WATERS液相色譜教程三四七(最全)課件

WATERS液相色譜教程三四七(最全)WATERS液相色譜教程三四七(最全)1啟動(dòng)液相色譜儀器的流程開(kāi)啟HPLC系統(tǒng)各個(gè)設(shè)備的電源打開(kāi)泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器電源，待設(shè)備通過(guò)自檢后，打開(kāi)計(jì)算機(jī)，啟動(dòng)色譜管理軟件準(zhǔn)備流動(dòng)相過(guò)濾,脫氣色譜泵排氣用新配制的流動(dòng)相灌注泵啟動(dòng)液相色譜儀器的流程開(kāi)啟HPLC系統(tǒng)各個(gè)設(shè)備的電源WATERS液相色譜教程三四七(最全)課件WATERS液相色譜教程三四七(最全)課件液相色譜對(duì)流動(dòng)相的要求液相色譜儀器對(duì)流動(dòng)相的要求∶與檢測(cè)器匹配脫氣避免用含鹵素離子的緩沖鹽（不銹鋼系統(tǒng)）溶劑的粘度防止細(xì)菌的生長(zhǎng)液相色譜對(duì)流動(dòng)相的要求液相色譜儀器對(duì)流動(dòng)相的要求∶流動(dòng)相的脫氣流動(dòng)相脫氣的目的使色譜泵的輸液準(zhǔn)確輸液量均勻準(zhǔn)確，并且脈動(dòng)減小保留時(shí)間及色譜峰面積的重現(xiàn)性提高提高檢測(cè)的性能防止氣泡引起的尖峰基線穩(wěn)定，信噪比增加溶劑的紫外吸收本底降低保護(hù)色譜柱減少死體積防止填料的氧化流動(dòng)相的脫氣流動(dòng)相脫氣的目的流動(dòng)相脫氣的方法加熱簡(jiǎn)單，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易造成流動(dòng)相組成的變化抽真空同上，一般在溶劑抽濾的同時(shí)，也有脫氣的效果超聲波振蕩簡(jiǎn)單，但效果不夠理想；超聲時(shí)間不要太長(zhǎng)(1分鐘左右即可)通惰性氣體（一般用氦氣）可保持在線連續(xù)脫氣，多用于低壓梯度在線脫氣機(jī)（in-linedegasser)可保持連續(xù)脫氣，多用于低壓梯度流動(dòng)相脫氣的方法加熱流動(dòng)相的保存有機(jī)溶劑流動(dòng)相:室溫下密封,避光保存緩沖鹽流動(dòng)相:當(dāng)日現(xiàn)配現(xiàn)用低溫下密封保存,一般不超過(guò)3天防止微生物生長(zhǎng)有機(jī)溶劑與水（緩沖鹽）混配的流動(dòng)相:低溫密封保存防止有機(jī)相的揮發(fā)選用適宜的容器流動(dòng)相的保存有機(jī)溶劑流動(dòng)相:2星期1天1星期1小時(shí)新鮮配制5101520250分保存于聚乙烯瓶中的超純水測(cè)試條件水樣:40mltraceenrichment@2.0ml/min色譜柱:C18反相柱(Waters)梯度:線性100%水－100%乙腈波長(zhǎng):254nm2星期1天1星期1小時(shí)新鮮配制5101520250分1天1星期新鮮配制5101520250分保存于棕色玻璃瓶中的超純水測(cè)試條件水樣:40mltraceenrichment@2.0ml/min色譜柱:C18反相柱(Waters)梯度:線性100%水－100%乙腈波長(zhǎng):254nm1天1星期新鮮配制5101520250分保存于棕色玻璃瓶中色譜泵的排氣操作色譜泵實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)先確認(rèn)泵頭內(nèi)沒(méi)有氣體，如有氣體要按以下步驟排氣：將泵入口管吸濾頭放入脫過(guò)氣的流動(dòng)相中打開(kāi)泵及在線脫氣機(jī)電源開(kāi)關(guān)將排液閥打開(kāi)，或斷開(kāi)與色譜柱連接的管路設(shè)置流速到6-9ml/min,排液閥出口有液流連續(xù)流出必要時(shí)(600泵)用10ml注射器從泵入口注入流動(dòng)相對(duì)于600,2695四元梯度泵,分別對(duì)所用各路溶劑進(jìn)行排氣操作停止泵流速,關(guān)閉排液閥,恢復(fù)斷開(kāi)的管路,備用注:泵排氣后,應(yīng)輸液穩(wěn)定(系統(tǒng)壓力脈動(dòng)小,一般在幾十Psi以?xún)?nèi)),否則,需重做排氣操作色譜泵的排氣操作色譜泵實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)先確認(rèn)泵頭內(nèi)沒(méi)有氣體，如有氣Waters515泵的前面板電源開(kāi)關(guān)柱塞桿清洗孔排液閥Waters515泵的前面板電源開(kāi)關(guān)Waters600泵的前面板柱塞桿清洗孔電源開(kāi)關(guān)排液閥泵控制器泵體泵灌注閥Waters600泵的前面板柱塞桿電源開(kāi)關(guān)排液閥泵控制器泵Waters2695分離單元溶劑瓶盤(pán)注射器箱門(mén)柱溫箱溶劑配比單元進(jìn)入門(mén)檢測(cè)器接液盤(pán)前面板顯示屏和鍵盤(pán)軟盤(pán)驅(qū)動(dòng)器樣品室門(mén)溶劑輸送單元進(jìn)入門(mén)Waters2695分離單元溶劑瓶盤(pán)注射器箱門(mén)柱溫箱溶劑2695排氣操作示意圖面板操作:打開(kāi)狀態(tài)(Statas)畫(huà)面按右下角DirectFunction功能鍵選DryPime或WetPrime命令選OK即可進(jìn)行泵的排氣注:當(dāng)流路中充滿(mǎn)空氣時(shí),按圖示做DryPrime若只是更新流動(dòng)相時(shí),只須作WetPrime2695排氣操作示意圖面板操作:

關(guān)于色譜系統(tǒng)的反壓什么是反壓(backpressure)流動(dòng)相流經(jīng)管路及色譜柱時(shí)會(huì)有阻力,即所謂的反壓,又稱(chēng)系統(tǒng)反壓或系統(tǒng)壓力Waters習(xí)慣用的壓力單位是Psi(磅/平方英吋)其它單位有:Bar,Mpa影響系統(tǒng)反壓的主要因素:流動(dòng)相的溶劑組成溫度流速關(guān)于色譜系統(tǒng)的反壓什么是反壓(backpressure)

反壓與溶劑組成的關(guān)系流動(dòng)相的粘度是產(chǎn)生反壓的主要原因有機(jī)溶劑－水的粘度隨組成而改變其壓力隨組成變化如下圖所示反壓與溶劑組成的關(guān)系流動(dòng)相的粘度是產(chǎn)生反壓的主要原因

反壓與流速的關(guān)系流速對(duì)反壓的影響是線性關(guān)系流速增加，反壓亦增大下圖的實(shí)驗(yàn)條件：2.1×30mmSymmetryC18柱,20℃反壓與流速的關(guān)系流速對(duì)反壓的影響是線性關(guān)系

反壓與溫度的關(guān)系溫度對(duì)反壓的影響是反比關(guān)系溫度升高,反壓降低,對(duì)某些流動(dòng)相的影響更大一些

反壓與溫度的關(guān)系溫度對(duì)反壓的影響是反比關(guān)系

影響系統(tǒng)反壓的其它因素反壓與色譜柱長(zhǎng)度成正比反壓與填料顆粒度的平方成反比2.5μm填料比3.5μm填料反壓高反壓與管路直徑的四次方成反比(1/D4)反壓與管路的長(zhǎng)度成正比影響系統(tǒng)反壓的其它因素反壓與色譜柱長(zhǎng)度成正比色譜泵的運(yùn)行排氣后的色譜泵即可用于實(shí)驗(yàn)運(yùn)行注意∶排氣后，先設(shè)流速為0恢復(fù)排氣時(shí)斷開(kāi)的部分，如:進(jìn)樣器、色譜柱如需要，恢復(fù)排氣時(shí)斷開(kāi)的控制線根據(jù)色譜柱的不同，逐漸提高流速到設(shè)定值若使用緩沖鹽流動(dòng)相,用前和用后均需用水過(guò)渡(包括排氣操作)色譜泵的運(yùn)行排氣后的色譜泵即可用于實(shí)驗(yàn)運(yùn)行色譜泵的維護(hù)保養(yǎng)流動(dòng)相要過(guò)濾常用緩沖液時(shí)，停泵前要用水清洗泵頭，并用水沖洗柱塞桿清洗孔關(guān)閉排液閥時(shí)，不要太用力擰緊，以不滲液為準(zhǔn)更換流動(dòng)相時(shí)，要保證兩種溶劑的互溶性,如不互溶，要用一種中間溶劑過(guò)渡色譜泵在停用時(shí),應(yīng)先用水洗去緩沖鹽,然后用純甲醇充滿(mǎn)泵頭及管路,并保存在純甲醇中色譜泵的維護(hù)保養(yǎng)流動(dòng)相要過(guò)濾液相色譜系統(tǒng)的清洗與鈍化色譜泵吸濾頭,進(jìn)出口閥及管路(包括進(jìn)樣器和檢測(cè)池)若被污染,應(yīng)作清洗和鈍化處理一般采用30％磷酸水溶液作為清洗劑，用6M硝酸作為鈍化劑，先清洗再鈍化清洗的目的是去除不銹鋼管路及系統(tǒng)內(nèi)的污垢鈍化的目的是使不銹鋼管路的內(nèi)表面形成光滑均勻的氧化膜液相色譜系統(tǒng)的清洗與鈍化色譜泵吸濾頭,進(jìn)出口閥及管路(包括進(jìn)色譜泵及系統(tǒng)的清洗清洗液用30%磷酸水溶液30%磷酸配制:取85%濃磷酸35ml與65ml水混勻清洗步驟如下:取下色譜柱，用兩通(Union)連接進(jìn)樣器和檢測(cè)器用純水灌注泵頭(四元泵的A,B,C,D四路各為25%)用30%磷酸清洗液洗系統(tǒng)(1ml/min流速)45分鐘(四元泵的A,B,C,D四路各為25%)換成清水洗至出口水pH顯中性用純甲醇過(guò)渡，浸潤(rùn)泵頭及管路，備用色譜泵及系統(tǒng)的清洗清洗液用30%磷酸水溶液色譜泵及系統(tǒng)的鈍化鈍化液用6M硝酸水溶液6M硝酸的配制:取濃硝酸40ml與60ml水混勻鈍化步驟如下:在清洗步驟完成后進(jìn)行鈍化處理確認(rèn)清洗用的磷酸已基本洗凈用純水灌注泵頭(四元泵的A,B,C,D四路各為25%)用6M硝酸水溶液鈍化系統(tǒng)(1ml/min流速)45分鐘換成清水洗至出口水pH顯中性用純甲醇過(guò)渡，浸潤(rùn)泵頭及管路，備用色譜泵及系統(tǒng)的鈍化鈍化液用6M硝酸水溶液實(shí)驗(yàn)樣品的制備標(biāo)樣和樣品標(biāo)樣:又稱(chēng)對(duì)照品,它作為液相色譜定性和定量分析的參考標(biāo)準(zhǔn)物,一般是純度較高的純物質(zhì)樣品:待測(cè)物,一般是成分復(fù)雜的混合物液相色譜對(duì)樣品(包括標(biāo)樣)制備的要求:必須能溶于流動(dòng)相如樣品的溶劑不是流動(dòng)相,一定要用流動(dòng)相試溶解度,以免在進(jìn)樣時(shí)樣品在流動(dòng)相中析出,堵塞管路和色譜柱樣品溶液要過(guò)濾除去微粒及雜質(zhì)了解樣品對(duì)色譜柱的基質(zhì)/填料是否有破壞作用實(shí)驗(yàn)樣品的制備標(biāo)樣和樣品復(fù)雜樣品的預(yù)處理樣品預(yù)處理的目的除去微粒減少干擾雜質(zhì)濃縮微量的組份提高檢測(cè)的靈敏度及選擇性改善分離的效果有利于保護(hù)色譜柱及儀器復(fù)雜樣品的預(yù)處理樣品預(yù)處理的目的樣品預(yù)處理的重要性是影響實(shí)驗(yàn)成敗的決定性步驟占樣品分析時(shí)間的比例最大樣品預(yù)處理所用時(shí)間遠(yuǎn)多于色譜分離的時(shí)間占分析消耗總成本的比重最大消耗大量的溶劑及其它化學(xué)品對(duì)分析結(jié)果的重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性影響最大的環(huán)節(jié)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果好壞的最重要因素樣品預(yù)處理的重要性是影響實(shí)驗(yàn)成敗的決定性步驟樣品預(yù)處理常用的方法高速離心取上清液過(guò)濾、超濾選擇性沉淀衍生反應(yīng)液-液萃取固相提取(SolidPhaseExtract,SPE)Oasis和Sep-Pak固相提取小柱其它樣品預(yù)處理常用的方法高速離心取上清液去除微粒的方法過(guò)濾過(guò)濾膜/過(guò)濾裝置有機(jī)濾膜(≤0.5μm)/水溶性濾膜(≤0.45μm)膜片可更換一次性使用的膜“Cartridge”使用方便簡(jiǎn)單，交叉污染小有更小內(nèi)徑，可用于微量樣品的處理高速離心大于：10,000rpm去除微粒的方法過(guò)濾超濾機(jī)理超濾是一種基于分子量分離的技術(shù)目的根據(jù)分子量的不同把分子、細(xì)胞及病毒等分為不同的餾份除去小分子樣品中的大分子蛋白脫鹽超濾機(jī)理選擇性沉淀常用于生化樣品中除蛋白有機(jī)溶劑乙腈，甲醇強(qiáng)酸三氯乙酸，高氯酸鹽50%硫酸銨10%TCA(三氯乙酸鈉)選擇性沉淀常用于生化樣品中除蛋白樣品衍生提高檢測(cè)的靈敏度增加紫外基團(tuán)以增強(qiáng)紫外檢測(cè)的靈敏度增加熒光基團(tuán)以便使用高靈敏度熒光檢測(cè)器改變分離的選擇性改變組份的基團(tuán)，如：變離子型化合物為非離子型，用反相方法分離典型的例子柱前衍生氨基酸分析樣品衍生提高檢測(cè)的靈敏度AccQ-Tag衍生法NNOHOONO+NOR1R2HNNOOOHNH20NH2NOOOHN++AQC衍生試劑１°及２°氨基酸衍生后的氨基酸CO2N-羥基琥珀酰亞胺N-羥基琥珀酰亞胺半衰期＜1秒半衰期約15秒6-氨基喹啉AccQ-Tag衍生法NNOHOONO+NOR1R2HNN濃縮樣品目的：富集微量或痕量組份濃縮樣品的方法萃取/吹干沉淀/再溶解色譜法固相提取

Oasis小柱

Sep-Pak小柱濃縮樣品目的：富集微量或痕量組份OasisHLB固相提取小柱親水-親脂平衡共聚物“親水”使填料具有水可浸潤(rùn)性質(zhì)降低與水的接觸角“親脂”提供對(duì)被分析物質(zhì)的反相保留能力NO親水性單體∶N-乙烯基吡咯烷酮親脂性單體∶

二乙烯基苯OasisHLB固相提取小柱親水-親脂平衡共聚物“親水”活化/平衡1ml甲醇/1ml水上樣多至200ml樣品沖洗廢棄物1ml5%甲醇/水溶液洗脫想要的化合物1ml甲醇揮發(fā)溶劑并重新定容制備樣品這是適合于分析眾多基質(zhì)中大多數(shù)樣品的通用操作步驟建議首先使用這種通用的操作步驟如果需要進(jìn)一步降低干擾物的影響，可使用二維SPE方法注:此方法于規(guī)格為3cc,60mg的Oasis?HLB小柱上開(kāi)發(fā)樣品預(yù)處理的通用SPE方法活化/平衡1ml甲醇/1ml水上樣多至200ml樣SPE處理的效果SPE處理的效果進(jìn)樣器的使用進(jìn)樣器的種類(lèi):手動(dòng)進(jìn)樣器－7725i自動(dòng)進(jìn)樣器－717Plus，2695樣品管理系統(tǒng)進(jìn)樣器與系統(tǒng)的連接：進(jìn)樣器的入口與色譜泵的出口相連進(jìn)樣器的出口與色譜柱的入口相連要求：出入口方向不能接錯(cuò)，接頭不能留有空隙進(jìn)樣器的連接管路：出口管路一定要用細(xì)管(內(nèi)徑≤0.009″),長(zhǎng)度要短,盡量減少譜帶擴(kuò)展進(jìn)樣器的使用進(jìn)樣器的種類(lèi):手動(dòng)進(jìn)樣器的使用7725i手動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣方式:固定體積進(jìn)樣:進(jìn)樣量取決于Loop的體積可變體積進(jìn)樣:進(jìn)樣量由微量注射器量取注意:固定體積進(jìn)樣需要用超過(guò)Loop體積5-10倍的樣品量進(jìn)樣,以保證進(jìn)樣濃度不被稀釋可變體積進(jìn)樣在注射器注入樣品后,應(yīng)盡快將進(jìn)樣器扳至Inject位置,以避免樣品在Loop中的擴(kuò)散進(jìn)樣器的清洗:每次進(jìn)樣前應(yīng)將微量注射器清洗干凈,防止樣品間交叉污染,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果手動(dòng)進(jìn)樣器的使用7725i手動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣方式:自動(dòng)進(jìn)樣器的使用自動(dòng)進(jìn)樣器(717Plus和2695樣品管理系統(tǒng)):樣品瓶位置和進(jìn)樣量由軟件設(shè)定注意:樣品瓶中應(yīng)有超過(guò)1／3瓶高度的樣品量使用內(nèi)襯管(Insert)時(shí)應(yīng)設(shè)定針高度為2mm(2695)或75%高度(717Plus)進(jìn)樣器的清洗:進(jìn)樣針是流路的組成部分,運(yùn)行中一直由流動(dòng)相清洗進(jìn)樣針外部由軟件控制在每次進(jìn)樣前用洗針液清洗若注射器內(nèi)出現(xiàn)氣泡，用面板操作的PurgeInject功能清除之自動(dòng)進(jìn)樣器的使用自動(dòng)進(jìn)樣器(717Plus和2695樣品管理自動(dòng)進(jìn)樣器的洗針液注意∶洗針溶劑瓶(內(nèi)放綠色塑料管)不要放在儀器的上部，應(yīng)放于與儀器同一水平面的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上洗針溶劑根據(jù)流動(dòng)相的不同應(yīng)有不同：自動(dòng)進(jìn)樣器的洗針液注意∶洗針溶劑根據(jù)流動(dòng)相的不同應(yīng)有不同：檢測(cè)器的啟動(dòng)操作連通流路：色譜柱出口接檢測(cè)器入口注意接頭不要留有空隙連接管路要用細(xì)管(≤0.009″)檢測(cè)器出口用適當(dāng)?shù)墓苈?內(nèi)徑,長(zhǎng)度)通向廢液瓶連通數(shù)據(jù)線路:IEEE電纜(對(duì)大多數(shù)檢測(cè)器)與軟件busLAC/E卡連接手動(dòng)進(jìn)樣器的啟動(dòng)信號(hào)線與檢測(cè)器背板上的InjectStart接口連接開(kāi)啟電源開(kāi)關(guān)后,需待檢測(cè)器通過(guò)自檢后,才能被軟件控制(約需5-10分鐘)通流動(dòng)相平衡至少30分鐘后才能正常工作檢測(cè)器的啟動(dòng)操作連通流路：Waters2487檢測(cè)器Waters2487檢測(cè)器2487的顯示屏幕通道吸光度燈開(kāi)/關(guān)波長(zhǎng)靈敏度下一畫(huà)面運(yùn)行時(shí)間(分)自控/遙控診斷開(kāi)/關(guān)鍵盤(pán)鎖開(kāi)/關(guān)單/雙波長(zhǎng)Shift開(kāi)/關(guān)AUFS(AbsorbanceUnitFullScale):滿(mǎn)量程吸光度單位2487的顯示屏幕通道吸光度燈開(kāi)/關(guān)波長(zhǎng)靈敏度下一畫(huà)面運(yùn)行時(shí)2487的面板及操作回車(chē)鍵分屏顯示鍵選項(xiàng)移動(dòng)鍵主屏幕方法調(diào)用，A/B通道切換設(shè)置及診斷單/雙波長(zhǎng)，自動(dòng)調(diào)零運(yùn)行/停止鍵第二功能鍵監(jiān)視色譜圖屏幕對(duì)比度2487的面板及操作回車(chē)鍵分屏顯示鍵選項(xiàng)移動(dòng)鍵主屏幕方法調(diào)用Waters2996PDA檢測(cè)器PDA(PhotoDiodeArray):光電二極管矩陣Waters2996PDA檢測(cè)器PDA(PhotoDi由軟件設(shè)定檢測(cè)器參數(shù)只需設(shè)定如下參數(shù)即可采集數(shù)據(jù)波長(zhǎng)范圍分辨率每秒采集的光譜數(shù)操作極為簡(jiǎn)便不需費(fèi)神選擇參比波長(zhǎng)及其帶寬由軟件設(shè)定檢測(cè)器參數(shù)只需設(shè)定如下參數(shù)即可采集數(shù)據(jù)Waters2414示差折光檢測(cè)器Waters2414示差折光檢測(cè)器2414的顯示屏幕沖洗參比池折射率極性RIU量程檢測(cè)器溫度下一畫(huà)面運(yùn)行時(shí)間(分)自控/遙控鍵盤(pán)鎖開(kāi)/關(guān)模式Shift2414的顯示屏幕沖洗參比池折射率極性RIU量程檢測(cè)器溫度下2414的面板及操作回車(chē)鍵屏幕對(duì)比度選項(xiàng)移動(dòng)鍵主屏幕方法調(diào)用，溫度設(shè)置自動(dòng)調(diào)零運(yùn)行/停止鍵第二功能鍵監(jiān)視色譜圖沖洗參比池設(shè)置及診斷下一頁(yè)2414的面板及操作回車(chē)鍵屏幕對(duì)比度選項(xiàng)移動(dòng)鍵主屏幕方法調(diào)用2414檢測(cè)器的日常操作設(shè)定檢測(cè)器內(nèi)、外(如有柱溫箱)溫度以5ml/min的流速“purge”參比池五分鐘不接色譜柱！參數(shù)設(shè)置按文獻(xiàn)值或?qū)嶒?yàn)決定至少需要2小時(shí)以上的平衡時(shí)間通常檢測(cè)器可以在白天結(jié)束工作后不關(guān)機(jī)，保持0.1到0.5ml/min的流速循環(huán)沖洗樣品池和參比池,可節(jié)省第二天的平衡時(shí)間2414檢測(cè)器的日常操作設(shè)定檢測(cè)器內(nèi)、外(如有柱溫箱)溫度使用示差檢測(cè)器的注意事項(xiàng)不能做梯度實(shí)驗(yàn)最大的池耐壓是100psi注意保持出口管路的暢通流速范圍是0.1-10ml/min此種類(lèi)型檢測(cè)器是壓力敏感和溫度敏感型檢測(cè)器注意保持泵壓力的平穩(wěn)注意環(huán)境溫度的恒定使用示差檢測(cè)器的注意事項(xiàng)不能做梯度實(shí)驗(yàn)Waters2475熒光檢測(cè)器Waters2475熒光檢測(cè)器2475檢測(cè)器的特點(diǎn)可調(diào)波長(zhǎng)熒光檢測(cè)器雙掃描在掃描模式下(Scan)發(fā)射波長(zhǎng)及激發(fā)波長(zhǎng)均可掃描高靈敏度∶水的RAMAN峰S/N大于200可編程時(shí)間-波長(zhǎng)時(shí)間-增益由RS232串行口或網(wǎng)線與計(jì)算機(jī)相連2475檢測(cè)器的特點(diǎn)可調(diào)波長(zhǎng)熒光檢測(cè)器2475的主顯示屏發(fā)射/能量燈開(kāi)/關(guān)下一頁(yè)運(yùn)行時(shí)間(分)面板/軟件控制鍵盤(pán)鎖/開(kāi)Shift開(kāi)/關(guān)單/多波長(zhǎng)通道選擇增益波長(zhǎng)診斷鍵開(kāi)/關(guān)靈敏度2475的主顯示屏發(fā)射/能量燈開(kāi)/關(guān)下一頁(yè)運(yùn)行時(shí)間(分)面板2475的面板及操作回車(chē)鍵分屏顯示鍵選項(xiàng)移動(dòng)鍵主屏幕方法調(diào)用，通道切換設(shè)置／診斷自動(dòng)調(diào)零運(yùn)行/停止鍵第二功能鍵監(jiān)視色譜圖開(kāi)／關(guān)燈屏幕亮度調(diào)節(jié)光譜掃描2475的面板及操作回車(chē)鍵分屏顯示鍵選項(xiàng)移動(dòng)鍵主屏幕方法調(diào)用2475熒光檢測(cè)器的掃描功能掃描功能

由面板功能執(zhí)行Empower

英文版亦能由軟件執(zhí)行2475熒光檢測(cè)器的掃描功能掃描功能熒光檢測(cè)器使用注意事項(xiàng)不是所有化合物都有熒光，有時(shí)需要衍生檢測(cè)器對(duì)溶解氣體及其它“淬滅”物質(zhì)(如甲醇)敏感,流動(dòng)相最好能在線脫氣對(duì)Ex及Em的最佳，易受溫度、溶劑極性和粘度、pH及樣品濃度影響檢測(cè)池的耐壓較低,注意出口管路要暢通設(shè)置的發(fā)射波長(zhǎng)至少要比激發(fā)波長(zhǎng)高10nm熒光檢測(cè)器使用注意事項(xiàng)不是所有化合物都有熒光，有時(shí)需要衍生流動(dòng)相脫氣與否的信號(hào)比較MinutesColumn- WatersPAHColumn, @27oCEluentA: WaterEluentB: AcetonitrileGradient: 60%Bto100%Busing curve9in12minutes Hold11minutes BacktoinitialconditionsFlowRate 1.2ml/minInjection: 20ul Timeprogrammed wavelengthchanges20.521.022.01000MV脫氣未脫氣Breeze?withFluorescence1231.Benzo(b)flouranthene–400ppb2.Benzo(k)fluoranthene-200ppb3.Benzo(a)pyrene-200ppb流動(dòng)相脫氣與否的信號(hào)比較MinutesColumn- Wa樣品濃度對(duì)激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)的影響發(fā)射激發(fā)~10–3M~10–5M在庚烷中樣品濃度對(duì)激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)的影響發(fā)射激發(fā)~10–3M檢測(cè)器的使用和保養(yǎng) 如長(zhǎng)時(shí)間不用檢測(cè)器可以關(guān)掉光源燈(UV,FL)僅在4小時(shí)以上不用時(shí),才需關(guān)燈頻繁開(kāi)關(guān)燈也會(huì)影響燈壽命不要讓緩沖液長(zhǎng)期停滯在檢測(cè)池內(nèi)用純水沖洗保存在純甲醇中示差檢測(cè)器及熒光檢測(cè)器若與其它檢測(cè)器串聯(lián)使用,應(yīng)將此兩種檢測(cè)器串在其它檢測(cè)器的后面不用檢測(cè)器的液晶顯示屏?xí)r，應(yīng)將其亮度調(diào)暗檢測(cè)器的使用和保養(yǎng) 如長(zhǎng)時(shí)間不用檢測(cè)器可以關(guān)掉光源燈(UV,Waters中國(guó)有限公司培訓(xùn)中心液相色譜教程

(四)

液相色譜柱基礎(chǔ)知識(shí)

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(四)

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(3)反相色譜柱的選擇Waters中國(guó)有限公司培訓(xùn)中心液相色譜柱基礎(chǔ)知識(shí)

(3)反相色譜柱的選擇Waters中國(guó)液相色譜柱與分離機(jī)理的關(guān)系從色譜方法上分正相/反相離子交換分子體積排除親合疏水回受從柱子類(lèi)型上分分配/吸附離子交換凝膠親合液相色譜柱與分離機(jī)理的關(guān)系從色譜方法上分從柱子類(lèi)型上分對(duì)HPLC色譜柱的要求(1)合適的選擇性滿(mǎn)足不同的分離要求良好的色譜峰形重現(xiàn)性寬應(yīng)用范圍對(duì)HPLC色譜柱的要求(1)合適的選擇性硅膠基質(zhì)C18填料都相同嗎？色譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果揭示：疏水性不同殘留硅羥基活性不同為什么？不同

C18配體鍵合水平（狀況）配體覆蓋率不同硅膠顆?；|(zhì)密度，表面積，孔徑純度硅膠基質(zhì)C18填料都相同嗎？色譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果揭示：色譜柱品牌名稱(chēng)不同色譜柱“品牌名稱(chēng)”表示不同的硅膠基質(zhì)WatersSymmetry?C18WatersNova-Pak?C18相同的“品牌名稱(chēng)”,不同的配體表示相同的硅膠基質(zhì)，鍵合相不同WatersSymmetry?C18WatersSymmetry?C8注意：由于硅羥基的影響，許多情況下硅膠基質(zhì)對(duì)整個(gè)鍵合相的性能起決定作用色譜柱品牌名稱(chēng)不同色譜柱“品牌名稱(chēng)”表示不同的硅膠基質(zhì)注Minutes04812162024YMC-Pack?ProC18?YMC-Pack?ProC4?二氫苊萘對(duì)羥基苯甲酸丁酯提示:相似的選擇性歸因于相同的硅膠基質(zhì)(同一品牌,不同鍵合相)配體不同的影響：C18與C4Minutes04812162024YMC-Pack?Pr品牌不同的影響:(相同配體)分45678910YMC-Pack?ODS-AQ?YMC-Pack?ProC18?酮洛芬痛滅定萘普生舒洛芬舒洛芬

萘普生酮洛芬和痛滅定注意:由于硅膠顆?；|(zhì)不同(品牌不同),分離的選擇性不同品牌不同的影響:(相同配體)分45678910YMC-Pa01020304050用于浸潤(rùn)固定相的甲醇水溶液的比例%020406080100在1mL/min流速下的浸潤(rùn)率%C18鍵合相硅膠柱填料需要

合適的濕潤(rùn)度注意：需要有機(jī)溶劑來(lái)保證反相填料有合適的濕度,反之停流速后易出現(xiàn)“疏水塌陷”問(wèn)題01020304050用于浸潤(rùn)固定相的甲醇水溶液的比例%02未濕潤(rùn)的孔濕潤(rùn)的孔注意：保留時(shí)間與填料表面積與配體有關(guān)。然而，如果硅膠表面未濕潤(rùn)，那么有效的色譜表面積會(huì)減少95%，因此，減少被分析物的保留時(shí)間即等于“疏水塌陷”，記?。簬缀跛械谋砻娣e都在孔內(nèi)！低比例有機(jī)溶劑或純水溶液流動(dòng)相C18硅膠什么是“疏水塌陷”？未濕潤(rùn)的孔濕潤(rùn)的孔注意：保留時(shí)間與填料表面積與配體有關(guān)。然而分0246810流動(dòng)相：0.1%醋酸水溶液阿莫西林Vo：被分析物沒(méi)有保留“濕潤(rùn)時(shí)”“去濕后”Symmetry?C8：疏水塌陷分0246810流動(dòng)相：0.1%醋酸水溶液阿莫西林Vo：被停流速后(孔去濕:~3%)流動(dòng)相：0.1%醋酸水溶液Minutes0246810初始時(shí)保留時(shí)間無(wú)變化阿莫西林SymmetryShield?RP8：

無(wú)疏水塌陷現(xiàn)象發(fā)生內(nèi)嵌極性基團(tuán)鍵合相：使用高比例水溶液流動(dòng)相時(shí)色譜性能穩(wěn)定停流速后(孔去濕:~3%)流動(dòng)相：0.1%醋酸水溶液M帶有極性基團(tuán)的反相色譜填料帶有極性基團(tuán)的反相色譜填料內(nèi)嵌極性基團(tuán)配體:可能機(jī)理-極性基團(tuán)增加了填料表層水的濃度降低堿性物質(zhì)的保留減少了拖尾改善與水的浸潤(rùn)性屏蔽了帶負(fù)電的硅羥基內(nèi)嵌極性基團(tuán)配體:可能機(jī)理-極性基團(tuán)增加了填料表層水的濃度降水表面層機(jī)理水“屏蔽”層降低了堿性化合物的保留降低了拖尾現(xiàn)象屏蔽了帶負(fù)電的硅羥基水表面層機(jī)理水“屏蔽”層降低了堿性化合物的保留屏蔽了帶負(fù)電SymmetryShield?RP18TfUSP=1.1分0102030阿米替林Symmetry?C18TfUSP=1.9注意：對(duì)堿性化合物而言，可以減少保留時(shí)間并且改善色譜峰形相同硅膠基質(zhì)(配體不同)內(nèi)置極性基團(tuán)的配體與直鏈烷烴配體的比較SymmetryShield?RP18分0102030阿米注:使用相同的流動(dòng)相SymmetryShield?RP8Symmetry?C8選擇性不同呋喃唑酮(痢特靈)雜質(zhì)分析注:使用相同的流動(dòng)相SymmetryShield?RP8色譜柱選擇性比較表(ln[k]二氫苊)Hypersil?BDSC18Symmetry?C18Inertsil?ODS-2Inertsil?ODS-3Kromasil?C18YMC-Pack?ProC18?YMC-Pack?ODS–AQ?Nova-Pak?C18Hypersil?ODSYMCJ'sphere?ODS–H80YMCJ'sphere?ODS–M80Nucleosil?C18μBondapak?C18YMCJ'sphere?ODS–L80WatersSpherisorb?ODS1Resolve?C18WatersSpherisorb?ODS2-0.20.30.81.31.82.32.811.522.533.5疏水性增加硅羥基活性降低(ln[a]阿米替林/二氫苊)選擇性變化色譜柱選擇性比較表(ln[k]二氫苊)Hypersil?對(duì)HPLC色譜柱的要求(2)合適的選擇性良好的色譜峰形定量精度、靈敏度與分離度重現(xiàn)性寬應(yīng)用范圍對(duì)HPLC色譜柱的要求(2)合適的選擇性USP拖尾因子（TailingFactor）:

Tf＝不對(duì)稱(chēng)因子(AssymmetryFactor):

As＝ab峰高之5%處色譜峰對(duì)稱(chēng)性的衡量方法abab)(a2+USP拖尾因子（TailingFactor）:ab峰高之對(duì)稱(chēng)峰形的益處更準(zhǔn)確與精確的定量結(jié)果純度分析穩(wěn)定性分析更高的靈敏度

更好的檢出限與定量限（LOD和LOQ）對(duì)低濃度雜質(zhì)有更強(qiáng)的檢測(cè)能力更好的分離度更有利于相鄰色譜峰的分離對(duì)稱(chēng)峰形的益處更準(zhǔn)確與精確的定量結(jié)果99.6%99.8%99.9%峰面積回收率T=1.00Waters21,379由于拖尾引起的積分誤差92.3%95.3%97.8%T=1.58峰面積回收率99.6%99.8%99.9%峰面積回收率T=1.由于拖尾引起的靈敏度差異

他莫昔芬0.25g/mL信噪比11.06.5AUSymmetryC18AU5.0010.00MinutesConventionalC18由于拖尾引起的靈敏度差異他莫昔芬信噪比AUSymmetry峰形對(duì)分離度的影響Rs=(t峰2–t峰1)/0.5(w4.4%

峰1+w4.4%

峰2)=(11.5-10.6)/0.5(2.0+0.5)=0.72Minutes0510152025提示:基線分離的分離度

=1.5峰形對(duì)分離度的影響Rs=(t峰2–t峰1)/不同填料的峰形比較1.二羥基丙酮2.心得安(T=1.0)3.二氫苊4.阿米替林(T=1.6)1.二羥基丙酮2.心得安(T=5.7)3.二氫苊4.阿米替林(T=7.0)AlltimaC8SymmetryC8不同填料的峰形比較1.二羥基丙酮1.二羥基丙酮Allti具有良好峰形的Symmetry柱建立高效液相色譜柱的新標(biāo)準(zhǔn)，開(kāi)創(chuàng)新一代高品質(zhì)色譜柱全新的標(biāo)準(zhǔn)：在很寬的pH范圍下，對(duì)酸、堿及中性化合物均有非常好的色譜峰形極高的批間重現(xiàn)性獨(dú)特的選擇性良好的柱壽命具有良好峰形的Symmetry柱建立高效液相色譜柱的新標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)HPLC色譜柱的要求(3)合適的選擇性良好的色譜峰形重現(xiàn)性色譜柱間重現(xiàn)性批次間重現(xiàn)性寬應(yīng)用范圍對(duì)HPLC色譜柱的要求(3)合適的選擇性色譜柱重現(xiàn)性的重要性重現(xiàn)性是液相色譜分析的基本要求缺乏重現(xiàn)性是用戶(hù)最擔(dān)心的問(wèn)題加快方法驗(yàn)證(Validation)的速度更容易傳遞方法色譜系統(tǒng)之間以及實(shí)驗(yàn)室之間確保長(zhǎng)期符合認(rèn)證及系統(tǒng)適應(yīng)性等要求更容易符合法規(guī)要求色譜柱重現(xiàn)性的重要性重現(xiàn)性是液相色譜分析的基本要求同一批次合成的填料—色譜柱之間的重現(xiàn)性柱床填充質(zhì)量控制塔板數(shù)色譜峰對(duì)稱(chēng)性反壓無(wú)選擇性差異不同批次合成的填料—色譜柱批次間重現(xiàn)性顆粒的物理性質(zhì)表面之化學(xué)性質(zhì)柱間重現(xiàn)性與批次間重現(xiàn)性的區(qū)別同一批次合成的填料—色譜柱之間的重現(xiàn)性柱間重現(xiàn)性與批次間重現(xiàn)Symmetry—優(yōu)異的重現(xiàn)性不同產(chǎn)品批號(hào)間的差別最低，充分滿(mǎn)足各種嚴(yán)格的cGMP要求孔徑 RSD=3%滲透性 RSD=2%特征表面積 RSD=2%平均顆粒度 RSD=2%Symmetry—優(yōu)異的重現(xiàn)性不同產(chǎn)品批號(hào)間的差別最低，不同批次間重現(xiàn)性Symmetry?C18品牌B品牌CSymmetry?C18–45批不同批次間重現(xiàn)性Symmetry?C18品牌B品牌C紫杉醇中的不純物分析:三批色譜柱所得色譜重疊圖色譜柱:Symmetry

C83.5m(4.6x100mm)8

流速:1.8mL/min流動(dòng)相:甲醇/乙腈/水9:34:57檢測(cè)波長(zhǎng):UV230nm樣品:25Lof1mg/mL紫杉醇0.0010.0020.0030.00Minutes

不同批次間重現(xiàn)性紫杉醇中的不純物分析:三批色譜柱所得色譜重疊圖色譜柱:SySymmetry?色譜柱優(yōu)點(diǎn)優(yōu)異的色譜峰形無(wú)可比擬的重現(xiàn)性所認(rèn)證的方法置信度高容易達(dá)到法規(guī)要求認(rèn)證方法的長(zhǎng)期穩(wěn)定性有利于長(zhǎng)期符合法規(guī)要求Symmetry?色譜柱優(yōu)點(diǎn)優(yōu)異的色譜峰形對(duì)HPLC色譜柱的要求(4)合適的選擇性良好的色譜峰形重現(xiàn)性寬應(yīng)用范圍pH

范圍溫度范圍對(duì)HPLC色譜柱的要求(4)合適的選擇性pH對(duì)填料穩(wěn)定性的影響高pH實(shí)驗(yàn)pH>8時(shí),許多C18硅膠基質(zhì)過(guò)早地喪失柱效由于填料顆粒溶解,色譜柱內(nèi)產(chǎn)生空隙隨著鍵合相覆蓋率的增加，色譜柱壽命延長(zhǎng)低pH實(shí)驗(yàn)pH<2時(shí),許多C18硅膠基質(zhì)過(guò)早地喪失柱效由于鍵合相之水解作用,被測(cè)物喪失保留行為使用三官能團(tuán)鍵合相可獲得最佳的穩(wěn)定性pH對(duì)填料穩(wěn)定性的影響高pH實(shí)驗(yàn)XTerra色譜填料Tetraethoxysilane(TEOS)Polyethoxysilane(MPEOS)Methyltriethoxysilane(MTEOS)雜化顆粒合成(Hybridparticlesynthesis)同時(shí)含有有機(jī)和無(wú)機(jī)組分擁有介于有機(jī)與無(wú)機(jī)材料之間的性質(zhì)Xterra:Waters創(chuàng)新的雜化填料XTerra色譜填料Tetraethoxysilane(T0102030400123456789101112pHXTerra?色譜柱硅羥基電離硅羥基不電離

弱保留

好峰形保留增加好色譜峰形必須嚴(yán)格控制pH方可獲得良好色譜重現(xiàn)性pH10

去甲替林阿米替林Minutes0123Minutes0123pH2保留最強(qiáng)

好色譜峰形改善色譜重現(xiàn)性保留因子(k)堿性化合物在不同pH條件下的分離度0102030400123456789101112pHXTe靈敏度與選擇性的改變色譜柱:XTerra?RP18,4.6.x150mm,3.5μm檢測(cè):254nm(相同進(jìn)樣量)流動(dòng)相:50%乙腈/40%水/10%含100mM

CAPSO,

pH10流動(dòng)相:30%乙腈/60%水/10%含100mM磷酸鈉,

pH2.0MinutespH100.000.2524681012酮康唑阿司咪唑0酮康唑阿司咪唑AUpH2色譜圖重疊pH2與10：阿司咪唑與酮康唑分析靈敏度與選擇性的改變色譜柱:XTerra?RP18,4簡(jiǎn)化方法開(kāi)發(fā)過(guò)程123456789101112pH中間pH硅膠柱低pH硅膠柱高pH聚合物基質(zhì)柱寬pH范圍XTerra?填料色譜柱XTerra?色譜柱之寬pH范圍(以一當(dāng)三)簡(jiǎn)化方法開(kāi)發(fā)過(guò)程123456789101112pH中間pH溫度pHXTerra?填料：高溫穩(wěn)定性溫度pHXTerra?填料：高溫穩(wěn)定性Xterra:高溫壽命試驗(yàn)PeakNumber

USPTailingFactor1.多慮平1.22.去甲替林1.13.阿米替林1.14.三甲丙咪嗪1.0AU-0.0050.10Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.00AU-0.020.48Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.001234123412341234AU0.000.26Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.00AU-0.0050.10Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.00第二十一天第二天XTerra?RP18普通硅膠C18

Conditions:Column:XTerra?RP18,5μm,4.6X150mmMobilePhase:40%pH7,10mMNa2PO4,60%ACNColumnTemp.:60°CFlowRate:1.5mL/minDetector:254nm三環(huán)抗抑郁藥物分離Xterra:高溫壽命試驗(yàn)PeakNumberXterra色譜柱的優(yōu)點(diǎn)XTerra色譜柱為方法開(kāi)發(fā)提供了極其有效且方便的工具寬pH范圍良好色譜峰形高穩(wěn)定性高速度WatersPatentTechnology2000R&D100AwardWinnerXterra色譜柱的優(yōu)點(diǎn)XTerra色譜柱為方法開(kāi)發(fā)提供了極最新研制的Atlantis反相柱最新研制的Atlantis反相柱新型AtlantisTM填料的性質(zhì)提高極性物質(zhì)保留能力的同時(shí)，改善常規(guī)反相色譜性能雙官能團(tuán)鍵合C18(dC18)端基封口平均孔徑為100?顆粒度：3,5及10m

新型AtlantisTM填料的性質(zhì)提高極性物質(zhì)保留能力的同新型AtlantisTM填料的特點(diǎn)對(duì)極性與非極性化合物的優(yōu)異保留特性在100％水溶液流動(dòng)相中運(yùn)行保持色譜性能穩(wěn)定峰形優(yōu)異超低鍵合相流失，質(zhì)譜兼容酸性條件下穩(wěn)定性良好雙鍵鍵合C18，使之：具有較長(zhǎng)的色譜柱壽命低pH條件下穩(wěn)定性增強(qiáng)極佳的色譜柱間重現(xiàn)性新型AtlantisTM填料的特點(diǎn)對(duì)極性與非極性化合物的優(yōu)同時(shí)分離極性與非極性化合物極性化合物在AtlantisTM色譜柱上保留較強(qiáng)，而非極性物質(zhì)在其上的保留時(shí)間與常規(guī)C18色譜柱相似。12345109876V0=0.98minTime(Min)1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.0011.0012.0013.0014.0015.00ConditionsColumn:AtlantisTM4.6x150mm,5μmMobilePhaseA:H2OMobilePhaseB:ACNMobilePhaseC:100mMNH4COOH,pH3.0Flowrate:2.0mL/minGradient:TimeProfile(min)%A%B%C0.008010

1010.0095515.00955Injectionvolume:5.0μLTemperature:30oCDetection:UV@254nmCompounds1.Uracil2.Acetanilide3.Triamcinolone4.Hydrocortisone5.2-Amino-7-chloro-5-oxo-5H-[1]-benzopyrano-[2,3-b]pyridinecarbonitrile6.6a-Methyl-17a-hydroxyprogesterone7.3-Aminofluoranthene8.2-Bromofluorene9.Perylene10.Naphthol[2,3-a]pyrene同時(shí)分離極性與非極性化合物極性化合物在AtlantisTM兒茶酚胺及其代謝產(chǎn)物12345109876Time(Min)2.004.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00V0=1.83min化合物:1.去甲腎上腺素(NE)2.腎上腺素(E)3.3,4-二羥基苯基丙氨酸(DOPA)4.多巴胺(DA)5.3-甲氧基-4-羥基苯乙二醇(MHPG)6.4-羥基-3-甲氧基苯基乙醇酸(VMA)7.5-羥色胺(5-HT)8.3,4-二羥基苯乙酸(DOPAC)9.5-羥基-3-吲哚乙酸(5HIAA)10.4-羥基-3-甲氧基苯乙酸(HVA)條件色譜柱: 4.6x150mm,5μm流動(dòng)相A: H2O流動(dòng)相B: ACN流動(dòng)相C: 100mMNH4COOH,pH3.0流速 1.0mL/min梯度: 時(shí)間 流動(dòng)相組成 (min) %A%B%C 0.00 90010 5.00 90010 15.0 652510 20.0 652510進(jìn)樣體積: 10μL溫度: 30oC檢測(cè): UV@280nm兒茶酚胺及其代謝產(chǎn)物12345109876Time(Min水溶性維生素(Vitamins)化合物:

USP拖尾因子1.L-抗壞血酸(Vc) 1.122.煙酸 1.273.硫胺(VB1) 1.204.吡哆醛 1.135.VB6 1.046.葉酸 1.107.咖啡因 1.108.核黃素(VB2) 1.14Time(Min)1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.0011.0012.0013.0014.0015.0012345876V0=1.37min條件色譜柱:4.6x150mm,5μm流動(dòng)相A:0.1%TFA流動(dòng)相B:乙腈流速:1.4mL/min梯度: 時(shí)間 流動(dòng)相組成 (min) %A%B 0.0 1000 4.0 973 6.0 8515 15.0 8020進(jìn)樣體積:10.0μL溫度:30oC檢測(cè):UV@260nm水溶性維生素(Vitamins)化合物: 反相色譜柱的選擇小結(jié):(1)常規(guī)應(yīng)用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱：SymmetryShield/Symmetry優(yōu)點(diǎn)：峰形好，重現(xiàn)性高，壽命長(zhǎng)限制：pH2-8流動(dòng)相中含有大量水溶液采用Shield技術(shù)：XTerraRP或SymmetryRP填料Atlantis填料技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：在含有大量水溶液（100％水溶液）流動(dòng)相中性能穩(wěn)定：峰形好反相色譜柱的選擇小結(jié):(1)常規(guī)應(yīng)用需要使用寬pH值或高溫條件－如生物堿分離XTerra雜化顆粒技術(shù)：pH1-12優(yōu)點(diǎn)：pH范圍寬，高溫條件下填料穩(wěn)定性好，色譜峰形好，壽命長(zhǎng)采用質(zhì)譜檢測(cè)器:窄內(nèi)徑/小顆粒/短柱XterraMSC18AtlantisSymmetryC18反相色譜柱的選擇小結(jié):(2)需要使用寬pH值或高溫條件－如生物堿分離反相色譜柱的選擇小需要提高極性物質(zhì)的保留常規(guī)pH：AtlantisdC18極端pH：Xterra：如堿性化合物需要分析分子量較大的多肽或蛋白Symmetry300C18C4反相色譜柱的選擇小結(jié):(3)需要提高極性物質(zhì)的保留反相色譜柱的選擇小結(jié):(3)結(jié)論各種品牌的C18柱皆有各自不同的選擇性結(jié)論各種品牌的C18柱皆有各自不同的選擇性液相色譜教程

(七)

液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題分析Waters中國(guó)有限公司培訓(xùn)中心液相色譜教程

(七)

液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題分析Waters中國(guó)色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題主要有三類(lèi):色譜峰峰形異常問(wèn)題例如負(fù)峰,寬峰,肩峰,雙峰,峰形不對(duì)稱(chēng)等色譜圖中多峰少峰問(wèn)題色譜圖未出峰,出峰比預(yù)想的多等色譜峰保留時(shí)間問(wèn)題保留時(shí)間不穩(wěn)定等色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題主要有三類(lèi):色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:所有的峰均為負(fù)峰:信號(hào)電纜接反或檢測(cè)器輸出極性設(shè)置顛倒光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡一個(gè)或幾個(gè)峰是負(fù)峰流動(dòng)相吸收本底高進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)了空氣離子對(duì)分離中的系統(tǒng)峰樣品組分的吸收(RI或UV)低于流動(dòng)相色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:所有的峰都是寬峰系統(tǒng)未平衡或未達(dá)到化學(xué)平衡溶樣的溶劑比流動(dòng)相強(qiáng)很多色譜柱類(lèi)型或尺寸不正確色譜柱或保護(hù)柱被污染或降級(jí)溫度變化對(duì)色譜柱的影響色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:較早洗脫的峰呈寬峰進(jìn)樣體積過(guò)大或樣品濃度太高進(jìn)樣器有問(wèn)題,定量環(huán)(Loop)大小不合適在線過(guò)濾器,保護(hù)柱,色譜柱或管路堵塞管路問(wèn)題:內(nèi)徑不對(duì)或切管不正確管路連接問(wèn)題:接頭或錐箍不正確檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)不正確色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:峰比預(yù)想的要小樣品粘度過(guò)大進(jìn)樣器有問(wèn)題或進(jìn)樣體積有誤檢測(cè)器設(shè)置不正確,定量環(huán)(Loop)體積不正確檢測(cè)器輸出未置零用了不正確的檢測(cè)器輸出信號(hào)檢測(cè)池被污染檢測(cè)器的燈可能有問(wèn)題色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:雙峰或肩峰進(jìn)樣量或樣品濃度過(guò)大保護(hù)柱或色譜柱進(jìn)口堵塞保護(hù)柱或色譜柱污染或失效前伸峰進(jìn)樣量或樣品濃度過(guò)大溶樣的溶劑相對(duì)于流動(dòng)相太強(qiáng)保護(hù)柱或色譜柱污染或失效色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:平頭峰檢測(cè)器設(shè)置不正確進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高拖尾峰保護(hù)柱或色譜柱問(wèn)題:污染或失效進(jìn)樣問(wèn)題檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)不正確色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(一)色譜峰峰形異常問(wèn)題:拖尾是由什么引起的?混合型保留機(jī)理與鍵合相的疏水作用與帶電點(diǎn)的離子交換作用拖尾是由什么引起的?混合型保留機(jī)理緩沖液的pH與拖尾緩沖液的pH與拖尾色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(二)色譜圖多峰少峰問(wèn)題:色譜圖中未出峰:進(jìn)樣問(wèn)題:未進(jìn)樣或樣品分解流動(dòng)相問(wèn)題:泵未輸液或流動(dòng)相不正確檢測(cè)器設(shè)置不正確,或檢測(cè)器有問(wèn)題色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(二)色譜圖多峰少峰問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(二)色譜圖多峰少峰問(wèn)題:色譜圖中出峰比預(yù)想的少樣品分解色譜柱分辨率喪失用錯(cuò)流動(dòng)相梯度洗脫時(shí)平衡不足(例如,過(guò)早將手動(dòng)進(jìn)樣器扳至(Load)位置色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(二)色譜圖多峰少峰問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(二)色譜圖多峰少峰問(wèn)題:色譜圖中出峰比預(yù)想的多(鬼峰):樣品分解或制樣時(shí)導(dǎo)入了雜質(zhì)流動(dòng)相被污染,或用錯(cuò)流動(dòng)相流動(dòng)相中含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑發(fā)生變化前次進(jìn)樣的后流出物(某些Rt值特大的組分)進(jìn)樣器被污染,洗針系統(tǒng)出問(wèn)題或注射器臟未充分平衡進(jìn)樣器Loop管保護(hù)柱臟,色譜柱被污染,分辨率下降色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(二)色譜圖多峰少峰問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(三)色譜峰保留時(shí)間問(wèn)題:保留時(shí)間飄忽不定(各次運(yùn)行之間)系統(tǒng)不穩(wěn)定或未達(dá)化學(xué)平衡泵壓力不穩(wěn)(泵頭里有氣泡)進(jìn)樣體積過(guò)大或樣品濃度過(guò)大溫度波動(dòng)流動(dòng)相混合不均勻色譜柱被污染色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(三)色譜峰保留時(shí)間問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(三)色譜峰保留時(shí)間問(wèn)題:保留時(shí)間增加或減少(各次運(yùn)行之間)系統(tǒng)不穩(wěn)定或化學(xué)平衡不足泵流速變化溫度變化色譜柱污染,柱效下降流動(dòng)相被污染溶劑入口過(guò)濾器堵或管路堵塞系統(tǒng)滲漏色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(三)色譜峰保留時(shí)間問(wèn)題:色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(三)色譜峰保留時(shí)間問(wèn)題:保留時(shí)間改變到一個(gè)新的恒定值流動(dòng)相不正確或其組成不正確泵流速變化實(shí)際輸液的流速不正確(泵失靈或故障)環(huán)境溫度變化；柱溫不正確色譜柱尺寸或類(lèi)型不正確色譜柱被污染流動(dòng)相含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑發(fā)生變化輸液系統(tǒng)的梯度滯后體積不正確色譜圖常見(jiàn)問(wèn)題分析(三)色譜峰保留時(shí)間問(wèn)題:HPLC實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題系統(tǒng)壓力問(wèn)題壓力高壓力低或沒(méi)有壓力壓力不穩(wěn)流路基線噪音問(wèn)題基線不穩(wěn)定(不重復(fù))長(zhǎng)、短程振蕩基線漂移噪音脈沖尖刺HPLC實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題系統(tǒng)壓力問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析系統(tǒng)壓力問(wèn)題壓力高的原因溫度太低流速太高流動(dòng)相粘度大管路堵塞儀器或色譜柱堵塞壓力傳感器問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析系統(tǒng)壓力問(wèn)題系統(tǒng)壓力問(wèn)題壓力低或沒(méi)有壓力溫度太高;流速太低泵關(guān)閉或保險(xiǎn)絲斷了泵未輸送流動(dòng)相系統(tǒng)內(nèi)有滲漏處所用溶劑不正確自動(dòng)進(jìn)樣器在Purge時(shí)卡住HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析系統(tǒng)壓力問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析系統(tǒng)壓力問(wèn)題壓力低或沒(méi)有壓力（續(xù)）儲(chǔ)液瓶中無(wú)溶劑低壓限設(shè)置不當(dāng)泵未正確排氣溶劑入口過(guò)濾頭堵入口管路中有空氣泵失效HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析系統(tǒng)壓力問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析系統(tǒng)壓力問(wèn)題壓力不穩(wěn)壓力傳感器問(wèn)題泵排氣不充分泵失效流動(dòng)相未正確脫氣所用溶劑不混溶或易揮發(fā)HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析系統(tǒng)壓力問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題基線不穩(wěn)定(不重復(fù))檢測(cè)池中有大的氣泡流路中有小氣泡流過(guò)系統(tǒng)未穩(wěn)定或未達(dá)到化學(xué)平衡流動(dòng)相被污染檢測(cè)器流動(dòng)池漏色譜柱污染HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題基線漂移系統(tǒng)不穩(wěn)或未化學(xué)平衡溫度波動(dòng)流動(dòng)相未正確脫氣流動(dòng)相被污染;流動(dòng)相中有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑變化檢測(cè)器流動(dòng)池漏;系統(tǒng)中有滲漏色譜柱污染;固定相滲漏選用不正確的檢測(cè)波長(zhǎng)(相對(duì)于溶劑)有遲流出的組分HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題短程振蕩泵壓不穩(wěn)泵入口管松,彎或堵塞溶劑混合不充分檢測(cè)池中有大氣泡泵入口閥臟或失效泵柱塞桿密封墊磨損檢測(cè)器出口溶液成滴狀流入廢液瓶HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題長(zhǎng)程振蕩溫度波動(dòng)溶劑被循環(huán)通過(guò)系統(tǒng)噪音脈沖尖刺流路中有小氣泡泵頭有氣泡空腔入口閥臟或失效檢測(cè)池中有小顆粒物泵或檢測(cè)器未正確接地HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析流路基線噪音問(wèn)題HPLC常見(jiàn)問(wèn)題分析判斷故障與故障排除的原則規(guī)則一∶確認(rèn)問(wèn)題至少發(fā)生兩次以上。如果問(wèn)題不重復(fù)出現(xiàn)，很難證實(shí)其確實(shí)為問(wèn)題規(guī)則二∶從最簡(jiǎn)單的因素入手規(guī)則三∶一次只變化一個(gè)因素，以使你能夠確認(rèn)所變因素與問(wèn)題之間的關(guān)聯(lián)判斷故障與故障排除的原則規(guī)則一∶確認(rèn)問(wèn)題至少發(fā)生兩次以上。如判斷故障與故障排除的原則規(guī)則四∶恢復(fù)原狀。如果使用更換組件方法來(lái)查找問(wèn)題之所在,完畢后應(yīng)將原有完好組件安裝回原處。否則,換下的組件將來(lái)很難再利用,會(huì)造成浪費(fèi)規(guī)則五∶養(yǎng)成記錄的好習(xí)慣。一個(gè)完整的好記錄是成功地進(jìn)行故障排除的關(guān)鍵判斷故障與故障排除的原則規(guī)則四∶恢復(fù)原狀。如果使用更換組件方人文科學(xué)：文學(xué)、語(yǔ)言學(xué)廣義文科社會(huì)科學(xué)：法學(xué)，經(jīng)濟(jì)學(xué)，政治學(xué)，新聞學(xué)，社會(huì)學(xué)，歷史學(xué)，哲學(xué)什么是文理科分科？自然科學(xué)；理學(xué)：物理學(xué)，化學(xué)；工學(xué)：建筑，土木工程，機(jī)械工程，電子工程；農(nóng)學(xué)；醫(yī)學(xué)數(shù)學(xué)廣義理科人文科學(xué)：廣義文科社會(huì)科學(xué)：法學(xué)，經(jīng)濟(jì)學(xué)，政治學(xué)，新聞學(xué)，社142文科：研究人、社會(huì)規(guī)律研究對(duì)象理科：研究物、自然規(guī)律文科：思辨性強(qiáng)，實(shí)證性弱，重歸納，總結(jié)，聯(lián)系理科：思辨性弱，實(shí)證性強(qiáng)，重實(shí)踐，內(nèi)在邏輯的建立研究特點(diǎn)文科：研究人、社會(huì)規(guī)律研究對(duì)象理科：研究物、文科：思辨性強(qiáng)，143高中學(xué)習(xí)的科目理科語(yǔ)文數(shù)學(xué)英語(yǔ)物理化學(xué)生物文科語(yǔ)文數(shù)學(xué)英語(yǔ)政治歷史地理高中學(xué)習(xí)的科目理科144狹義文科：歷史，政治，地理高中的文理科狹義理科：物理，化學(xué)，生物文理分科核心含義文理分科最大作用區(qū)分了考試科目和報(bào)考專(zhuān)業(yè)確定主攻方向，能強(qiáng)化重點(diǎn)科目的學(xué)習(xí)，為科學(xué)安排時(shí)間打下基礎(chǔ)，也直接影響高考的成敗，影響將來(lái)的就業(yè)。狹義文科：高中的文理科狹義理科：文理分科核心含義文理分科最大145文科特點(diǎn)人才特點(diǎn)：以論理和表達(dá)為主要能力的形象思維。學(xué)習(xí)特點(diǎn)：以記憶、歸納、整理、比較為特點(diǎn)的學(xué)習(xí)。文科記憶量較大，理解能力要求較高。就業(yè)面：以社會(huì)為對(duì)象的事務(wù)性人才，從事媒體傳播、金融財(cái)會(huì)、社會(huì)服務(wù)和教育等行業(yè)文科比較好工作：金融財(cái)會(huì)，高級(jí)翻譯，法官，檢察官，外交官，證券類(lèi),經(jīng)濟(jì)師，律師，營(yíng)銷(xiāo)師，公務(wù)員，旅游等。人才特點(diǎn)：以推理和研究為主要能力的邏輯思維。學(xué)習(xí)特點(diǎn)：以記憶、理解、推理、計(jì)算為特點(diǎn)的學(xué)習(xí)。理科需要推理能力強(qiáng)，邏輯思維能力強(qiáng)。就業(yè)面：以技術(shù)為對(duì)象的生產(chǎn)型人才，可從事的職業(yè)類(lèi)型較多。理科比較好工作：光電類(lèi)，醫(yī)學(xué)類(lèi)，會(huì)計(jì)師，公務(wù)員，工程師等。理科特點(diǎn)

文科特點(diǎn)人才特點(diǎn)：以論理和表達(dá)為主要能力的形象思維。人才特點(diǎn)146關(guān)于高考理科語(yǔ)文（總分150）：6月7日早上，兩個(gè)半小時(shí)數(shù)學(xué)（總分150）：6月7日下午，兩個(gè)小時(shí)理科綜合（總分300分，物理110，化學(xué)100，生物90）：6月8日早上，兩個(gè)半小時(shí)英語(yǔ)（總分150）：6月8日下午，兩個(gè)小時(shí)關(guān)于高考理科147關(guān)于高考文科語(yǔ)文（總分150）：6月7日早上，兩個(gè)半小時(shí)數(shù)學(xué)（總分150）：6月7日下午，兩個(gè)小時(shí)文科綜合（總分300分，政治100，歷史100，地理100）：6月8日早上，兩個(gè)半小時(shí)英語(yǔ)（總分150）：6月8日下午，兩個(gè)小時(shí)關(guān)于高考文科148廣西12-15年高考各批次錄取分?jǐn)?shù)線

理科文科一本二本三本一本二本三本2012528444332544473409201351041331054146739520145204073265504634042015480320530380廣西12-15年高考各批次錄取分?jǐn)?shù)線理科文科一本二本三本一149文科、理科到底有什么專(zhuān)業(yè)呢！？1哲學(xué)

2社會(huì)學(xué)

3社會(huì)工作

4應(yīng)用心理學(xué)

5勞動(dòng)與社會(huì)保障

6漢語(yǔ)言文學(xué)

7新聞學(xué)

8廣告學(xué)

9播音與主持藝術(shù)

10歷史學(xué)

11考古學(xué)

12博物館學(xué)

13英語(yǔ)

14俄語(yǔ)

15西班牙語(yǔ)

16日語(yǔ)

17朝鮮語(yǔ)

18藝術(shù)設(shè)計(jì)

19繪畫(huà)

20音樂(lè)表演

21音樂(lè)學(xué)

22作曲與作曲技術(shù)理論

23社會(huì)體育

24運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練

25經(jīng)濟(jì)學(xué)

26國(guó)際經(jīng)濟(jì)與貿(mào)易

27財(cái)政學(xué)

28金融學(xué)

29法學(xué)

30政治學(xué)與行政學(xué)

31國(guó)際政治

32行政管理

33思想政治教育文科文科、理科到底有什么專(zhuān)業(yè)呢??？1哲學(xué)

2社會(huì)學(xué)

3社會(huì)150文科、理科到底有什么專(zhuān)業(yè)呢！？理科數(shù)學(xué)與應(yīng)用數(shù)學(xué)

信息與計(jì)算科學(xué)

理論與應(yīng)用力學(xué)

統(tǒng)計(jì)學(xué),物理學(xué)

應(yīng)用物理學(xué)

光信息科學(xué)與技術(shù)

化學(xué),應(yīng)用化學(xué)

高分子材料與工程

化學(xué)工程與工藝

材料化學(xué)

生物科學(xué),生物技術(shù)

制藥工程

機(jī)械工程及自動(dòng)化

工程力學(xué),工業(yè)工程

車(chē)輛工程,工業(yè)設(shè)計(jì)

熱能與動(dòng)力工程

材料物理

材料科學(xué)與工程

無(wú)機(jī)非金屬材料

材料成型與控制工程

金屬材料工程

交通運(yùn)輸,交通工程

土木工程

食品科學(xué)與工程

包裝工程,生物工程

農(nóng)業(yè)機(jī)械化及其自動(dòng)化,電子信息科學(xué)與技術(shù),微電子技術(shù)

電子科學(xué)與技術(shù)

文科、理科到底有什么專(zhuān)業(yè)呢！？理科數(shù)學(xué)與應(yīng)用數(shù)學(xué)151物流工程

食品質(zhì)量與安全

汽車(chē)服務(wù)工程

藥物制劑

醫(yī)事法學(xué)

動(dòng)物醫(yī)學(xué)

動(dòng)物科學(xué)

農(nóng)學(xué)

園藝

植物保護(hù)

農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境

服裝設(shè)計(jì)與工程

物流管理

農(nóng)林經(jīng)濟(jì)管理

地下水科學(xué)與工程理科自動(dòng)化,信息工程,計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)

地質(zhì)學(xué),地理科學(xué),資源環(huán)境與城鄉(xiāng)規(guī)劃管理

資源勘查工程,土地資源管理,地球物理學(xué)

地理信息系統(tǒng),勘查技術(shù)與工程,測(cè)繪工程

環(huán)境工程,環(huán)境科學(xué),水文學(xué)與水資源工程

預(yù)防醫(yī)學(xué),放射醫(yī)學(xué),臨床醫(yī)學(xué),口腔醫(yī)學(xué)

藥學(xué),護(hù)理學(xué),軟件工程,信用管理物流工程

食品質(zhì)量與安全

汽車(chē)服務(wù)工程

藥物制劑

醫(yī)事法學(xué)

152Ⅰ經(jīng)濟(jì)學(xué)Ⅱ國(guó)際經(jīng)濟(jì)與貿(mào)易Ⅲ新聞學(xué)Ⅳ電子信息科學(xué)與技術(shù)Ⅴ財(cái)政學(xué)Ⅵ信息與計(jì)算科學(xué)Ⅶ會(huì)計(jì)學(xué)Ⅷ自動(dòng)化Ⅸ檔案學(xué)Ⅹ公共事業(yè)管理中國(guó)目前就業(yè)面最廣的十大高考專(zhuān)業(yè)盤(pán)點(diǎn)Ⅰ經(jīng)濟(jì)學(xué)中國(guó)目前就業(yè)面最廣的十大高考專(zhuān)業(yè)盤(pán)點(diǎn)153近年來(lái)十大熱門(mén)專(zhuān)業(yè)1.金融2.建筑、設(shè)計(jì)3.通訊4.計(jì)算機(jī)、信息技術(shù)5.電氣工程6.電子商務(wù)7.工業(yè)設(shè)計(jì)8.國(guó)際關(guān)系9.法律10.土木工程近年來(lái)十大熱門(mén)專(zhuān)業(yè)1.金融6.電子商務(wù)154文理選科的重要性表現(xiàn)為三個(gè)方面：選擇錯(cuò)位，容易讓自己在最近的學(xué)業(yè)上，缺乏興趣，欠缺激情，效率低下，效果低微，從而直接影響高考的成功。選擇錯(cuò)位，可能使自己在高考填報(bào)志愿意中不知何從選擇，造成選錯(cuò)專(zhuān)業(yè)，選錯(cuò)學(xué)校，進(jìn)大學(xué)后學(xué)習(xí)沒(méi)興趣，甚至自己退學(xué)回家。

選擇錯(cuò)位，可能使自己在以后的事業(yè)中，沒(méi)有敬業(yè)精神，沒(méi)有工作熱情，工作效率低下，事業(yè)高度有限，以致深刻地影響事業(yè)的成功。文理選科的重要性表現(xiàn)為三個(gè)方面：選擇錯(cuò)位，容易讓自己在最近的155應(yīng)盡量避免選擇文理的誤區(qū)

1、“墻頭草”現(xiàn)象。班里或者學(xué)校里，哪科報(bào)的多，我就報(bào)哪科。2、根據(jù)傳統(tǒng)觀念，不認(rèn)真了解現(xiàn)在的實(shí)際情況，自認(rèn)為哪種類(lèi)型好就選哪種。3、分班態(tài)度不端正，認(rèn)為哪科好念就選哪科。學(xué)習(xí)好的報(bào)理科，學(xué)習(xí)差的人才學(xué)文科。智力好的報(bào)理科，智力差的人才學(xué)文科。4、過(guò)早的為將來(lái)工作尋找門(mén)路，認(rèn)為哪科好賺錢(qián)就選哪科5、情感取向型。認(rèn)為某某教師有魅力，某某同學(xué)和自己關(guān)系特別好，隨之選擇6、班級(jí)依戀癥。認(rèn)為目前班級(jí)好、和諧，感情深，對(duì)陌生的環(huán)境恐懼。7、和父母賭氣，家長(zhǎng)想讓我學(xué)理，我偏學(xué)文。

以上這些都不是選擇文理的好依據(jù)，而且常常是導(dǎo)致選擇后學(xué)習(xí)困難的主要原因。又有70%以上的學(xué)生因?yàn)檫@些原因選擇了不適合自己的科目，后悔莫及。

應(yīng)盡量避免選擇文理的誤區(qū)1、“墻頭草”現(xiàn)象。班里或者學(xué)校里156女生讀文科更合適嗎？

目前有一種很普遍的現(xiàn)象，高中文理分科時(shí)，男生偏理，女生偏文。一個(gè)文科班，五十幾個(gè)學(xué)生，男生只有十來(lái)名，如何看待文科班這種“陰盛陽(yáng)衰”的現(xiàn)象？是因?yàn)榕m合讀文科嗎？女生認(rèn)識(shí)上更傾向于形象思維，她們感受力、洞察力比較強(qiáng)，有表達(dá)上的優(yōu)勢(shì)，選擇文科是正常的；而男生傾向于關(guān)注自然科學(xué)，喜歡技術(shù)研究、開(kāi)發(fā)創(chuàng)新，分析力、判斷力強(qiáng)，邏輯思維發(fā)達(dá)，選擇理科也在常理之中。不過(guò)，這兩者之間沒(méi)有絕對(duì)的界限，關(guān)鍵還是前面提到的要看學(xué)生個(gè)人的興趣愛(ài)好以及學(xué)習(xí)個(gè)性能力的傾向。如何找到和發(fā)現(xiàn)自己的特長(zhǎng)、天賦、能力？這要看學(xué)生自己對(duì)學(xué)科的感覺(jué)?？赡苓@個(gè)學(xué)生會(huì)對(duì)某個(gè)學(xué)科感覺(jué)特別好，或用相同的時(shí)間或少量的時(shí)間獲得的效果與其它學(xué)科花學(xué)費(fèi)多時(shí)間獲得的效果相當(dāng)或更好，那說(shuō)明這個(gè)學(xué)生有學(xué)習(xí)這一科的特長(zhǎng)和能力，與此同時(shí)就應(yīng)該考慮，哪一科能更好地發(fā)揮和促進(jìn)自己的特長(zhǎng)發(fā)展。一些選擇理科的男生如果在女生成堆的文科班里，可能會(huì)更加出類(lèi)拔萃。從目前看，女生偏愛(ài)語(yǔ)言、文學(xué)等文科類(lèi)專(zhuān)業(yè)，這并不是因?yàn)榕狈?chuàng)造性思維和科學(xué)能力，而是女生教育中缺失了這部分內(nèi)容，有不少人都認(rèn)為這些應(yīng)該讓男生去做。

女生讀文科更合適嗎？目前有一種很普遍的現(xiàn)157理科生就業(yè)面更廣泛？

文理分科，大家關(guān)心的另外一個(gè)問(wèn)題是，針對(duì)大學(xué)畢業(yè)之后的就業(yè)，文科與理科之間到底哪一個(gè)優(yōu)勢(shì)更大？目前就業(yè)的情況對(duì)理科生是比較有利，企業(yè)需要的理科生比較多，但是，并不是學(xué)文科的都無(wú)法分配工作，畢業(yè)就是失業(yè)。選擇了理科，并不意味著已經(jīng)捧上了金飯碗；選擇了文科，也同樣不會(huì)注定這個(gè)人就默默無(wú)聞。重理輕文現(xiàn)象歷來(lái)存在，但社會(huì)的發(fā)展越來(lái)越多元化，對(duì)人才的需求越來(lái)越多，只要有實(shí)力，不論是學(xué)文還是學(xué)理，都能在社會(huì)上找到自己的位置。從現(xiàn)在看，盡管文理科錄取比例有區(qū)別，但總量還是相當(dāng)龐大的。不論選文還是選理，你都有較大的升學(xué)機(jī)會(huì)?，F(xiàn)在的關(guān)鍵是，你在選擇之后如何適應(yīng)文理科的學(xué)習(xí)要求。理科生就業(yè)面更廣泛？文理分科，大家關(guān)心的另外一個(gè)問(wèn)題是，針158選擇文科理科是高中生活的一次重大選擇，是今后人生道路的分水嶺，要慎重，慎重，慎重。選文科好還是選理科？其實(shí)主要的分科標(biāo)準(zhǔn)就是好好分析一下自己，從以下幾個(gè)方面來(lái)考慮：

1、你的實(shí)力。2、你的興趣與特長(zhǎng)。

3、你的志向。4、你的態(tài)度。5、你的家庭情況。四、怎樣選擇文理選擇文科理科是高中生活的一次重大選擇，是今后人生道路的分水嶺159

有些同學(xué)認(rèn)為自己實(shí)在讀不了理科，而選擇文科，這種現(xiàn)象是很多的，但高考過(guò)后才醒悟過(guò)來(lái)，后當(dāng)初沒(méi)有慎重選擇。因此，選擇文科還是選擇理科，還要注意從實(shí)際出發(fā)，揚(yáng)長(zhǎng)避短。好好分析一下你的現(xiàn)實(shí)情況，看看你的優(yōu)勢(shì)在哪里。你的文理水平差多少，你的潛力在哪兒？特長(zhǎng)于語(yǔ)言、寫(xiě)作方面還是運(yùn)算、邏輯推理？在每次大考中你是憑什么取勝，又是什么拖了你的后腿，這就要認(rèn)真分析，整體把握。如果你的政治、歷史，遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于你的物理化學(xué)，你就去讀文科，因?yàn)槌煽?jī)本身就反映了很多問(wèn)題，比方你的興趣，你的思維方式，智力優(yōu)勢(shì)等。

你的實(shí)力有些同學(xué)認(rèn)為自己實(shí)在讀不了理科，而選擇文科，這種現(xiàn)160

1、你有較強(qiáng)的邏輯推斷能力，動(dòng)手能力較強(qiáng)。

2、數(shù)學(xué)、理化基礎(chǔ)比較好，理科之間有更多相通之處，會(huì)互相促進(jìn)。

3、記憶力較強(qiáng)，能準(zhǔn)確記憶各類(lèi)公式。

4、以后想從事理工方面的工作，比如：計(jì)算機(jī)、電子、建筑設(shè)計(jì)、土木工程、管理信息、生物工程、醫(yī)學(xué)、制藥、應(yīng)用化學(xué)、農(nóng)業(yè)等、會(huì)計(jì)師,公務(wù)員,老師,工程師；會(huì)計(jì)學(xué)、市場(chǎng)營(yíng)銷(xiāo)、財(cái)務(wù)管理。5、學(xué)校的理科畢業(yè)生情況總優(yōu)于文科。6、各科基礎(chǔ)薄弱、學(xué)習(xí)成績(jī)較差、學(xué)習(xí)主動(dòng)性不強(qiáng)、不愛(ài)看書(shū)。如果你有下面幾項(xiàng)建議選擇理科：學(xué)理科進(jìn)入重點(diǎn)大學(xué)的條件：

數(shù)學(xué)好；

物理、化學(xué)至少有一科在前列；英語(yǔ)不差；不喜歡文科。

1、你有較強(qiáng)的邏輯推斷能力，動(dòng)手能力較強(qiáng)。

2、數(shù)學(xué)、理161如果你有下面幾項(xiàng)建議選擇文科：1、語(yǔ)文、數(shù)學(xué)、英語(yǔ)、政史地基礎(chǔ)好，理化成績(jī)一般，尤其語(yǔ)文、外語(yǔ)內(nèi)容有很多與政史地是相通的，會(huì)互相促進(jìn)

。2、記憶力強(qiáng)，善于聯(lián)想。3、自己知識(shí)面廣。4、喜歡看各類(lèi)書(shū)籍。5、有一定的文化積淀。6、以后想從事以下方面的工作，比如：法官、律師、老師、營(yíng)銷(xiāo)師、公務(wù)員、旅游、證券類(lèi)、國(guó)際經(jīng)貿(mào)、金融學(xué)、保險(xiǎn)學(xué)、財(cái)政學(xué)、貿(mào)易經(jīng)濟(jì)、物流、語(yǔ)言文學(xué)、新聞、廣告學(xué)、考古、管理、勞動(dòng)與社會(huì)保障、會(huì)計(jì)學(xué)、市場(chǎng)營(yíng)銷(xiāo)、財(cái)務(wù)管理、心理學(xué)等。學(xué)文科進(jìn)入重點(diǎn)大學(xué)的條件：在文科高考中，最拉分的就是數(shù)學(xué)和英語(yǔ)。數(shù)學(xué)能拿出手；

英語(yǔ)也不差；能看得下去書(shū)，整理和記憶能力強(qiáng)；理化生沒(méi)有很高的天賦，成績(jī)平平。

如果你有下面幾項(xiàng)建議選擇文科：1、語(yǔ)文、數(shù)學(xué)、英語(yǔ)、政史地基162

興趣是學(xué)好一門(mén)功課的重要因素，興趣和愛(ài)好可以決定你的學(xué)習(xí)態(tài)度。有了興趣，可以使高二、高三學(xué)習(xí)變得多姿多彩。有了興趣，才可以讓你全身心的投入學(xué)習(xí)，而不會(huì)抱怨聲不斷。因?yàn)槟闩d趣所在，所以你的學(xué)習(xí)是為你自己學(xué)，而不是因?yàn)槭歉改缸屇阕x這個(gè)科目而顯得壓力重重。喜歡學(xué)文，感覺(jué)學(xué)文科有優(yōu)勢(shì)的學(xué)生，我們建議他學(xué)文；同樣，喜歡學(xué)理，邏輯能力強(qiáng)的學(xué)生，我們建議學(xué)理。但無(wú)論你學(xué)習(xí)文還是理,沒(méi)有一定興趣就會(huì)在競(jìng)爭(zhēng)中喪失主動(dòng)性,這在高三體現(xiàn)的尤為明顯.07屆文科班有名學(xué)生，在分班之前一直成績(jī)平平，分班后，成績(jī)突飛猛進(jìn)，高考在區(qū)內(nèi)前五名。后來(lái)她說(shuō)，“我從小就鐘愛(ài)文科，并一直保持到高中，所以選了文科并獲得了成功”。

你的興趣興趣是學(xué)好一門(mén)功課的重要因素，興趣和愛(ài)好可以決163

讀文、讀理，對(duì)于大家今后的志愿是