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G﹢菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子(fēnzǐ)形成一種透性障,當(dāng)乙醇脫色時(shí),肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶(jiéjīng)紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,沙黃復(fù)染后呈紅色。革蘭氏染色(rǎnsè)原理:第一步:結(jié)晶紫使菌體著上紫色第二步:碘和結(jié)晶紫形成脂溶性大分子復(fù)合物,分子大,能被細(xì)胞壁阻留在細(xì)胞內(nèi)。第三步:酒精脫色,細(xì)胞壁成分和構(gòu)造不同,出現(xiàn)不同的反應(yīng)。第四步:沙黃復(fù)染,增加脫色菌與背景的反差并區(qū)別于未脫色菌。第一頁,共十五頁。溶菌酶對細(xì)胞壁的作用(zuòyòng)◆可切斷NAM和NAG之間的—1,4糖苷鍵,引起細(xì)菌裂解(lièjiě)。
◆對Gˉ菌,在EDTA存在下,受溶菌酶作用。◆溶菌酶處理后的菌細(xì)胞應(yīng)保存在弱高滲(0.1~0.2M)蔗糖液中。第二頁,共十五頁。青霉素對細(xì)菌(xìjūn)細(xì)胞壁的作用Penicillium與轉(zhuǎn)肽酶結(jié)合(jiéhé),而使該酶失活,抑制了側(cè)鏈末端的丙氨酸與五肽橋的連接,破壞了細(xì)菌細(xì)胞壁的完整性(即抑制肽聚糖的合成),因此,Penicillium僅對正在生長著的細(xì)菌,且主要是對G+菌有效。第三頁,共十五頁。﹙6﹚周質(zhì)空間(kōngjiān)(periplasmicspace)又稱壁膜空間。指位于細(xì)胞(xìbāo)壁與細(xì)胞(xìbāo)膜之間的狹窄間隙,革蘭氏陽性細(xì)菌與陰性細(xì)菌均有。內(nèi)中含有多種蛋白質(zhì),例如蛋白酶、核酸酶等各種解聚酶,運(yùn)送某些物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞(xìbāo)的結(jié)合蛋白,以及趨化性的受體蛋白等。
第四頁,共十五頁。Table8.RepresentativeperiplasmicproteinsinE.coli.
Bindingproteins
Foraminoacids(e.g.histadine,arginine)
Forsugars(e.g.glucose,maltose)
Forvitamins(e.g.thiamine,vitaminB12)
Forions(e.g.phosphate,sulfate)
Biosyntheticenzymes
Formureinassembly(e.g.transglycosylases,carboxypeptidases,transpeptidases)
Forfimbrialsubunitsecretionandassembly(e.g.chaperonins)
Degradativeenzymes
phosphatases
proteases
Detoxifyingenzymes
Beta-lactamases(e.g.penicillinase)
Aminoglycoside-phosphorylatingenzymes第五頁,共十五頁。﹙7﹚細(xì)胞壁缺損型細(xì)菌(xìjūn)①原生質(zhì)體protoplast②球形體spheroplast③L型細(xì)菌(xìjūn)L-form★原生質(zhì)體的特點(diǎn):1、無細(xì)胞壁,為圓球形2、對環(huán)境(huánjìng)敏感:滲透壓,震蕩,離心,易溶菌3、有鞭毛,而不能運(yùn)動4、不被噬菌體感染(因?yàn)槭ノ轿稽c(diǎn))第六頁,共十五頁。﹙二﹚細(xì)胞膜(cytoplasticmembrane)1.概念:細(xì)胞膜是緊貼細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)包圍細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟,富有(fùyǒu)彈性的半透明薄膜。2.觀察(guānchá)分離方法:(1)質(zhì)壁分離(2)選擇性染色(3)電鏡技術(shù)(4)溶菌酶處理第七頁,共十五頁。1972年Singer和Nicolson提出(tíchū)的細(xì)胞膜液態(tài)鑲嵌模型4.細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)(jiégòu)與化學(xué)組成細(xì)胞膜液態(tài)鑲嵌(xiāngqiàn)模型認(rèn)為:膜是由球形蛋白與磷脂按照二維排列方式構(gòu)成的流體鑲嵌式,流動的脂類雙分子層構(gòu)成了膜的連續(xù)體,而蛋白質(zhì)象孤島一樣無規(guī)則地漂流在磷脂類的海洋當(dāng)中。第八頁,共十五頁。Figure10.Fluidmosaicmodelofabiologicalmembrane.Inaqueousenvironmentsmembranephospholipidsarrangethemselvesinsuchawaythattheyspontaneouslyformafluidbilayer.Membraneproteins,whichmaybestructuralorfunctional,maybepermanentlyortransientlyassociatedwithonesideortheotherofthemembrane,orevenbepermanentlybuiltintothebilayer,whileotherproteinsspanthebilayerandmayformtransportchannelsthroughthemembrane.
第九頁,共十五頁。第十頁,共十五頁。第十一頁,共十五頁。5.細(xì)胞膜的功能(gōngnéng):a)
控制細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)(營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物)的運(yùn)送、交換;
b)
維持細(xì)胞內(nèi)正常滲透壓的滲透屏障作用;
c)
合成(héchéng)細(xì)胞壁各種組分(LPS、肽聚糖、磷壁酸)和莢膜物質(zhì)等大分子的場所;
d)
進(jìn)行氧化磷酸化或光合磷酸化的產(chǎn)能基地;
e)
參與能量代謝,在細(xì)菌中,電子傳遞鏈和ATP合成酶均位于細(xì)胞膜;
f)
提供鞭毛的著生點(diǎn)并提供鞭毛運(yùn)動所需能量。
第十二頁,共十五頁。Table6.Functionsoftheprocaryoticplasmamembrane.
1.Osmoticorpermeabilitybarrier
2.Locationoftransportsystemsforspecificsolutes(nutrientsandions)
3.Energygeneratingfunctions,involvingrespiratoryandphotosyntheticelectrontransportsystems,establishmentofprotonmotiveforce,andtransmembranous,ATP-synthesizingATPase4.Synthesisofmembranelipids(includinglipopolysaccharideinGram-negativecells)
5.Synthesisofmurein(cellwallpeptidoglycan)
6.Assemblyandsecretionofextracytoplasmicproteins
7.CoordinationofDNAreplicationandsegregationwithseptumformationandcelldivision
8.Chemotaxis(bothmotilityperseandsensingfunctions)
9.Locationofspecializedenzymesystem第十三頁,共十五頁。﹙三﹚內(nèi)膜系統(tǒng)間體(mesosome):細(xì)胞膜內(nèi)褶形成的一種(yīzhǒnɡ)管狀、層狀或串狀物,一般位于細(xì)胞分裂的部位或附近。
間體的功能:(1)參與隔膜(gémó)形成(2)與核分裂有關(guān)(3)類似線粒體功能第十四頁,共十五頁。內(nèi)容
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