維生素C及制劑的質(zhì)量控制設(shè)計(jì)研究綜述

...wd......wd......wd...摘要：維生素C，是一種無法通過人體自身合成的必需維生素，當(dāng)軀體缺乏此類維生素時(shí)將導(dǎo)致多種疾病，尤其是壞血病，其制劑在醫(yī)療保健各方面均發(fā)揮不可無視的作用，因此，對各種維生素C制劑進(jìn)展質(zhì)量控制，對其能否更好地進(jìn)入機(jī)體、發(fā)揮相應(yīng)的療效具有重要意義。目前用于維生素C質(zhì)量控制的方法有很多，如滴定法、光度分析法、高效液相色譜法等，各方法各有各的特點(diǎn)，本文將對近年來有關(guān)維生素C制劑的質(zhì)量控制研究方法進(jìn)展綜述。關(guān)鍵詞：維生素C；質(zhì)量控制；含量測定；維生素C〔vitaminC〕又稱L-抗壞血酸〔L-ascorbicacid〕，是一種水溶性維生素，能促進(jìn)骨膠原的生物合成，利于組織創(chuàng)傷口的更快愈合、促進(jìn)膠原蛋白的合成，防止牙齦出血、促進(jìn)牙齒和骨骼的生長，防止牙床出血，防止關(guān)節(jié)痛、腰腿痛。還能促進(jìn)氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代謝，延長肌體壽命、同時(shí)能改善鐵、鈣和葉酸的利用、改善脂肪和類脂特別是膽固醇的代謝，能夠預(yù)防心血管疾病，穩(wěn)固結(jié)締組織，增強(qiáng)肌體對外界環(huán)境的抗應(yīng)激能力和免疫力，其參與體內(nèi)多種生化反響，在生物氧化和復(fù)原作用以及細(xì)胞呼吸中起重要作用。最近更有科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，維生素C在預(yù)防癌癥、心臟病等都起了很重要的作用。市場上對維生素C的需求量在不斷增加，因此生產(chǎn)多種維生素C制劑以應(yīng)對各種需求，具有一定的必要性，而各種制劑能否更好地發(fā)揮相應(yīng)的醫(yī)療保健作用，那么與其質(zhì)量息息相關(guān)，故對維生素C及其制劑的質(zhì)量控制研究勢在必行，而又不可馬虎松懈。1.維生素C概況維生素C是一種水溶性維生素，純品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭、味酸，久置色漸變微黃，水溶液呈酸性,具有較強(qiáng)的復(fù)原性，加熱或在溶液中易氧化分解，在堿性條件下更易被氧化，為己糖衍生物。易溶于水，能溶于乙醇，而不溶于氯仿或乙醚，熔點(diǎn)為190～192℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。分子構(gòu)造中具有二烯醇和內(nèi)酯環(huán)構(gòu)造，且有兩個(gè)手性碳原子〔C4、C5〕，不僅使維生素C性質(zhì)極為活潑，且具有旋光性,比旋度+20.5°至+21.5°。其分子中的二烯醇基具有極強(qiáng)的復(fù)原性，易被氧化為二酮基而成為去氫抗壞血酸，加氫又可復(fù)原為抗壞血酸，在堿性溶液或強(qiáng)酸性溶液中能進(jìn)一步水解為二酮古羅糖酸[1]。由于雙鍵使內(nèi)酯環(huán)穩(wěn)定，和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解，但在強(qiáng)堿中，內(nèi)酯環(huán)可水解，生成酮酸鹽。具有糖類的性質(zhì)和反響。本品具有共軛構(gòu)造，在稀鹽酸溶液中于243nm波長處有最大吸收，為560，可用于鑒別和含量測定。假設(shè)在中性或者堿性條件中，最大吸收波長紅移至265nm。維生素C常見的劑型主要有注射劑、片劑、顆粒劑、泡騰片及膠囊劑等，由于維生素C特殊的化學(xué)特性，故總體的質(zhì)量控制及含量測定方法大同小異，大多是基于其具有強(qiáng)的復(fù)原性，可被不同氧化劑定量氧化而進(jìn)展。因容量分析法簡便快速、結(jié)果準(zhǔn)確，被各國藥典所采用，中國藥典中維生素C含量測定采用碘量法，此法測定時(shí)在判斷終點(diǎn)時(shí)可能產(chǎn)生人為的誤差，且新版藥店中碘滴定液的標(biāo)定改用硫代硫酸鈉反標(biāo)，增加了移液和判斷滴定終點(diǎn)的二重誤差。加上維生素C在含水介質(zhì)中，由于受光、空氣、溫度和pH影響，樣品溶液不穩(wěn)定使測定結(jié)果不理想[2]。故不少學(xué)者也嘗試著使用其他方法來進(jìn)展實(shí)驗(yàn)，2，6-二氯靛酚滴定法，電位滴定法、二甲苯二氯靛酚比色法、2，4-二硝基苯肼比色法、熒光分光光度法、HPLC法、毛細(xì)管電泳法、比濁測定法、極譜法等也相繼開展。整體看來，近年來使用色譜法的文獻(xiàn)報(bào)道比較多，以下將對多年來的文獻(xiàn)報(bào)道進(jìn)展綜述。2.含量測定方法2.12，6-二氯靛酚滴定法2，6-二氯靛酚為一染料，其顏色反響表現(xiàn)為兩種特性，一是取決于其氧化復(fù)原狀態(tài)，氧化態(tài)為深蘭色，復(fù)原態(tài)為無色；二是受其介質(zhì)的酸度影響，在堿性溶液中呈深蘭色，在酸性介質(zhì)中呈淺紅色。用蘭色的堿性指示劑標(biāo)準(zhǔn)溶液，對含有維生素C的酸性浸取液進(jìn)展氧化復(fù)原滴定，指示劑被復(fù)原為無色，當(dāng)?shù)竭_(dá)滴定終點(diǎn)時(shí)，多余的指示劑在酸性介質(zhì)中那么表現(xiàn)為紅色，由指示劑的用量就可以計(jì)算樣品中復(fù)原性抗壞血酸的含量。為解決2,6-二氯靛酚滴定法不適合用于有色溶液中的抗壞血酸測點(diǎn)問題，可以利用2,6-二氯靛酚能溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn)，以1,2-二氯乙烷為有機(jī)溶劑，用2,6-二氯靛酚滴定抗壞血酸，當(dāng)復(fù)原性抗壞血酸消耗殆盡，多滴入的2,6-二氯靛酚就會(huì)進(jìn)入有機(jī)層呈粉紅色，以此來判斷滴定終點(diǎn)。2，6-二氯靛酚滴定法特別適宜用于測定復(fù)原型維生素C，新鮮果品中以復(fù)原型Vc為主[3]。故此法也僅用于測定果蔬或果汁飲料內(nèi)的維生素C含量。2.2薄層掃描法薄層色譜法又稱原位定量薄層色譜掃描法，是指用一定的波長的光照照射在薄層板或試紙上，對薄層色譜中有紫外或可見吸收的斑點(diǎn)或經(jīng)照射能激發(fā)發(fā)生熒光的斑點(diǎn)進(jìn)展掃描，將掃描得到的圖譜及積分值用于藥品定性定量的分析方法。利用維生素C與2，6-二氯靛酚的特征反響，制備2，6-二氯靛酚試紙，點(diǎn)樣后用薄層掃描法測定維生素C片中的維生素C的含量，選擇290nm，420nm，雙波長反射式鋸齒掃描結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，樣品中的其它輔料不干擾。王迎春等在利用此法測定維生素C片劑中維生素C含量后總結(jié)出，點(diǎn)樣時(shí)各點(diǎn)間距應(yīng)大于10mm，點(diǎn)樣量在3-8μl之間線性關(guān)系較好，當(dāng)點(diǎn)樣量為10μl時(shí)，線性關(guān)系較差[4]。2.3薄層色譜法薄層色譜法〔TLC〕，系將適宜的固定相涂布于薄層板上，成一均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開后，根據(jù)比移值〔Rf〕與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值〔Rf〕作比照，用以進(jìn)展藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。如維生素C銀翹片這類成分復(fù)雜的制劑中維生素C的檢驗(yàn)，可以用薄層色譜法，取相當(dāng)于維生素C1mg的制劑配成1ml的溶液，點(diǎn)樣5μg就能得到滿意的效果。蔡毓瓊等就采用硅膠GF254—CMC-Na薄層板,以正戊醇-氯仿-甲酸(6∶2∶1)為展開劑，在紫外燈(254nm)下檢測,Rf值約0.6,最低檢出量1μg,驗(yàn)證了此方法直觀可靠,能得到滿意的結(jié)果。使用此法能使維生素C與制劑中其他成分完全別離，互不干擾。還能以斑點(diǎn)顏色深淺和大小初步判斷維生素C的含量上下，比化學(xué)方法檢測專屬性強(qiáng)，而且用量少，可適用于含維生素C的中藥制劑的鑒別[5]。2.4紫外分光光度法紫外分光光度法的根基是物質(zhì)對紫外光的選擇性吸收，是基于分子里價(jià)電子的能級(jí)之間的躍遷所產(chǎn)生的吸收。運(yùn)用此法具有分析速度快，重復(fù)性好，無污染等的特點(diǎn)，紫外吸收法除了與可見吸收光譜一樣，可以進(jìn)展定量分析，可以測定物質(zhì)的物理化學(xué)常數(shù)之外，還可以對物質(zhì)進(jìn)展定性的分析和構(gòu)造的分析。韓春雨[6]等人基于分光光度法測定雙組份的原理，在紫外光區(qū)測定了維生素C與維生素B混合物的含量，掃描雙組分樣品的吸收峰，根據(jù)吸收度的加和性原理，以維生素C和維生素B的濃度為未知項(xiàng)組成的二元一次方程組，通過求解方程得到各自的真實(shí)值。此外，還有重鉻酸鉀分光光度法以及磷鉬藍(lán)分光光度法。蔡卓等人以重鉻酸鉀為顯色劑，利用其與維生素C的褪色反響，通過測定反響體系吸光度變化值，確定維生素C含量[7]。磷鉬藍(lán)法是一種常用來測定微量磷含量的分光光度方法，利用磷鉬酸銨定量地與維生素C反響，生成磷鉬藍(lán)來測定其含量。該方法用過量的磷鉬酸銨測定微量的復(fù)原型維生素C，不會(huì)生成鉬藍(lán)，測試條件允許范圍較寬，抗干擾能力強(qiáng)，分析結(jié)果準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好[8]。適合于分析生物、藥物等試樣中微量維生素C的含量。2.5紅外分光光度法紅外分光光度法是利用物質(zhì)對紅外光的選擇吸收特性來進(jìn)展構(gòu)造分析、定性鑒定和定量測定的一種儀器分析方法。李銳等人以無水乙醇為溶劑對維生素C片進(jìn)展提取，采用溴化鉀壓片法對維生素C進(jìn)展紅外的定性鑒別[9]。得到的紅外吸收光譜與對照品的完全一致，并與?藥品紅外光譜集?中的維生素C光譜一致，證明此法可行。2.6菲林B近紅外分光光度法在pH3的三氯乙酸酸性介質(zhì)中，菲林B可以定量地將復(fù)原型維生素C氧化成脫氫型維生素C，利用脫氫型維生素C在920nm處有最大吸光度，測定其含量，此法是一種測定維生素C的新方法，它是基于FolinB試劑與抗壞血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介質(zhì)中反響生成脫氫抗壞血酸，該方法簡單、快速、準(zhǔn)確。楊婷[10]等人利用此法對水果中的維生素C進(jìn)展了試驗(yàn)，經(jīng)樣品測定，結(jié)果令人滿意。2.7毛細(xì)管電泳法毛細(xì)管電泳是以彈性石英毛細(xì)管為別離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動(dòng)力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)別離的電泳別離分析方法。陳剛[11]等用毛細(xì)管電泳電化學(xué)柱端檢測法同時(shí)測定了復(fù)方蘆丁片中的蘆丁和維C，但電化學(xué)檢測法存在電極制備比較困難，操作繁瑣的缺點(diǎn)。故李向軍[12]等在此根基上改用紫外檢測法測定復(fù)方蘆丁片，優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿意。2.8高效液相色譜法高效液相色譜法是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被別離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)展檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析。劉國如[13]等人以維生素C注射液為研究對象，采用氨基柱，用磷酸二氫鉀液和乙腈混合液〔體積比1:1〕為流動(dòng)相，測定維生素C含量，結(jié)果準(zhǔn)確。張國鋒[14]等人采用反向高效液相離子對色譜法，以對氨基苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，測定了復(fù)方蘆丁片中蘆丁與維生素C的量。李玉明[15]等人進(jìn)展了新型高效液相色譜分析法的研究，以超純水為流動(dòng)相,流動(dòng)相的速度為1.0ml/min，紫外檢測波長為267nm，柱溫在25～30℃的條件下分析維生素C，結(jié)果具有良好的線性關(guān)系,其相關(guān)系數(shù)R2=0.9994；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差等于0.74%。3.總結(jié)維生素C制劑的質(zhì)量，從原料藥的選擇，生產(chǎn)中的實(shí)際操作到產(chǎn)后產(chǎn)品的貯存均受多種因素的影響，但本質(zhì)仍由其構(gòu)造決定，構(gòu)造決定性質(zhì)，性質(zhì)決定分析方法。綜上，維生素C質(zhì)量控制的測定方法很多，各方法各特點(diǎn)，在含量測定方面，常用的方法為滴定法，該方法簡單、簡便，而碘量法更是被應(yīng)用于維生素C多種劑型的含量測定，但在滴定有色物質(zhì)時(shí)終點(diǎn)不易判斷，分光光度法快捷，但操作費(fèi)時(shí)，而高效液相色譜法是目前開展較快的一種方法，簡便、靈敏、可靠，選擇性好，有較好的開展前景，相信隨著藥物分析技術(shù)的開展，將會(huì)發(fā)現(xiàn)更多具有效率高、分析時(shí)間短、樣品處理簡單的分析方法，讓我們拭目以待！參考文獻(xiàn)[1]賽麗曼，苦爾班江.碘量法測水果蔬菜中維生素C的含量[J].伊犁師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，3〔9〕：28-29.[2]蔣江云.HPLC法測定維生素C片含量[J].齊魯藥事，2012，31〔11〕：642-644.[3]李書靜，李可，姚新建，等.2，6-二氯靛酚鈉法測定果汁飲料中的維生素C[A].ChineseJournalofSpectroscopyLaboratory，2011，28〔5〕：2391-2394.[4]王迎春，周學(xué)琴.薄層掃描法測定維生素C片劑中維生素C的含量[A].JournalofMathematicalMedicine，2001，14〔5〕：466.[5]蔡毓瓊.薄層色譜法檢測維C銀翹片中的維生素C的研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志，1997，18〔4〕：34-36.[6]韓春雨，李靜雅.紫外分光光度法與維生素C和維生素B含量測定[A].食品與生物，2013，8：5-6.[7]蔡卓，黃富嶸，梁信源，等.重鉻酸鉀分光光度法測定藥片中維生素C[J].廣西大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，33〔3〕：288-290.[8]奚長生.磷鉬藍(lán)分光光度法測定維生素C[J].光譜學(xué)與光譜分析，2001，21〔5〕：723-725.[9]李銳，李春鳳.紅外分光光度法鑒別維生素C片[J].中南藥學(xué)，2007，5〔4〕：344-346.[10]楊婷.菲林B近紅外分光光度法測定維生素C[J].分析化學(xué)研究簡報(bào)，2005，11〔33〕：1593-1595.[11]陳剛，丁祥歡，葉建農(nóng).毛細(xì)管電泳法測定復(fù)方蘆丁片中的蘆丁和維生素C[A].高等學(xué)?；?/p>