二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的制備

關(guān)于二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的制備第一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日二級(jí)菌種和三級(jí)菌種接種第二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第三章二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的制備

食用菌生產(chǎn)多采用三級(jí)菌種繁育體系，也有采用二級(jí)菌種繁育體系的。經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)，增加菌絲體的適應(yīng)能力，使其粗壯;并檢驗(yàn)菌種生活力、純度;擴(kuò)大菌種數(shù)量，滿足生產(chǎn)需要。第三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第三章二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的制備第一節(jié)培養(yǎng)料的配制與滅菌第二節(jié)接種與培養(yǎng)第三節(jié)質(zhì)量鑒定第四節(jié)液體菌種生產(chǎn)和使用第四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第一節(jié)培養(yǎng)料的配制與滅菌一、培養(yǎng)料的配制二、培養(yǎng)料的滅菌第五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日一、培養(yǎng)基的配制㈠培養(yǎng)料配制的原則㈡培養(yǎng)料常用配方㈢培養(yǎng)料配制工藝流程第六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日㈠培養(yǎng)料配制的原則●要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)●營養(yǎng)物質(zhì)配制的比例要適當(dāng)●選擇經(jīng)濟(jì)使用來源廣泛的原料●適宜的酸堿度第七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日㈡培養(yǎng)料常用配方

常用的配方為78：20：1：1

78：指供應(yīng)碳源的主料，包括木屑、玉米芯、秸稈、稻草等。

20：指米糠、麩皮。

1：指糖。

1：石灰、石膏等第八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日㈡培養(yǎng)料常用配方木屑培養(yǎng)基棉籽殼、蔗糖培養(yǎng)基玉米芯、花生殼培養(yǎng)基第九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

木屑培養(yǎng)基

﹡闊葉樹木屑78%，米糠或麩皮20%，蔗糖1%，石膏粉1%。第十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日木屑培養(yǎng)基

﹡闊葉樹木屑93%，米糠或麩皮5%，蔗糖1%，尿素0.4%，碳酸鈣0.4%，磷酸二氫鉀0.2%。第十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日木屑培養(yǎng)基

﹡闊葉樹木屑75%，麩皮22%，蔗糖1.5%，石膏粉1.4%，維生素B10.1%。

適用于平菇、鳳尾菇、木耳、猴頭、靈芝、金針菇、榆黃蘑等菌種的培養(yǎng)。

第十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日棉籽殼、蔗糖培養(yǎng)基

﹡棉籽殼78%，麩皮20%，蔗糖1%，石膏粉1%。第十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日棉籽殼、蔗糖培養(yǎng)基

﹡棉籽殼96%，蔗糖2%，過磷酸鈣1%，石膏粉1%。

適用于平菇、鳳尾菇、毛木耳、金針菇等菌種的培養(yǎng)。第十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日玉米芯、花生殼培養(yǎng)基

﹡玉米芯%，米糠或麩皮20%，蔗糖1%，石膏粉1%。第十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日玉米芯、花生殼培養(yǎng)基

﹡玉米芯80%，米糠10%，玉米粉8%，石膏粉1%，磷酸二氫鉀0.2%。

第十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日玉米芯、花生殼培養(yǎng)基

﹡花生殼78%，米糠20%，蔗糖1.5%，石膏粉1%。

適用于平菇、香菇、木耳、猴頭、靈芝等菌種的培養(yǎng)。第十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日㈢培養(yǎng)料配制工藝流程●稱料●拌料●調(diào)節(jié)pH●分裝培養(yǎng)料●分裝容器的封口第十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●稱料

將預(yù)處理過的培養(yǎng)料（以不刺破容器為準(zhǔn)，過4目的篩子），按生產(chǎn)規(guī)模進(jìn)行稱取。先稱主料，后稱輔料。第十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●拌料

將不溶性的料干混均勻，可溶性的料加少量的水配成母液，邊潑澆邊混拌，含水量為60%。第二十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第二十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●調(diào)節(jié)pH

將培養(yǎng)料堆悶0.5～1.0h后，測定酸堿度，因?yàn)闇缇髉H下降1～1.5，所以高調(diào)1～1.5，調(diào)致6.5～7.0較為合適。第二十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●分裝培養(yǎng)料

分裝培養(yǎng)料時(shí)，邊裝邊壓，松緊適中（中下部稍松，上部稍緊），然后平整料面，在料中央打洞。第二十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第二十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第二十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第二十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第二十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡料中央打洞的目的

1.增加培養(yǎng)料與空氣的接觸面積以利菌絲生長；

2.便于固定接種塊；

3.讓部分菌種掉進(jìn)洞內(nèi)，增加接種點(diǎn)，縮短發(fā)菌周期。第二十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●分裝容器的封口

﹡瓶裝容器的封口：罐頭瓶用12㎝×12㎝×0.004㎝的低壓聚乙烯或聚炳烯膜封口；

﹡袋裝容器的封口：用無棉蓋體封口、擰口、折口等。第二十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第三十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第三十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第三十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第三十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第三十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日二、培養(yǎng)料的滅菌●常壓蒸氣滅菌●高壓蒸氣滅菌●滅菌效果的檢驗(yàn)第三十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●常壓蒸氣滅菌

當(dāng)?shù)蛯优囵B(yǎng)料的溫度達(dá)到100℃時(shí)，保持8～12h，培養(yǎng)料內(nèi)的雜菌已被徹底殺死。第三十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●高壓蒸氣滅菌

在121～128℃、0.11～0.14MPa下，木屑、棉耔殼培養(yǎng)料保持1～1.5h，谷粒培養(yǎng)料則需2.0～2.5h。第三十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●滅菌效果的檢驗(yàn)

隨機(jī)抽樣，置于25～30℃的條件下，培養(yǎng)3～5d，若沒有雜菌長出，說明滅菌徹底。第三十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

第二節(jié)接種與培養(yǎng)一、接種設(shè)備的使用規(guī)程二、二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的接種三、二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的培養(yǎng)第三十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

一、接種設(shè)備的使用規(guī)程●接種室使用規(guī)程●超凈工作臺(tái)使用規(guī)程●接種箱（室）的雜菌檢查第四十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●接種室使用規(guī)程

1.使用前半小時(shí)，把所需物品搬入接種場所噴霧消毒，關(guān)閉門窗，開啟紫外線燈照射0.5h。

2.穿上工作服和鞋，戴好口罩、帽，用2％來蘇爾洗手。

第四十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

3.操作前，用酒精棉球擦手。操作時(shí)，減少空氣波動(dòng)。兩人操作時(shí)應(yīng)配合默契，用完的廢棉球等應(yīng)丟到廢物桶內(nèi)。

4.接種結(jié)束及時(shí)收拾臺(tái)面，然后用石炭酸噴灑。第四十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

5.注意安全。如棉塞著火，用手緊握或用濕布撲滅，勿吹。若有帶菌物灑落，用抹布沾石炭酸，收拾到廢物桶內(nèi)，用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。第四十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●超凈工作臺(tái)使用規(guī)程1.把超凈工作臺(tái)用75％酒精擦凈。2.搬入培養(yǎng)料和菌種。3.接種工具事先高溫滅菌備用。雙手用酒精棉球擦凈。4.開動(dòng)機(jī)器約20min后，接種區(qū)空氣凈化完成，即可接種。第四十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

5.操作時(shí)，動(dòng)作輕盈，頭、手盡量置于接種材料的下風(fēng)側(cè)，接種用具放在臺(tái)面兩側(cè)。

6.接種結(jié)束，移去接種材料，再停止運(yùn)轉(zhuǎn)。7.如經(jīng)常使用，每2～3個(gè)月檢查一次空氣的無菌程度。如不合標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)及時(shí)更換超細(xì)纖維過濾板。第四十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●接種箱（室）的雜菌檢查1.制備6支PDA或牛肉膏的斜面或平板。

2.斜面打開棉塞，直立放置0.5h。培養(yǎng)皿開蓋5min，并在接種過程中和接種完畢時(shí)，進(jìn)行同樣檢查。寫明標(biāo)簽，檢查熏蒸、噴霧消毒藥液及紫外線燈光殺菌的效果。3.將檢查的6支斜面或6個(gè)培養(yǎng)皿，置于30℃下培養(yǎng)48h，檢查菌落生長數(shù)。

第四十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

4.平板內(nèi)≤3個(gè)菌落，斜面上無菌落的為合格。否則為污染嚴(yán)重。霉菌多時(shí)，用石炭酸噴霧后用甲醛熏蒸。如細(xì)菌多，可用乳酸和甲醛交替熏蒸。第四十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日二、二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的接種●接種的無菌操作規(guī)程●二級(jí)菌種的接種●三級(jí)菌種的接種●塑料袋接種●幾種簡易的接種方法第四十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●接種的無菌操作規(guī)程

1.按種空間徹底滅菌。凡是菌種所暴露的部位或通過的空間，都必須是無菌區(qū)。

2.酒精燈火焰封口(瓶口或管口)。3.接種工具灼燒后冷卻，再取菌種，所取菌種不得在火焰旁停留，也不要通過火焰，以免菌種燒傷。4.封口物，不要隨便放在臺(tái)面上,管口或瓶口不得和其他物體接觸。第四十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日5.接種工具徹底灼燒滅菌（包括進(jìn)入試管的其他部位）。

6.接種過程中，管口或瓶口，應(yīng)立即燒灼，以燒死多數(shù)雜菌。在操作時(shí)，試管口或瓶口不得離開火焰附近，在無菌區(qū)即可。7.燒灼的接種工具冷卻后，取少許菌種迅速抽出。注意不要碰到管、瓶壁，取出時(shí)不可通過火焰，以免燒死菌絲。第五十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日8.

將取出的菌種迅速送入待接袋(或)內(nèi)培養(yǎng)料的孔內(nèi)。

9.抽出接種工具，將管口(或瓶口)在火焰上燒灼，立即封口。第五十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●二級(jí)菌種的接種

把試管菌種接入二級(jí)菌種培養(yǎng)料中的過程稱為二級(jí)菌種接種。二級(jí)種要求純度高、質(zhì)量好。第五十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●二級(jí)菌種的接種

﹡接種前的準(zhǔn)備

﹡二級(jí)菌種的接種第五十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡接種前的準(zhǔn)備

1.一級(jí)種選擇：選擇種性純正，健壯、濃密、整齊的一級(jí)種。2.接種箱(室)消毒：用84噴灑后再開紫外燈20min。用酒精棉球擦管（瓶）外面，管口、瓶口和棉塞都要在火焰上烘烤。第五十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日一點(diǎn)接種

切取2㎝菌種，迅速送入菌種瓶內(nèi)的接種穴上，立即封口。每支一級(jí)菌種可接5～8瓶二級(jí)種。

第五十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日兩點(diǎn)接種

先在接種穴內(nèi)放一塊菌種，后在接種穴口上放一塊菌種。每支斜面菌種可接二級(jí)菌種3～5瓶。第五十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日接種箱、超凈臺(tái)第五十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日接種箱、超凈臺(tái)第五十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日接種箱、超凈臺(tái)第五十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第六十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●三級(jí)菌種的接種

把二級(jí)菌種接入三級(jí)菌種培養(yǎng)料中的過程稱為三級(jí)菌種接種。三級(jí)菌種用玻璃瓶或塑料袋生產(chǎn)。第六十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●三級(jí)菌種的接種﹡接種前的準(zhǔn)備﹡三級(jí)菌種的接種﹡塑料袋接種﹡幾種簡易的接種方法第六十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡接種前的準(zhǔn)備

把所需物品搬入接種箱(室)中，將二級(jí)種橫置于接種架上，待接種的料瓶(袋)臥放。然后對接種場所進(jìn)行消毒處理。第六十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡三級(jí)菌種的接種

用酒精棉球擦拭瓶外壁，以火焰瓶口。夾取燃著的酒精棉球，燒灼二級(jí)種瓶口、瓶頸內(nèi)壁，進(jìn)行瓶口消毒。用灼燒后的鑷子扒去老菌皮，搗碎菌料，火焰封口，放在接種瓶架上。第六十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

單人操作時(shí)，左手執(zhí)料瓶，右手拔去棉塞用小指和手掌夾住，掀起封口紙一個(gè)小角。右手執(zhí)接種工具，灼燒后，取2㎝大小原種塊。迅速投入料瓶內(nèi)。一般每瓶二級(jí)種可接40～80瓶三級(jí)種。第六十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡三級(jí)菌種的接種第六十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第六十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡塑料袋接種

由于塑料袋質(zhì)軟，袋口不能直立，又不能接近火焰，操作不不埂。最好在無菌條件較好的接種箱(帳)內(nèi)接種。接種時(shí)采用單人或雙人操作法進(jìn)行接種。第六十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第六十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡幾種簡易的接種方法1.蒸氣接種法2.電爐接種法3.扇形多頭酒精燈接種法

第七十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日1.蒸氣接種法⑴原理⑵方法第七十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日⑴原理

需要小接種室和一套蒸氣發(fā)生器。電爐上放一鋁鍋，作為蒸氣發(fā)生器，在鍋蓋中央挖一個(gè)直徑10厘米的圓孔，蒸氣在圓孔內(nèi)集中向外擴(kuò)散，把含有雜菌的空氣排開，形成無菌區(qū)。第七十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第七十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日⑵方法

接種前，向空中噴水，使空中孢子隨水滴沉降。將培養(yǎng)料趁熱搬進(jìn)接種室，待料溫降至30℃以下時(shí)開始接種。在此之前將水燒開，把接種工具等放入水中煮沸15分鐘、然后即可接種。第七十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

兩人配合，一人左手握菌種瓶(或管)，右手拿接種工具，負(fù)責(zé)將菌種接入待接的瓶、袋內(nèi)，另一人將待接的瓶、袋開塞或開口，接入菌種后立即封口。菌種瓶口、接種工具，待接瓶口(或袋口)及棉塞，不得離開蒸氣，以免感染雜菌。瓶口要稍向下傾斜。兩人接種，一次可接500～800瓶。第七十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日2.電爐接種法

800～1000瓦電爐，用薄鐵皮做一個(gè)內(nèi)徑30～50㎝，高40～60㎝的圓筒，罩在電爐外即成。這樣熱流集中于筒頂口形成一個(gè)無菌區(qū)，其范圍和熱力遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過酒精燈火焰。一套設(shè)備可供3～4人同時(shí)操作。操作時(shí)，盡可能縮短時(shí)間，以避免燙死菌絲。第七十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第七十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日三、二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的培養(yǎng)

需放置在適宜的環(huán)境條件下進(jìn)行培養(yǎng)。菌種的培養(yǎng)實(shí)質(zhì)是對菌絲體的培養(yǎng)。第七十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日三、二級(jí)菌種和三級(jí)菌種的培養(yǎng)●培養(yǎng)的重點(diǎn)工作●出現(xiàn)的異?，F(xiàn)象第七十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●培養(yǎng)的重點(diǎn)工作

1.二級(jí)種、三級(jí)種接種后，及時(shí)移入徹底處理過的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，溫度調(diào)致23～25℃，空氣相對濕度65～70％。2.培養(yǎng)2～3d后檢查雜菌。發(fā)現(xiàn)有污染的立即取出。開始每天檢查一次，當(dāng)菌絲覆蓋培養(yǎng)料，并吃料1～2㎝時(shí)，每周檢查一次。

第八十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

3.檢查溫度變化。當(dāng)菌絲快滿瓶（袋）時(shí)，將培養(yǎng)溫度降低2～3℃，起到壯菌的作用。4.培養(yǎng)3～5d后檢查成活率。發(fā)現(xiàn)菌種塊沒有萌發(fā)的，應(yīng)剔出單獨(dú)放，一周后仍未萌發(fā)，要及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)種。5.培養(yǎng)室要保持空氣新鮮、清潔、遮光，濕度過大時(shí)，要進(jìn)行通風(fēng)。

6.殺菌、殺蟲、防鼠工作，貫徹始終。第八十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

7.菌種(特別是二級(jí)菌種)培養(yǎng)好后，及時(shí)使用。二級(jí)菌種滿瓶后7～10d，菌絲處于快速生長期，適應(yīng)性較強(qiáng)。三級(jí)菌種培育好后，要置于低溫、干燥、清潔的室內(nèi)避光保存一個(gè)月。第八十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●菌種培養(yǎng)中出現(xiàn)的異?，F(xiàn)象

培養(yǎng)二級(jí)種和三級(jí)種時(shí)，若能選擇優(yōu)良菌種、合理配方、優(yōu)質(zhì)原料、嚴(yán)格滅菌、遵循無菌操作規(guī)程和科學(xué)培育，可培養(yǎng)出優(yōu)良的二級(jí)種和三級(jí)種。但因種種因素，會(huì)出現(xiàn)異?，F(xiàn)象，如雜菌污染、菌絲不萌發(fā)、不生長或菌絲發(fā)生萎縮衰退等現(xiàn)象。第八十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●出現(xiàn)異?，F(xiàn)象的處理◆雜菌污染◆斷菌◆退菌◆菌絲徒長◆不吃料第八十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日◆雜菌污染第八十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日◆雜菌污染第八十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日◆雜菌污染第八十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日◆雜菌污染第八十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日◆雜菌污染第八十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日◆雜菌污染﹡雜菌污染的原因﹡防止雜菌污染措施第九十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡雜菌污染的原因

1.如果雜菌在培養(yǎng)料的上、中、下部位同時(shí)發(fā)生。是由于培養(yǎng)料滅菌不徹底造成的。2.如果雜菌開始發(fā)生在接種塊上。是母種或原種已被污染，或者是由于接種工具滅菌不徹底造成。3.如果雜菌先在培養(yǎng)基表面發(fā)生。由于接種過程中無菌操作不嚴(yán)格引起的。第九十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

4.如果雜菌在接種若干天后才發(fā)生，并首先發(fā)生在從瓶口往下生長的菌絲上，說明是從棉塞侵入培養(yǎng)料的。是培養(yǎng)室濕度過大，棉塞受潮，造成霉菌滋生所致。第九十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日﹡防止雜菌污染措施

1.搞好環(huán)境衛(wèi)生。制種人員必須建立起正常的清潔衛(wèi)生制度，不斷清除污物，并加以藥劑消毒，不讓雜菌有滋生的余地。2.處理好原料。嚴(yán)加管理，杜絕任其堆放原料，不加保護(hù)，上下受潮霉變、中間生蟲、骯臟不堪的現(xiàn)象。第九十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

3.調(diào)整含水量和酸堿度。培養(yǎng)料的水分適當(dāng)，酸堿度適宜，則發(fā)菌順利，不易生雜菌。常見的毛病是；用水不稱也不量，酸堿度不測更無調(diào)節(jié)。4.保護(hù)培養(yǎng)料。滅過菌的培養(yǎng)料應(yīng)該加以保護(hù)。以為滅過菌，馬虎了事，不遮不蓋，污染嚴(yán)重。

第九十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

5.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程。要耐心、細(xì)致，切忌碰擦粘帶。

問題：器械不洗依靠熏，不擦酒精依靠熏，擦了酒精就不用火焰燒，碰擦污物不重?zé)?。第九十五頁，共一百一十八頁?022年，8月28日正確作法

接種的用具、容器，能洗的要洗干凈，能熏的要熏蒸，能擦酒精的要擦酒精，能用酒精燈火焰燒的要用火焰燒。大量的三級(jí)種可兩人接種，把好火焰封鎖關(guān)，一人持料瓶，一人接種，不離火焰無菌區(qū)，配合默契，動(dòng)作敏捷。第九十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日◆不吃料現(xiàn)象

接入菌種瓶內(nèi)的母種或原種，菌絲不萌發(fā)；有些菌種塊上的菌絲雖萌發(fā)，但不向料內(nèi)生長，以后逐漸萎縮變黃。第九十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日產(chǎn)生原因

1.培養(yǎng)料配方不合理，配制不科學(xué)。

2.培養(yǎng)料含水量、pH不適合，菌絲不吃料。

3.接種場所處理時(shí)，用藥量過多或溫度過高，致使菌絲受藥害死亡。

4.滅菌以后，搶溫接種溫度過高，致使菌絲遇高溫而死亡。第九十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

5.接種工具未冷卻或菌絲塊靠火焰太近，菌絲被燙死或燒死。

6.接入的母種或原種，在不條件下長期儲(chǔ)藏，菌絲老化失去生長能力。

7.菌種瓶（袋）內(nèi)潛入螨類，咬食菌種塊，致使菌絲消失。

第九十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第四節(jié)液體菌種生產(chǎn)和使用液體菌種：在無菌條件下，將母種接種于合適的液體培養(yǎng)基中，給予適宜的條件，通過震蕩、攪拌等方式培養(yǎng)出來的菌絲球稱為液體菌種。第一百頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第四節(jié)液體菌種生產(chǎn)和使用一、液體菌種的優(yōu)點(diǎn)二、液體菌種培養(yǎng)液配方三、液體菌種的培養(yǎng)四、液體菌種的使用第一百零一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日一、液體菌種的優(yōu)點(diǎn)●菌種生產(chǎn)周期短●接于固體料中發(fā)菌快●菌齡整齊一致●接種方便第一百零二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日二、液體菌種培養(yǎng)液配方

1.葡萄糖30％，豆餅粉2％，玉米粉1％，酵母粉0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，碳酸鈣0.2％，硫酸鎂0.05％，pH自然。適于多種食用菌的液體培養(yǎng)。第一百零三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

2.可溶性淀粉3～6％、蔗糖1％，磷酸二氫鉀0.3％，硫酸鎂0.15％，酵母膏0.1％，pH值調(diào)至6。適于平菇、香菇、猴頭菇，以平菇最為適宜?？扇苄缘砼慰稍黾优囵B(yǎng)液粘度，菌絲球小而多，菌絲球分散性好。第一百零四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

3.馬鈴薯20％，葡萄糖2％，硫酸銨0.2％，磷酸二氫鉀0.1％，硫酸鎂0.05％，維生素B110毫克/升，瓊脂0.05％，pH自然。適于培養(yǎng)香菇，菌絲生長快、菌球大、多，周圍有絨毛，絨毛狀菌普遍存在培養(yǎng)液中，有利于播種。第一百零五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

4.玉米粉4％，水解魚粉2％，酵母膏0.1％，磷酸二氫鉀0.15％，硫酸鎂0.05％，pH自然。適于培養(yǎng)金針菇，猴頭菌。第一百零六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

5.葡萄糖2.5％，酵母膏0.35％，玉米漿(含氮量7.1％)0.18％，磷酸二氫鉀0.1％，硫酸鎂0.05％，氯化鈣0.006％，每升培養(yǎng)液內(nèi)另加硫酸鋅4毫克，硫酸錳5毫克，檸檬酸鐵5毫克，維生素B10.1毫克。適于培養(yǎng)茯苓。第一百零七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日三、液體菌種的培養(yǎng)

液體菌種的培養(yǎng)：采用搖床生產(chǎn)的搖瓶培養(yǎng)法和采用發(fā)酵罐生產(chǎn)的深層培養(yǎng)法。第一百零八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日●液體菌種的搖瓶培養(yǎng)

搖床室溫在24～26℃，培養(yǎng)72～96h。培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，因菌種不同，培養(yǎng)液出現(xiàn)不同色澤。平菇，金針菇的培養(yǎng)液呈淺黃色，香菇、猴頭菌的培養(yǎng)液呈黃棕色，清澈透明，有許多菌絲小球，并有菇香。木耳的培養(yǎng)液呈褐色、粘稠，有香甜味。培養(yǎng)液混濁，多是細(xì)菌污染。培養(yǎng)液經(jīng)顯微鏡檢查后。方可用于生產(chǎn)。

第一百零九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

搖床培養(yǎng)，只適于固體菌種的接種。液體菌種供發(fā)酵罐接種，或接種于三角瓶內(nèi)，每瓶接種10mL，繼續(xù)搖瓶培養(yǎng)。因菌球正處于旺盛生