探討DNA鑒定技術在法醫(yī)物證學中的應用

討論DNA鑒定技術在法醫(yī)物證學中的應用〔〕:

摘要：法醫(yī)物證學是一門復雜且實用的學科，是司法鑒定與自然科學嚴密結合的一門學科，從dna鑒定理論根底研究后我國在該方面有了一定的改善和提升。目前，法醫(yī)物證為一些研究提供了多種技術與研究形式，特別是在個體判斷與親子鑒定方面，廣泛應用在法醫(yī)物證學中。另外，dna指紋技術也在法醫(yī)物證學中有所應用，而本文就來探究一下dna鑒定技術在法醫(yī)物證學中的應用。

關鍵詞：dna鑒定技術；法醫(yī)物證學；應用方法；分析

本文引用格式：王假設湛.討論dna鑒定技術在法醫(yī)物證學中的應用[J].世界最新醫(yī)學信息文摘,2022,19(85):232,234.

0引言

法醫(yī)物證學應用在DNA鑒定技術中就是將遺傳學作為理論支撐，把生物檢測中DNA分子作為研究對象，并且應用這種技術對個體判斷與親子鑒定等問題進展分析。本研究就是結合自己的實際工作經歷，就DNA鑒定技術在法醫(yī)物證學中的應用施行研究與討論，現(xiàn)將有關情況匯報如下【1】。

1DNA鑒定技術分型研究

DNA、STR分型技術、minsSTR技術、單核苷酸多態(tài)分型技術等等都在法醫(yī)物證學中有了很有價值的應用，尤其是這類技術應用在刑事案例偵查中是非常關鍵的，是科學取證的途徑之一。其中，DNA、STR分型技術原理主要是結合短串聯(lián)重復序列作為遺傳標志，經過高分辨率的凝膠電泳別離得到基因進而施行科學分析，在獲得DNA樣本隨后增加PCR且把電泳別離。最后，施行有效的基因分析。minsSTR技術就是對微量或嚴重降解生物施行檢測，應用降低的STR位點增多片斷讓增擴的片斷大小維持在100bp就可以有效提升等位基因檢出率。相關研究結果顯示，在講解DNA樣本分析的過程中，將其作為常規(guī)方式的STR基因座檢驗展開科學補充。而minsSTR技術在實際工作中應用的時候存在較大的局限性，比方：在構件復合增擴體系過程中通常僅能把較少的基因座增擴。同時，minsSTR引物與傳統(tǒng)引物交融范圍中存在較多的堿基的缺少，由此和傳統(tǒng)的STR分型結果是有很明顯的差異的【2】。

另外，單核苷酸多態(tài)性分型技術是第三代遺傳標記，和傳統(tǒng)的STR基因座進展比擬，擴增產物是比擬短的。因此，存在PCR阻礙與高度講解問題使得樣本分析工作難度較大，突變率較低下，將這種技術應用在法醫(yī)物證中多是經過群體災難進展個體判斷。當前，SNPs檢驗技術主要涵蓋了變性梯度凝膠電凝、引物延伸技術與飛行時間質譜技術等等。當然，不管應用任何一項技術均需要復雜的設備作為依托，一些和實驗室設備是有著很大的差異的，從而造成該項檢測技術的大范圍應用【3】，同時當前SNP檢測技術應用變得非常廣泛。線粒體DNA在細胞質內的主要遺傳形式是母系遺傳的方式，各細胞內含有上百個線粒體且其環(huán)狀構造不容易受到降解DNA分子外切核酸酶影響，不會容易發(fā)生降解，在法醫(yī)物證學中多是通過微量和缺乏核DNA檢測中。而線粒DNA也可以利用中屬鑒定形式。結合局部對mtDNAHVI及細胞色素b片斷片復合擴增鑒定人和動物混合學痕種屬的應用價值。但是需要注意的是，線粒體DNA本身是有著異質性的，可以出現(xiàn)兩種或以上的對mtDNA。因此，將其應用在法醫(yī)物證學內個體判斷與親子鑒定中其實穩(wěn)定性比擬令人擔憂，相關結果需要進一步核實[4,5]。

2多位點DNA指紋技術

在實際的偵查辦案過程中，DNA指紋技術應用是很常見的，所用到的檢測材料主要包括精液、陰道分泌物、血液、毛發(fā)等多種核細胞。通過DNA指紋圖技術操作較為繁雜，流程復雜，各環(huán)節(jié)操作對結果是有很大影響的。要想得到準確的檢測結果，需要做好如下工作：要確保有充足的高分子量DNA，參數(shù)在1.8左右比擬好。在提取的過程中，注意力量的控制，以防出現(xiàn)DNA大分子斷裂的情況。對于限制性內切酶消化DNA具有一定的繁雜性，違規(guī)操作容易將DNA污染進而導致DNA被剪切，進而改變DNA片段長度，這樣得到的檢測結果是不準確的。由此，酶與樣品、緩沖液體一定要均勻。體系內對于甘油濃度應低于5%，不然的話就很容易發(fā)生抑制酶解，保持在30微升就可以了。在DNA瓊脂糖凝膠電泳別離的過程中，凝膠板厚度應低于4mm【6】。把凝膠板放置在4℃環(huán)境下半小時，有利于樣品加樣。但是需要注意的是，假設電泳超出室內的溫度，熱量揮發(fā)緩慢就會導致凝膠變形使得電泳遷移率變快，使得別離效果顯著降低。通常會提升降低電壓與電流，把電泳時間延長。真空轉移保證高效與迅速。在轉移的過程中，通過玻管在膠表層輕輕滾動把膠布底的泡沫去掉，注意操作的過程中動作一定要柔和、緩慢，以防譜帶變形，轉移通常應保持1.5h左右為宜。注意標記效率，以不斷提升雜交的成功率。通過非同位素探針標記屬于生化工程，把探針溶液稀釋，熱變形5min后放進冰浴內，通過等體積標記試劑且把所有物質放入混合，確保水浴反響的高質量。在非同位素雜交膜洗脫過程中要控制好質量，對其背景明晰度，在更換溶液過程中通過濾紙把膜吸收干凈。最后，沖洗X線片，顯影液應保證新穎性，使用頻率至少10次以上，顯影條件保持在20℃左右為宜【7】。

在強奸案中施行DNA指紋圖檢驗，在搜集現(xiàn)場檢驗材料后準備檢測，提取被檢測人的精子，假設DNA酶解不開就要考慮是如下幾方面原因：和DNA溶液濃度不準確；混合斑載體內有布料或泥土物質，帶有小分子在DNA中。伴隨著大分子DNA沉淀融入DNA溶液內，其物質對酶具有一定抑制效果由此造成酶解不開。通常把溶液均勻搖動且保證DNA量就能得到滿意的檢測結果。對于酶解不完全條件目前還沒有有效的解決方法。據(jù)相關調查結果顯示，DNA指紋圖譜帶有漂移狀態(tài)，兩個樣品DNA譜帶形狀有一定差異且譜帶之間有一定的間隔，遷移率也會因此而有所不同。在親子鑒定中應給予高度重視，不可以有任何的偏向[8]。

在一樣樣品不同酶解時間檢測的時候，對于不完全酶解與完全酶解的DNA樣品，指紋圖譜也有一些不同。不完全酶解譜帶較多并存在較多不穩(wěn)定帶，這和酶解時間是有著嚴密聯(lián)絡的。在酶解時間不充足的時候，一些酶切位點并未區(qū)分與切割，片段超出平安酶解。因此，現(xiàn)實操作時應對酶解時間有一定控制，約4h是其正常酶解時間，不過其DNA量進步時可以適時增加時間，以確保理想的效果[9]。

3討論

在目前這個階段，DNA鑒定技術受一些因素的影響，比方使用儀器試劑等的影響。DNA鑒定技術在法醫(yī)物證學中常見應用STR分型技術、DNA、minSTR技術與單核苷酸多態(tài)性分型技術、線粒體DNA等形式，可以不斷提升法醫(yī)物證學的實際應用效果與價值。

參考文獻

【1】楊建軍,朱敏,梁萬杰.DNA鑒定技術在法醫(yī)物證學中的應用[J].職工法律天地：下,2022，31(5):101.

【2】申琴,楊紅旗,袁朝暉,等.DNA鑒定技術在法醫(yī)物證學中的現(xiàn)狀和展望[J].生物技術世界,2022，9(10):252-253.

【3】佚名.法醫(yī)物證學中DNA鑒定技術的應用現(xiàn)狀及將來展望[J].法制博覽,2022，34(31):267.

【4】王兵,古風生.DNA分型技術在法醫(yī)物證學中的技術應用[J].生物技術世界,2022，7(7):70-70.

【5】楊幸怡,李中紅,劉超.線粒體二代全測序在陳舊檢材親緣鑒定中應用1例[J].中國法醫(yī)學雜志,2022，32(6):652-654.

【6】姚偉靜,左林.親緣鑒定發(fā)現(xiàn)D7S820基因座基因變異1例[J].中國法醫(yī)學雜志,2022,27(5):420-421.

【7】蘇麗娟,單鑫,榮榮,等.關于進步法醫(yī)物證學實驗教學效果