基因治療的載體課件

基因治療的載體

基因治療的載體

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概況1990年9月

世界上首例基因治療—ADA基因治療目前世界范圍內(nèi)的基因治療方案已超過120項(xiàng)概況1990年9月2治療基因（目的基因）轉(zhuǎn)移載體

是基因治療成功的關(guān)鍵

治療基因（目的基因）轉(zhuǎn)移載體

是基因治療成功的關(guān)鍵

3基因治療的載體主要有兩類

非病毒載體

病毒性載體

基因治療的載體主要有兩類

非病毒載體

病毒性載體

4

裸DNA

治療基因連接于質(zhì)粒中

直接進(jìn)行DNA注射

1990年，Wolff首次報(bào)道

基因槍、電穿孔

裸DNA

治療基因連接于5

脂質(zhì)體

1987年，F(xiàn)elgner首先報(bào)道

問題：轉(zhuǎn)染效率和靶向性

改進(jìn)：在脂質(zhì)體和DNA復(fù)合物中加入少量多聚陽離子多肽

脂質(zhì)體

1987年，F(xiàn)elgn6蛋白質(zhì)多肽

受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)

通過細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移

復(fù)合物間利用靜電作用

轉(zhuǎn)移基因最大長(zhǎng)度可達(dá)48kb

配體的選擇性

反復(fù)注射而不產(chǎn)生免疫性

蛋白質(zhì)多肽

受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)

通過細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)行基7非病毒載體的共同問題

表達(dá)時(shí)間短

非病毒載體的共同問題

表達(dá)時(shí)間短

8病毒性載體

在目前臨床I期基因治療方案中，

80%以上使用病毒性載體

病毒性載體

在目前臨床I期基因治療方案中，

80%以上使9

逆轉(zhuǎn)錄病毒

易與宿主細(xì)胞基因穩(wěn)定整合，

長(zhǎng)期表達(dá)

目的基因一般應(yīng)<8kb

缺點(diǎn)：僅感染分裂細(xì)胞

隨機(jī)整合入宿主基因組，

有致突變危險(xiǎn)

不穩(wěn)定

逆轉(zhuǎn)錄病毒

易與宿主細(xì)胞基因穩(wěn)定整合，10基因治療的載體課件11基因治療的載體課件12

腺病毒

靶細(xì)胞范圍廣

易獲得高滴度重組體

表達(dá)效率高

不整合入宿主基因組，安全

缺點(diǎn)：免疫原性強(qiáng)

目的基因表達(dá)時(shí)間短

腺病毒

靶細(xì)胞范13基因治療的載體課件14

腺相關(guān)病毒

本身無致病性

宿主范圍廣

轉(zhuǎn)移外源基因時(shí)，不伴隨任何病毒基因

以位點(diǎn)特異方式整合入人19號(hào)染色體

缺點(diǎn)：包裝容量有限，<5kb

腺相關(guān)病毒

本身無致病性

宿主范圍廣15基因治療的載體課件16

其他

單純皰疹病毒載體

包裝容量可達(dá)50kb

EB病毒載體

包裝容量可達(dá)150kb

其17基因治療的一些新型載體

構(gòu)建策略

相嵌型病毒載體

輕重鏈分別構(gòu)建，體內(nèi)包裝

目的基因分段構(gòu)建于同一載體，經(jīng)分子剪切，轉(zhuǎn)錄為完整的mRNA

基因治療的一些新型載體

構(gòu)建策略

18基因治療的載體課件19基因治療的載體課件20

謝謝！

21

基因治療的載體

基因治療的載體

22

概況1990年9月

世界上首例基因治療—ADA基因治療目前世界范圍內(nèi)的基因治療方案已超過120項(xiàng)概況1990年9月23治療基因（目的基因）轉(zhuǎn)移載體

是基因治療成功的關(guān)鍵

治療基因（目的基因）轉(zhuǎn)移載體

是基因治療成功的關(guān)鍵

24基因治療的載體主要有兩類

非病毒載體

病毒性載體

基因治療的載體主要有兩類

非病毒載體

病毒性載體

25

裸DNA

治療基因連接于質(zhì)粒中

直接進(jìn)行DNA注射

1990年，Wolff首次報(bào)道

基因槍、電穿孔

裸DNA

治療基因連接于26

脂質(zhì)體

1987年，F(xiàn)elgner首先報(bào)道

問題：轉(zhuǎn)染效率和靶向性

改進(jìn)：在脂質(zhì)體和DNA復(fù)合物中加入少量多聚陽離子多肽

脂質(zhì)體

1987年，F(xiàn)elgn27蛋白質(zhì)多肽

受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)

通過細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移

復(fù)合物間利用靜電作用

轉(zhuǎn)移基因最大長(zhǎng)度可達(dá)48kb

配體的選擇性

反復(fù)注射而不產(chǎn)生免疫性

蛋白質(zhì)多肽

受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)

通過細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)行基28非病毒載體的共同問題

表達(dá)時(shí)間短

非病毒載體的共同問題

表達(dá)時(shí)間短

29病毒性載體

在目前臨床I期基因治療方案中，

80%以上使用病毒性載體

病毒性載體

在目前臨床I期基因治療方案中，

80%以上使30

逆轉(zhuǎn)錄病毒

易與宿主細(xì)胞基因穩(wěn)定整合，

長(zhǎng)期表達(dá)

目的基因一般應(yīng)<8kb

缺點(diǎn)：僅感染分裂細(xì)胞

隨機(jī)整合入宿主基因組，

有致突變危險(xiǎn)

不穩(wěn)定

逆轉(zhuǎn)錄病毒

易與宿主細(xì)胞基因穩(wěn)定整合，31基因治療的載體課件32基因治療的載體課件33

腺病毒

靶細(xì)胞范圍廣

易獲得高滴度重組體

表達(dá)效率高

不整合入宿主基因組，安全

缺點(diǎn)：免疫原性強(qiáng)

目的基因表達(dá)時(shí)間短

腺病毒

靶細(xì)胞范34基因治療的載體課件35

腺相關(guān)病毒

本身無致病性

宿主范圍廣

轉(zhuǎn)移外源基因時(shí)，不伴隨任何病毒基因

以位點(diǎn)特異方式整合入人19號(hào)染色體

缺點(diǎn)：包裝容量有限，<5kb

腺相關(guān)病毒

本身無致病性

宿主范圍廣36基因治療的載體課件37

其他

單純皰疹病毒載體

包裝容量可達(dá)50kb

EB病毒載體

包裝容量可達(dá)150kb

其38基因治療的一些新型載體

構(gòu)建策略

相嵌型病毒載體

輕重鏈分別構(gòu)建，體內(nèi)包裝

目的基因分段構(gòu)建于同