探討DNA鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的應(yīng)用

討論DNA鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的應(yīng)用〔〕:

摘要：法醫(yī)物證學(xué)是一門復(fù)雜且實(shí)用的學(xué)科，是司法鑒定與自然科學(xué)嚴(yán)密結(jié)合的一門學(xué)科，從dna鑒定理論根底研究后我國在該方面有了一定的改善和提升。目前，法醫(yī)物證為一些研究提供了多種技術(shù)與研究形式，特別是在個(gè)體判斷與親子鑒定方面，廣泛應(yīng)用在法醫(yī)物證學(xué)中。另外，dna指紋技術(shù)也在法醫(yī)物證學(xué)中有所應(yīng)用，而本文就來探究一下dna鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：dna鑒定技術(shù)；法醫(yī)物證學(xué)；應(yīng)用方法；分析

本文引用格式：王假設(shè)湛.討論dna鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的應(yīng)用[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2022,19(85):232,234.

0引言

法醫(yī)物證學(xué)應(yīng)用在DNA鑒定技術(shù)中就是將遺傳學(xué)作為理論支撐，把生物檢測(cè)中DNA分子作為研究對(duì)象，并且應(yīng)用這種技術(shù)對(duì)個(gè)體判斷與親子鑒定等問題進(jìn)展分析。本研究就是結(jié)合自己的實(shí)際工作經(jīng)歷，就DNA鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的應(yīng)用施行研究與討論，現(xiàn)將有關(guān)情況匯報(bào)如下【1】。

1DNA鑒定技術(shù)分型研究

DNA、STR分型技術(shù)、minsSTR技術(shù)、單核苷酸多態(tài)分型技術(shù)等等都在法醫(yī)物證學(xué)中有了很有價(jià)值的應(yīng)用，尤其是這類技術(shù)應(yīng)用在刑事案例偵查中是非常關(guān)鍵的，是科學(xué)取證的途徑之一。其中，DNA、STR分型技術(shù)原理主要是結(jié)合短串聯(lián)重復(fù)序列作為遺傳標(biāo)志，經(jīng)過高分辨率的凝膠電泳別離得到基因進(jìn)而施行科學(xué)分析，在獲得DNA樣本隨后增加PCR且把電泳別離。最后，施行有效的基因分析。minsSTR技術(shù)就是對(duì)微量或嚴(yán)重降解生物施行檢測(cè)，應(yīng)用降低的STR位點(diǎn)增多片斷讓增擴(kuò)的片斷大小維持在100bp就可以有效提升等位基因檢出率。相關(guān)研究結(jié)果顯示，在講解DNA樣本分析的過程中，將其作為常規(guī)方式的STR基因座檢驗(yàn)展開科學(xué)補(bǔ)充。而minsSTR技術(shù)在實(shí)際工作中應(yīng)用的時(shí)候存在較大的局限性，比方：在構(gòu)件復(fù)合增擴(kuò)體系過程中通常僅能把較少的基因座增擴(kuò)。同時(shí)，minsSTR引物與傳統(tǒng)引物交融范圍中存在較多的堿基的缺少，由此和傳統(tǒng)的STR分型結(jié)果是有很明顯的差異的【2】。

另外，單核苷酸多態(tài)性分型技術(shù)是第三代遺傳標(biāo)記，和傳統(tǒng)的STR基因座進(jìn)展比擬，擴(kuò)增產(chǎn)物是比擬短的。因此，存在PCR阻礙與高度講解問題使得樣本分析工作難度較大，突變率較低下，將這種技術(shù)應(yīng)用在法醫(yī)物證中多是經(jīng)過群體災(zāi)難進(jìn)展個(gè)體判斷。當(dāng)前，SNPs檢驗(yàn)技術(shù)主要涵蓋了變性梯度凝膠電凝、引物延伸技術(shù)與飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)等等。當(dāng)然，不管應(yīng)用任何一項(xiàng)技術(shù)均需要復(fù)雜的設(shè)備作為依托，一些和實(shí)驗(yàn)室設(shè)備是有著很大的差異的，從而造成該項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)的大范圍應(yīng)用【3】，同時(shí)當(dāng)前SNP檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用變得非常廣泛。線粒體DNA在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的主要遺傳形式是母系遺傳的方式，各細(xì)胞內(nèi)含有上百個(gè)線粒體且其環(huán)狀構(gòu)造不容易受到降解DNA分子外切核酸酶影響，不會(huì)容易發(fā)生降解，在法醫(yī)物證學(xué)中多是通過微量和缺乏核DNA檢測(cè)中。而線粒DNA也可以利用中屬鑒定形式。結(jié)合局部對(duì)mtDNAHVI及細(xì)胞色素b片斷片復(fù)合擴(kuò)增鑒定人和動(dòng)物混合學(xué)痕種屬的應(yīng)用價(jià)值。但是需要注意的是，線粒體DNA本身是有著異質(zhì)性的，可以出現(xiàn)兩種或以上的對(duì)mtDNA。因此，將其應(yīng)用在法醫(yī)物證學(xué)內(nèi)個(gè)體判斷與親子鑒定中其實(shí)穩(wěn)定性比擬令人擔(dān)憂，相關(guān)結(jié)果需要進(jìn)一步核實(shí)[4,5]。

2多位點(diǎn)DNA指紋技術(shù)

在實(shí)際的偵查辦案過程中，DNA指紋技術(shù)應(yīng)用是很常見的，所用到的檢測(cè)材料主要包括精液、陰道分泌物、血液、毛發(fā)等多種核細(xì)胞。通過DNA指紋圖技術(shù)操作較為繁雜，流程復(fù)雜，各環(huán)節(jié)操作對(duì)結(jié)果是有很大影響的。要想得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，需要做好如下工作：要確保有充足的高分子量DNA，參數(shù)在1.8左右比擬好。在提取的過程中，注意力量的控制，以防出現(xiàn)DNA大分子斷裂的情況。對(duì)于限制性內(nèi)切酶消化DNA具有一定的繁雜性，違規(guī)操作容易將DNA污染進(jìn)而導(dǎo)致DNA被剪切，進(jìn)而改變DNA片段長度，這樣得到的檢測(cè)結(jié)果是不準(zhǔn)確的。由此，酶與樣品、緩沖液體一定要均勻。體系內(nèi)對(duì)于甘油濃度應(yīng)低于5%，不然的話就很容易發(fā)生抑制酶解，保持在30微升就可以了。在DNA瓊脂糖凝膠電泳別離的過程中，凝膠板厚度應(yīng)低于4mm【6】。把凝膠板放置在4℃環(huán)境下半小時(shí)，有利于樣品加樣。但是需要注意的是，假設(shè)電泳超出室內(nèi)的溫度，熱量揮發(fā)緩慢就會(huì)導(dǎo)致凝膠變形使得電泳遷移率變快，使得別離效果顯著降低。通常會(huì)提升降低電壓與電流，把電泳時(shí)間延長。真空轉(zhuǎn)移保證高效與迅速。在轉(zhuǎn)移的過程中，通過玻管在膠表層輕輕滾動(dòng)把膠布底的泡沫去掉，注意操作的過程中動(dòng)作一定要柔和、緩慢，以防譜帶變形，轉(zhuǎn)移通常應(yīng)保持1.5h左右為宜。注意標(biāo)記效率，以不斷提升雜交的成功率。通過非同位素探針標(biāo)記屬于生化工程，把探針溶液稀釋，熱變形5min后放進(jìn)冰浴內(nèi)，通過等體積標(biāo)記試劑且把所有物質(zhì)放入混合，確保水浴反響的高質(zhì)量。在非同位素雜交膜洗脫過程中要控制好質(zhì)量，對(duì)其背景明晰度，在更換溶液過程中通過濾紙把膜吸收干凈。最后，沖洗X線片，顯影液應(yīng)保證新穎性，使用頻率至少10次以上，顯影條件保持在20℃左右為宜【7】。

在強(qiáng)奸案中施行DNA指紋圖檢驗(yàn)，在搜集現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)材料后準(zhǔn)備檢測(cè)，提取被檢測(cè)人的精子，假設(shè)DNA酶解不開就要考慮是如下幾方面原因：和DNA溶液濃度不準(zhǔn)確；混合斑載體內(nèi)有布料或泥土物質(zhì)，帶有小分子在DNA中。伴隨著大分子DNA沉淀融入DNA溶液內(nèi)，其物質(zhì)對(duì)酶具有一定抑制效果由此造成酶解不開。通常把溶液均勻搖動(dòng)且保證DNA量就能得到滿意的檢測(cè)結(jié)果。對(duì)于酶解不完全條件目前還沒有有效的解決方法。據(jù)相關(guān)調(diào)查結(jié)果顯示，DNA指紋圖譜帶有漂移狀態(tài)，兩個(gè)樣品DNA譜帶形狀有一定差異且譜帶之間有一定的間隔，遷移率也會(huì)因此而有所不同。在親子鑒定中應(yīng)給予高度重視，不可以有任何的偏向[8]。

在一樣樣品不同酶解時(shí)間檢測(cè)的時(shí)候，對(duì)于不完全酶解與完全酶解的DNA樣品，指紋圖譜也有一些不同。不完全酶解譜帶較多并存在較多不穩(wěn)定帶，這和酶解時(shí)間是有著嚴(yán)密聯(lián)絡(luò)的。在酶解時(shí)間不充足的時(shí)候，一些酶切位點(diǎn)并未區(qū)分與切割，片段超出平安酶解。因此，現(xiàn)實(shí)操作時(shí)應(yīng)對(duì)酶解時(shí)間有一定控制，約4h是其正常酶解時(shí)間，不過其DNA量進(jìn)步時(shí)可以適時(shí)增加時(shí)間，以確保理想的效果[9]。

3討論

在目前這個(gè)階段，DNA鑒定技術(shù)受一些因素的影響，比方使用儀器試劑等的影響。DNA鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中常見應(yīng)用STR分型技術(shù)、DNA、minSTR技術(shù)與單核苷酸多態(tài)性分型技術(shù)、線粒體DNA等形式，可以不斷提升法醫(yī)物證學(xué)的實(shí)際應(yīng)用效果與價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

【1】楊建軍,朱敏,梁萬杰.DNA鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的應(yīng)用[J].職工法律天地：下,2022，31(5):101.

【2】申琴,楊紅旗,袁朝暉,等.DNA鑒定技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的現(xiàn)狀和展望[J].生物技術(shù)世界,2022，9(10):252-253.

【3】佚名.法醫(yī)物證學(xué)中DNA鑒定技術(shù)的應(yīng)用現(xiàn)狀及將來展望[J].法制博覽,2022，34(31):267.

【4】王兵,古風(fēng)生.DNA分型技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)中的技術(shù)應(yīng)用[J].生物技術(shù)世界,2022，7(7):70-70.

【5】楊幸怡,李中紅,劉超.線粒體二代全測(cè)序在陳舊檢材親緣鑒定中應(yīng)用1例[J].中國法醫(yī)學(xué)雜志,2022，32(6):652-654.

【6】姚偉靜,左林.親緣鑒定發(fā)現(xiàn)D7S820基因座基因變異1例[J].中國法醫(yī)學(xué)雜志,2022,27(5):420-421.

【7】蘇麗娟,單鑫,榮榮,等.關(guān)于進(jìn)步法醫(yī)物證學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果