鈣衛(wèi)蛋白在腫瘤壞死因子抑制劑治療幼年特發(fā)性關節(jié)炎臨床應答中的預測作用

鈣衛(wèi)蛋白在腫瘤壞死因子抑制劑治療幼年特發(fā)性關節(jié)炎臨床應答中的預測作用李暉;蔡瑋;陳開瀾【摘要】ObjectiveToinvestigatethecorrelationofserumcalprotectin(MRP8/14)expressionwithclinicalresponseinChinesejuvenileidiopathicarthritis(JIA)patientstreatedwithatumornecrosisfactor(TNF)inhibitor.MethodsSeventy-twoJIApatientsand30healthvolunteers(HCs)wereenrolledinthisprospectivestudy.AllJIApatientsreceivedetanerceptfor24weeks.SerumwascollectedfromJIApatientsatbaselinebeforetreatmentandfromHCs.ClinicalresponsewasdefinedaccordingtotheAmericanCollegeofRheumatology(ACR)Pedi50criteria.ResultsSerumMRP8/14expressionwasgreaterinJIApatientsthaninHCs(P＜0.001).SerumMRP8/14levelwasgreaterinrespondersthaninnon-responders(areaunderthereceiveroperatingcharacteristiccurve,0.823;95thathighserumMRP8/14expressionwasanindependentpredictivefactorforclinicalresponse(P=0.003).ConclusionSerumMRP8/14levelcanbeusedasaconvincingandnovelbiomarkerforclinicalresponseinJIApatientstreatedwithaTNFinhibitor.%目的評估血清鈣衛(wèi)蛋白(MRP8/14)水平在腫瘤壞死因子(TNF)抑制劑治療中國人群幼年特發(fā)性關節(jié)炎(JIA)患者臨床應答中的預測作用.方法納入72例接受依那西普治療24周的JIA患者和30例健康志愿者(HCs),采用免疫酶吸附法檢測JIA患者基線期和HCs血清MRP8/14水平.臨床應答定義為實現(xiàn)ACR兒科臨床應答標準ACRpedi50.結果JIA患者中血清MRP8/14水平HCs(P0.001)MRP8/14組(P0.001),MRP8/140.823(95CI:0.706～0.939)logisticMRP8/14(P=0.003)MRP8/14TNFJIA【期刊名稱】《中國醫(yī)科大學學報》【年(卷),期】2017(046)009【總頁數(shù)】5頁(P825-829)【關鍵詞】幼年特發(fā)性關節(jié)炎;鈣衛(wèi)蛋白;腫瘤壞死因子抑制劑;臨床應答【作者】李暉;蔡瑋;陳開瀾【作者單位】430016430016430016【正文語種】中文【中圖分類】R593.22腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor，TNF）抑制劑作為幼年特發(fā)性關節(jié)炎（juvenileidiopathicarthritis，JIA）最有效的治療方式，可快速緩解患者的疾病活動度，在一定程度上抑制放射學進展［1］，但依然有20%～30%的患者治療療效不佳［2］。鈣衛(wèi)蛋白（MRP8/14）是中性粒細胞的衍生蛋白，其在JIA、類風濕關節(jié)炎（rheumatoidarthritis，RA）、炎癥性腸病（inflammatoryboweldisease，IBD）等多種免疫性疾病中都表現(xiàn)出促炎作用［3-5］。HOLZINGER等［6］發(fā)現(xiàn)，血清MRP8/14在JIA患者中高表達，且與疾病活動度相關；ANINK［3］的研究顯示，血清MRP8/14JIA6MRP8/14TNFJIA患者中的療效預測作用尚未MRP8/14水平在TNF抑制劑治療中國人群JIA患者臨床療效應答中的預測作用。2010912015830TNF（依那西普）治療的JIA72例。入組標準：家屬簽2001（internationalleagueofassociationsforrheumatology，ILAR）JIA3和血液、內(nèi)分泌系統(tǒng)病變及病史者（嚴重程度的評價標準為肝功能≥2g/L；血小板80×109/L）；正處于急、慢性感染期間，或既往有活動性結核史者；惡性度心力衰竭（3～4）；研究者認為的不適合使用依那西普的其他30JIA本研究獲得武漢市婦女兒童醫(yī)療保健中心倫理委員會批準，所有受試者家屬均簽署書面知情同意書。JIA患者均采用依那西普進行治療（0.4mg/kg皮下注射，2次/周），2424ACRACRpedi50將患者劃分為應答組與不應答組［7］。ACRpedi50應答標準為以下6項核心指標中至少3項改善≥50%，且不超過1項惡化≥30%：紅細胞沉降率（erythrocytesedimentationrate，ESR）、兒童健康評估問卷（childhoodhealthassessmentquestionnaire，CHAQ）、活動性炎性關節(jié)計數(shù)、活動受限關節(jié)計數(shù)、醫(yī)師對疾病的總體評估、患兒或患兒父母對病情的總體評估［7］。MRP8/14JIA4mL，置于不含乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）1h，41000g10min416000g10min，取上清液置于-80采用免疫酶聯(lián)吸附法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA），按照MRP8/14ELISA試劑盒（Immunodiagnostik公司，德國）說明書操作，對患者血清中MRP8/14的水平進行檢測。采用SPSS21.0軟件進行統(tǒng)計學分析。定量資料的組間差異比較采用Mann-Whitney檢驗（偏態(tài)），定性資料組間的差異比較采用χ2檢驗進行分析。應用受試者工作特征（receiveroperatingcharacteristic，ROC）曲線進行血清MRP8/14對依那西普治療JIA患者臨床應答的預測作用分析，并進一步采用單因素、多因素logistic邏輯回歸模型分析影響依那西普治療JIA患者臨床應答的因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。JIA患者中血清MRP8/14水平為1464（798～2947）ng/mL，顯著高于年齡、性別匹配的健康對照組［202（112～368）ng/mL，P＜0.001］。72例JIA患者中，9例未持續(xù)用藥至第24周（4例感染和3例失訪，未納入最后臨床應答分析；2例療效不佳，納入不應答組進行分析），因此納入最終分析的24周臨床療效應答患者為65例，患者年齡中位值為11.5（8.3～14.2）歲、女42例（65%）、病程42（24～67）個月，其他臨床特征、合并用藥和JIA類型見表1。2465JIA46ACRpedi50，為應答組；19ACRpedi5019例無應答患者，6TNF（英夫利昔單抗）治療，96（interleukin6，IL-6）抑制劑治療，43C反應蛋白（C-reactiveprotein，CRP）［34.9（23.3～42.6）mg/Lvs24.4（17.1～35.2）mg/L，P=0.076］；JIA（7%vs26%，P0.027）。2間其他人口學信息、臨床特征、合并用藥、JIA亞型差異均無統(tǒng)計學意義，見表1MRP8/142189（995～3588）ng/mL，顯著高于不應答組［748（284～1130）ng/mL，P＜0.001］。采用ROC曲線進行分析，顯示MRP8/14水平預測依那西普治療JIA患者臨床應答曲線下面積（areaundercurve，AUC）為0.823，95%CI：0.706～0.939（圖1）。采用整體65例JIA患者中MRP8/14血清水平中位值1426ng/mL作為切割點，預測敏感度65.2%，特異度84.2%。MRP8/14JIA65JIAMRP8/141426ng/mL為切割點，將MRP8/14高水平組（＞1426ng/mL）MRP8/14低水平組（≤1426ng/mL），1中應答組與不應答組差異分析中P0.1的因素一起納logistic回歸分析，單因素回歸分析中P0.1的因素再進一步納入多l(xiāng)ogisticCRP65JIA28.9mg/L為切割點，分CRP組（＞28.9mg/L）CRP組（≤28.9mg/L）；按照是否全身型JIAJIAJIA單因素logistic回歸顯示，基線期血清MRP8/14高水平可以顯著預測臨床應答（OR=9.098，95%CI：2.310～35.832，P=0.002），JIA（OR=5.199，95%CI：1.083～24.196，P=0.039）。logisticMRP8/14JIA患者約8（OR=8.926，95%CI：2.085～38.218，P=0.003），見表2。MRP8/14，又稱S100A8/A9，隸屬于S100類蛋白，其亞基包含2個鈣結合EF手型結構蛋白，是中性粒細胞中比例最高的蛋白［8-9］。MRP8/14表達具有組織或細胞特異性，可作為急性炎癥細胞活化的標志物［10］，同時它也是一種宿主防御蛋白，進入細胞微環(huán)境后可結合微生物生長繁殖所必須的鋅錳離子，進而抑制其增殖，從而發(fā)揮抑制病原微生物生長的作用［11］。MRP8/14Toll4CD8+TIL-17表達水平的上調(diào)［12］。在抗原誘導的小鼠關節(jié)炎模型中，S100A8-/A9-（MRP8-/14-）小鼠關節(jié)腫脹數(shù)顯著低于對照組，軟MRP8-/14-組未顯示MRP8/14并破壞關節(jié)軟骨［13］。本研究發(fā)現(xiàn)，JIAMRP8/14水平顯著高于健康HOLZINGER等［6］MRP8/14JIAMONCRIEFFE［14］MRP8/14水平可以預測接受甲氨蝶呤治JIA患者的治療應答。ANINK［3］TNF6JIAMRP8/14TNF24MRP8/14MRP8/14高表達水平是TNF抑制劑治療JIA患者療效應答的獨立預測因素，其可以增加8倍療效應答概率。MRP8/14TNF［5］對使用不同TNFRA16MRP8/14水平顯著高于不應答組，進一步多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，MRP8/14的獨立預測因素；BOSCHETTI等［15］納入使用TNF抑制誘導治療的IBD患者，持續(xù)隨訪1年，發(fā)現(xiàn)糞便MRP8/14水平與誘導治療應答顯著相關。此研究尚有一些不足之處，樣本量可以進一步擴大，除依那西普外其他TNF抑制劑治療JIA的評估未納入。因此進一步研究方向為納入更大樣本量的JIA患者，使用不同類型TNF抑制劑進行治療，檢測其治療前基線期MRP8/14血清水平，深入評估MRP8/14在不同TNF抑制劑治療JIA患者中的臨床應答預測作用。TNFJIA患者，達到臨床應答MRP8/14MRP8/14MRP8/148TNFJIA［1］KLOTSCHEJ，NIEWERTHM，HAASJP，etal.Long-termsafetyofetanerceptandadalimumabcomparedtomethotrexateinpatientswithjuvenileidiopathicarthritis（JIA）［J］.AnnRheumDis，2016，75（5）：855-861.DOI：10.1136/annrheumdis-annrheumdis-2014-206747.［2］OTTENMH，PRINCEFH，ARMBRUSTW，etal.Factorsassociatedwithtreatmentresponsetoetanerceptinjuvenileidiopathicarthritis［J］.JAMA，2011，306（21）：2340-2347.DOI：10.1001/jama.2011.1671.［3］ANINKJ，VANSUIJLEKOM-SMITLW，OTTENMH，etal.MRP8/14serumlevelsasapredictorofresponsetostartingandstoppinganti-TNFtreatmentinjuvenileidiopathicarthritis［J］.ArthritisResTher，2015，17：200.DOI：10.1186/s13075-015-0723-1.［4］MOSLIMH，ZOUG，GARGSK，etal.C-reactiveprotein，fecalcalprotectin，andstoollactoferrinfordetectionofendoscopicactivityinsymptomaticinflammatoryboweldiseasepatients：asystematicreviewandmeta-analysis［J］.AmJGastroenterol，2015，110（6）：802-819，820.DOI：10.1038/ajg.2015.120.［5］CHOIIY，GERLAGDM，HERENIUSMJ，etal.MRP8/14serumlevelsasastrongpredictorofresponsetobiologicaltreatmentsinpatientswithrheumatoidarthritis［J］.AnnRheumDis，2015，74（3）：499-505.DOI：10.1136/annrheumdis-2013-203923.［6］HOLZINGERD，F(xiàn)ROSCHM，KASTRUPA，etal.TheToll-likereceptor4agonistMRP8/14proteincomplexisasensitiveindicatorfordiseaseactivityandpredictsrelapsesinsystemic-onsetjuvenileidiopathicarthritis［J］.AnnRheumDis，2012，71（6）：974-980.DOI：10.1136/annrheumdis-2011-200598.［7］GIANNINIEH，RUPERTON，RAVELLIA，etal.Preliminarydefinitionofimprovementinjuvenilearthritis［J］.ArthritisRheum，1997，40（7）：1202-1209.［8］HEIZMANNCW，F(xiàn)RITZG，SCHAFERBW.S100proteins：structure，functionsandpathology［J］.FrontBiosci，2002，7：d1356-d1368.［9］LEUKERTN，VOGLT，STRUPATK，etal.Calcium-dependenttetramerformationofS100A8andS100A9isessentialforbiologicalactivity［J］.JMolBiol，2006，359（4）：961-972.DOI：10.1016/j.jmb.2006.04.009.［10］UCHIDAT，F(xiàn)UKAWAA，UCHIDAM，etal.Applicationofanovelproteinbiochiptechnologyfordetectionandidentificationofrheumatoidarthritisbiomarkersinsynovialfluid［J］.JProteomeRes，2002，1（6）：495-499.［11］BROPHYMB，HAYDENJA，NOLANEM.Calciumiongradientsmodulatethezincaffinityandantibacterialactivityofhumancalprotectin［J］.JAmChemSoc，2012，134（43）：18089-18100.DOI：10.1021/ja307974e.［12］VOGLT，TENBROCKK，LUDWIGS，etal.Mrp8andMrp14areendogenousactivatorsofToll-likereceptor4，promotinglethal，end