志物不能分泌到外周血中。

3、血標(biāo)本的采集、儲存不當(dāng)也會影響腫瘤標(biāo)志物的測定結(jié)果

（1）血清：將全血在室溫下（25℃左右）靜置1小時左右或37℃水浴15分鐘，然后2000r/m離心5分鐘，分離血清。血清量不少于300μl（實際檢測量需100μl）。

（2）溶血需要重新抽血；黃疸血不宜檢測；脂血要求血清在20000r/min離心3分鐘以上，除去上層油脂后才可檢測。

（3）血清分離于1.5或2.0ml的離心管中（干凈、干燥），當(dāng)天不能檢測者，需放置在4℃冰箱保存；若一周內(nèi)不能檢測則放置在-20℃儲藏，凍藏血清融化后，混合均勻即可檢測，但不可以反復(fù)凍融。避免微生物污染。

二、腫瘤標(biāo)志物測定意義及周期

1、動態(tài)記錄腫瘤標(biāo)志物的濃度變化，隨著時間的推移濃度值逐漸升高，臨床參考價值更大?？捎糜诮】岛蛠喗】等巳后w檢時的腫瘤篩查，以及良性疾病患者腫瘤標(biāo)志物升高的動態(tài)觀察，可每年檢測1-2次。

2、腫瘤患者定期測定腫瘤標(biāo)志物：

（1）治療前應(yīng)測定每個患者腫瘤標(biāo)志物的原始值。

（2）治療后第1-2年：1次/每月，第3-5年：1-2次/每年，第6年：1次/年。每次改變治療方法前、腫瘤標(biāo)志物濃度升高或懷疑復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移時，均應(yīng)及時測定腫瘤標(biāo)志物的濃度。

三、蛋白芯片檢測出現(xiàn)陽性時應(yīng)考慮：

1、若是門診患者：此結(jié)果可以作為醫(yī)生臨床診斷的參考依據(jù)，建議結(jié)合其他檢查進(jìn)行綜合判斷。

2、若為普查體檢人群：建議2-6個月后再檢測一次，如兩次檢測某些指標(biāo)均高于參考值，且高得很多，則應(yīng)去醫(yī)院做臨床檢查，以便及時確診和治療。臨床檢查后未能發(fā)現(xiàn)有疾病存在則可考慮定期隨訪。通常，腫瘤標(biāo)志物升高意味著各種炎癥疾病、慢性疾病及腫瘤，后者常常超出臨界參考值數(shù)倍，盡管良性疾病亦偶見此情況。

3、若為腫瘤治療后患者：應(yīng)高度懷疑有否復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的檢查和治療。

四、蛋白芯片檢測出現(xiàn)陽性時應(yīng)根據(jù)被檢者情況綜合判斷

由于一種腫瘤可以出現(xiàn)多種指標(biāo)陽性，一種腫瘤指標(biāo)與多種腫瘤相關(guān)，所以在體檢或門診患者中出現(xiàn)某些指標(biāo)陽性，應(yīng)根據(jù)被檢者情況綜合判斷。

1、參考值的確定是采用該試劑盒對大量正常人群的檢測結(jié)果統(tǒng)計，以95%的正常人群小于該值來界定，由于存在人群差異，推薦只能作為參考。所以并不是所有正常人絕對應(yīng)該在臨界值之下。

2、血清（溶血、脂血等）的因素，被檢者身體狀況的波動（如炎癥）等等干擾因素，有時會使生化檢測指標(biāo)出現(xiàn)上揚，甚至達(dá)臨界值的2倍。對于此類無癥狀體檢者，建議采取短期隨訪，2個月后復(fù)檢，如維持原值或有下降，認(rèn)為陰性，如果持續(xù)上升應(yīng)高度警惕。

3、目前臨床研究表明不存在性別特異性指標(biāo)。CA125、CA15-3、β－HCG等指標(biāo)在男性患者中也可有不同程度的提高。PSA原來一直認(rèn)為是前列腺癌完全特異性指標(biāo)，但是研究表明在一些非前列腺癌癥患者中，尤其是肝癌、胰腺癌，也有較高比例的陽性，且陽性值很高，有的高達(dá)200－300ng/ml。我們曾在遇到女性PSA陽性時，用其它公司進(jìn)行單指標(biāo)復(fù)檢，得到的結(jié)果與我們是一致的。

4、Ferritin是一個非特異性指標(biāo)。在正常人群中范圍大，所以在Ferritin單獨出現(xiàn)陽性時無特殊預(yù)警意義，只有結(jié)合其他指標(biāo)才能做出判斷。第五章臨床報告回到[醫(yī)生手冊]首頁通過對上海華山醫(yī)院、上海曙光醫(yī)院、上海新華醫(yī)院、上海長征醫(yī)院、上海市第一人民醫(yī)院、上海長海醫(yī)院、浙江醫(yī)科大附屬二院等醫(yī)院約6000份血清的臨床驗證顯示，靈敏度：真陽性/（真陽性+假陽性）>80%，特異性：真陰性/（真陰性+假陰性）>90%，批間差：<15%；批內(nèi)差<10%。個案分析個案一：（乳腺癌早期發(fā)現(xiàn)病例）

某女性，52歲，育有一子，母乳喂養(yǎng)。因其母有乳腺癌史，自己有雙側(cè)乳腺小葉增生，去醫(yī)院體檢，自覺無任何不適癥狀，當(dāng)時查雙側(cè)乳房未發(fā)現(xiàn)明顯腫塊，醫(yī)院建議患者進(jìn)行多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測，結(jié)果顯示CA199與CA153分別升高到52.78ng/ml和61.84ng/ml。蛋白芯片檢測結(jié)果如圖：CA15-3

--->CA19-9

--->報告顯示如下：*項目數(shù)據(jù)參考值濃度單位項目數(shù)據(jù)參考值濃度單位CA19-952.78<35.00U/mlAFP<1.00<20.00ng/mlNSE<1.00<13.00ng/mlFree-PSA<0.10<1.00ng/mlCEA<0.50<5.00ng/mlPSA<0.06<5.00ng/mlCA2429.13<20.00U/mlCA12512.71<35.00U/mlFerritin205.48*ng/mlHGH1.64<7.50ng/mlBeta-HCG<0.50<3.00ng/mlCA15-361.84<35.00U/ml

*男性<322ng/ml，女性<219ng/ml患者在醫(yī)院進(jìn)一步B超檢查，B超顯示：右側(cè)乳腺可見邊界不清楚的小腫塊，周圍血管紋理紊亂，可見鈣化點。CT檢測，第一次CT檢查斷層掃描距離為0.5cm，未見明顯腫塊陰影，后掃描距離改為0.1cm，隱約可見腫塊?；颊哂?月31日做了探查性手術(shù)，術(shù)中冰凍切片提示：右側(cè)乳房乳腺小葉增生，部分導(dǎo)管上皮高度增生活躍，局限性癌變，故進(jìn)行了左側(cè)乳房乳腺改良根治術(shù)。術(shù)后患者恢復(fù)良好。病理診斷結(jié)果：乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌。個案二：某女，年齡81。發(fā)現(xiàn)右臂腫瘤。經(jīng)檢查發(fā)現(xiàn)原發(fā)灶為肺癌，臨床分期：T4N3M1。細(xì)胞學(xué)診斷：間葉組織來源惡性腫瘤。在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院選了3個指標(biāo)做放免檢測結(jié)果為陰性，具體如表1。用多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測后6項指標(biāo)陽性，具體如表2。表1

放免結(jié)果(陰性)：指標(biāo)濃度參考ＣＡ７２４3<3.8U/mlＣＡ２４２16.78<20U/mlＣＥＡ4.57<5ng/ml表2

芯片結(jié)果(六個指標(biāo)陽性)：指標(biāo)濃度參考ＣＡ１９９65.18<35U/mlＣＡ２４２23.21<20U/mlβ－ＨＣＧ21.63<3ng/mlＡＦＰ25.06<20ng/mlＣＡ１２５165.86<35U/mlＣＡ１５３91.42<35U/ml個案三：病人，毛先榮，男45歲，10月份感冒后開始出現(xiàn)咳嗽、咳少量黃膿痰，未予重視，一月后癥狀無減輕，于當(dāng)?shù)蒯t(yī)院就診，胸片顯示右肺下葉軟組織陰影，用青霉素抗炎治療二周，咳嗽少有好轉(zhuǎn)，復(fù)查胸片，病灶無明顯變化，于南昌醫(yī)院做纖維支氣管鏡檢查，未作明確診斷。11月轉(zhuǎn)至上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院就診，12月初出現(xiàn)午后低熱，無胸痛，痰血、盜汗等癥狀。CT:右肺下葉背段4-5cm類圓形軟組織。醫(yī)院用CT、B超等方法未能做出明確診斷。蛋白芯片檢測結(jié)果如圖：<---

CA125:146.84u/ml

<---

Beta-HCG:>60ng/ml患者于12月進(jìn)行手術(shù)切除。術(shù)后：

病理報告

右下肺腺鱗癌（低分化），近腫瘤支氣管旁淋巴結(jié)均見轉(zhuǎn)移。

免疫組化

腫瘤細(xì)胞HCG++,CA125+多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測采血要求

1.空腹，不飲水。

2.采靜脈血２ｍｌ，無需加抗凝劑。

3.離心2000rpm×5min，吸出血清轉(zhuǎn)移至另一干凈的EP管內(nèi)，待測。

4.溶血、黃疸血的樣品會影響結(jié)果，不宜檢測。脂血的樣品可以離心10000rpm×5min，去除上層油脂后，取下層血清檢測。

5.如當(dāng)天不能檢測，請將樣品放置2-8℃保存，如一周內(nèi)不能檢測，可將樣品放置在－20大量的臨床數(shù)據(jù)顯示，該系統(tǒng)的假陽性率為1-10%，假陰性率為5%-20%問：多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)適用于哪些人群？答：1、多種惡性腫瘤疑診患者的臨床早期輔助檢查。如臨床癥狀可疑、有腫瘤家族史及腫瘤高發(fā)地區(qū)人群的檢查。

2、團體健康普查。因所查癌癥范圍廣、檢測無創(chuàng)傷性，多指標(biāo)檢測，高通量，且早期發(fā)現(xiàn)對癌癥篩檢極具價值，同時可降低普查費用，提高普查的工作效率。

3、對癌癥患者進(jìn)行病情檢測及療效動態(tài)觀察，并可用于療效后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的隨訪。問：出現(xiàn)溶血、脂血或黃疸血，是否會影響實驗結(jié)果？答：會。由于血清中某些成分的特別增高會改變抗原和抗體反應(yīng)的體系，從而影響檢測結(jié)果的數(shù)值，所以溶血、脂血或黃疸血的血清一般不宜進(jìn)行檢測。問：此檢測系統(tǒng)對樣品質(zhì)量和采血時間有什么要求？答：血清須澄清、透明，溶血、脂血或黃疸血不宜；血清在2-8攝氏度保存不超過7天為宜。

對采血時間無特殊要求，但在一些創(chuàng)傷性檢查以后宜休息2-3天后再做檢測。問：當(dāng)此檢測系統(tǒng)檢測出某個腫瘤標(biāo)志物濃度高于參考臨界值，被測者該怎么辦？答：需要視被測者的個人病理情況而定。

一．被測者是正常體檢人群：若檢測出某腫瘤標(biāo)志物濃度高于參考臨界值，建議被測者應(yīng)該一個月后再（用本檢測系統(tǒng)或僅對相應(yīng)標(biāo)志物）進(jìn)行復(fù)查，或咨詢醫(yī)生是否需要做相關(guān)器官的身體檢查。

二．被測者是已被高度懷疑的腫瘤病人：若檢測出某腫瘤標(biāo)志物濃度高于參考臨界值，應(yīng)該引起被測者的高度重視，建議病人立刻用其它方法進(jìn)行相應(yīng)器官的的檢測，如物理學(xué)方法的B超,CT,核磁共振等，使醫(yī)生可迅速對病情進(jìn)行診斷。

三．被測者是治療后的腫瘤病人：若檢測出某腫瘤標(biāo)志物濃度高于參考臨界值，應(yīng)該懷疑有腫瘤復(fù)發(fā)的可能性，建議病人做進(jìn)一步的跟蹤檢測或用其它方法進(jìn)行檢測，以便醫(yī)生更好的確診。問：多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)可檢測哪些腫瘤標(biāo)志物？答：該檢測系統(tǒng)可同時檢測以下12種腫瘤標(biāo)志物：

CA15-3（腫瘤抗原15-3）,CA242（腫瘤抗原242）,CEA（癌胚抗原）,NSE（神經(jīng)元特異性烯醇化酶）,CA19-9（腫瘤抗原19-9）,CA125（腫瘤抗原125）,free-PSA（游離前列腺特異性抗原）,PSA（前列腺特異抗原）,AFP（甲胎蛋白）,β-HCG（絨毛膜促性腺激素β亞基）,Ferritin（鐵蛋白）,HGH（人體生長激素）。問：多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)適用于哪些人群？答：1、多種惡性腫瘤疑診患者的臨床早期輔助檢查。如臨床癥狀可疑、有腫瘤家族史及腫瘤高發(fā)地區(qū)人群的檢查。

2、團體健康普查。因所查癌癥范圍廣、檢測無創(chuàng)傷性，多指標(biāo)檢測，高通量，且早期發(fā)現(xiàn)對癌癥篩檢極具價值，同時可降低普查費用，提高普查的工作效率。

3、對癌癥患者進(jìn)行病情檢測及療效動態(tài)觀察，并可用于療效后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的隨訪。問：多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)的檢測原理是什么？答：多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)利用抗原與其抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)原理，在固相基質(zhì)上結(jié)合多種腫瘤標(biāo)志物的抗體，捕捉被檢者血清中的對應(yīng)腫瘤標(biāo)志物，并促成特定的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生光信號，通過對光信號強度的定量測定（HD-2001A生物芯片檢測儀）來實現(xiàn)對各腫瘤標(biāo)志物定量檢測的目的。1．癌胚抗原（CEA）

§參考值：0-5μg/L癌胚抗原是1965年Gold和Freedman首先從胎兒及結(jié)腸癌組織中發(fā)現(xiàn)的。CEA是一種分子量為22KD的多糖蛋白復(fù)合物，45％為蛋白質(zhì)。CEA的編碼基因位于19號染色體。一般情況下，CEA是由胎兒胃腸道上皮組織、胰和肝細(xì)胞所合成。通常在妊娠前6個月內(nèi)CEA含量增高，出生后血清中含量已很低。96%-97%非吸煙健康成年人血清中CEA濃度小于2.5μg/L，大量吸煙者有20%-40%的人CEA>2.5μg/L，少數(shù)CEA>5.0μg/L。CEA屬于非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原，分泌CEA的腫瘤大多位于空腔臟器，如胃腸道、呼吸道、泌尿道等。正常情況下CEA經(jīng)胃腸道代謝，而腫瘤狀態(tài)時的CEA則進(jìn)入血和淋巴循環(huán)，引起血清CEA異常增高，使上述各種腫瘤患者的血清CEA均有增高。在臨床上，當(dāng)CEA大于60μg/L時，可見于結(jié)腸癌、直腸癌、胃癌和肺癌。CEA值升高，表明有病變殘存或進(jìn)展。如肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血清CEA量會明顯升高，大多顯示為腫瘤浸潤，其中約70％為轉(zhuǎn)移性癌。一般來說，手術(shù)切除后6周，CEA水平恢復(fù)正常，否則提示有殘存腫瘤，若CEA濃度持續(xù)不斷升高，或其數(shù)值超過正常5-6倍者均提示預(yù)后不良。連續(xù)隨訪定量檢測血清CEA含量，對腫瘤病情判斷更具有意義。除血液之外，其它生物液體，如胰液和膽汁內(nèi)CEA定量可用于診斷胰腺或膽道癌；漿液性滲出液的CEA定量可作為細(xì)胞學(xué)檢查的輔助手段；尿液CEA定量可作為判斷膀胱癌預(yù)后的參考。血清CEA定量結(jié)合甲狀腺降鈣素測定，有助于甲狀腺髓樣癌的診斷和復(fù)發(fā)的估計。癌胚抗原（CEA）一度被認(rèn)為是消化道癌腫尤其是結(jié)腸癌的特異性免疫學(xué)表現(xiàn)。但以后發(fā)現(xiàn)某些良性疾患尤其是肝病時，循環(huán)內(nèi)CEA也常升高，故認(rèn)為其特異性不強。⑴原發(fā)性肝癌時血清CEA常升高；各種原發(fā)癌（特別是結(jié)腸、肺和乳房）肝轉(zhuǎn)移時，CEA水平較無肝轉(zhuǎn)移者為高，近年研究發(fā)現(xiàn)各種來源的肝轉(zhuǎn)移性癌腫組織內(nèi)均有大量CEA存在。⑵良性肝病也常有CEA升高，一般為2.5~5毫微克/毫升，罕有超過10毫微克/毫升者，在各種肝病中，以酒精性肝病時升高者最多，特別是伴有活動性肝細(xì)胞損害病例；膽道疾患時血清CEA也可升高。肝病時血清CEA升高的原理和臨床意義。目前認(rèn)為，正常腸粘膜和有炎癥、癌腫的腸粘膜均能產(chǎn)生CEA。肝損害時，肝對血循環(huán)中CEA的攝取和降解能力減低，血清CEA即升高；如病人系腸癌伴肝轉(zhuǎn)移，則一方面CEA產(chǎn)生增多，另一方面被癌腫損害的肝不能攝取、降解CEA，則血清CEA更加升高。因此，在某種意義上，血清CEA濃度反映了肝功能狀態(tài)，肝病時如血清CEA升高，反映肝功能不良；如癌腫病人CEA明顯升高，應(yīng)疑及肝內(nèi)轉(zhuǎn)移可能。

原發(fā)性小腸癌是少見的消化道腫瘤，臨床表現(xiàn)與發(fā)生部位、生長方式等有關(guān)。2．甲胎蛋白（AFP）

§參考值：0-25μg/L甲胎蛋白是1956年Bergstrandh和Czar在人胎兒血清中發(fā)現(xiàn)的一種專一性的甲種球蛋白。1963年G.I.Abelev首先發(fā)現(xiàn)AFP主要是由胎盤層（其次是卵黃囊）合成，由胃腸道粘膜和腎臟合成較少。1964年Tatarinov發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞癌患者血清中檢測到AFP。AFP是一種在電場中泳動于α-球蛋白區(qū)的單一多聚體肽鏈的糖蛋白，其分子量平均為70KD，含糖4％，AFP的編碼基因位于4號染色體4q11-12，與血清白蛋白、維生素D結(jié)合蛋白同屬一大家族。近年來已發(fā)現(xiàn)了AFP的異質(zhì)體。妊娠婦女的血和尿中的AFP含量會持續(xù)增高，從妊娠6周開始合成，至12-15周達(dá)高峰。胎兒血漿中的AFP值可達(dá)到3mg/ml，隨后即逐漸降低，出生后，AFP合成很快受抑制，其含量降至50μg/L，周歲末嬰兒的濃度接近成人水平，一般健康成人血漿AFP濃度低于25μg/L。AFP是原發(fā)性肝癌的最靈敏、最特異的腫瘤標(biāo)志，血清AFP測定結(jié)果大于500μg/L以上，或含量有不斷增高者，更應(yīng)高度警惕。肝癌患者血清AFP含量變化的速率和程度與腫瘤組織分化程度高低有一定相關(guān)性，分化程度較高的腫瘤AFP含量常大于200μg/L。AFP測定診斷原發(fā)性肝癌的標(biāo)準(zhǔn)為：①AFP>500ng/ml持續(xù)4周；②AFP由低濃度逐漸升高不降；③AFP在200ng/ml以上的中等水平持續(xù)8周。AFP的動態(tài)變化與病情有一定的關(guān)系。AFP含量上升提示病情惡化，其動態(tài)變化是顯示治療效果的一項敏感指標(biāo)。通常手術(shù)切除肝癌后二個月，AFP值應(yīng)降至20ng/ml以下，若降的不多或降而復(fù)升，提示切除不徹底或有復(fù)發(fā)可能。制定一個恰當(dāng)?shù)腁FP臨界值(cutoffvalue)至關(guān)重要。若此值訂得偏高，雖可增加診斷的特異性，但可能造成過多病例漏診；又若此值訂得偏低，雖可增加敏感性，但可能增加誤診。作為統(tǒng)一的診斷標(biāo)準(zhǔn)，制定此值應(yīng)當(dāng)慎重，值得探討。在1977年的肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)中確曾有一個單純依靠AFP診斷肝癌的標(biāo)準(zhǔn)，其表述為AFP＞400μg/L，持續(xù)4周，并能排除妊娠、活動性肝病、生殖腺胚胎源性腫瘤及轉(zhuǎn)移性肝癌者，即可診斷為原發(fā)性肝癌。

臨床上常遇到良性肝病AFP值明顯升高(>400ng/ml)，或原發(fā)性肝癌的AFP值偏低(<400ng/ml)。因此，根據(jù)血清AFP濃度難以鑒別良惡性肝病。AFP異質(zhì)體測定的目的是判斷AFP的來源，用于鑒別原發(fā)性肝癌、生殖細(xì)胞腫瘤、轉(zhuǎn)移性肝癌以及良性肝病。血清AFP含量的檢測對其它腫瘤的檢測亦有重要臨床價值。如睪丸癌、畸胎瘤、胃癌、胰腺癌等患者血清AFP含量可以升高。某些非惡性肝臟病變，如病毒性肝炎、肝硬化，AFP水平亦可升高，故必須通過動態(tài)觀察AFP含量和ALT酶活性的變化予以鑒別診斷。3．癌抗原CA125

§參考值：0-35U/L1983年由Bast等從上皮性卵巢癌抗原檢測出可被單克隆抗體OC125結(jié)合的一種糖蛋白--CA125。其分子量為200KD，加熱至100℃4．癌抗原CA15-3

§參考值：0-28U/LCA15-3是1984年由Hilkens等從人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成的小鼠單克隆抗體（115-DB），1984年Kufu等自肝轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞膜制成單克隆抗體（DF-3），故被命名為CA15-3。CA15-3分子量為400KD，分子結(jié)構(gòu)尚未清楚。正常健康者血清CA15-3含量（RIA法）小于28kU/L。CA15-3存在于多種腺癌內(nèi)，如乳腺癌、肺腺癌及卵巢癌等，是檢測乳腺癌比較重要的抗原，60－80％進(jìn)展期乳腺癌病人CA153血清水平高于30u/ml，可用于判斷乳腺癌進(jìn)展與轉(zhuǎn)移，并檢測治療與復(fù)發(fā)。30％-50％的乳腺癌患者的CA15-3明顯升高，它也是監(jiān)測乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的最佳指標(biāo)，當(dāng)CA15-3大于100kU/L時，可認(rèn)為有轉(zhuǎn)移性病變，其含量的變化與治療結(jié)果密切相關(guān)。與CA125相似，肺癌、胃腸癌、卵巢癌及宮頸癌患者的血清CA15-3也可升高，應(yīng)予以鑒別，特別要排除部分妊娠引起的含量升高。5.糖鏈抗原CA19-9

§參考值：0-37U/LCA19-9是1979年Koprowski等用結(jié)腸癌細(xì)胞免疫小鼠，并與骨髓瘤雜交所得116NS19-9單克隆抗體。它是一種分子量為5000KD的低聚糖類腫瘤相關(guān)糖類抗原，其結(jié)構(gòu)為Lea血型抗原物質(zhì)與唾液酸Lexa的結(jié)合物。CA19-9為消化道癌相關(guān)抗原，是胰腺癌和結(jié)、直腸癌的標(biāo)志物。血清CA19-9陽性的臨界值為37KU/L。胰腺癌患者85％-95％為陽性。當(dāng)CA19-9小于1000kU/L時，有一定的手術(shù)意義。腫瘤切除后CA19-9濃度會下降；如再上升，則可表示復(fù)發(fā)。結(jié)直腸癌、膽囊癌、膽管癌、肝癌和胃癌的陽性率也會很高。若同時檢測CEA和AFP可進(jìn)一步提高陽性檢測率。蛋白芯片檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不但是消化道腫瘤，乳腺癌、卵巢癌等腫瘤也會出現(xiàn)CA19-9的升高。6．糖鏈抗原（CA242）

§參考值：0-12U/LCA242也是一種唾液酸化的鞘糖脂類抗原，幾乎總是和CA50一起表達(dá)，但兩者受不同的單克隆抗體識別。CA242是近年來應(yīng)用于臨床較新的一種腫瘤標(biāo)志物。有資料顯示，對胰腺癌的診斷，CA242優(yōu)于CA19-9，敏感性可達(dá)66%～100%，對大腸癌的敏感性也達(dá)60%～72%。CA242的敏感性由高至低依次為肝癌、胃癌、大腸癌、胰腺癌。食管癌的CA242敏感性僅為9.09%，表明該項標(biāo)志物檢測不適用于鱗狀細(xì)胞癌的檢測。CA242正常血清的上限為20000u/L。7/8．前列腺特異性抗原（PSA、f-PSA）

§參考值：0-4μg/L1971年，Hara等首先發(fā)現(xiàn)PSA是由前列腺上皮細(xì)胞合成分泌至精液中，是精漿的主要成分之一；1979由Wang等從前列腺肥大癥患者的前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶，分子量34KD，編碼基因定位于19q13。PSA僅存在于前列腺上皮細(xì)胞的胞質(zhì)、導(dǎo)管上皮和粘液內(nèi)，具有糜蛋白酶樣和胰蛋白酶的活性。血清PSA有兩種分子形式：結(jié)合PSA和f-PSA。PSA在正常男性（RIA法、ElA法）含量小于2.5μg/L。PSA是前列腺癌的特異性標(biāo)志物，也是目前少數(shù)器官特異性腫瘤標(biāo)志物之一。前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)的主要囊性腫瘤，血清PSA定量的陽性臨界值為大于10μg/L，前列腺癌的診斷特異性達(dá)90％-97％。最近的實驗表明，在前列腺癌中f-PSA/t-PSA（總PSA）比正常情況下要低。一般認(rèn)為F/T（f-PSA/t-PSA）臨界值為0.20，在0.20以下均需考慮前列腺癌的問題。PSA在4-10ng/ml時，F(xiàn)/T比值可在良性和惡性前列腺疾病中發(fā)生顯著的變化，測定f-PSA并結(jié)合DRE檢查能夠提高前列腺癌檢測的特異性，而不降低其靈敏度。血清PSA除了作為檢測和早期發(fā)現(xiàn)前列腺癌，還可用于治療后的監(jiān)控。90%術(shù)后患者的血清PSA值可降至不能檢出的痕量水平。若術(shù)后血清PSA值升高，提示有殘存腫瘤。放療后療效顯著者，50％以上患者在2個月內(nèi)血清PSA降至正常。據(jù)2月15日出版的《癌癥》雜志報道，50歲以上男性在前列腺癌普查中，若前列腺特異性抗原(PSA)初查值<1.0ng/ml，應(yīng)每3年接受一次檢查；若PSA值為1.0~4.0ng/ml，則應(yīng)每年檢查一次。前列腺癌陽性率在初次篩查后的10年中呈穩(wěn)定增加的趨勢，尤其在PSA初查值為2.0~4.0ng/ml的人群中。研究者認(rèn)為這些人是患前列腺癌的高危人群。

最新研究表明，在肝癌、肺癌等腫瘤中，PSA在基因水平就有高表達(dá)，提示PSA在前列腺腫瘤以外的其他腫瘤中也會有升高的可能，有待進(jìn)一步調(diào)查。[注意]：采集病人的血清標(biāo)本前，若進(jìn)行前列腺按摩，將導(dǎo)致血清PSA升高。9．神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NSE）

§參考值：0-15μg/L烯醇化酶是催化糖原酵途徑中甘油分解的最后的酶。由3個獨立的基因片段編碼3種免疫學(xué)性質(zhì)不同的亞基α、β、γ，組成5種形式的同工酶αα、ββ、γγ、αγ、βγ。二聚體是該酶分子的活性形式，γ亞基同工酶存在于神經(jīng)原和神經(jīng)內(nèi)分泌組織，稱為NSE。α亞基同工酶定位于膠質(zhì)細(xì)胞，稱為非神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NNE）。NSE和NNE的分子量分別為78KD和87KD，正常參考范圍為0.6-5.4μg/L。NSE是神經(jīng)母細(xì)胞瘤和小細(xì)胞肺癌的標(biāo)記物。神經(jīng)母細(xì)胞瘤是常見的兒童腫瘤，占1-14歲兒童腫瘤的8％-10％。NSE作為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)志物，對該病的早期檢測具有較高的臨床應(yīng)用價