微生物接種方法比較

5/5微生物接種方法比較

細菌的接種方法有很多種，如劃線法、涂布法、傾注法、斜面接種法、液體培養(yǎng)基接種法、螺旋接種法等，其方法和應(yīng)用各有不同，下面就這幾種方法進行解釋以幫助實驗人員選擇操作。

劃線法

此法主要用于菌種分純，獲得單菌落。

用接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

優(yōu)點：可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離。

缺點：不能用于菌落計數(shù)。

涂布法

此法主要用于菌落總數(shù)計數(shù)。

先將培養(yǎng)基熔化后趁熱倒入無菌平板中，然后用無菌吸管吸取0.1ml菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L型玻璃棒將菌液在平板上涂抹均勻，將涂抹好的平板平放于桌上20~30min，使菌液滲透入培養(yǎng)基內(nèi)，然后將平板倒轉(zhuǎn)，保溫培養(yǎng)，至長出菌落后即可計數(shù)。

優(yōu)點：可以計數(shù)，可以觀察菌落特征。

缺點：接種前需梯度稀釋，吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延。

傾注法

此法主要用于菌落總數(shù)的計數(shù)。

吸取1mL菌液加入平板中，倒入已融化并冷卻至45~50℃的細菌培養(yǎng)基，輕輕轉(zhuǎn)動平板，使菌液與培養(yǎng)基混合均勻，冷卻后倒置，適溫培養(yǎng)。至長出菌落后即可計數(shù)。

優(yōu)點：可以計數(shù)，較方便。

缺點：接種前需梯度稀釋，不能觀察菌落特征，不適用于嚴(yán)格好氧菌和熱敏感菌。

斜面接種法

此法主要用于保存菌種，或觀察細菌的某些生化特性和動力。

用接種環(huán)或接種針伸入菌種管內(nèi)，挑取用來移種的菌落。伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi)，先從斜面底部到頂端拖一條接種線，再自下而上蜿蜒劃線，或直接自下而上地蜿蜒劃線。接種完成之后，用火焰滅菌培養(yǎng)管口，并塞上棉塞，置于37℃培養(yǎng)。

液體培養(yǎng)基接種法

此法主要用于菌液比濁實驗。

用滅菌接種環(huán)挑取菌落或標(biāo)本，在試管內(nèi)壁與液面交界處輕輕研磨，使細菌均勻得散落在液體培養(yǎng)基中。

螺旋接種法

此法主要用于菌落總數(shù)計數(shù)。

可以在無任何全部或中間稀釋的情況下快速細菌接種。對數(shù)減少的樣品容量以阿基米德螺旋線的形式被自動分注在旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)基上每一點的容量可以被知曉和校準(zhǔn)。菌液的濃度可以通過培養(yǎng)皿上一定區(qū)域的菌落數(shù)量除以同區(qū)域樣品分注量來計算。

優(yōu)點：螺旋接種法菌液無需稀釋（其他接種方法均需經(jīng)過梯度稀釋才能計