葡萄糖的一般雜質(zhì)檢查課件

藥物分析實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一葡萄糖的分析藥物分析實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一葡萄糖的分析1一、教學(xué)目的

了解葡萄糖的全檢過(guò)程；掌握葡萄糖中氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽等一般雜質(zhì)檢查的基本原理、操作方法及雜質(zhì)限量計(jì)算；正確使用納氏比色管、檢砷器工作原理。一、教學(xué)目的了解葡萄糖的全檢過(guò)程；2葡萄糖結(jié)構(gòu)D-葡萄糖中國(guó)藥典收載：葡萄糖結(jié)構(gòu)D-葡萄糖中國(guó)藥典收載：3二、基本原理

葡萄糖分子中具有醛基，還原堿性酒石酸銅生成紅色氧化亞銅。

本實(shí)驗(yàn)除了檢查氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽等一般雜質(zhì)外，還檢查溶液的澄清度（目的檢查不溶性雜質(zhì)，如糊精、蛋白質(zhì)等）、亞硫酸鹽與可溶性淀粉（因制備時(shí)使用的酸可能帶有亞硫酸鹽，可溶性淀粉為引入的中間體）。C6H12O6+2Cu2++4OH-=C6H12O7+Cu2O↓+2H2O二、基本原理葡萄糖分子中具有醛基，還原堿性酒石4實(shí)驗(yàn)要求記錄每個(gè)試驗(yàn)項(xiàng)目的稱樣質(zhì)量記錄酸度的檢查、溶液的澄清度與顏色檢查、氯化物的檢查、硫酸鹽的檢查的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象給出實(shí)驗(yàn)結(jié)果、進(jìn)行結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)要求記錄每個(gè)試驗(yàn)項(xiàng)目的稱樣質(zhì)量5主要試劑及器皿酚酞指示液25%氯化鋇溶液0.020mol/LNaOH溶液稀硝酸10μg/mLNaCl標(biāo)準(zhǔn)溶液稀鹽酸100μg/mLK2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液器皿：50mL納氏比色管電子天平試劑：主要試劑及器皿試劑：6三、實(shí)驗(yàn)操作（二）鑒別取本品約0.2g，加水5mL溶解后，緩緩滴入溫?zé)岬膲A性酒石酸銅試液，即生成氧化亞銅紅色沉淀。三、實(shí)驗(yàn)操作（二）鑒別7（三）檢查

1.酸度的檢查取葡萄糖2.0g至50mL比色管，加水20mL溶解后，加酚酞指示劑3滴與0.020mol/L氫氧化鈉溶液0.20mL，應(yīng)顯粉紅色。記錄：稱量質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象標(biāo)準(zhǔn)要求：溶液應(yīng)粉紅色單項(xiàng)判定：□合格□不合格（三）檢查

1.酸度的檢查取葡萄糖2.0g至50mL比色管，82.溶液的澄清度與顏色檢查取葡萄糖12.5g至50mL納氏比色管中，加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至25mL，觀察，溶液應(yīng)澄清無(wú)色。記錄：稱量質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象標(biāo)準(zhǔn)要求：溶液應(yīng)澄清無(wú)色單項(xiàng)判定：□合格□不合格2.溶液的澄清度與顏色檢查取葡萄糖12.5g至50mL納氏比94.亞硫酸鹽與可溶性淀粉檢查

取本品1.0g至試管中，加水10mL溶解后，加0.1mol/L碘試液1滴，應(yīng)即刻顯示黃色。4.亞硫酸鹽與可溶性淀粉檢查取本品1.0g至107.氯化物的檢查

取葡萄糖0.60g至50mL納氏比色管中，加水溶解使成25mL（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10mL（如溶液不澄清，應(yīng)過(guò)濾），加水使成約40mL，搖勻，即得樣品溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)10μg/mL氯化鈉溶液6.0mL，置于50mL比色管中，加稀硝酸10mL，加水使約成40mL，搖勻，即得對(duì)照溶液。于樣品溶液和對(duì)照溶液中，分別加入1mL（用滴管滴20滴）0.1mol/L硝酸銀溶液，用水稀釋至50mL，搖勻，在暗處放置5min，在黑色背景下，從比色管上方向下觀察比較，樣品溶液如發(fā)生渾濁，與對(duì)照品比較不得更濃（0.010%）。7.氯化物的檢查取葡萄糖0.60g至11雜質(zhì)限量的計(jì)算

雜質(zhì)限量的計(jì)算12氯化物的限量氯化物的限量13實(shí)驗(yàn)記錄舉例實(shí)驗(yàn)記錄舉例148.硫酸鹽的檢查

取葡萄糖2.0g至50mL納氏比色管中，加水溶解使成約40mL（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性，如溶液不澄清，過(guò)濾），加稀鹽酸2mL，搖勻，即得樣品溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀（100μg/mL）溶液2.0mL置于50mL比色管中，加水使成40mL，加稀鹽酸2mL，搖勻，即得對(duì)照溶液。于樣品溶液和對(duì)照溶液中，分別加入25%氯化鋇溶液5mL，用水稀釋至50mL，充分搖勻，放置10min，在黑色背景下，從比色管上方向下觀察比較，樣品溶液如發(fā)生渾濁，與對(duì)照品比較不得更濃。（0.010%）8.硫酸鹽的檢查取葡萄糖2.0g至50mL15硫酸鹽的限量硫酸鹽的限量169.鐵鹽的檢查原理：鐵鹽在酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液同法處理后所呈顏色比較，判斷供試品鐵鹽是否超限。對(duì)照液葡萄糖9.鐵鹽的檢查原理：鐵鹽在酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性17鐵鹽的檢查試驗(yàn)方法

取葡萄糖2.0g至50mL納氏比色管中，加水20mL溶解后，滴加硝酸3滴，小火煮沸5min，放冷，加水稀釋使成45mL，加硫氰酸銨(30→100)3mL，搖勻，如顯色，與標(biāo)準(zhǔn)Fe溶液（10μg/mL）2.0mL用同一方法制成的對(duì)照液比較，白色背景下從上向下觀察，不得更深（0.001%）鐵鹽的檢查試驗(yàn)方法取葡萄糖2.0g至50mL納氏1810、重金屬檢查法硫代乙酰胺法原理：10、重金屬檢查法硫代乙酰胺法19重金屬檢查方法取50mL納氏比色管兩支，甲管中標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10μg/mL）2.0mL與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL后，加水稀釋至25mL;取葡萄糖4.0g至于乙管，加水20mL溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL，加水稀釋至25mL;再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2mL,搖勻，放置2min,同置白色背景上，從上向下觀察，不得更深。重金屬檢查方法取50mL納氏比色管兩支，甲管中標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（12011.砷鹽原理鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成具揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較，判定藥物中砷鹽的含量。其反應(yīng)式如下：AsO33-+3Zn+9H+AsH3+3Zn2++3H2OAsH3+2HgBr22HBr+AsH(HgBr)2黃色AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3

棕色11.砷鹽21檢砷裝置的準(zhǔn)備：取60mg醋酸鉛棉花撕成疏松狀，每次少量，用細(xì)玻璃棒輕輕而均勻的裝入導(dǎo)氣管中，裝管高度約60mm，用鑷子取出一片溴化汞試紙，置旋塞頂端平面上，蓋住孔徑，用橡皮筋固定。檢砷裝置的準(zhǔn)備：22砷鹽檢查方法

樣品砷鹽檢查：取葡萄糖2.0g至檢砷瓶中，加水5mL溶解后，加（濃）鹽酸5mL與水稀釋至28mL，加KI試液5mL與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10min后，加鋅粉2g，迅速將導(dǎo)氣管塞于瓶口上，并將檢砷器置在25℃下反應(yīng)45min，取出溴化汞試紙，將生成的砷斑與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（1μg/mL）在相同條件下生成的砷斑比較，顏色不得更深(0.0001%)。注意：KI試液與氯化亞錫還可抑制銻化氫的生成。砷鹽檢查方法樣品砷鹽檢查：取葡萄糖2.0g至檢砷瓶中，加23標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備：精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（As1μg/ml）2ml，于另一個(gè)試砷瓶中，加鹽酸5ml與蒸餾水21ml，照上述方法自“加碘化鉀試液5ml”起，依法操作，即得。

標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備：精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（As1μg/ml）2m24四、注意事項(xiàng)1．比色管的正確使用：選擇配對(duì)的兩支納氏比色管，用清潔液蕩洗除去污物，再用水沖洗干凈。采用旋搖的方法使管內(nèi)液體混合均勻。2．正確選用量具：根據(jù)檢查試驗(yàn)一般允許誤差為±10%的要求和藥品、試劑的取用量。3．平行操作：標(biāo)準(zhǔn)品與樣品必須同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，加入試劑量、順序等均應(yīng)一致。觀察時(shí)，兩管受光照的程度應(yīng)一致，使光線從正面照入，比色時(shí)置白色背景上，比濁時(shí)置黑色背景上，自上而下地觀察。4．砷鹽檢查時(shí)，取用的樣品管與標(biāo)準(zhǔn)管應(yīng)力求一致，管的長(zhǎng)短，內(nèi)徑一定要相同，以免生成的色斑大小不同，影響比色。鋅粒加入后，應(yīng)立即將檢砷管蓋上，塞緊，以免AsH3氣體逸出，反應(yīng)時(shí)勿隨意晃動(dòng)。5.砷鹽檢查實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，醋酸鉛棉花自導(dǎo)氣管上部全數(shù)夾出，廢液倒入回收桶，切勿倒入水槽以免造成堵塞。四、注意事項(xiàng)1．比色管的正確使用：選擇配對(duì)的兩支納氏比色管，25本實(shí)驗(yàn)技術(shù)要點(diǎn)：1.比色管正確使用；2.點(diǎn)滴瓶用法；3.檢砷瓶用法拿法及用法（醋酸鉛棉花塞入的位置、長(zhǎng)度及蓬松程度；導(dǎo)氣管的密閉程度等）；本實(shí)驗(yàn)技術(shù)要點(diǎn)：1.比色管正確使用；26下周預(yù)備實(shí)驗(yàn)-G板和H板的制備

（每人做一個(gè)G和一個(gè)H）1.G板：玻璃背面先貼上標(biāo)簽（G板），取硅膠G粉5g，加18毫升水，向同一個(gè)方向研磨混合，去除表面氣泡，從中心倒入潔凈玻璃板，研缽棒助涂布均勻(快速)，拍板，轉(zhuǎn)向，再拍板，平推，勿動(dòng)??！-做完讓老師看板，認(rèn)可后方能離開(kāi)。2.H板：玻璃背面先貼上標(biāo)簽（H板），取硅膠H粉5g，加18毫升CMC-Na，同上法制板，平推，勿動(dòng)！！下周預(yù)備實(shí)驗(yàn)-G板和H板的制備

（每人做一個(gè)G和一個(gè)H）127藥物分析實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一葡萄糖的分析藥物分析實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一葡萄糖的分析28一、教學(xué)目的

了解葡萄糖的全檢過(guò)程；掌握葡萄糖中氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽等一般雜質(zhì)檢查的基本原理、操作方法及雜質(zhì)限量計(jì)算；正確使用納氏比色管、檢砷器工作原理。一、教學(xué)目的了解葡萄糖的全檢過(guò)程；29葡萄糖結(jié)構(gòu)D-葡萄糖中國(guó)藥典收載：葡萄糖結(jié)構(gòu)D-葡萄糖中國(guó)藥典收載：30二、基本原理

葡萄糖分子中具有醛基，還原堿性酒石酸銅生成紅色氧化亞銅。

本實(shí)驗(yàn)除了檢查氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽等一般雜質(zhì)外，還檢查溶液的澄清度（目的檢查不溶性雜質(zhì)，如糊精、蛋白質(zhì)等）、亞硫酸鹽與可溶性淀粉（因制備時(shí)使用的酸可能帶有亞硫酸鹽，可溶性淀粉為引入的中間體）。C6H12O6+2Cu2++4OH-=C6H12O7+Cu2O↓+2H2O二、基本原理葡萄糖分子中具有醛基，還原堿性酒石31實(shí)驗(yàn)要求記錄每個(gè)試驗(yàn)項(xiàng)目的稱樣質(zhì)量記錄酸度的檢查、溶液的澄清度與顏色檢查、氯化物的檢查、硫酸鹽的檢查的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象給出實(shí)驗(yàn)結(jié)果、進(jìn)行結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)要求記錄每個(gè)試驗(yàn)項(xiàng)目的稱樣質(zhì)量32主要試劑及器皿酚酞指示液25%氯化鋇溶液0.020mol/LNaOH溶液稀硝酸10μg/mLNaCl標(biāo)準(zhǔn)溶液稀鹽酸100μg/mLK2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液器皿：50mL納氏比色管電子天平試劑：主要試劑及器皿試劑：33三、實(shí)驗(yàn)操作（二）鑒別取本品約0.2g，加水5mL溶解后，緩緩滴入溫?zé)岬膲A性酒石酸銅試液，即生成氧化亞銅紅色沉淀。三、實(shí)驗(yàn)操作（二）鑒別34（三）檢查

1.酸度的檢查取葡萄糖2.0g至50mL比色管，加水20mL溶解后，加酚酞指示劑3滴與0.020mol/L氫氧化鈉溶液0.20mL，應(yīng)顯粉紅色。記錄：稱量質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象標(biāo)準(zhǔn)要求：溶液應(yīng)粉紅色單項(xiàng)判定：□合格□不合格（三）檢查

1.酸度的檢查取葡萄糖2.0g至50mL比色管，352.溶液的澄清度與顏色檢查取葡萄糖12.5g至50mL納氏比色管中，加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至25mL，觀察，溶液應(yīng)澄清無(wú)色。記錄：稱量質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象標(biāo)準(zhǔn)要求：溶液應(yīng)澄清無(wú)色單項(xiàng)判定：□合格□不合格2.溶液的澄清度與顏色檢查取葡萄糖12.5g至50mL納氏比364.亞硫酸鹽與可溶性淀粉檢查

取本品1.0g至試管中，加水10mL溶解后，加0.1mol/L碘試液1滴，應(yīng)即刻顯示黃色。4.亞硫酸鹽與可溶性淀粉檢查取本品1.0g至377.氯化物的檢查

取葡萄糖0.60g至50mL納氏比色管中，加水溶解使成25mL（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10mL（如溶液不澄清，應(yīng)過(guò)濾），加水使成約40mL，搖勻，即得樣品溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)10μg/mL氯化鈉溶液6.0mL，置于50mL比色管中，加稀硝酸10mL，加水使約成40mL，搖勻，即得對(duì)照溶液。于樣品溶液和對(duì)照溶液中，分別加入1mL（用滴管滴20滴）0.1mol/L硝酸銀溶液，用水稀釋至50mL，搖勻，在暗處放置5min，在黑色背景下，從比色管上方向下觀察比較，樣品溶液如發(fā)生渾濁，與對(duì)照品比較不得更濃（0.010%）。7.氯化物的檢查取葡萄糖0.60g至38雜質(zhì)限量的計(jì)算

雜質(zhì)限量的計(jì)算39氯化物的限量氯化物的限量40實(shí)驗(yàn)記錄舉例實(shí)驗(yàn)記錄舉例418.硫酸鹽的檢查

取葡萄糖2.0g至50mL納氏比色管中，加水溶解使成約40mL（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性，如溶液不澄清，過(guò)濾），加稀鹽酸2mL，搖勻，即得樣品溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀（100μg/mL）溶液2.0mL置于50mL比色管中，加水使成40mL，加稀鹽酸2mL，搖勻，即得對(duì)照溶液。于樣品溶液和對(duì)照溶液中，分別加入25%氯化鋇溶液5mL，用水稀釋至50mL，充分搖勻，放置10min，在黑色背景下，從比色管上方向下觀察比較，樣品溶液如發(fā)生渾濁，與對(duì)照品比較不得更濃。（0.010%）8.硫酸鹽的檢查取葡萄糖2.0g至50mL42硫酸鹽的限量硫酸鹽的限量439.鐵鹽的檢查原理：鐵鹽在酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液同法處理后所呈顏色比較，判斷供試品鐵鹽是否超限。對(duì)照液葡萄糖9.鐵鹽的檢查原理：鐵鹽在酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性44鐵鹽的檢查試驗(yàn)方法

取葡萄糖2.0g至50mL納氏比色管中，加水20mL溶解后，滴加硝酸3滴，小火煮沸5min，放冷，加水稀釋使成45mL，加硫氰酸銨(30→100)3mL，搖勻，如顯色，與標(biāo)準(zhǔn)Fe溶液（10μg/mL）2.0mL用同一方法制成的對(duì)照液比較，白色背景下從上向下觀察，不得更深（0.001%）鐵鹽的檢查試驗(yàn)方法取葡萄糖2.0g至50mL納氏4510、重金屬檢查法硫代乙酰胺法原理：10、重金屬檢查法硫代乙酰胺法46重金屬檢查方法取50mL納氏比色管兩支，甲管中標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10μg/mL）2.0mL與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL后，加水稀釋至25mL;取葡萄糖4.0g至于乙管，加水20mL溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2mL，加水稀釋至25mL;再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2mL,搖勻，放置2min,同置白色背景上，從上向下觀察，不得更深。重金屬檢查方法取50mL納氏比色管兩支，甲管中標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（14711.砷鹽原理鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成具揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較，判定藥物中砷鹽的含量。其反應(yīng)式如下：AsO33-+3Zn+9H+AsH3+3Zn2++3H2OAsH3+2HgBr22HBr+AsH(HgBr)2黃色AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3

棕色11.砷鹽48檢砷裝置的準(zhǔn)備：取60mg醋酸鉛棉花撕成疏松狀，每次少量，用細(xì)玻璃棒輕輕而均勻的裝入導(dǎo)氣管中，裝管高度約60mm，用鑷子取出一片溴化汞試紙，置旋塞頂端平面上，蓋住孔徑，用橡皮筋固定。檢砷裝置的準(zhǔn)備：49砷鹽檢查方法

樣品砷鹽檢查：取葡萄糖2.0g至檢砷瓶中，加水5mL溶解后，加（濃）鹽酸5mL與水稀釋至28mL，加KI試液5mL與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10min后，加鋅粉2g，迅速將導(dǎo)氣管塞于瓶口上，并將檢砷器置在25℃下反應(yīng)45min，取出溴化汞試紙，將生成的砷斑與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（1μg/mL）在相同條件下生成的砷斑比較，顏色不得更深(0.0001%)。注意：KI試液與氯化亞錫還可抑制銻化氫的生成。砷鹽檢查方法樣品砷鹽檢查：取葡萄糖2.0g至檢砷瓶中，加50標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備：精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（As1μg/ml）2ml，于另一個(gè)試砷瓶中，加鹽酸5ml與蒸餾水21ml，照上述方法