生化分離工程復習題2

生化分別工程復習題一、填空題1.生化分別過程主要包括四個方而：預辦理、細胞分別、純化、產(chǎn)品加工。發(fā)酵液常用固液分別方法有積淀法和結(jié)晶法等。3.膜分別過程中所使用膜，依照其膜特點（孔徑）不相同可分為微濾膜、超濾膜、納濾膜和反浸透膜；4.離子交換分別操作中，常用洗脫方法簡單洗脫和梯度洗脫。5.等電聚焦電泳法分別不相同蛋白質(zhì)原理是依照其_______________不同。典型工業(yè)過濾設(shè)備有板框壓濾機和轉(zhuǎn)筒真空過濾機。常用蛋白質(zhì)沉析方法有鹽析法、等電點積淀和有機溶劑積淀。8.離子交換樹脂由___________、活性基團_____________和可交換離子組成。超臨界流體特點是及氣體有相似擴散性能，及液體有相似密度。二、單項選擇題供生產(chǎn)生物藥物生物質(zhì)源不包括（D）A.動物B.植物C.微生物D.礦物質(zhì)以下哪個不屬于初步純化：（C）A.積淀法B.吸附法C.親和層析D.萃取法HPLC是哪一種色譜簡稱（C）。A.離子交換色譜B.氣相色譜C.髙效液相色譜D.凝膠色譜4.其他條件均相同時，優(yōu)先采用那種固液分別手段（B）A.離心分別B.過濾C.沉降D.超濾適合小量細胞破碎方法是（C）A.高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法6.有機溶劑積淀法中可使用有機溶劑為（D）A.乙酸乙酯B.正丁醇C.苯D.丙酮7.液-液萃取常常發(fā)生乳化作用，如何防范（D）A.激烈攪拌B.低溫C.靜止D.加熱鹽析法及有機溶劑積淀法比較，其優(yōu)點是（B）A.分辨率高B.變性作用小C.雜質(zhì)易除D.積淀易分別工業(yè)上常用過濾介質(zhì)不包括（D）A.織物介質(zhì)B.積聚介質(zhì)C.多孔固體介質(zhì)D.真空介質(zhì)哪一種膜孔徑最小（C）A.微濾B.超濾C.反浸透D.納米過濾用于蛋白質(zhì)分別過程中脫鹽和更換緩沖液色譜是（C）A.離子交換色譜B.親和色譜C.凝膠過濾色譜D.反相色譜12.“近似物簡單吸周邊似物”原則，一般極性吸附劑適合于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)（B）A.極性溶劑B.非極性溶劑C.水D.溶劑13.以下細胞破碎方法中，哪個方法屬于非機械破碎法（A）A.化學法B.髙壓勻漿C.超聲波破碎D.高速珠磨14.離子交換樹脂適用（A）進行溶脹1/4A.水B.乙醇C.氫氧化鈉D.鹽酸使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（D）A.氯化鈉B.硫酸C.硝酸汞D.硫酸彼超臨界流體萃取法適用于提取（B）A.極性大成分B.極性小成分C.離子型化合物D.能氣化成分最常用干燥方法有（D）A.常壓干燥B.減壓干燥C.噴霧干燥D.以上都是分子篩層析指是（C）A.吸附層析B.分配層析C.凝膠過濾D.親和層析為加快過濾收效平時使用（C）A.電解質(zhì)B.髙分子聚合物C.惰性助濾劑D.活性助濾劑影響電泳分別主要因素（B）A.光照B.待分別生物大分子性質(zhì)C.濕度D.電泳時間發(fā)酵液預辦理方法不包括（C）A.加熱B.絮凝C.離心D.調(diào)pH哪一種細胞破碎方法適用工業(yè)生產(chǎn)（A）A.髙壓勻漿B.超聲波破碎C.浸透壓沖擊法D.酶解法23.液-液萃取常常發(fā)生乳化作用，如何防范（D）A.激烈攪拌B.低溫C.靜止D.加熱24.在匍聚糖及聚乙二醇形成雙水相系統(tǒng)中，目標蛋白質(zhì)存在于（A）A.上相B.下相C.匍聚糖相D.以上都有可能使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（D）A.氯化鈉B.硫酸C.硝酸汞D.硫酸讓超濾技術(shù)常被用作（C）A.小分子物質(zhì)脫鹽和濃縮B.小分子物質(zhì)分級分別C.小分子物質(zhì)純化D.固液分別吸附色譜分別依照是（A）＜.A.固定相對各物質(zhì)吸附力不相同B.各物質(zhì)分子大小不相同C.各物質(zhì)在流動相和固定相分配系數(shù)不相同D.各物質(zhì)及專一分子親和力不相同28.人血淸淸蛋白等電點為4.64,在pH為7溶液中將血淸蛋白質(zhì)溶液通電，淸蛋白質(zhì)分子向（A）A.正極搬動B.負極搬動C.不搬動D.不確定。蛋白質(zhì)分子量測宦可采用（C）方法。A.離子交換層析B.親和層析C.凝膠層析D.聚酰胺層析陰離子交換劑（C）。A.可交換為陰、陽離子B.可交換為蛋白質(zhì)C.可交換為陰離子D.可交換為陽離子31.下面哪一種是依照酶分子專一性結(jié)合純化方法（A）。A.親和層析B.凝膠層析C.離子交換層析D.鹽析以下哪項不是蛋白質(zhì)濃度測定方法（D）。A.凱氏泄氮法B.考馬斯亮藍法C.福林-酚法D.核磁共振33.物理萃取即溶質(zhì)依照（B）原理進行分別。2/4A.吸附B.相似相溶分子篩D.親和C.匍聚糖凝膠可使用那種溶劑溶脹（B）A.甲醇B.乙醇C.緩沖液D.乙酸乙酯35.疏水性相互作用層析平時在（D）條件下進行A.酸性B.堿性C.中性D.高濃度鹽溶液36.超臨界流體萃取中，如何降低溶質(zhì)溶解度達到分別目（C）A.降溫B.高升壓力C.升溫D.加入夾帶劑HPLC是哪一種色譜簡稱（C）。A.離子交換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜最常用干燥方法有（D）A.常壓干燥B.減壓干燥C.噴霧干燥D.以上都是三、判斷題1.細胞破碎技術(shù)是生化分別操作中必需步驟。（X）板框壓濾機可過濾所有菌體。（X）冷凍干燥適用于髙度熱敏生物物質(zhì)。（V）4.鹽析是利用不相同物質(zhì)在髙濃度鹽溶液中溶解度差異，向溶液中加入一左量中性鹽，使原溶解物質(zhì)沉淀析出分別技術(shù)。（V）5.要增加目物溶解度，常常要在目物等電點周邊進行提取。（X）助濾劑是一種可壓縮多孔微粒。（X）7.經(jīng)過加入某些反應(yīng)劑是發(fā)酵液進行預辦理方法之一。（V）8.珠磨法中適合地增加研磨劑裝量可提高細胞破碎率。（X）冷凍干燥適用于高度熱敏生物物質(zhì)。（V）10.氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點沉析。（V）蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì)，改變pH可改變其荷電性質(zhì)，pH>pI蛋白質(zhì)帶正電。（X）層析分別是一種化學分別方法。（X）13.層析點樣時用一根毛細管，吸取樣品溶液，在距薄層一端1.5-2cm初步線上點樣，樣品點直徑小于3mm=>（V）14.凝膠層析會使得大分子物質(zhì)后流岀，小分子物質(zhì)先流岀。（X）15.蛋白質(zhì)類生物大分子在鹽析過程中，最幸好高溫下進行，因為溫度高會增加其溶解度。（X>溶劑萃取中乳化現(xiàn)象必然存在。（X）17.要增加目物溶解度，常常要在目物等電點周邊進行提取。（X）18.應(yīng)用有機溶劑提取生化成分時，一般在較高溫度下進行。（X）19.氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點沉析。（V）色譜分別技術(shù)中固立相都是固體。（X）四、簡答題1.生化分別技術(shù)基本涵義及內(nèi)容？生化分別是從生物質(zhì)料、微生物發(fā)酵液、生物反應(yīng)液或動植細胞培養(yǎng)液中分別并純化有關(guān)生化產(chǎn)品（如擁有藥理活性作用生物藥物等）過程，又稱下游工程。發(fā)酵液一預辦理一細胞分別-*（細胞破碎一細胞碎片分別）一初步純化一高度純化一成品加工簡述生化分別過程特點？特點：1、目產(chǎn)物在初始物料（發(fā)酵液）中含量低：2、培養(yǎng)液是多組分混雜物，除少量產(chǎn)物外，還有3/4大量細胞及碎片、其他代謝物（幾百上千種）、培養(yǎng)基成分、無機鹽等；3、生化產(chǎn)物穩(wěn)左性低，易變質(zhì)、易失活、易變性，對溫度、pH值、重金屬離子、有機溶劑、剪切力、表而張力等特別敏感:4、對最后產(chǎn)質(zhì)量量要求髙簡述軟水和無鹽水制備方法？軟水制備：利用鈉型磺酸樹脂除去水中鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制得軟水。②無鹽水制備：將原水經(jīng)過氫型強酸性陽離子交換樹脂和疑型強堿或弱堿性陰離子交換樹脂組合，經(jīng)過離子交換反應(yīng)，將水中所有陰、陽離子除去，從而制得純度很髙無鹽純水。試述柱層析基本操作過程。答：1、裝柱：①干法裝柱②濕法裝柱注意：濕法裝柱中柱內(nèi)預留一部分水，防范氣泡產(chǎn)生，裝柱過程要連結(jié)。平衡。2、加樣：①干法加樣②濕法加樣注意：加樣過程中，要防范產(chǎn)生飛濺，量要適中。3、洗脫：以設(shè)泄好流速加入洗脫劑，可以是單一溶劑，也可以梯度洗脫。注意：不使柱表而溶液流干，柱上端保留一層溶液。4、收集：每隔10mL收集一試管，使用層析手段或紫外檢測器進行實時檢測，合并擁有相同物質(zhì)流份。簡述凝膠層析有哪些用途？1、脫鹽2、用于分別提純3、測泄髙分子物質(zhì)分子量4、髙唸自溶液濃縮簡述膜分別技術(shù)種類？微濾、納濾、超濾、反浸透、電滲析7.木瓜蛋白酶是一種本源廣泛植物蛋白酶，它對蛋白質(zhì)、短肽化合物、氨基酸酯以及酰胺等多類化合物水解反應(yīng)都擁有優(yōu)異催化活性。被廣泛應(yīng)用于肉類嫩化、啤酒澄淸、明膠制造、蠶繭脫膠、皮革脫毛等工業(yè)，在醫(yī)療衛(wèi)生方而用途遠景更為廣闊。木瓜蛋白酶生產(chǎn)以番木瓜未成熟果實新鮮乳汁為原料，如何改進生產(chǎn)工藝、提髙產(chǎn)品思疑已成為當前急需解決課題。請就木瓜蛋白酶粗品以及木瓜蛋白