液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的臨床檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展101113課件

LC-MS/MS臨床檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院李水軍2013.10.29LC-MS/MS臨床檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院報(bào)告提綱液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)原理國內(nèi)外臨床應(yīng)用進(jìn)展在我院的應(yīng)用情況介紹同型半胱氨酸25-羥基維生素D1,5-脫水葡萄糖醇問題和展望報(bào)告提綱液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)原理質(zhì)譜技術(shù)發(fā)展歷史1906Joseph

John測定電子荷質(zhì)比1922FrancisWilliam發(fā)現(xiàn)同位素1989WolfgamgPaul發(fā)明離子阱2002JohnFenn發(fā)明電噴霧離子化質(zhì)譜技術(shù)發(fā)展歷史1906JosephJohn測定電子荷質(zhì)比質(zhì)譜儀組成由離子源、真空接口、質(zhì)量分析器和檢測器組成。根據(jù)檢測器類型可分為磁質(zhì)譜、四級桿質(zhì)譜、離子阱質(zhì)譜、傅里葉回旋共振質(zhì)譜、飛行時(shí)間質(zhì)譜。產(chǎn)生帶電離子離子源真空接口質(zhì)量分析器檢測器引入帶電離子按m/z分離和排列電信號放大樣品引入數(shù)據(jù)分析質(zhì)譜儀組成由離子源、真空接口、質(zhì)量分析器和檢測器組成。產(chǎn)LC-MS/MS儀靈敏度μg/mL靈敏度ng/mL或者pg/mLHPLC,$$MS,$$$LC-MS/MS儀靈敏度μg/mL靈敏度ng/mL或者pg/APIHighvacuumLC-MS/MS工作原理+Ionization+++MS1+MS2FragmentationDetectionLCAPIHighvacuumLC-MS/MS工作原理+IonLC-MS/MS優(yōu)勢特異性好，免疫分析對小分子化合物的檢測缺陷比HPLC和GC-MS的容易使用，通量更大，是免疫分析法的主要互補(bǔ)方法與其他技術(shù)相比，單個(gè)樣本的測試成本更低建立和驗(yàn)證新方法比較容易LC-MS/MS優(yōu)勢特異性好，免疫分析對小分子化合物的檢測缺國外LC-MS/MS應(yīng)用2000年，LC-MS/MS開始應(yīng)用于藥物研發(fā)領(lǐng)域，逐步從標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)成為國際通用技術(shù)2010年，LC-MS/MS廣泛應(yīng)用于歐美臨檢參考實(shí)驗(yàn)室。由于第三方檢測機(jī)構(gòu)的推動，

從大型醫(yī)院臨檢實(shí)驗(yàn)室向中小型、甚至社區(qū)醫(yī)院擴(kuò)展Vogeser,ClinChemLabMed2003;41:117-126.Dooley,ClinBiochem2003;36:471-481.Vogeser,ClinBiochem2008;41:649-662.國外LC-MS/MS應(yīng)用2000年，LC-MS/MS開始應(yīng)用LC-MS在PubMed論文發(fā)表數(shù)量LC-MS在PubMed論文發(fā)表數(shù)量臨檢主要應(yīng)用領(lǐng)域新生兒篩查：氨基酸、肉毒堿、脂肪酸、有機(jī)酸藥物中毒、濫用藥物分析、止痛藥物分析治療藥物監(jiān)測：免疫抑制劑、抗癲癇藥物、抗心律失常藥內(nèi)分泌分析：腎上腺激素、性激素蛋白鑒定和定量：C肽、PTH、血管緊張素功能醫(yī)學(xué)檢測以美國Mayo

Clinic為例，1998年沒有LC-MS/MS。2010年，60臺LC-MS/MS，200萬個(gè)測試。GrebeSK,SinghRJ.ClinBiochemRev.2011Feb;32(1):5-31.臨檢主要應(yīng)用領(lǐng)域新生兒篩查：氨基酸、肉毒堿、脂肪酸、有機(jī)酸GLC-MS/MS國內(nèi)應(yīng)用現(xiàn)狀在各大醫(yī)院已普及，主要用于臨床藥理但在臨檢領(lǐng)域尚處于起步階段衛(wèi)生部臨檢中心部分醫(yī)院檢驗(yàn)科第三方檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)LC-MS/MS國內(nèi)應(yīng)用現(xiàn)狀在各大醫(yī)院已普及，主要用于臨床藥質(zhì)譜法常作為參考方法，用于參考測量程序和校準(zhǔn)品定值質(zhì)譜法常作為參考方法，用于參考測量程序和校準(zhǔn)品定值我院應(yīng)用簡介2000年引進(jìn)LC-MS/MS，主要用于臨床藥理和臨床科研。2002年開始探索臨檢應(yīng)用：同型半胱氨酸、TDM、生物標(biāo)志物（心血管病、糖尿病、前列腺癌）、內(nèi)分泌（性激素、腎上腺激素）、維生素、氨基酸等。我院應(yīng)用簡介2000年引進(jìn)LC-MS/MS，主要用于臨床藥同型半胱氨酸(Hcy)：

心血管疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因子同型半胱氨酸(Hcy)：

心血管疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因子H型高血壓增加心腦血管事件30倍051015202530ReferenceCholesterolSmokingHypertensionNoElevatedFastingHomocysteineElevatedFastingHomocysteineRiskFactorsRelativeRisk(Vascular

Disease)流行病學(xué)研究證明，“H型”高血壓患者心血管事件發(fā)生率較單純存在高血壓的患者高出約5倍，較正常人高出約25-30倍。GrahamIM,etal.JAMA.1997;277(22):1775-81.H型高血壓增加心腦血管事件30倍051015202530ReHcy代謝HcyMetAdoMetAdoHcyTHFCH3THFCH2THFCHOTHFCysB6BHMTMTRB12B2蛋氨酸循環(huán)葉酸循環(huán)RefsumH,etal.ClinChem.2004;50(1):3-32.Hcy代謝HcyMetAdoMetAdoHcyTHFCH3T血中Hcy形式Hcy-AlbuminHcy-CysHcy80%bHcy20%fHcy正常tHcy5-15μmol/L血中Hcy形式Hcy-AlbuminHcy-CysHcy80Hcy檢測方法原理Hcy檢測方法原理檢測分析流程檢測分析流程臨床研究與應(yīng)用體檢人群血漿/血清Hcy測定結(jié)果組別例數(shù)年齡Hcy（μmol/L）P值*正常對照組2039.9±9.913.1±3.4

心腦血管病高危人群14945.0±7.920.2±12.7＜0.01糖尿病2447.2±5.921.3±12.3＜0.01住院病人血漿/血清Hcy測定結(jié)果組別例數(shù)年齡Hcy（μmol/L）P值*對照組3869.2±12.313.9±6.6

腦梗塞4075.0±9.422.0±14.9＜0.01冠心病4579.3±5.818.3±7.9＜0.05高血壓4871.1±10.316.8±7.8＜0.05LiS,etal.JChromatogrB.2008;870(1):63-67臨床研究與應(yīng)用體檢人群血漿/血清Hcy測定結(jié)果組別例數(shù)年齡H衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心

2011年全國同型半胱氨酸EQA循環(huán)酶法和LC-MS/MS法結(jié)果差異明顯，Bias從10.64%至21.80%循環(huán)酶法的室間差異較大，CV9.10-12.61%。衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心

2011年全國同型半胱氨酸EQA循環(huán)酶法合作開發(fā)檢測試劑盒國內(nèi)首個(gè)獲得SFDA批準(zhǔn)，具有自主知識產(chǎn)權(quán)的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜HCY體外診斷試劑盒[國食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2007第3401206號]合作開發(fā)檢測試劑盒國內(nèi)首個(gè)獲得SFDA批準(zhǔn)，具有自主知識產(chǎn)權(quán)與現(xiàn)有方法比較優(yōu)勢LC-MS/MS技術(shù)已成為目前生物樣品中小分子化合物定性定量測定的金標(biāo)準(zhǔn)方法高準(zhǔn)確性和特異性，直接測定質(zhì)量,專一、靈敏、通用高通量：超過400測試/天長期運(yùn)行成本低：使用通用試劑、消耗品成本低廉，大批量測定有優(yōu)勢與現(xiàn)有方法比較優(yōu)勢LC-MS/MS技術(shù)已成為目前生物樣品中25羥基維生素D(25OHD)：

維生素D營養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo)VITAMIND25羥基維生素D(25OHD)：

維生素D營養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo)據(jù)估計(jì)，全球有10億人維生素D缺乏或者不足。骨質(zhì)疏松癥只是維生素D缺乏的冰山一角，對人體的健康的影響極為廣泛。維生素D可降低慢性病，包括癌癥、自身免疫性疾病、感染、心血管疾病等發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)?！?0ng/mL缺乏21-29ng/mL不足30-60ng/mL充足25OHD水平維生素D營養(yǎng)狀態(tài)維生素D缺乏相當(dāng)普遍HolickMF.NEnglJMed.2007;357(3):266-281.據(jù)估計(jì)，全球有10億人維生素D缺乏或者不足。骨質(zhì)疏松癥只是維上海的維生素D調(diào)查情況25OHD濃度維生素D狀況比例<10ng/mL嚴(yán)重缺乏（15）8%10-20ng/mL缺乏（141）73%20-30ng/mL不足（33）17%30-60ng/mL充足（4）2%>150ng/mL中毒（0）0%25OHD16.4±5.3ng/mL(2.5th-97.5th7.9-28.8ng/mL)上海的維生素D調(diào)查情況25OHD濃度維生素D狀況比例<1025OHD檢測市場需求巨大25OHD檢測市場需求巨大25OHD檢測方法比較免疫法通常只能測總25OHD體內(nèi)類似物多，交叉反應(yīng)大，影響結(jié)果準(zhǔn)確性HPLC法測定費(fèi)時(shí)，工作量大靈敏度可能不足LC-MS/MS可分別測定25OHD2和25OHD3，有助于臨床療效判斷靈敏度、特異性較好25OHD檢測方法比較免疫法通常只能測總25OHD體內(nèi)類似物L(fēng)C-MS/MS與ECLIA方法比較y=0.514x+1.269ng/mL,r=0.590,Sy|x=-11.9ng/mL(ECLIAfor25OHD3)LC-MS/MS與ECLIA方法比較y=0.514x+1LC-MS/MS與ECLIA總25OHD比較y=1.364x-1.815ng/mL,r=0.834,Sy|x=5.22ng/mL(ECLIAfor25OHDtotal)LC-MS/MS與ECLIA總25OHD比較y=1.364LC-MS/MS與EIA總25OHD比較y=1.120x+7.274ng/mL,r=0.723,Sy|x=9.06ng/mL(EIAfor25OHDtotal)LC-MS/MS與EIA總25OHD比較y=1.120xy=0.885x+1.672ng/mL,r=0.987,Sy|x=-1.88ng/mL(LC-MS/MSfor25OHD2and25OHD3)LC-MS/MS與美國CAP比較y=0.885x+1.672ng/mL,r=0LC-MS/MS與NIST的LC-MS/MS參考方法比較y=0.9222x-0.045ng/mL,r=0.9971,Sy|x=1.47ng/mL(LC-MS/MSfor25OHD2and25OHD3)LC-MS/MS與NIST的LC-MS/MS參考方法比較y方法不同導(dǎo)致完全不同的臨床判斷方法不同導(dǎo)致完全不同的臨床判斷1,5-脫水葡萄糖醇

(1,5-AG)1,5-脫水葡萄糖醇

(1,5-AG)我國糖尿病現(xiàn)狀36我國糖尿病現(xiàn)狀36控制糖尿病并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)糖尿病的并發(fā)癥分為微血管并發(fā)癥和大血管并發(fā)癥。中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會慢性并發(fā)癥調(diào)查組報(bào)告住院2型糖尿病并發(fā)癥患病率分別為：高血壓34.2%，腦血管病12.6%，心血管病17.1%，下肢血管病5.2%。防治心腦血管疾病所需的醫(yī)療支出，占糖尿病醫(yī)療費(fèi)用的最主要部分。單純餐后血糖升高者占近50%。37中國2型糖尿病防治指南（2010版）控制糖尿病并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)糖尿病的并發(fā)癥分為微血管并發(fā)癥和大血管血糖控制不良人群占63%DatafromNHANESandDCCT血糖控制不良人群占63%DatafromNHANESa血糖監(jiān)測指標(biāo)1,5AG果糖胺108975643120HbA1C葡萄糖Weeksbefore

measurement1,5-AG使血糖監(jiān)控更加嚴(yán)密完整和科學(xué)！血糖監(jiān)測指標(biāo)1,5AG果糖胺108975643120HbA11,5-AG的生理特征40組織庫存(500-1000mg)腎飲食攝入1,5-AG(5-10mg/天)尿排泄1,5-AG(5-10mg/天)

BuseJBetal.DiabTech&Ther2003,5(3):355-363高血糖尿排泄1,5-AG增加1,5-AG重吸收血1,5-AG下降1,5-AG的生理特征40組織庫存腎飲食攝入1,5-AG尿排1,5-AG可監(jiān)測到血糖的細(xì)微變化YamanouchiTetal.Lancet19962型糖尿病人治療過程中考察1，5-AG的變化A組28例糖尿病人連續(xù)治療6周B組28例糖尿病人連續(xù)治療4周后終止治療1,5-AG可監(jiān)測到血糖的細(xì)微變化YamanouchiT方法驗(yàn)證方法驗(yàn)證臨床應(yīng)用

LiSetal.JChromatogr.2008;875(2):459-64.臨床應(yīng)用LiSetal.JChromatogr.1,5-AG與其他指標(biāo)的相關(guān)性1,5-AG與其他指標(biāo)的相關(guān)性1,5-AG臨床意義11,5-AG是短期血糖控制和血糖波動的監(jiān)測指標(biāo)，反映3天-1周的血糖水平。2快速敏感地響應(yīng)血糖變化，適用于嚴(yán)格血糖控制監(jiān)測，可作為診斷糖尿病情好轉(zhuǎn)與惡化趨勢的敏銳指標(biāo)。31,5-AG能更特異性且有效地反映餐后血糖，即使在HbA1C水平相同者也截然不同，因此測定1,5-AG有利于監(jiān)控糖尿病并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。41,5-AG水平不受輕度或中度腎功能不全的影響，對輕度或中度腎功能不全的2型糖尿病患者，1,5-AG仍可作為血糖控制的可靠指標(biāo)。1,5-AG臨床意義11,5-AG是短期血糖控制和血1,5-AG與血糖控制關(guān)系1,5-AG(μg/mL)血糖控制情況>14.0正常10–13.9控制良好6–9.9控制一般2–5.9控制差<2控制非常差美國糖尿病協(xié)會指出預(yù)防糖尿病病并發(fā)癥的重要性在于嚴(yán)格的血糖控制。間歇性的血糖波動比慢性高血糖對血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷更大。1,5-AG測試結(jié)果2周內(nèi)發(fā)生變化，醫(yī)生可以利用檢測結(jié)果及時(shí)了解患者血糖控制的改進(jìn)效果或惡化程度。1,5-AG能更準(zhǔn)確地反映餐后血糖變化情況，有利于監(jiān)控糖尿病并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。1,5-AG與血糖控制關(guān)系1,5-AG(μg/mL)血糖控優(yōu)勢和潛力國際認(rèn)可、國內(nèi)尚未普及的臨檢新指標(biāo)

金標(biāo)準(zhǔn)方法，臨床診斷的準(zhǔn)確性優(yōu)勢明顯高通量檢測，連續(xù)測試可超過300個(gè)/天有效填補(bǔ)臨床糖尿病管理的信息數(shù)據(jù)鏈缺口

可客觀評價(jià)病人住院期間的血糖控制情況其臨床應(yīng)用推廣及相關(guān)科研價(jià)值凸顯優(yōu)勢和潛力國際認(rèn)可、國內(nèi)尚未普及的臨檢新指標(biāo)質(zhì)譜技術(shù)用于臨床問題與瓶頸技術(shù)操作政策質(zhì)譜技術(shù)用于臨床問題與瓶頸技術(shù)技術(shù)方法重現(xiàn)性通量限制分析時(shí)間樣品處理和信息系統(tǒng)的連接內(nèi)源性物質(zhì)、同分異構(gòu)體、代謝物的干擾基質(zhì)效應(yīng)（離子抑制／增強(qiáng)）穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)（ID-MS）Vogeser,ClinChemLabMed2003;41:117-126.Dooley,ClinBiochem2003;36:471-481.Vogeser,ClinBiochem2008;41:649-662.技術(shù)方法重現(xiàn)性Vogeser,ClinChemLab操作儀器貴，試劑成本低初始投資大，長期回報(bào)高技術(shù)門檻高，有利自主創(chuàng)新要求批量分析，報(bào)告周期長配套技術(shù)及專用試劑盒有待開發(fā)操作儀器貴，試劑成本低政策用于臨床檢驗(yàn)在國內(nèi)剛起步高新技術(shù)臨床應(yīng)用社會認(rèn)同有待提高缺乏相應(yīng)的規(guī)范性文件和專業(yè)組織沒有相應(yīng)的臨檢收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)政策用于臨床檢驗(yàn)在國內(nèi)剛起步未來展望樣品前處理、檢測通量和配套試劑的創(chuàng)新蛋白和多肽定量高分辨質(zhì)譜未來展望樣品前處理、檢測通量和配套試劑的創(chuàng)新液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的臨床檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展101113課件LC-MS/MS臨床檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院李水軍2013.10.29LC-MS/MS臨床檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院報(bào)告提綱液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)原理國內(nèi)外臨床應(yīng)用進(jìn)展在我院的應(yīng)用情況介紹同型半胱氨酸25-羥基維生素D1,5-脫水葡萄糖醇問題和展望報(bào)告提綱液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)原理質(zhì)譜技術(shù)發(fā)展歷史1906Joseph

John測定電子荷質(zhì)比1922FrancisWilliam發(fā)現(xiàn)同位素1989WolfgamgPaul發(fā)明離子阱2002JohnFenn發(fā)明電噴霧離子化質(zhì)譜技術(shù)發(fā)展歷史1906JosephJohn測定電子荷質(zhì)比質(zhì)譜儀組成由離子源、真空接口、質(zhì)量分析器和檢測器組成。根據(jù)檢測器類型可分為磁質(zhì)譜、四級桿質(zhì)譜、離子阱質(zhì)譜、傅里葉回旋共振質(zhì)譜、飛行時(shí)間質(zhì)譜。產(chǎn)生帶電離子離子源真空接口質(zhì)量分析器檢測器引入帶電離子按m/z分離和排列電信號放大樣品引入數(shù)據(jù)分析質(zhì)譜儀組成由離子源、真空接口、質(zhì)量分析器和檢測器組成。產(chǎn)LC-MS/MS儀靈敏度μg/mL靈敏度ng/mL或者pg/mLHPLC,$$MS,$$$LC-MS/MS儀靈敏度μg/mL靈敏度ng/mL或者pg/APIHighvacuumLC-MS/MS工作原理+Ionization+++MS1+MS2FragmentationDetectionLCAPIHighvacuumLC-MS/MS工作原理+IonLC-MS/MS優(yōu)勢特異性好，免疫分析對小分子化合物的檢測缺陷比HPLC和GC-MS的容易使用，通量更大，是免疫分析法的主要互補(bǔ)方法與其他技術(shù)相比，單個(gè)樣本的測試成本更低建立和驗(yàn)證新方法比較容易LC-MS/MS優(yōu)勢特異性好，免疫分析對小分子化合物的檢測缺國外LC-MS/MS應(yīng)用2000年，LC-MS/MS開始應(yīng)用于藥物研發(fā)領(lǐng)域，逐步從標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)成為國際通用技術(shù)2010年，LC-MS/MS廣泛應(yīng)用于歐美臨檢參考實(shí)驗(yàn)室。由于第三方檢測機(jī)構(gòu)的推動，

從大型醫(yī)院臨檢實(shí)驗(yàn)室向中小型、甚至社區(qū)醫(yī)院擴(kuò)展Vogeser,ClinChemLabMed2003;41:117-126.Dooley,ClinBiochem2003;36:471-481.Vogeser,ClinBiochem2008;41:649-662.國外LC-MS/MS應(yīng)用2000年，LC-MS/MS開始應(yīng)用LC-MS在PubMed論文發(fā)表數(shù)量LC-MS在PubMed論文發(fā)表數(shù)量臨檢主要應(yīng)用領(lǐng)域新生兒篩查：氨基酸、肉毒堿、脂肪酸、有機(jī)酸藥物中毒、濫用藥物分析、止痛藥物分析治療藥物監(jiān)測：免疫抑制劑、抗癲癇藥物、抗心律失常藥內(nèi)分泌分析：腎上腺激素、性激素蛋白鑒定和定量：C肽、PTH、血管緊張素功能醫(yī)學(xué)檢測以美國Mayo

Clinic為例，1998年沒有LC-MS/MS。2010年，60臺LC-MS/MS，200萬個(gè)測試。GrebeSK,SinghRJ.ClinBiochemRev.2011Feb;32(1):5-31.臨檢主要應(yīng)用領(lǐng)域新生兒篩查：氨基酸、肉毒堿、脂肪酸、有機(jī)酸GLC-MS/MS國內(nèi)應(yīng)用現(xiàn)狀在各大醫(yī)院已普及，主要用于臨床藥理但在臨檢領(lǐng)域尚處于起步階段衛(wèi)生部臨檢中心部分醫(yī)院檢驗(yàn)科第三方檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)LC-MS/MS國內(nèi)應(yīng)用現(xiàn)狀在各大醫(yī)院已普及，主要用于臨床藥質(zhì)譜法常作為參考方法，用于參考測量程序和校準(zhǔn)品定值質(zhì)譜法常作為參考方法，用于參考測量程序和校準(zhǔn)品定值我院應(yīng)用簡介2000年引進(jìn)LC-MS/MS，主要用于臨床藥理和臨床科研。2002年開始探索臨檢應(yīng)用：同型半胱氨酸、TDM、生物標(biāo)志物（心血管病、糖尿病、前列腺癌）、內(nèi)分泌（性激素、腎上腺激素）、維生素、氨基酸等。我院應(yīng)用簡介2000年引進(jìn)LC-MS/MS，主要用于臨床藥同型半胱氨酸(Hcy)：

心血管疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因子同型半胱氨酸(Hcy)：

心血管疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因子H型高血壓增加心腦血管事件30倍051015202530ReferenceCholesterolSmokingHypertensionNoElevatedFastingHomocysteineElevatedFastingHomocysteineRiskFactorsRelativeRisk(Vascular

Disease)流行病學(xué)研究證明，“H型”高血壓患者心血管事件發(fā)生率較單純存在高血壓的患者高出約5倍，較正常人高出約25-30倍。GrahamIM,etal.JAMA.1997;277(22):1775-81.H型高血壓增加心腦血管事件30倍051015202530ReHcy代謝HcyMetAdoMetAdoHcyTHFCH3THFCH2THFCHOTHFCysB6BHMTMTRB12B2蛋氨酸循環(huán)葉酸循環(huán)RefsumH,etal.ClinChem.2004;50(1):3-32.Hcy代謝HcyMetAdoMetAdoHcyTHFCH3T血中Hcy形式Hcy-AlbuminHcy-CysHcy80%bHcy20%fHcy正常tHcy5-15μmol/L血中Hcy形式Hcy-AlbuminHcy-CysHcy80Hcy檢測方法原理Hcy檢測方法原理檢測分析流程檢測分析流程臨床研究與應(yīng)用體檢人群血漿/血清Hcy測定結(jié)果組別例數(shù)年齡Hcy（μmol/L）P值*正常對照組2039.9±9.913.1±3.4

心腦血管病高危人群14945.0±7.920.2±12.7＜0.01糖尿病2447.2±5.921.3±12.3＜0.01住院病人血漿/血清Hcy測定結(jié)果組別例數(shù)年齡Hcy（μmol/L）P值*對照組3869.2±12.313.9±6.6

腦梗塞4075.0±9.422.0±14.9＜0.01冠心病4579.3±5.818.3±7.9＜0.05高血壓4871.1±10.316.8±7.8＜0.05LiS,etal.JChromatogrB.2008;870(1):63-67臨床研究與應(yīng)用體檢人群血漿/血清Hcy測定結(jié)果組別例數(shù)年齡H衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心

2011年全國同型半胱氨酸EQA循環(huán)酶法和LC-MS/MS法結(jié)果差異明顯，Bias從10.64%至21.80%循環(huán)酶法的室間差異較大，CV9.10-12.61%。衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心

2011年全國同型半胱氨酸EQA循環(huán)酶法合作開發(fā)檢測試劑盒國內(nèi)首個(gè)獲得SFDA批準(zhǔn)，具有自主知識產(chǎn)權(quán)的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜HCY體外診斷試劑盒[國食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2007第3401206號]合作開發(fā)檢測試劑盒國內(nèi)首個(gè)獲得SFDA批準(zhǔn)，具有自主知識產(chǎn)權(quán)與現(xiàn)有方法比較優(yōu)勢LC-MS/MS技術(shù)已成為目前生物樣品中小分子化合物定性定量測定的金標(biāo)準(zhǔn)方法高準(zhǔn)確性和特異性，直接測定質(zhì)量,專一、靈敏、通用高通量：超過400測試/天長期運(yùn)行成本低：使用通用試劑、消耗品成本低廉，大批量測定有優(yōu)勢與現(xiàn)有方法比較優(yōu)勢LC-MS/MS技術(shù)已成為目前生物樣品中25羥基維生素D(25OHD)：

維生素D營養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo)VITAMIND25羥基維生素D(25OHD)：

維生素D營養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo)據(jù)估計(jì)，全球有10億人維生素D缺乏或者不足。骨質(zhì)疏松癥只是維生素D缺乏的冰山一角，對人體的健康的影響極為廣泛。維生素D可降低慢性病，包括癌癥、自身免疫性疾病、感染、心血管疾病等發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)?！?0ng/mL缺乏21-29ng/mL不足30-60ng/mL充足25OHD水平維生素D營養(yǎng)狀態(tài)維生素D缺乏相當(dāng)普遍HolickMF.NEnglJMed.2007;357(3):266-281.據(jù)估計(jì)，全球有10億人維生素D缺乏或者不足。骨質(zhì)疏松癥只是維上海的維生素D調(diào)查情況25OHD濃度維生素D狀況比例<10ng/mL嚴(yán)重缺乏（15）8%10-20ng/mL缺乏（141）73%20-30ng/mL不足（33）17%30-60ng/mL充足（4）2%>150ng/mL中毒（0）0%25OHD16.4±5.3ng/mL(2.5th-97.5th7.9-28.8ng/mL)上海的維生素D調(diào)查情況25OHD濃度維生素D狀況比例<1025OHD檢測市場需求巨大25OHD檢測市場需求巨大25OHD檢測方法比較免疫法通常只能測總25OHD體內(nèi)類似物多，交叉反應(yīng)大，影響結(jié)果準(zhǔn)確性HPLC法測定費(fèi)時(shí)，工作量大靈敏度可能不足LC-MS/MS可分別測定25OHD2和25OHD3，有助于臨床療效判斷靈敏度、特異性較好25OHD檢測方法比較免疫法通常只能測總25OHD體內(nèi)類似物L(fēng)C-MS/MS與ECLIA方法比較y=0.514x+1.269ng/mL,r=0.590,Sy|x=-11.9ng/mL(ECLIAfor25OHD3)LC-MS/MS與ECLIA方法比較y=0.514x+1LC-MS/MS與ECLIA總25OHD比較y=1.364x-1.815ng/mL,r=0.834,Sy|x=5.22ng/mL(ECLIAfor25OHDtotal)LC-MS/MS與ECLIA總25OHD比較y=1.364LC-MS/MS與EIA總25OHD比較y=1.120x+7.274ng/mL,r=0.723,Sy|x=9.06ng/mL(EIAfor25OHDtotal)LC-MS/MS與EIA總25OHD比較y=1.120xy=0.885x+1.672ng/mL,r=0.987,Sy|x=-1.88ng/mL(LC-MS/MSfor25OHD2and25OHD3)LC-MS/MS與美國CAP比較y=0.885x+1.672ng/mL,r=0LC-MS/MS與NIST的LC-MS/MS參考方法比較y=0.9222x-0.045ng/mL,r=0.9971,Sy|x=1.47ng/mL(LC-MS/MSfor25OHD2and25OHD3)LC-MS/MS與NIST的LC-MS/MS參考方法比較y方法不同導(dǎo)致完全不同的臨床判斷方法不同導(dǎo)致完全不同的臨床判斷1,5-脫水葡萄糖醇

(1,5-AG)1,5-脫水葡萄糖醇

(1,5-AG)我國糖尿病現(xiàn)狀89我國糖尿病現(xiàn)狀36控制糖尿病并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)糖尿病的并發(fā)癥分為微血管并發(fā)癥和大血管并發(fā)癥。中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會慢性并發(fā)癥調(diào)查組報(bào)告住院2型糖尿病并發(fā)癥患病率分別為：高血壓34.2%，腦血管病12.6%，心血管病17.1%，下肢血管病5.2%。防治心腦血管疾病所需的醫(yī)療支出，占糖尿病醫(yī)療費(fèi)用的最主要部分。單純餐后血糖升高者占近50%。90中國2型糖尿病防治指南（2010版）控制糖尿病并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)糖尿病的并發(fā)癥分為微血管并發(fā)癥和大血管血糖控制不良人群占63%DatafromNHANESandDCCT血糖控制不良人群占63%DatafromNHANESa血糖監(jiān)測指標(biāo)1,5AG果糖胺108975643120HbA1C葡萄糖Weeksbefore

measurement1,5-AG使血糖監(jiān)控更加嚴(yán)密完整和科學(xué)！血糖監(jiān)測指標(biāo)1,5AG果糖胺108975643120HbA11,5-AG的生理特征93組織庫存(500-1000mg)腎飲食攝入1,5-AG(5-10mg/天)尿排泄1,5-AG(5-10mg/天)

BuseJBetal.DiabTech&Ther2003,5(3):355-363高血糖尿排泄1,5-AG增加1,5-AG重吸收血1,5-AG下降1,5-AG的生理特征40組織庫存腎飲食攝入1,5-AG尿排1,5-AG可監(jiān)測到血糖的細(xì)微變化YamanouchiTetal.Lancet19962型糖尿病人治療過程中考察1，5-AG的變化A組28例糖尿病人連續(xù)治療6周B組28例糖尿病人連續(xù)治療4周后終止治療1,5-AG可監(jiān)測到血糖的細(xì)微變化YamanouchiT方