微生物農(nóng)藥病毒

關(guān)于微生物農(nóng)藥病毒第1頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

病毒是非細(xì)胞形式的最小有機(jī)體，是一種最原始的生命形態(tài)。一個(gè)病毒由兩部分構(gòu)成：內(nèi)部是核酸，外部是衣殼，成分是蛋白質(zhì)。結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。只含有一種類型的核酸（RNA或DNA）。沒有細(xì)胞器和細(xì)胞構(gòu)造、不能獨(dú)立生活，只能在活的寄主細(xì)胞內(nèi)才能復(fù)制增殖。1、什么是病毒？一、病毒的主要特征第2頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三第3頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三2、病毒與其他生物的主要區(qū)別病毒只含一種核酸，DNA或RNA，而其他生物一般同時(shí)含有DNA和RNA兩種核酸；病毒依靠自身的核酸通過復(fù)雜的生物合成過程進(jìn)行復(fù)制，而不是通過二分裂或類似二分裂方式在特定的宿主活細(xì)胞中進(jìn)行繁殖；第4頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三病毒缺乏完整的酶系統(tǒng)，不含核糖體，必須利用宿主細(xì)胞的核糖體合成自身蛋白質(zhì)，脫離宿主不能進(jìn)行任何形式的代謝活動(dòng)；病毒對(duì)抗菌素或其他對(duì)微生物代謝途徑起作用的因子不敏感；病毒對(duì)宿主DNA復(fù)制有一定指導(dǎo)性。昆蟲病毒的主要組成成分是核酸和蛋白質(zhì)，只有核酸能夠繁殖和具有感染能力。第5頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三3、病毒的復(fù)制病毒在活細(xì)胞內(nèi)，以其基因?yàn)槟０?，在酶的作用下，分別合成病毒基因及蛋白質(zhì)，再組裝成完整的病毒顆粒，這種方式稱為復(fù)制（replication)。從病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞開始，經(jīng)過基因組復(fù)制和病毒蛋白合成，至釋放出子代病毒的全過程，稱為一個(gè)復(fù)制周期。病毒復(fù)制周期：包括吸附、侵入、脫殼、大分子合成、裝配與釋放五個(gè)連續(xù)步驟。第6頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三復(fù)制周期第7頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三4、昆蟲病毒分類與性狀病毒分類主要依據(jù)：

1、病毒粒子特性（1）病毒的形態(tài)特征（囊膜、粒子的大小、形狀以及亞顯微結(jié)構(gòu)）；（2）生理生化和物理性質(zhì)；（3）病毒基因組（核酸的類型、特性）；（4）病毒蛋白（數(shù)量、大小、功能、活性）；（5）病毒脂類和碳水化合物的含量及特性；（6）病毒基因組組成和復(fù)制特性。2、病毒抗原性質(zhì)3、病毒生物學(xué)特性天然寄主范圍、傳播特性、分布、致病機(jī)理、引發(fā)的病理和組織病理學(xué)特點(diǎn)。第8頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

屬于13個(gè)病毒科，2個(gè)病毒亞科，21個(gè)病毒屬1、根據(jù)病毒核酸的類型分為：

（1）雙鏈DNA病毒（有囊膜）：

①桿狀病毒科；②多分DNA病毒科；③痘病毒科；④泡囊病毒科；（2）雙鏈DNA病毒（無囊膜）：

①虹彩病毒科；②細(xì)尾病毒科（3）單鏈DNA病毒（無囊膜）：細(xì)小病毒科二、昆蟲病毒分類：第9頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三（4）雙鏈RNA病毒：

①呼腸孤病毒科；②二分RNA病毒科（5）單鏈RNA病毒：

①微RNA病毒科；②野田村病毒科；③T4病毒科（6）DNA和RNA反轉(zhuǎn)錄病毒，包括：

①前病毒科；②變位病毒科第10頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三2、根據(jù)包含體在寄主細(xì)胞中的部位，分為：（1）核型多角體病毒(NPV)寄生在寄主細(xì)胞核內(nèi)，包含體內(nèi)含有多個(gè)桿狀病毒粒子。（2）質(zhì)型多角體病毒(CPV)寄生在寄主細(xì)胞質(zhì)中，包含體內(nèi)含有多個(gè)球狀病毒粒子。（3）顆粒體病毒(GV)在感染的細(xì)胞核里和細(xì)胞質(zhì)里均可發(fā)育形成。多為橢圓形，也有腎形，每個(gè)包含體一般僅含一個(gè)桿狀病毒粒子。（4）無包含體病毒如昆蟲濃核病毒、感染病毒的寄主細(xì)胞核膨脹、核內(nèi)物質(zhì)呈濃密、豐盈現(xiàn)象。（5）昆蟲痘病毒(EPV)于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，但紡錘形包涵體是不包埋病毒粒子的。第11頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三昆蟲病毒包括兩類昆蟲病原病毒蟲媒病毒昆蟲病原病毒第12頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三昆蟲病原病毒：是指以昆蟲為宿主并對(duì)昆蟲有致病性的病毒，超顯微沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，在活細(xì)胞里專性寄生的大分子微生物。

在活體外具有一般大分子的特征，進(jìn)入宿主細(xì)胞又具有生命特征

80%的昆蟲病毒都是農(nóng)林業(yè)中常見的鱗翅目害蟲的病原體，國此是害蟲生物防治的巨大資源庫。第13頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三三、昆蟲病毒研究歷史和現(xiàn)狀家蠶和蜜蜂黃疸病。中國陳旉所著《農(nóng)書》(1149)中即有關(guān)于家蠶“高節(jié)”、“腳腫”病的記載，即中國農(nóng)民俗稱的“膿病”。20世紀(jì)初才證明“膿病”病原是核型多角體病毒1949年加拿大引進(jìn)歐洲云杉葉蜂NPV(核多角體病毒)控制害蟲。1940-60年代主要應(yīng)用細(xì)菌防治，70年代才利用病毒。1981年，對(duì)病毒病的描述，幾乎遍及昆蟲綱的各個(gè)目，記載了800多種寄主昆蟲和螨類的1200種病毒病。1980年代，我國已經(jīng)分離出200種以上的昆蟲病毒。第14頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三俄：黃葉蜂NPV、甘藍(lán)夜盜蛾、舞毒蛾、美國白蛾、天幕毛蟲等。捷：美國白蛾GV法：松帶蛾CPV日：1974年注冊(cè)了赤松毛蟲CPV，直升飛機(jī)噴灑。還對(duì)茶小卷葉蛾、茶卷葉蛾GV進(jìn)行研究利用。埃及、中：斜紋夜蛾NPV新西蘭：牧草蝙蝠蛾WNPV斐濟(jì)：獨(dú)角仙病毒第15頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

國際上已報(bào)道過的昆蟲病毒有1600多種，分屬于6個(gè)目的昆蟲，60%為桿狀病毒，能引起1100種昆蟲和螨類發(fā)病，可控制近30%的糧食和纖維作物上的主要害蟲。至少有60多株進(jìn)入大田應(yīng)用或示范，約20多株制成殺蟲劑，僅就俄羅斯而言，1990年已有14種病毒殺蟲劑，其中有7種年總產(chǎn)量為60多噸，防治面積150萬公頃。

1971年，棉鈴蟲NPV在美國成為第一個(gè)商品化制劑，1987年美國加強(qiáng)了對(duì)舞毒蛾、黃杉毒蛾、苜蓿尺蠖等NPV的研究。第16頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

我國已報(bào)道220種，250株，絕大部分為桿狀病毒，寄生在70多種寄主中。

始于60年代，先是調(diào)查、收集，70年代后做了大量工作。1987年我國將棉鈴蟲NPV投入商品化生產(chǎn)。

北京、廣東(斜紋夜蛾NPV)、武漢、華東(棉鈴蟲NPV)都進(jìn)行過卓有成效的工作。我國有20株進(jìn)入大田應(yīng)用或示范，7株制成制劑，先后建立5座工廠，一種新的生物農(nóng)藥產(chǎn)業(yè)。第17頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三從防治對(duì)象來看，可分為二個(gè)階段:40~60年代：食葉性森林害蟲；

70年代后：農(nóng)業(yè)害蟲。從病毒生產(chǎn)方式，二個(gè)階段:40年代到60年代：野外采集；之后：人工飼養(yǎng)蟲制成殺蟲劑。第18頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三四、病毒殺蟲劑的優(yōu)點(diǎn)選擇性好：不損傷天敵，不易引起生態(tài)平衡的破壞。傳播性強(qiáng)：很快擴(kuò)散蔓延，造成流行病。持久性長(zhǎng)：包涵體可抵抗不良環(huán)境，具有非常好的穩(wěn)定性。4)經(jīng)濟(jì)效益高：劑量低，使用簡(jiǎn)便。5)安全無害：無殘留。第19頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三五、病毒殺蟲劑的缺點(diǎn)1)防治效果慢：10天，潛伏期較長(zhǎng)，往往降低其商業(yè)價(jià)值和實(shí)際效果。2)防治譜窄：不能成功地用來防治種植地區(qū)生長(zhǎng)季節(jié)內(nèi)繁衍的多種害蟲。3)受到溫度、陽光等環(huán)境條件影響較大。4)不易生產(chǎn)（活體生物培養(yǎng)）。第20頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三存在的安全隱患昆蟲病毒、其它的無脊椎動(dòng)物、脊椎動(dòng)物和植物病毒之間并無明確的界限。日本乙型腦炎病毒通過三帶喙庫蚊傳染給人類。黃熱病毒和登革熱病毒通過伊蚊傳染人類。呼腸孤病毒科環(huán)狀病毒屬的全體成員、朋揚(yáng)病毒科的全體成員、彈狀病毒科水皰病毒屬和狂犬病毒屬的部分成員，植物呼腸孤病毒等，都是既能使昆蟲致死，又能寄生植物；野田村病毒既能使昆蟲發(fā)病，又能使哺乳動(dòng)物發(fā)病致死。第21頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三六、DNA病毒殺蟲劑一、核型多角體病毒（NPV）二、顆粒體病毒（GV）三、昆蟲痘病毒（EPV）四、細(xì)小病毒（DNV）五、其他DNA殺病毒

1、多分DNA病毒科2、虹彩病毒科

3、泡囊病毒科

4、細(xì)尾病毒科

5、棕櫚獨(dú)角仙病毒第22頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

桿狀病毒

A亞組——核型多角體病毒(NPV)，如家蠶NPV，棉鈴蟲NPV，松毛蟲NPV，春尺蠖NPV，舞毒蛾NPV，斜紋夜蛾NPV，粘蟲NPV，中國刺蛾NPV等；

B亞組——顆粒體病毒(GV)，如黃地老虎GV，菜粉蝶GV，茶小卷葉蛾GV等；

C亞組——非包涵體核型桿狀病毒，如印度棕櫚獨(dú)角仙病毒；

D亞組——非包涵體多分體DNA基因組核型桿狀病毒，如甜菜尺蠖姬蜂病毒。第23頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三感染病毒的幼蟲形成大量包含體，擴(kuò)散、傳播桿狀病毒有宿主專一性，宿主僅限于節(jié)肢動(dòng)物，對(duì)脊椎動(dòng)物、植物完全不感染——應(yīng)用安全主要見于昆蟲體內(nèi)，是已知昆蟲病毒中類群最大、發(fā)現(xiàn)最早、研究最多，且實(shí)用意義最大的主要應(yīng)用：

1）作為載體，表達(dá)外源基因

2）作為殺蟲劑，有效地控制農(nóng)業(yè)害蟲的發(fā)生，并且對(duì)環(huán)境不造成污染桿狀病毒殺蟲劑的的特點(diǎn)第24頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三1)研發(fā)現(xiàn)狀

二十世紀(jì)50年代，我國開始昆蟲桿狀病毒的基礎(chǔ)性和應(yīng)用性研究。有20種左右桿狀病毒殺蟲劑進(jìn)入田間試驗(yàn)或?qū)嶋H應(yīng)用，包括：棉鈴蟲、甜菜夜蛾、斜紋夜蛾、苜蓿銀紋夜蛾、春尺蠖、舞毒蛾、木毒蛾、美國白蛾、甘藍(lán)夜蛾、茶毛蟲、灰茶尺蠖、茶尺蠖、大蓑蛾、油桐尺蠖等核型多角體病毒。小菜蛾、菜青蟲、黃地老虎、楊扇舟蛾、玉米螟、茶蠶等顆粒體病毒。

第25頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三2)昆蟲表現(xiàn)癥狀

初期：行動(dòng)遲緩，缺乏食欲，體軀腫脹，變黃或乳白色，皮膚變脆，組織液化，一觸即破。后期：趨向最高處，如植株項(xiàng)端，頭朝下倒掛。

第26頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三3)殺蟲活性

7個(gè)目，290多種害蟲，主要為鱗翅目，其次為膜翅目、雙翅目、鞘翅目和直翅目昆蟲。

LD50：50~100微克/頭。害蟲死亡高峰在施藥后的4-5天。

甜菜夜蛾核型多角體病毒只對(duì)甜菜夜蛾有效，藥后4天達(dá)到死亡高峰；

棉鈴蟲病毒只對(duì)夜蛾屬的昆蟲有效，死亡高峰在第5天

第27頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三廣譜性的桿狀病毒：苜蓿銀紋夜蛾病毒

對(duì)10多種害蟲有效。克服防治譜窄的部分弱點(diǎn)但活性低1~2個(gè)數(shù)量級(jí)。研究最為深入第28頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三重要品種：（1）核多角體病毒(nuclearpolyhedrosisviruses，簡(jiǎn)稱NPV)是研究最早、最詳細(xì)的一個(gè)類群，我國至少已發(fā)現(xiàn)60多種，已有比較成功的病毒制劑。包涵體的形態(tài)結(jié)構(gòu)：NPV的包涵體稱多角體(polyhedron)，簡(jiǎn)稱IB或PIB，是在感染的細(xì)胞核中產(chǎn)生的包涵和保護(hù)病毒粒子的一團(tuán)蛋白質(zhì)，呈多邊形，具梭角。常因寄主種類的不同而不同。常見的有三角形、四角形、五角形、六角形、立方形、近圓形和不規(guī)則形。第29頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三不同多角體的形狀第30頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三同一品系或分離株病毒的多角體的形狀是趨于穩(wěn)定的，相同寄主而不同品系或分離株病毒的多角體的形狀和平均大小就可能判別比較大。如從盜毒蛾幼蟲體分離的NPV的兩菌株，一個(gè)多角體是多形狀的，另一個(gè)是立方形的，而用它們混合感染盜毒蛾幼蟲時(shí)，在同一感染細(xì)胞內(nèi)并未同時(shí)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)病毒株，因而多角體的形狀可以作為辨別一個(gè)病毒品系或分離株的標(biāo)志。多角體的表面有膜，若多角體被溶解，則會(huì)留下囊狀空泡，再延長(zhǎng)時(shí)間，也會(huì)被溶解，與核膜相似。第31頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三病毒粒子的形態(tài)結(jié)構(gòu)

在NPV中，每個(gè)囊膜可以包封一個(gè)至多個(gè)核衣殼，一個(gè)囊膜內(nèi)有多個(gè)排列成束的核衣殼的，常稱為病毒束.獲得囊膜的病毒粒子被隨機(jī)的包埋在蛋白質(zhì)構(gòu)成的結(jié)晶狀多角體之內(nèi)，一個(gè)多角體可以包埋一個(gè)至多個(gè)病毒粒子。而未被包埋的病毒粒子則只有核衣殼。第32頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三核型多角體病毒的包涵體呈多角形，有兩種包埋形式：1、一種是多角體內(nèi)包埋著許多單個(gè)的病毒粒（單粒包埋型），簡(jiǎn)稱SEV2、另一種是1個(gè)包膜內(nèi)包裹著多個(gè)核殼(一般稱為病毒束)，成束地被包埋于多角體蛋白基質(zhì)中(多粒包埋型)，簡(jiǎn)稱MEV。包涵體的大小為0.5～15微米。C亞組與D亞組都不形成包涵體。第33頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三第34頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三棉鈴蟲NPV的病毒束可有2-6個(gè)核衣殼，最多達(dá)20多個(gè)；斜紋夜蛾為2-10個(gè)；盜毒蛾為6-10個(gè)。兩種不同包埋型的病毒，與不同的病毒品系或分離株有關(guān)，是由遺傳性決定的。同一種昆蟲的兩種不同包埋型的NPV，它們對(duì)寄主的感染力、專一性、對(duì)環(huán)境的抵抗力以及多角體蛋白的化學(xué)持性、血清學(xué)特征等方面都可能有較大的差異。第35頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三掃描電子顯微鏡下的隱紋稻苞蟲NPV的多角體第36頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三1、對(duì)不同化學(xué)藥劑具有高度抵抗力2、不溶于水及多種有機(jī)溶劑3、不被細(xì)胞或細(xì)胞蛋白酶分解4、在pH值2~2.9時(shí)，可被胰蛋白酶破壞5、溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿溶液6、比重大于水，對(duì)低溫有較強(qiáng)的抗力，抗高溫能力差7、不溶于昆蟲血淋巴，所以將其接種于昆蟲的血腔，幼蟲不會(huì)感染。8、必須通過幼蟲食入，經(jīng)消化液消化后，才能釋放出有感染力的病毒粒子。核多角體的理化性質(zhì)第37頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三9、經(jīng)干燥后，可以保存多年性質(zhì)不變，如家蠶多角體在無水氯化鈣中保存37年，其在碳酸鈉中的溶解性不變。10、可以抵抗細(xì)菌的腐敗作用，在提純或死蟲尸為細(xì)菌污染時(shí)，多角體一般不受收破壞。11、在昆蟲幼蟲消化認(rèn)中的溶解性不受寄主范圍的限制，對(duì)非敏感昆蟲也是如此。12、有較強(qiáng)的折光性，成熟的多角體不易被一般染料著色，但經(jīng)酸堿處理一可為一些染料所強(qiáng)染。第38頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三侵染途徑：

通過幼蟲口服侵入。多角體在易感蟲體中腸內(nèi)迅速溶解，侵入上皮細(xì)胞，并出現(xiàn)最初的復(fù)制。在侵染昆蟲細(xì)胞核內(nèi)充滿大量的多角體。體內(nèi)組織液化。?；詮?qiáng)，一般只感染同種昆蟲。第39頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三中毒癥狀：

初期無明顯變化，漸而行動(dòng)遲緩，食欲減退，體色變淡或油光色，血淋巴變?nèi)榘咨ｓw內(nèi)組織液化，軀體前端膨大，皮膚易裂，破后流出乳白色或褐色濃綢液體，無特殊臭味。棉鈴蟲幼蟲的環(huán)節(jié)處被核型多角體病毒感染第40頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三第41頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三1987年建成我國第一座棉鈴蟲病毒殺蟲劑實(shí)驗(yàn)工廠，開始步入商品化生產(chǎn)1993年，由中國科學(xué)院武漢病毒所同湖北蔣湖農(nóng)場(chǎng)登記了我國第一個(gè)昆蟲病毒殺蟲劑產(chǎn)品——棉鈴蟲核型多角體病毒殺蟲劑。隨后共有12個(gè)昆蟲病毒制劑品種登記注冊(cè)，1個(gè)原藥品種獲得登記。

開發(fā)最成功的是棉鈴蟲病毒殺蟲劑，十多年里，累計(jì)生產(chǎn)2000余噸，累計(jì)推廣面積超過1000萬畝次。推廣應(yīng)用：第42頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

中國科學(xué)院動(dòng)物研究所與河南省濟(jì)源白云實(shí)業(yè)有限公司聯(lián)合開展的昆蟲病毒殺蟲劑產(chǎn)業(yè)化合作項(xiàng)目"2噸/年5000億pib/克棉鈴蟲核型多角體病毒原粉"獲得國家發(fā)改委的生產(chǎn)核準(zhǔn).

被列入農(nóng)業(yè)部首批公布的《無公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)推薦農(nóng)藥品種和植保機(jī)械名單》中。第43頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三（2）顆粒體病毒(GV)最是是法國人于1926年在患病的大菜粉蝶中發(fā)現(xiàn)的。主要存在于鱗翅目昆蟲幼蟲中，至1980年，全世界已發(fā)現(xiàn)100種昆蟲感染這種病毒，其中只有一種是膜翅目昆蟲我國從20多種昆蟲中發(fā)現(xiàn)這種病毒病有較強(qiáng)的致病性。

第44頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三包涵體的形態(tài)顆粒體是包涵和保護(hù)病毒粒子的結(jié)晶狀蛋白質(zhì)，體積較多角體小，呈卵形、橢圓形、腎形，有時(shí)也出現(xiàn)長(zhǎng)角狀、角狀、分叉狀、不規(guī)則形、多角形等。在同一昆蟲體內(nèi)，顆粒體的體積也有不同。一個(gè)顆粒體僅包埋一個(gè)（偶爾2個(gè)）病毒粒子。第45頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三稻縱卷葉螟GV顆粒體第46頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三菜粉蝶GV顆粒體經(jīng)弱堿溶解后釋放出的病毒粒子第47頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三顆粒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒粒子呈桿狀，常彎曲，大小因寄主種類不同而異。病毒粒子從顆粒體中釋放出來后，其直徑和長(zhǎng)度有增大的現(xiàn)象，病毒粒子脫去囊膜，其長(zhǎng)度也會(huì)增加。如黃地老虎GV，完整的病毒粒子大小為310×70nm，脫去囊膜后，核衣殼大小為325×45nm。每個(gè)病毒粒子兩層膜包被：囊膜、衣殼；兩層膜之間有空隙。第48頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三1、比重大于水2、不溶于水及多種有機(jī)溶劑3、強(qiáng)酸和強(qiáng)堿條件下迅速溶解，并使粒子變性失活4、耐低溫，高溫和紫外線易使粒子失活5、有包涵體的顆粒體病毒，在外界環(huán)境中較穩(wěn)定，在室內(nèi)和野外土壤中的存活時(shí)間長(zhǎng)達(dá)數(shù)年6、沒有包涵體保護(hù)的顆粒體，穩(wěn)定性差。顆粒體病毒的理化性質(zhì)第49頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三侵染途徑：

口服侵入易感蟲體，顆粒在中腸內(nèi)溶解，粒子通過腸道柱形細(xì)胞的微絨毛侵入細(xì)胞，在細(xì)胞核中增殖，新形成的粒子釋放入血液，繼發(fā)感染。第50頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三中毒癥狀：

初期無明顯病癥，發(fā)展出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍和停止取食，在不同組織中顆粒體大量累積，體色有明顯變化，腹面出現(xiàn)淡白或乳白色或帶黃色。體壁出現(xiàn)斑點(diǎn)或變色，身體變軟，皮膚易破。第51頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三對(duì)昆蟲有很強(qiáng)的致病性，常常在野外爆發(fā)自然流行病，抑制寄主種群的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)昆蟲種群也往往因受GV感染而大量死亡作感染力測(cè)定常以死蟲尸內(nèi)含物的稀釋倍數(shù)作劑量單位。小齡幼蟲比大齡幼蟲敏感，大齡幼蟲受感染后，可以化蛹并發(fā)育為成蟲，但受感染的蛹常常死亡。經(jīng)血腔接種，幼蟲不受感染。專一性比NPV強(qiáng)，交叉感染只限于種內(nèi)或?qū)賰?nèi)。第52頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三(3)痘病毒

病毒形態(tài)相似，大小隨寄主不同而不同鰓角金龜子痘病毒：400×250毫微米鱗翅目和直翅目痘病毒：350×250毫微米雙翅目痘病毒：320×230毫微米

包涵體有2類：球形體（包埋病毒粒子）

紡綞體（不含病毒粒子）均在細(xì)胞質(zhì)中形成第53頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

害蟲癥狀與作用機(jī)理

害蟲食入包涵體，包涵體進(jìn)入消化道后溶解，散出病毒粒子。粒子在體腔感染寄主脂肪體、氣管上皮細(xì)胞和生殖腺等。害蟲染害后，體呈惡白色，脂肪體呈泡沫狀，血細(xì)胞增大，病毒在脂肪體細(xì)胞和血細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)增殖。病毒傳遞主要通過口服和接種進(jìn)行，沒有卵傳現(xiàn)象。第54頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三2)殺蟲活性

Herpin和Vago于1983發(fā)現(xiàn)，可感染鞘翅目、鱗翅目、雙翅目和直翅目昆蟲我國新疆地區(qū)發(fā)現(xiàn)的新疆西伯利亞蝗寄主。第55頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三(4)虹彩病毒

病毒粒子為二十面體，直徑120~200毫微米，核心為雙股脫氧核糖核酸，無膜，無包涵體。代表種為：二化螟虹彩病毒，是鱗翅目幼蟲感染虹彩病毒的第一個(gè)例子。發(fā)現(xiàn)于日本九州。第56頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三昆蟲癥狀與作用機(jī)理

食入病毒感染，粒子大量復(fù)制，在組織內(nèi)形成大量結(jié)晶體，活體昆蟲出現(xiàn)虹彩顏色。感染部位主要在脂肪細(xì)胞，其次為皮膚上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肌肉細(xì)胞。第57頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三2)殺蟲活性

感染28種雙翅目，10多種鱗翅目，也可感染鞘翅目、半翅目和膜翅目昆蟲。主要寄主有：棉鈴象甲、葉跳蟲、深山葉蟬、稻綠葉跳蟲、黑尾葉蟬、小褐飛虱，蚊蟲。第58頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三(5)細(xì)小病毒

病毒粒子為多軸體，直徑約22毫微米，核心為單股DNA，無膜，無包涵體。只有3個(gè)種，其中只有濃核癥病毒侵染昆蟲。第59頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三1)害蟲癥狀與作用機(jī)理

幼蟲不腫脹而呈萎縮形，死后呈茶褐色，有時(shí)為暗紅色?？膳c菜粉蝶顆粒體病毒混合感染，也可單獨(dú)感染，混合感染多呈腫脹型，單獨(dú)感染呈萎縮型。害蟲死亡較快，在25℃下，染蟲后2~3天即可死亡。第60頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三2)殺蟲活性

國外：蠟螟濃縮核癥病毒和鹿眼蝶濃縮核癥病毒。國內(nèi)：菜粉蝶濃縮核癥病毒可感染：鱗翅目、鞘翅目、膜翅目害蟲第61頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三七、RNA病毒殺蟲劑一、質(zhì)型多角體病毒（CPV）二、其他RNA殺病毒

1、雙RNA病毒科2、野田村病毒科

3、四對(duì)稱病毒科

第62頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三(1)質(zhì)型多角體病毒（CPV）

屬于呼腸弧病毒科1950年患病燈蛾幼蟲侵襲昆蟲消化管在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)寄生，細(xì)胞核中并無多角體已在鱗翅目、雙翅目、膜翅目、鞘翅目和脈翅目等200多種昆蟲發(fā)現(xiàn)。

已知寄主種類和數(shù)量，僅次于NPV，在我國已發(fā)現(xiàn)有10多種。第63頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三

無囊膜，

形態(tài)有六角形、二十面體、圓球形、橢圓形、四角形和正方體直徑0.2~0.5微米不溶于水，但在水中經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間易被蝕刻，從而容易失去粒子。在堿液中的溶解度小于NPV，粒子在堿液中迅速失活。一個(gè)多角體可以埋100~1000個(gè)病毒粒子大多數(shù)粒子為二十面體，具12條突起形態(tài)結(jié)構(gòu)CPV病毒粒子模式圖第64頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三家蠶CPV立方形多角體第65頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三2)昆蟲表現(xiàn)癥狀

初期：食欲不振，體形縮小，比例失調(diào)形成大頭，長(zhǎng)刺毛。皮膚不被侵染，其它組織也很少侵染，無組織液化現(xiàn)象。幼蟲消化道吐現(xiàn)不透明和淡黃色或乳白色，失去半透明和淡綠色。后期：皮膚出現(xiàn)白色斑塊。中腸細(xì)胞液化后，多角體可被嘔吐出來或由糞便排出。第66頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三3)殺蟲活性

100多種害蟲，主要為鱗翅目、少數(shù)為雙翅目和膜翅目。染蟲后7~20天死亡。口服感染。進(jìn)入蟲體，在后部第7節(jié)穿透中腸，在細(xì)胞間擴(kuò)散，直至中腸前端。中腸上皮細(xì)胞核內(nèi)是病毒RNA合成部位，核周圍的細(xì)胞質(zhì)是病毒蛋白質(zhì)合成部位。致病性強(qiáng)，低劑量即可使寄主昆蟲感染死亡率與劑量沒有直接對(duì)應(yīng)性可通過母代傳遞至寄主的子代，成為長(zhǎng)期抑制寄主種群的一個(gè)致病因子第67頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三八、影響病毒防治效果的因素

(1)病毒本身選擇毒力高的病毒株系正確掌握適宜的濃度、用藥次數(shù)及合適的施藥時(shí)間(2)防治對(duì)象(3)環(huán)境因素1)溫度

15度，LT50為9天；32度，LT50為2~3天2)光照紫外光，5cm5min可使HaNPV全部失活，2h粉紋夜蛾NPV失活3)pH值和土壤

HaNPVpH值為2或12時(shí)，經(jīng)24h活性大減，以pH值=7為宜。第68頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三九、大量生產(chǎn)與應(yīng)用

用天然飼料、人工飼料飼養(yǎng)昆蟲。原理簡(jiǎn)單：活蟲體、活細(xì)胞、活組織

采集或引進(jìn)昆蟲病毒的原種：不同單株毒力不同，且差異很大，所以一定要選用最好的病毒株。必須經(jīng)濟(jì)方便：牽涉到大量飼養(yǎng)的方法，對(duì)一些昆蟲已經(jīng)解決，如斜紋夜蛾、棉鈴蟲等，它能用人工配制的食料來解決，若一種病毒能感染幾種害蟲，應(yīng)選用最易感染的昆蟲。找出一個(gè)最適宜的接種量、蟲期、環(huán)境條件。第69頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三大量生產(chǎn)的方法:①直接在害蟲自然種群中繁殖：蟲口密度大，適當(dāng)蟲期噴，把死蟲收回，最簡(jiǎn)便，適于一些害蟲在室內(nèi)不易人工培養(yǎng)，如葉蜂，森林上的害蟲。②野外采集：采回(小區(qū)、室內(nèi))接種。③完全在室內(nèi)條件下用自然或人工合成的飼料來繁殖：斜紋夜蛾、地老虎。第70頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三病毒殺蟲劑生產(chǎn)工藝(以NPV殺蟲劑為例)病毒的提取技術(shù)防菌保護(hù)劑增效誘餌劑病毒殺蟲劑安全性試驗(yàn)填充劑輔助劑NPV劑型配制稱量標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)生物活性測(cè)定產(chǎn)品分裝、包裝、保藏病毒多角體檢測(cè)感病蟲體的收集、破碎、勻漿過濾NPV的采集、分離、鑒定NPV毒株的引進(jìn)天然飼料養(yǎng)、添食、使感染，大量增殖NPV直接從野外大量收集NPV蟲尸用人工半合成飼料大量增殖NPV重組(遺傳改良)昆蟲桿狀病毒第71頁，共80頁，2022年，5月20日，14點(diǎn)57分，星期三水平傳遞：經(jīng)污染的環(huán)境和食物傳給健康昆蟲垂直傳遞：經(jīng)雌蟲所產(chǎn)的卵傳遞給它的子代1、由患病幼蟲傳播：患病毒病而死亡的幼蟲，從其尸體中釋放出大量